Identificação clássica e molecular de fungos endofíticos isolados de
plantas de milho (Zea mays L.) e padronização do Banco biológico
do LabMicro-DPAT
Joyce Ana Teixeira (PIBIC / UFPR-TN)
Profª Drª Patricia do Rocio Dalzoto
A cultura de milho representa grande parte da
produção de grãos no país, sendo o estado do
Paraná o líder. Para que novas alternativas de
combate à pragas sejam possíveis, o presente
trabalho objetiva a caracterização da micro biota
fúngica das plantas de milho através do isolamento e
identificação dos isolados por meio de macro e
micromorfologia, quantificando a ocorrência dos
gêneros encontrados, além da utilização de
seqüenciamento de regiões ITS do rDNA. Todo esse
processo ainda é incluído na padronização do banco
biológico do LabMicro-DPAT.
O isolamento dos fungos endofíticos requer a
desinfeccção superficial das folhas (ARAÚJO,
W.L., et al) para assegurar que não sejam
isolados fungos epifíticos. A identificação dos
isolados a nível de gênero foi obtida através do
método do microcultivo (KERN; BLEVINS, 1999)
e observação da morfologia da colônia e
assegurada pelo seqüenciamento de regiões
específicas de DNA, que ainda encontra-se na
fase de extração do material genético (VICENTE,
2000) .
ARAÚJO, W.L.; AZEVEDO, J.L.; LIMA, A.O.S.; MARCOM J.; KUKLINSKY-SOBRAL, J.;
LACAVA, P.T. Manual: Isolamento de Microrganismos Endofíticos. 1. ed. Piracicaba:
CALQ., 2002.
BARNETT, H. L.; HUNTER, B. B. Illustrated genera of imperfect
fungi. 3.ed. New York: MacMillan,1972. 241p.
HOOG, G.S., GUARRO, J., GENÉ, J.,
FIGUEIRAS M.J.. Utrech: Centraalbureau voor schimmelcultures. Atlas of clinical fungi.
2ª edição, 2000.
KERN, M.E.; BLEVIS, K.S. Microbiologia Médica. Segunda edição.
São Paulo: Editora Premier, 1999.
Foram obtidos 328 isolados fúngicos, resultando num
percentual de infecção de 65,5%, o que é um número
influenciável por fatores ambientais. Usando as
características da colônia (cores, textura – Figura 01), os
isolados foram separados em 58 grupos que,
posteriormente, foram identificados a nível de gênero com
base na literatura (HOOG, G.S., 2000 e BARNETT, H. L.,
1972), analisando as lâminas dos microcultivos em
microscopia óptica.
Figura 01: Características macromorfológicas (verso e reverso,
respectivamente) dos isolados pertencentes aos grupos 30 (A),
47 (B) e 54 (C) após crescimento em meio BDA por 7 dias a
27oC.Fonte: O autor (2013).
Em comparação com trabalhos anteriores, pode-se relacionar
os percentuais de infecção com a sazonalidade.Foram obtidos
58 grupos de acordo com as características das
colônias.Foram identificados, 7 gêneros através da
identificação clássica, são eles: Alternaria sp, Curvularia sp,
Nigrospora sp, Trichoderma sp, Drechslera sp, Pestalotiopsis
sp e Mycelia sterilia.