Seminário de Iniciação Científica da UNIFAL-MG – Edição 2012 ISOLADOS BRASILEIROS CORROBORAM COMPLEXO DE ESPÉCIES EM ROTÍFEROS DA FAMILIA BRACHIONIDAE. Natalia Ingrid Oliveira Silva¹*(IC), Nara Cristina Chiarini Pena Barbosa¹(PG), Karla Palmieri Tavares¹(PG), Maria José dos Santos Wisniewski²(PQ), Tereza Cristina Orlando¹(PQ). *[email protected] ¹Laboratório de Biologia Molecular Aplicada à Biodiversidade – ²Laboratório de Limnologia, Instituto de Ciências da Natureza, UNIFAL-MG, Rua Gabriel Monteiro da Silva, 700, CEP 37130-000, Alfenas, MG. Palavras-Chave: Variabilidade Genética, Endemismo e Complexo de Espécies. Introdução Rotíferos são componentes vitais dos ecossistemas aquáticos, sendo considerados bioindicadores da qualidade da água. O grupo é classificado como cosmopolita, porém, estudos recentes demonstram que muitas espécies podem ser consideradas endêmicas caracterizando-as como um complexo de espécies (Gómez, 2005; Gilbert & Walsh, 2005; Xiang et al., 2011). O reconhecimento destes complexos é importante para o entendimento de interações ecológicas entre as espécies dentro das comunidades zooplantônicas (Schröder & Walsh, 2007). Metodologia Os organismos foram coletados no reservatório da UHE de Furnas com rede em arrastos horizontais, fixados em álcool absoluto, identificados, isolados e tiveram seu DNA extraído. Através da técnica de PCR foi amplificada a região ITS1-5.8S-ITS2 de Brachionus falcatus, Brachionus calyciflorus e Plationus patulus. Os produtos de PCR foram clonados em plasmídeos (pGEM-T- Promega). O inserto clonado foi sequenciado bidirecionalmente. As sequências foram alinhadas e então geradas tabela de distância genética e árvores filogenéticas através do programa MEGA5 (Tamura et al., 2011). Resultados e Discussão Após a análise das sequências, os resultados mostraram que os isolados brasileiros de B. calyciflorus apresentam distância genética com isolados de outras regiões (China~0,365, Geórgia 0,375, Texas 0,375, Flórida 0,368 e Austrália 0,373), com valores similares a outra espécie do mesmo gênero como B. forficula (0,391 e 0,375). Isso demonstra que o isolado brasileiro, apesar da semelhança morfológica com B. calyciflorus, é diferente geneticamente de outros da mesma espécie, caracterizando um complexo de espécies, ideia esta já discutida por Gómez (2005), Gilbert & Walsh (2005) e Xiang et al. (2011). O mesmo foi observado para espécies do gênero Plationus. O isolado brasileiro P. patulus possui uma distância genética grande (1.015) com o isolado da mesma espécie, porém do México, sugerindo que deve haver também um complexo de espécies para Plationus patulus. Conclusões As árvores filogenéticas e as distâncias genéticas observadas entre os isolados da mesma espécie de B. calyciflorus corroboram a ideia de um complexo de espécies, possivelmente com espécies crípticas. O mesmo parece estar ocorrendo com P. patulus, porém mais isolados de outros locais são necessários para confirmar a proposta. Os resultados demonstram que os isolados de regiões geográficas diferentes são linhagens distintas há muito separadas, podendo, através de efeito fundador e especiação, terem se diferenciado em novas espécies, o que corrobora não só a ideia de complexo de espécies, como o endemismo em contraposição ao cosmopolitismo, que era, até então, proposto para o grupo. Agradecimentos FAPEMIG (APQ 01518-09), Furnas – Centrais Elétricas. Ao programa PIBICT/FAPEMIG pela bolsa de IC a N.I.O.S. __________________ Referências bibliográficas XIANG-LING, X. et al. Genetic differentiation and phylogeographical structute of the Brachionus calyciflorus complex in eastern China. Molecular Ecology, v.20, p. 3027-3044, 2011. REYNA-FABÍN, M., LACLETTE, J. P., CUMMINGS, M. P., SARMA S. S. S., & GARCÍA-VARELA, M. Validating the systematic position of Plationus Segers, Murugan & Dumont, 1993 (Rotifera: Brachionidae) using sequences of the large subunit of the nuclear ribosomal DNA and of cytochrome c oxidase. Hydrobiologia, 2010. GILBERT, J. J. & E. J. WALSH. Brachionus calyciflorus is a species complex: Mating behavior and genetic differentiation among four geographically isolated strains. Hydrobiologia 546: 257–265. 2005. SCHRÖDER T; WALSH E. J. Cryptic speciation in the cosmopolitan. Epiphanes senta complex (Monogononta, Rotifera) with the description of new species. Hydrobiologia, 593, 129–140. 2007. GÓMEZ A. Molecular ecology of rotifers: from population differentiation to speciation. Hydrobiologia 546: 89-99. 2005. TAMURA K, PETERSON D, PETERSON N, STECHER G, NEI M, AND KUMAR S (2011). MEGA5: Molecular Evolutionary Genetics Analysis using Maximum Likelihood, Evolutionary Distance, and Maximum Parsimony Methods. Molecular Biology and Evolution 28: 2731-2739.