EFEITOS DA MANIPULAÇÃO SEROTONINÉRIGA NA AMIGDALA SOBRE
AS RESPOSTAS AVERSIVAS INDUZIDAS POR MICROINJEÇÃO DE NMDA
NO COLÍCULO INFERIOR.
Villela, C.; Carotti, A.P.; Landeira-Fernandez, J.; Maisonnette, S. Laboratório de Neurociências
e Comportamento, PUC-Rio; Laboratório de Psicologia Comparada , Universidade Estácio de
Sá.
Resultados
Introdução
O comportamento de fuga, medido pelo número de cruzamentos, pode ser observado na figura
2.
Estimulação elétrica e química do colículo inferior (CI) produz
respostas defensivas por exemplo reações de fuga e saltos.
Outra estrutura envolvida nos comportamentos defensivos é o
complexo amígdalóide. Uma vasta literatura evidencia a importância
das conexões funcionais entre o CI
e a amígdala para o
condicionamento auditivo aversivo LeDoux, 1995). Maisonnette e cols.
(1996) verificaram que lesões neurotóxicas do complexo basolateral da
amígdala (BLA) diminuem a expressão da resposta de fuga produzida
pela estimulação elétrica do CI. Embora esta relação seja evidente,
ainda não se sabe quais os neurotransmissores envolvidos na
modulação da amígdala sobre estas respostas.
Partindo das evidências de que a transmissão serotonérgica na
amígdala esta envolvida nas reações aversivas e devido a
concentração elevada de receptores 5HT2 neste núcleo, o objetivo
deste trabalho foi investigar os efeitos da Nefazodona, um antagonista
dos receptores 5HT2, na modulação das respostas aversivas eliciadas por
microinjeção de aminoácido excitatório no CI.
*Não há diferença significativa entre os grupos durante os primeiros 10 minutos indicando que a
nefazodona no BLA não produziu efeito sobre o comportamento ambulatório durante este
tempo. *Foi detectada uma diferença significativa após a microinjeção de NMDA ou salina no CI,
durante os períodos de 10, 20 e 30 minutos indicando a ocorrência de fuga somente nos grupos
que receberam NMDA no CI.
* Durante os períodos de 20 e 30 minutos, a microinjeção de 5HT2 no BLA acentuou o efeito do
NMDA no CI.
* Nenhuma diferença foi encontrada no período de 40 minutos.
* Não foi detectada nenhuma diferença significativa entre os demais grupos e o grupo que
recebeu nefazodona no BLA e salina no CI no cruzamento durante todo o experimento.
* Na figura 3 podemos observar que o comportamento de saltar só ocorre nos animais que
receberam NMDA no CI. Sendo que a nefazodona acentuou o comportamento saltatório
durante os períodos de 20 e 30 minutos. Nenhuma diferença foi encontrada no período de 40
minutos.
.
C r u z a m
e n to
s
5
s
5
2 5 0
2 0 0
1 6 1 ,8 9
1 5 6 ,3 3
Materiais e Métodos
1 5 0
1 0 0
8 4 ,5 6
7 7 ,7 1
a l
2 -s a l
M D A
2 -N M D A
2 4 ,7 8
4 2 ,2 2
3 9 ,1 1
2 4 ,6 7
1 3 ,5 7
3 1 ,7 1
0
L in h a
d e
b a s e
1 0
m
T e m
Procedimento – Após o período pós-operatório de 7 dias, os animais
receberam microinjeções de 0.5l de nefazodona dissolvida em salina
(0.2g/0.5l) no BLA ou apenas salina. Após a microinjeção, a agulha
foi mantida dentro do cérebro por 1minuto para a absorção da droga.
s
T
N
T
6 3
8 2 ,3 3
5 0
Cirurgia- Animais foram anestesiados com thionembutal (45 mg/kg,
i.p.), e fixados no estereotáxico. Após a administração local de
lidocaína (20mgml), foi implantada unilateralmente uma cânula (26ga
Plastic One inc., USA) no CI. As coordenadas utilizadas foram tiradas a
partir de lambda: (AP) = -1.5 mm; (ML) = 1.5mm; e (DV)= 5.0mm. A
Segunda cânula foi dirigida para o BLA utilizando bregma como
referência: AP = -2.3mm, ML = 5.3, DV = 8.0mm. As cânulas foram
introduzidas no mesmo hemisfério.
lH
lH
8 3 ,1 1
6 7
Animais - foram usados ratos wistar machos pesando entre 250–300g
(Dep. de Psicologia da PUC-Rio). Os animais foram acondicionados em
grupos de seis por caixa. Após a cirurgia os animais foram alojados
isoladamente com comida/água ad libitum.
a
a
-
in
p o
2 0
d e
m
1 3 ,4 4
1 1 ,5 6
6 ,7 1
in
3 0
o b s e r v a ç ã o
(m
m
in
1 1 ,6 7
8 ,3 3
3 ,2 9
4 0
m
in
in )
Fig.1. Os resultados do cruzamento induzido pelo NMDA(intra IC) e sua influência sobre os efeitos de manipulação serotoninérgica em ratos
submetidos ao teste de campo aberto. Os dados estão descritos em médias +/- sem (*=p<0.005) teste de Newman-Keuls.
5-HT2-NMDA
sal-NMDA
Saltos
35
5-HT2-sal
sal-sal
30
25
10,6
20
16,67
15
13,22
10
6,67
5
0
0
Linha de base
0
10 min
0
20 min
0
30 min
0
40 min
Tempo de observação (min)
Imediatamente após a microinjeção no BLA, o animal era colocado em
uma arena de madeira quadrada (60 x 60 x 60cm) cujo o assoalho fora
dividido em 9 quadrados.
Medidas operacionais:
Cruzamento: O número de cruzamento foi medido através quantidade
de vezes que o animal atravessava as linhas divisórias do assoalho com
as quatro patas.
Fig.2. Os resultados dos saltos induzidos pelo NMDA (intra IC) e sua influência sobre
manipulações serotoninérgicas na AM nos ratos submetidos no teste de campo aberto. Os
dados estão descritos em médias+/- sem (*=p<0.005) teste de Newman-Keuls.
Saltos: O salto foi medido todas as vezes que o animal tirava as quatro
patas do chão.
Primeiramente foram feitos 10 minutos de observação. Então os
animais eram retirados da arena para a microinjeção de 0.5l de NMDA
diluídos em salina (10g/0.5l) no CI, ou apenas salina em igual
volume. (ver figura 1)
Após a microinjeção no CI, os animais retornavam à arena por mais 40
minutos e os cruzamentos e saltos foram quantificados.
NMDA
Salina
5HT2 Salina
9
9
9
7
Conclusão
A microinjeção de nefazodona no BLA potencializa as respostas de fuga obtidas
por microinjeção de NMDA no CI.
Estes resultados sugerem uma participação dos receptores 5HT2 na modulação
exercida pelo complexo basolateral da amígdala sobre o comportamento
aversivo eliciado por estimulação química do CI e a ativação dos desses
receptores acentuam as respostas aversivas do segundo.
Referências Bibliográficas
LeDoux, J.L. Emotion:Clues from the brain. Annu. Ver. Psychol., 46:209-235, 1995.
Maisonnette, S.; Kawasaki, M. C.; Coimbra, N. C.; Brandão, M. L. Effects of lesion ao amygdaloid nuclei
and substantia nigra on aversive responses induced by electrical stimulation of the inferior colliculus. Brain
Research Bulletin, 40(2): 93-98, 1996.