FACULDADE DE EXCELÊNCIA EDUCACIONAL DO RIO GRANDE DO NORTE - FATERN
UNIVERSIDADE GAMA FILHO - UGF
DISCIPLINA DE CITOLOGIA,EMBRIOLOGIA E HISTOLOGIA
MICROSCOPIA CELULAR: TEORIA E PRÁTICA
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MICROSCOPIA CELULAR:TEORIA E PRÁTICA
PROFESSORAS:
ADRIANA MOTTA
MONARA BITTENCOURT DE AMORIM
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA:
1.
2.
JUNQUEIRA e CARNEIRO, L.C. Histologia Básica. 9ed.Rio de Janeiro:Guanabara Koogan, 2004.
Manual de Instruções da BIOVAL, 2007.
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MICROSCÓPIO
“APARELHO COM LENTES ÓPTICAS QUE MAXIMIZA UM SER
ESTRUTURAS MINÚSCULAS A UM TAMANHO DE BOA OBSERVAÇÃO”
OU
BACTÉRIAS
CÉLULA
LEUCÓCITOS
CÉLULAS
SANGUÍNEAS
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PRINCIPAIS COMPONENTES DE UM MICROSCÓPIO
O MICROSCÓPIO ÓPTICO, É TAMBÉM CONHECIDO
COMO MICROSCÓPIO DE LUZ
COMPÕE-SE DE UMA PARTE MECÂNICA
QUE SERVE DE SUPORTE PARA A PARTE
ÓPTICA
PARTE ÓPTICA
É CONSTITUÍDA POR TRÊS SISTEMAS DE LENTES:
O CONDENSADOR, AS OBJETIVAS E AS OCULARES.
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PRINCIPAIS COMPONENTES DA PARTE ÓPTICA
CONDENSADOR
SUA FINALIDADE É PROJETAR UM CONE DE LUZ SOBRE AS CÉLULAS QUE
ESTÃO SENDO EXAMINADAS AO MICROSCÓPIO.
APÓS ATRAVESSAR AS CÉLULAS, ESSE FEIXE LUMINOSO, EM FORMA DE
CONE, PENETRA NAS OBJETIVAS.
OBJETIVAS
PROJETAM UMA IMAGEM AUMENTADA , NO PLANO FOCAL DAS
OCULARES, QUE NOVAMENTE A AMPLIA.
OCULARES
AS IMAGENS FORNECIDAS PELA OCULARES PODEM SER PERCEBIDAS
PELA RETINA.
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OCULARES
BRAÇO
OBJETIVAS
PINÇA
PARAFUSO
MACROMÉTRICO
PLATINA
PARAFUSO
MICROMÉTRICO
CONDENSADOR
LÂMPADA
BASE
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OCULARES
BRAÇO OU
SUPORTE
OBJETIVAS
REVÓLVER
PLATINA
CONDENSADOR
LÂMPADA
PARAFUSO
MACROMÉTRICO
PARAFUSO
MICROMÉTRICO
BASE
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PODER DE RESOLUÇÃO X LIMITE DE RESOLUÇÃO
PODER DE RESOLUÇÃO
 O PODER DE RESOLUÇÃO DE UM SISTEMA ÓPTICO É A SUA CAPACIDADE DE
SEPARAR DETALHES.
• É EXPRESSO PELO LIMITE DE RESOLUÇÃO.
LIMITE DE RESOLUÇÃO
 É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE
ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.
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EXEMPLO DE LIMITE DE RESOLUÇÃO:
É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.
ESPOROS DE
LEVEDURAS
HEMÁCIAS
CÉLULAS TUBULARES
DO EPITÉLIO RENAL
O QUE DETERMINA, A RIQUEZA DE DETALHES DA IMAGEM FORNECIDA POR
UM SISTEMA ÓPTICO É O SEU LIMITE DE RESOLUÇÃO, E NÃO O SEU PODER
DE AUMENTAR O TAMANHO DO OBJETO.
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DIFERENÇAS DE IMAGENS ENTRE UM MICROSCÓPIO ÓPTICO
(MO) E UM MICROSCÓPIO ELETRÔNICO (ME)
HEMÁCIAS
LEUCÓCITO
MICROSCOPIA ELETRÔNICA (ME) DE
BACTÉRIAS COMENSAIS
PLAQUETAS
EOSINÓFILOS
LINFÓCITO
MICROSCOPIA ÓPTICA EM
LÂMINA DE TECIDO
SANGUÍNEO
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DETERMINE QUAL O TIPO DE MICROSCÓPIO QUE SE UTILIZOU NA OBSERVAÇÃO
DESSAS IMAGENS
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PRINCIPAIS UNIDADES DE MEDIDAS USADAS NA MICROSCOPIA
MICRÔMETRO (µm)
1mm = 1.000 μm
NANÔMERO (nm)
1μm = 1.000 nm
ÂNGSTROM (Å)
1nm = 10 Å
ESTA UNIDADE ESTÁ SENDO SUBSTITUÍDA PELO NANÔMETRO
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ESPECIFICAÇÕES DAS OBJETIVAS E SUAS AMPLIAÇÕES
OBJETIVAS
(COM OCULAR DE 10X)
AMPLIAÇÃO TOTAL
(VER SEMPRE AS OCULARES)
04 x
40 X
10 x
100 X
40 x
400 X
100 x
(Sempre usar com óleo de Imersão)
1000 X
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OPERAÇÃO (PRÁTICA LABORATORIAL)
NORMAS E CONDUTAS NA PRÁTICA LABORATORIAL
1.
OBEDECER TODAS AS NORMAS DE BIOSEGURANÇA (EPI/EPC).
2. LAVAR AS MÃOS NA ENTRADA E NA SAÍDA APÓS A PRATICA.
3. É OBRIGATÓRIO QUE VOCÊ CONHEÇA AS PARTES ÓPTICAS E MECÂNICAS
DOS MICROSCÓPICOS ANTES DE USÁ-LO.
4.
NÃO MANUSEAR O APARELHO COM AS MÃOS SUJAS OU MOLHADAS
5. NUNCA DESLOQUE O APARELHO COM A LÂMPADA ACESA.
6.
NA REMOÇÃO DO EQUIPAMENTO, SEGURE-O FIRMEMENTE COM UMA
DAS MÃOS NO BRAÇO E A OUTRA NA BASE.
7. É
PROIBIDO
O
USO
DE
CÂMARAS
FOTOGRÁFICAS
DURANTE
A
EXPOSIÇÃO DA AULA PRÁTICA.
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COMO USAR O MICROSCÓPIO
1.
INICIE SEMPRE PELA OBJETIVA DE MENOR AUMENTO.
2. NA OBSERVAÇÃO DE UMA PREPARAÇÃO, OLHE PELA OCULAR E
MOVA O MACROMÉTRICO MUITO LENTAMENTE, ASSIM QUE A
IMAGEM APARECER, MESMO CONFUSA, PARE E COMPLETE A
FOCALIZAÇÃO COM O MICROMÉTRICO.
USANDO A OBJETIVA 100x
 O USO DA OBJETIVA DE IMERSÃO É MAIS DELICADA POIS, A
DISTÂNCIA FOCAL ENTRE A FACE DA OBJETIVA E A PARTE SUPERIOR
DA LAMÍNULA, DIMINUI QUANDO A AMPLIAÇÃO É AUMENTADA.
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COLORAÇÃO
QUASE TODAS AS ORGANELAS SÃO TRANSPARENTES E INCOLORES, O QUE
DIFICULTA SEU ESTUDO MICROSCÓPICO, LOGO A COLORAÇÃO FACILITA A
VISUALIZAÇÃO DAS ESTRUTURAS DOS TECIDOS.
PARA VENCER ESSA DIFICULDADE, FORAM CRIADOS NUMEROSOS PROCESSOS
DE COLORAÇÃO QUE TORNAM VISÍVEIS OS DIVERSOS COMPONENTES
CELULARES.
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A MAIORIA DOS CORANTES COMPORTA-SE COMO ÁCIDOS OU BASES
ESTRUTURAS BASOFÍLICAS:
ESTRUTURAS ACIDÓFILAS:
 SÃO OS COMPONENTES DOS
TECIDOS
QUE
SE
CORAM
FACILMENTE COM CORANTES
BÁSICOS (Hematoxilina)
 SÃO OS COMPONENTES DOS
TECIDOS
QUE
SE
CORAM
FACILMENTE COM CORANTES
ÁCIDOS (Ex:EOSINA)
EX: ESTRUTURAS ÁCIDAS (NÚCLEOS)
EX: ESTRUTURAS BÁSICAS
(ORGANELAS CITOPLASMÁTICAS)
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TÉCNICAS DE COLORAÇÃO MAIS USUAIS, TÉCNICA DE IMPREGNAÇÃO
PELA PRATA E ALGUNS DOS RESULTADOS OBTIDOS COM ELAS:
TÉCNICAS
CONSTITUINTES
HEMALÚMEN
(Hematoxilina),
HEMATOXILINA
FÉRRICA
FUCCINA ÁCIDA
E PONCEAU DE
XILIDINA,
TRICRÔMICO
DE MASSON
VERDE-LUZ
SOLUÇÕES DE
SAIS DE PRATA
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CITOPLASMA
FIBRAS
COLÁGENAS
ROSA
ROSA
FIBRAS
RETICULARES
AZUL
EOSINA
HE
IMPREGNAÇÃO
ARGÊNTICA
PARA FIBRAS
RETICULARES
NÚCLEOS
PRETO
VERMELHO
VERDE
PRETO
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
OS
MICROSCÓPIOS
MODERNOS
UTILIZAM
LASERS
COMPLEXOS,
DETECTORES EXTREMAMENTE SENSÍVEIS, OBJETIVAS PODEROSAS.
 PERMITEM FILMAR DIVISÃO CELULAR, O TRÁFICO DE MOLÉCULAS DENTRO
DAS CÉLULAS, PERMITEM OBSERVAR CERTAS PROTEÍNAS NO CÉREBRO DE
ANIMAIS VIVOS ETC.
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EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO
1.Defina microscópio, suas principais estruturas ópticas e mecânicas, observando
os cuidados a serem utilizados no manuseio deste aparelho.
2.Diferencie Poder de Resolução de Limite de Resolução.
3.Quais as características para cada parte do Microscópio óptica ?
4.Quais os cuidados a serem observados antes de manusear o aparelho?
5.De acordo com as oculares de 22x, calcule a ampliação total de uma imagem
observada por objetivas de : 05x,10x,20x,40x e 100x.
Jamais esqueçam de acrescentar os cálculos destas respostas na prova
6.Defina Ampliação Total.
7.Cite 6 elementos estruturais de um Microscópio Óptico.
8.Quais os dois principais corantes da Técnica de coloração por HE?
9.Quais os cuidados individuais que se deve ter ao uso dos laboratórios?
10.Defina Equipamento de Proteção Individual (EPI).
11.Qual a importância dos Equipamento de Proteção Coletiva (EPC)?
12.Cite 5 condutas inapropriadas dentro de um laboratório.
13.Quais as vacinas que devem ser tomadas antes de se adentrar dentro de um
laboratório com riscos biológicos?
14. O que são riscos e quais os principais relacionados com a área da saúde?
15. Qual a única objetiva que só deve ser usada com óleo de imersão?
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