ESTUDO DA RELAÇÃO DE SCOLYTIDAE COM Ceratocystis cacaofunesta Ana Carolina Firmino 1, Dilze Maria Argôlo Magalhães2, Stela Dalva Vieira Midlej Silva3, Carlos Frederico Wilcken4, Francisco André Ossamu Tanaka5, Edson L. Furtado6. 1 Pós Doutora - Departamento de Produção Vegetal/Defesa Fitossanitária, UNESP/FCA, CEP 18610-307, Botucatu, SP, Brasil. E-mail: [email protected]. 2 Professora , 3 Fiscal Federal Agropecuário - Ceplac/Cepec/Seção de Fitopatologia, Cx. Postal 07, CEP 45600-970, Itabuna, BA. 4, 6 Professor - UNESP/FCA/Departamento de Produção Vegetal/Defesa Fitossanitária, CEP 18610-307, Botucatu, SP,. 5 Professor - UNESP/FCA/Departamento de Entomologia e Nematologia, Universidade de São Paulo/ESALQ, Piracicaba, SP. INTRODUÇÃO Espécies do gênero Ceratocystis podem causar a seca e morte em diversas culturas de importância econômica. No Brasil, o fungo Ceratocystis cacaofunesta causa a doença murcha-deceratocystis no cacaueiro. Esse fungo exala substâncias voláteis com odor de fruta madura que são importantes na epidemiologia da doença, pois atraem o inseto vetor. Por isso o presente trabalho objetivou identificar espécies de Scolytidae em cacaueiros com sintomas da doença e detectar a presença do fungo nesses insetos. MATERIAL e MÉTODOS RESULTADOS E DISCUSSÃO Os Scolytidae foram coletados em troncos de cacaueiro infectado com C. cacaofunesta em Ilhéus, Bahia, Brasil. Estes insetos foram identificados e divididos em amostras que foram destinadas para isolamento do fungo em isca de cenoura, análise em Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) e realização de cortes finos para visualizarão do fungo no interior do inseto. Para análise em MEV os insetos foram pré-fixados em solução de “Karnovsky”. Em seguida, foram fixados com vapor de OsO4 a 2% durante 12 horas e desidratados por 2 horas em sílica gel. As amostras foram cobertas com ouro e visualizadas em MEV (Esquema 1). Para a realização dos cortes finos os insetos foram pré-fixados em solução de “Karnovsky”, desidratado em série alcoólica, embebido e incluído em historesina. Os cortes histológicos com 6-8µm de espessura foram recolhidos em lâminas e corados com azul de toluidina (Esquema 2). Nos troncos de cacaueiro analisados foram encontrados somente o inseto: Xyleborus affinis. O fato de ter encontrado somente esta espécie de inseto relacionado com material infectado com Ceratocystis pode indicar que haja uma interação deste fungo somente com alguns insetos, provando a teoria de que nem todos os besouros de casca são obrigatoriamente dependentes do fungo. Nas análises realizadas em MEV foi observado aleuroconídeos C. cacaofunesta aderidos somente na parte inferior do abdômen e nas patas do inseto (Figura 1), indicando que esta pode ser também uma das formas de disseminação do fungo no campo. No interior do inseto não foram observados esporos típicos de Ceratocystis, porém foi notada a presença de possíveis esporos de Lasiodiplodia. As tentativas de isolar Ceratocystis em iscas de cenoura a partir dos insetos coletados não tiveram êxitos. ESQUEMA 1 Figura 2: Insetos pré- fixados em solução de “Karnovsky Figura 1: A. Galeria realizada pelo inseto. B. Inseto coletado nos troncos infectados com C. cacaofunesta. Figura 3: Metodologia empregada para fixação dos insetos em vapor de OsO4.. Para isso uma gota do reagente é colocada em um um pequeno compartimento (a direita) dentro de uma placa de Petri com as amostras (a esquerda). Figura 1: Adultos de X. affinis coletado em troncos de cacau infectados com Ceratocystis . Figura 7: Análise das amostras ao microscópio eletrônico de varredura LEO435-VP. Figura 6: Amostras metalizadas com ouro. Figura 5: Metalização das amostras com ouro. Figura 4: Secagem das amostras em dessecador com sílica gel. Figura 2: Esporos de Lasidiodiplodia na região do mesentério de Xyleborus affinis ESQUEMA 2 CONCLUSÕES Desidratação 30%, 50%, 70%, 90%,100% Série crescente de Etanol Figura 1: Inseto coletado nos troncos infectados com C. cacaofunesta. Figura 2: Insetos pré- fixados em solução de “Karnovsky Figura 4: Amostra infiltrada e incluída em historesina Figura 8: Análise das amostras microscópio eletrônico de Luz. ao Figura 6: Corte das amostras em micrótomo Figura 5: Secagem das amostras em dessecador com sílica gel. O inseto Xyleborus affinis predominou nas amostras de tronco de cacaueiros infectados pela doença murcha-de-ceratocystis Somente aleuroconídios de Ceratocystis cacaofunesta foram encontrados aderidos aos corpos desses Scolytidae. Nenhum esporo característico de Ceratocystis cacaofunesta foi visualisado no interior do inseto. Apoio e Agradecimento