DETECÇÃO DE UM NOVO PROVÁVEL POLIMORFISMO NO GENE RECEPTOR
DA VITAMINA D (VDR) POR LIS-SSCP. Cunha G, Goulart IMB, Goulart LR, Ferreira
FR e Borges DS. Universidade Federal de Uberlândia. [email protected]
O polimorfismo no gene receptor da vitamina D (VDR) tem sido relacionado à
suscetibilidade a doenças que incluem a osteoporose, câncer de próstata, tuberculose
pulmonar e hanseníase. Acredita-se que 1,25 dihydroxyvitamina D3 (1,25D3), forma
ativa da vitamina D, não somente regula o metabolismo do cálcio e dos ossos mas
também desempenha papel imunorregulador sobre monócitos, macrófagos e linfócitos
ativos. Este efeito pode ser influenciado por polimorfismos em 3 regiões do gene VDR
definidos pelos sítios de restrição das enzimas Taq1, BSm1 e Fok1. Indivíduos
homozigotos (BB) para o polimorfismo alélico BSm1 tendem a ter menor densidade
óssea (BMD) do que indivíduos homizigotos (bb). Um segundo polimorfismo no gene
VDR, Fok1, que também está associado a redução da densidade óssea, é resultado da
substituição C/T que cria um códon de iniciação alternativo (ATG), três códons abaixo do
sítio de iniciação. O polimorfismo (Taq1), não altera a seqüência do gene VDR, mas tem
sido associada com o aumento da estabilidade do seu mRNA. Este trabalho emprega a
técnica de LIS-SSCP para genotipagem do polimorfismo (C/T) no sítio Taq1 do gene
VDR. O DNA genômico foi obtido a partir de amostras de sangue de 44 pacientes de
hanseníase e 116 contatos domiciliares. As reações da PCR ocorreram utilizando-se a
seqüência de primers previamente descrita por ROY et. al (1998), que amplifica um
fragmento de 340pb do gene. O polimorfismo T/t foi visualizado em gel de LIS-SSCP
corado por prata, demonstrando que a técnica de LIS-SSCP confere idêntica sensibilidade
para genotipagem do polimorfismo C/T no sítio Taq I do gene. Contudo, utilizando-se a
técnica de LIS-SSCP para genotipagem T/t de pacientes de hanseníase e contatos
domiciliares, foi detectado um padrão de bandas no gel de LIS-SSCP em dois contatos
familiares, que difere nitidamente do padrão esperadas para os genótipos TT, Tt, tt. Os
resultados encontrados sugerem um novo polimorfismo no gene VDR. O polimorfismo
encontrado no gel de LIS-SSCP está em fase de clonagem e seqüenciamento para
descrição do tipo de mutação que pode estar presente, para posterior avaliação de sua
freqüência na população e correlação com dados clínicos. Órgão Financiador : CNPq