hemogloWiener
Standard
Utilizado para padronizar e controlar a hemoglobinometria
APLICAÇÕES
Permite calibrar os aparelhos fotométricos assim também
como eliminar os erros operativos e de técnicas que os padrões coloridos não controlam: reagentes vencidos ou deteriorados, pipetas e micropipetas com má calibração, técnicas
defeituosas, diferenças entre cubetas ou tubos de leituras,
erros de leitura, etc.
FUNDAMENTOS DO MÉTODO
hemogloWiener Standard é uma solução que constitui um
verdadeiro padrão para a hemoglobina desenvolvido pela Wiener
lab., que é processado na mesmas condições que a amostra. Utilizado para padronizar os métodos colorimétricos baseados na formação de cianeto de hemiglobina (cianmetahemoglobina) ou hemiglobinazida (ou azidametahemoglobina).
REAGENTE FORNECIDO
hemogloWiener Standard: frasco contendo solução estabilizada de hemoglobina nativa.
Conteúdo hemoglobínico determinado pela espectrofotometria a 540 nm como cianeto de hemiglobina como reagente
segundo van Kampen e Zijlstra (pH 7,2) conforme uma
absortividade milimolar de 440,0 mmol-1 partindo da equação:
HiCN (mg/dl) =
D540 x 64.458
MATERIAL NECESSÁRIO (não fornecido)
Vide Manual de Instruções de hemogloWiener Reactivo.
CONDIÇÕES DE REAÇÃO
Vide Manual de Instruções de hemogloWiener Reactivo.
PROCEDIMENTO
hemogloWiener Standard deve ser utilizado nas mesmas condições que a amostra. Medir 20 ul com uma micropipeta limpa e seca, limpando com muito cuidado a
borda, e transferir a 5 ml de reagente, enxugando 3 vezes
com o mesmo. Misturar por inversão e aguardar até que
seja completado o desenvolvimento da cor, segundo o reagente utilizado. Ler em espectrofotômetro a 540 nm ou
em fotocolorímetro com filtro verde (520-550 nm).
Volume de leitura: se é necessário, podem utilizar-se 6
ou 7 ml de reagente com 20 ul de Padrão.
Controle da linearidade dos fotômetros: quando seja
necessário comprovar o cumprimento da lei de Beer, podese realizar uma gráfica de calibração de dois pontos, processando 20 ul de Padrão com 5 e 10 ml de reagente
respetivamente, obtendo-se as leituras com o valor do ensaio do Padrão e sua diluição 1:2.
44 x d x 10
onde D540 é a leitura obtida; 64.458 o peso molecular da hemoglobina; d = 1,00 cm = espessura da capa de leitura e 10
o fator de conversão de litros a decilitros.
ESTABILIDADE DA MISTURA DE REAÇÃO FINAL
Vide Manual de Instruções de hemogloWiener Reactivo.
CÁLCULO DOS RESULTADOS
REAGENTE NÃO FORNECIDO
hemogloWiener Reactivo.
f=
INSTRUÇÕES DE USO
O Reagente Fornecido é pronto para uso.
onde Padrão (g/l) é a concentração de hemoglobina correspondente ao lote de hemogloWiener Standard.
PRECAUÇÕES
Para uso diagnóstico "in vitro".
MÉTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE
As soluções de cianeto de hemiglobina obtidas com o Padrão
obedecem as especificações do Internacional Commitee for
Standardization in Hemotology (ICSH): relação DO540/505 = 1,61;
turbidez (leitura a 750 nm): menor que 0,002 D.O. e concordam com a Preparação de Referência de Cianeto de Hemiglobina (ICSH) obtida do Rijks Instituut voor deer Volksgezondheid
(Utrecht Netherlands).
ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE
ARMAZENAMENTO
O Reagente Fornecido é estável durante 2 anos sob refrigeração (2-10oC).
INDÍCIOS DE INSTABILIDADE OU DETERIORAÇÃO
DOS REAGENTES
Discoloração ou presença de precipitado são indícios de deterioração dos reagentes.
Padrão (g/l)
P
LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Vide Limitações do Procedimento no Manual de Instruções
de hemogloWiener Reactivo.
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Controle de fontes de erro: sendo uma verdadeira solução de
hemoglobina, hemogloWiener Standard se processa de
forma idêntica às condições da amostra, devendo-se utilizar
as mesmas pipetas e micropipetas, o mesmo reagente, o
mesmo fotômetro, etc. De esta maneira, não só se calibra o
aparelho de leitura, também se controlam todas as variações
de métodos. As variações nas leituras a diário do Padrão detectam erros operativos, materiais com defeitos ou reagentes
deteriorados.
hemogloWiener Standard pode ser utilizado como testemunha com todos os reagentes que determinam a hemoglobina como cianeto de hemiglobina (Drabkin; van Kampen &
Zijlstra, etc.) ou como hemiglobinazida (Venzetti). Nestes casos
o Padrão deverá ser processado seguindo as instruções dadas pelos sistemas utilizados.
Não se deve utilizar em métodos baseados na capacidade de
fixação do oxigênio (oxihemoglobina, etc.).
APRESENTAÇÃO
Frasco contendo 1,5 ml (Cód. 1450002).
REFERÊNCIA
- Rice E.W. - J. Lab. Clin. Med. 71/2:319 (1968).
- Van Kampen, E.J.; Zijlstra, W.G. - Adv. Clin. Chem. 8/141
(1965).
- Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C. y Drappo, G.A. - III
Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos Aires (1975).
Wiener lab.
2000 Rosario - Argentina
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