Histotécnica - fases
1. Coleta ou Colheita do material
2. Fixação
3. Clivagem
4. Desidratação
5. Diafanização
6. Impregnação
7. Inclusão
8. Microtomia
9. Coloração de rotina
10. Montagem
1. Coleta / Colheita do material
- Quem realiza esta fase?
- Tipos: in vivo (biópsia) x post-mortem
Biópsia = é a remoção de tecido de pacientes vivos para
exame diagnóstico (amostra obtida por biópsia)
- Acondicionar o material, identificar e colocar a substância
fixadora de modo adequado são fundamentais neste
momento!
2) Fixação
Conceito: É o tratamento dado a um tecido a fim de se evitar a
deteriorização do mesmo por suas próprias enzimas (autólise) ou
por microrganismos. Preserva a morfologia e a composição química
do tecido através da insolubilidade das proteínas.
Sangue
O2
Mitocôndrias
Bomba Na/K
X
Lisossomos
Fixadores químicos:
-Simples
-Compostos
Formol a 10 %
Bicromato de potássio
Bicloreto de mercúrio
Etanol
Metanol
Líquido de Bouin
Líquido de Zenker
Líquido de Helly
Fixadores físicos:
-Frio (congelamento/câmaras frigoríficas)
-Calor (fixação de esfregaços)
Identificação da substância preparada !
Formol a 10%
 Fórmula:
100ml de formol 40% (solução estoque)
900 ml de água corrente
Ou
1 litro de formol 40% (solução estoque)
9 litros de água corrente
Bom fixador
- agir rapidamente, matando a célula
- não interferir na coloração, aumentando a afinidade do
tecido pelo corante
- preservar morfologia e composição química teciduais
- evitar a autólise e o crescimento de bactérias e fungos
- não produzir artefatos ou estruturas artificiais
- ter alto poder de penetração
- endurecer sem deformar
- ser de baixo custo / "atóxico"
- ter ação conservante
Requisitos para uma boa fixação
- intervalo mínimo entre a colheita e a fixação
- contato superfícies/ substância fixadora
- fixador = 20x o volume da peça
- espessura da peça = 1-6 mm
-boa colheita
Cadáver
12h
48h
1 semana
Fresco
Resfriado
Congelado
Descalcificação
- Quando realizar esta fase adicional ?
Erros
-Coleta:
Fragmento não representativo da lesão
Diversos fragmentos sem identificação do local
Fragmento grande
-Fixação:
Pouco formol
Pote pequeno
Pote inadequado
Peça muito grande
3) Clivagem
Descrição macroscópica de PC
1-Registro
2-Descrição
a- Local : lesão ou tumor
b- Quantidade: peça única/ retalho/ fragmentos
c- Formato: irregular/ arredondado/ ovalado
d- Tamanho: ...x...x... cm / .... cm diâmetro
e- Superfície externa
Tonalidade
Lisa / rugosa
Recoberta por pele (parcial, total, tricotomizada)
Úlcera/ íntegra
Envolta por tecido (do tipo adiposo, conjuntivo)
Nodular/papilomatosa/deprimida/ulcerada/crostosa
Coberta de sujidades/sangue/muco/pus
Presença de ectoparasitas
f- Consistência aos cortes
Friável/ gelatinosa/ bem macia/ macia/ esponjosa
Elástica/ firme-elástica/ firme/ rangente/ pétrea
Ora macia, ora firme/ deixando fluir líquido
g- Superfície de cortes
Tonalidade
Irregular/ lisa (compacta)/ fasciculada/ marmóreo/
Aspecto fibroso/ untuosa/ lobada ou multilobada
cística ou policística (...cm de diâmetro)
Conteúdo dos cistos: consistência (líquido, gelatinoso, caseoso, purulento...)
Tonalidade (brancacenta, pardacenta, rósea, enegrecida, ora.... ora...)
Odor (pútrido, inodoro, amoniacal...)
-Material: Navalha, faca, bisturi
-Tamanho: 2 a 6 mm
- Finalidade
Planos de corte
Outras possibilidades:
 E se o fragmento for pequeno ?
- dividir ao meio ou processar inteiro
 E se a peça for muito grande ?
- Fazer cortes para a penetração da substância
fixadora ou descrever a peça e retirar fragmentos
menores para exame, desde que sejam
representativos da lesão