TNF- and IL-1 inhibit through different pathways
IFN--induced antigen presentation, processing
and MHC class II surface expression on
astrocytes, but not on microglia
O. Gresser · A. Hein · S. Riese · A. Régnier-Vigouroux
Cell Tissue Res (2000) 300:373–382
Andréia, Claudiney e Hugo
Introdução
 Astrócitos e micróglia
 2 populações de céls. gliais do SNC;
 Função como APC in vivo: obscura.
 Estudos prévios mostraram que:
 IL-1 é capaz de inibir a expressão de MHC II induzida por IFN- em astrócitos
murinos, mas não na micróglia;
 CSF-1 inibe a expressão de MHC II induzida por IFN- na micróglia, mas não em
astrócitos de camundongos;
 Durante o curso de doenças que afetam o SNC astrócitos e micróglia
são expostos à várias citocinas que podem afetar sua competência
imunológica e portanto influenciar o curso da doença.
Objetivos
Investigar e comparar os efeitos in vitro de duas combinações de
citocinas, IFN /IL-1 e IFN-/TNF-, sobre a estimulação de células T
primadas e sobre a expressão total e de superfície de MHC II, ICAM-1 e
B7-1/2 por culturas de astrócitos e micróglia de camundongo.
Resultados
Caracterização dos aspectos imunológicos básicos de
culturas de astrócitos e micróglia
Contraste de Fase Imunofluorêscia
Astrócitos
(Pureza: 90 – 95%)
Micróglia
(Pureza: 99%)
Anti-GFAP
Captação de
Dil-ac-LDL
Fig.1 - Pureza de culturas de astrócitos e micróglia.
GFAP – Glial Fibrilar Acidic Protein (marcador de astrócito);
Dil-ac-LDL – liga-se específica// a receptores presentes na micróglia.
Expressão constitutiva e iduzida de MHC II, ICAM-1 e
B7-1/2 em astrócitos e micróglia
Astrócitos
Micróglia
Fig.2 – Astrócitos e micróglia foram estimulados c/ diferentes doses de
IFN- por 48 h. A expressão de MHC II, ICAM-1, B7-1 e B7-2 foi
analizada por ELISA.
Apresentação de apamina por astrócitos e micróglia
estimulados por IFN-
Tratado c/ IFN-
Não-tratado c/ IFN-
Fig.3 – Astrócitos e micróglia tratados ou não c/ IFN- por 48 h foram
incubados por 24 h c/ hibridoma de céls. T específicos p/ apamina em
s [ ]s de apamina.
EC50 p/ astrócitos = 3.7  0.5 M e p/ micróglia = 5.1  0.9 M.
EC50 = [apamina ] necessária p/ se alcançar ½ da resposta máxima.