Remoção avançada de matriz (EMR) Agilent—Lipídios
LIVRE-SE DOS LIPÍDIOS,
ENCONTRE OS ANALITOS
REMOÇÃO AVANÇADA DE MATRIZ AGILENT—LIPÍDIOS
OS LIPÍDIOS ESTÃO PREJUDICANDO AS SUAS AMOSTRAS?
A interferência de lipídios é um problema para laboratórios que medem de resíduos a nível traço em alimentos
com alto teor de gordura ou matrizes biológicas complexas. Os lipídios podem se acumular no instrumento
e na coluna, diminuindo a vida útil e reduzindo a sensibilidade ao analito devido à supressão de íons.
A necessidade de manutenção do MS também aumenta, porque os lipídios se depositam na fonte.
A necessidade de remover os lipídios é bem compreendida, mas os métodos atuais geralmente sacrificam
a recuperação do analito, removendo alguns dos analitos alvo junto com os lipídios.
Agora você não precisa mais escolher entre a remoção de lipídios e a recuperação do analito, porque
a inovadora Remoção avançada de matriz Agilent—Lipídios oferece a remoção de matriz
e a recuperação de analito mais completa de qualquer produto de preparo de amostras.
A Remoção avançada de matriz Agilent—Lipídios, DIFERENTE de qualquer outro tipo de preparo de amostras,
é um sorvente exclusivo que remove de forma seletiva os lipídios em matrizes complexas e amostras com alto
teor de gordura, como o abacate, para que seja possível remover lipídios sem perder os analitos.
Abacate — Extrato Quechers antes de dSPE
Abacate — Extrato Quechers com limpeza C18/PSA
Abacate — Quechers com limpeza EMR—Lipídios
x106
1,6
Remoção de 92% da matriz com EMR—Lipídios
1,5
1,4
1,3
1,2
1,1
1
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
Figura 1. Sobreposição de cromatogramas de varredura completa para GC/MS de um extrato de abacate QuEChERS não tratado (preto), em relação
à limpeza C18/PSA tradicional (vermelho) e um extrato tratado com a Remoção avançada de matriz Agilent —Lipídios (azul).
33
34
PADRÃO QuEChERS
EMR—LIPÍDIOS QuEChERS
Extração/partição (6 etapas)
Extração/partição (6 etapas)
Misturar e centrifugar
Misturar e centrifugar
Transferir para dSPE (sorventes)
Transferir para dSPE
(EMR—Lipídios e H2O)
Misturar e centrifugar
Misturar e centrifugar
Evaporar/reconstituir ou diluir
Polir*
Filtrar o precipitado
Evaporar/reconstituir ou diluir
Transferir para o vial A/S
Transferir para o vial A/S
O sorvente inovador em EMR—Lipídios
substitui o C18/PSA na metodologia QuEChERS reduz significativamente os efeitos
da matriz e melhora as recuperações dos
analitos. Ele pode ser aplicado em todos os
analitos polares, parcialmente polares e não
polares, proporcionando uma remoção
de matriz eficiente.
*Observação: a etapa de polimento é omitida na análise de tetraciclina.
Tipo de amostra
Remoção
(%)
Abacate
92
Azeite de oliva
73
Óleo de abacate
82
Óleo de canola
75
Fígado bovino
97
Alimento úmido para gatos
91
Páprica
91
Cominho
72
Lúpulo
57
Açafrão
47
Pimenta-do-reino
22
Cebola
41
Morango
10
Ameixa
12
Pimenta vermelha
61
Espinafre
61
Laranja
52
Maçã
66
3
EMR—LIPÍDIOS
MINIMIZE OS LIPÍDIOS. MAXIMIZE OS RESULTADOS.
% de recuperação de analito (n=6) em abacate fortificado
com pesticidas na concentração de 50 ppb
120
Limpeza EMR—Lipídios
Limpeza C18/PSA dSPE
Limpeza do sorvente de zircônio
EMR—Lipídios remove consideravelmente
as contribuições de matriz, melhorando a
recuperação de vários analitos e reduzindo
a necessidade de outros testes e métodos.
100
80
60
40
20
0
Metamidofós
Tiofanato
de metilo
Bentazona
2,4-D ácido
Diclorprope
Penconazol
% de recuperação de analitos (n=6) em medicamentos veterinários
na concentração de 50 ppb fortificados em amostras de fígado bovino
30
EPN
Captafol
REC<70%
REC entre 70–120%
REC>120
25
A remoção de matriz mais eficiente com
a EMR—Lipídios resulta em maior
precisão e exatidão dos resultados.
20
15
10
5
0
Limpeza EMR—Lipídios
4
TPP
Figura 3. Dados de recuperação da análise de diversos
resíduos de pesticidas em abacate, mostrando alguns
dos 73 pesticidas analisados. Com a utilização da
Remoção avançada de matriz Agilent– Lipídios,
92% dos pesticidas ficaram na faixa de recuperação
aceitável de 70 a 120%.
Limpeza C18/PSA
Limpeza do sorvente
de zircônio
Figura 4. Número de analitos com porcentagens de
recuperação dentro da faixa aceitável de 70 a 120%
para a análise de medicamentos veterinários em fígado
bovino, demonstrando o número maior de resultados
aceitáveis após a limpeza com a Remoção avançada de
matriz Agilent —Lipídios em relação ao sorvente de zircônio.
Benefícios cromatográficos do preparo de amostras usando EMR—Lipídios QuEChERS
Remover lipídios de amostras com eficiência sem remover os analitos é essencial para melhorar o desempenho cromatográfico para obter os melhores dados com qualidade, principalmente com detectores seletivos
e de alta sensibilidade como o MS.
Um protocolo EMR—Lipídios QuEChERS aumenta consideravelmente a precisão, a reprodutibilidade e a
quantificação em baixa concentração ao usar GC/MS e LC/MS (Figura 5).
BENEFÍCIO
Exemplo
MELHOR SENSIBILIDADE
DO ANALITO
EPN em abacate no LC-QQQ
RAZÃO S/N MELHORADA
MENOS INTERFERÊNCIAS PARA
OBTER INTEGRAÇÃO PRECISA
Captano em abacate no GC-QQQ
Permetrina em abacate no GC-QQQ
+MRM (324,1 -> 296,1)
AVBVR POQ4.d
103
x
104
x
+MRM (151,0 -> 79,1)AV
MBPI-a-CD C2 com adição de 50 ppb-1.D
104
x
5
2,6
14,863 min.
4,25
2
1,0
+MRM (183,1 -> 168,1)AV
MBPI-a-CD C2 com adição de 50 ppb-1.D
20,788 min.
13,163 min.
3,25
g
1,6
EMR—Lipídios
0,5
0
14,2 14,46
15
15,4
0,8
2,25
0,5
1,25
0,2
0,75
-0,2
-0,25
15,6
12,7
Tempo de aquisição (min)
105
+MRM (324,1 -> 296,1)
AVZ-Sep+ POQ 4.d
x
13,2
13,4
103
g
1,0
+MRM (151.0 -> 79.1)
AV Z-Sep+ C5 spike 50 ppb-1.d
104
7
1,2
6
1,0
5
0,8
4
15,4
12,9
13,2
13,4
+MRM (324,1 -> 296,1)
AVC8 PR-Q3.d
105
x
103
x
+MRM (151,0 -> 79,1)
Post-S 50 ppb Fatty cSPE C1-2.D
g
0,5
6
1,0
5
0,8
4
15
15,4
15,6
Tempo de aquisição (min)
21,2
+MRM (183,1 -> 168,1) AV
Fatty dSPE com adição de 50 ppb-1R.D
20,833
8 min.
1
0
-0,1
14,2 14,46
21
2
*13,174 min.
0,2
0
104
7
1,2
0,5
14,855 min.
20,8
Tempo de aquisição (min)
x
1,4
1,0
20,4 20,6
13,6
Tempo de aquisição (min)
Tempo de aquisição (min)
Limpeza C18/PSA
0
12,7
15,6
+MRM (183,1 -> 168,1) AV
MZ-Sep+ C5 adição de 50 ppb-1.D
20,819
8 min.
1
-0,1
15
21,2
2
0,2
14,2 14,46
21
13,163 min.
14,863 min.
0
20,8
Tempo de aquisição (min)
x
0,5
0,5
20,4 20,6
13,6
1,6
x
Limpeza do sorvente
de zircônio
13
Tempo de aquisição (min)
12,7
12,9
13,2
13,4
13,6
Tempo de aquisição (min)
20,4 20,6
20,8
21
21,2
Tempo de aquisição (min)
Figura 5. Melhorias na cromatografia podem ser observadas na análise de amostras preparadas com a Remoção avançada de matriz Agilent—Lipídios, inclusive
maior sensibilidade devido à menor supressão de íons, melhor razão sinal-ruído e menos interferências, fornecendo integração precisa com os sistemas de GC ou LC
triplo quadrupolo.
5
O PREPARO DE AMOSTRAS MAIS RÁPIDO AGILIZA
A PRODUTIVIDADE DO LABORATÓRIO
Sem a limpeza da amostra, a eficiência e a qualidade analítica são comprometidas rapidamente, visto que as matrizes com alto teor de gordura
se acumulam no instrumento e na coluna. Com a EMR—Lipídios, o desempenho do sistema é mantido mesmo após 100 injeções de uma amostra
de matriz com alto teor de gordura, como o abacate. A manutenção menos frequente permite aumentar a produtividade das amostras e utilizar ao
máximo os ativos, maximizando a produtividade do seu laboratório.
20000
18000
16000
Área do pico do TPP
14000
12000
10000
8000
Figura 6. Resposta do analito em 100 injeções de amostra de abacate. O fosfato
de trifenil (TPP) é um padrão interno usado com frequência. A supressão ou aumento do sinal pode ser resultado da limpeza inadequada das amostras e pode
contribuir com dados de má qualidade, erros e reexecução de amostras. A maior
capacidade de limpeza da matriz com Remoção avançada de matriz Agilent—Lipídios, resulta em uma fonte mais limpa e respostas do MS mais consistentes ao
longo do tempo, para fornecer dados com mais qualidade, menos reexecuções e
menos resoluções de problemas e manutenção na fonte.
6000
4000
Limpeza EMR—Lipídios. Quedas de resposta – 4%
Limpeza do sorvente de zircônio. Quedas de resposta – 50%
Limpeza C18/PSA. Diminuição da resposta – 35%
2000
0
5
10 15 20
25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100
Injeções de amostras de extrato de abacate no GC/QQQ
130
1600
120
1400
100
1200
90
80
1000
70
800
60
50
PARÂMETRO
Tensão EM
Íon MS de abundância rel. 219
Íon MS de abundância rel. 502
40
30
CRITÉRIOS DE DESEMPENHO DE MÉTODO
>1600V necessita a substituição de EM
Mín 70
Mín 5
600
400
20
200
10
0
0
0
500
1000
1500
2000
Injeções de amostras de abacate após a limpeza QuEChERS EMR—Lipídios
6
Tensão EM
Abundância relativa para íon de ajuste (%)
110
Com EMR—Lipídios há menos necessidade
de manutenção e calibração do sistema
devido a menor entrada de interferentes
da matriz no instrumento. Como
resultado, menos amostras precisam ser
reprocessadas. Esta vantagem permite
que você opere com maior produtividade,
resultando em economias de custo
e um laboratório mais eficiente.
2500
Figura 7. Condições da fonte do GC/MS durante 2.500 injeções de
amostras de abacate, demonstrando uma frequência bastante reduzida
de manutenção na fonte do MS (limpeza ou substituição) ao usar a
Remoção avançada de matriz—Lipídios.
RSD dos analitos após 100 injeções no GC/QQQ (n = 20)
Pesticidas
Limpeza EMR—
Lipídios
Limpeza C18/PSA
Limpeza do sorvente
de zircônio
Diclorvos
6,2
10,5
16,8
2-Fenilfenol
7,0
13,6
19,5
Etalfluralina
12,4
18,8
32,0
Sulfotep
7,1
11,8
17,2
Atrazina
6,8
12,2
19,1
Lindano
8,5
10,8
20,0
Clorotalonil
12,5
11,7
37,4
Diazinon
6,6
11,7
16,9
Clorpirifos metil
8,4
8,9
14,9
Diclofluanida
11,7
9,0
25,9
Aldrin
9,8
19,3
25,7
Tolilfluanida
10,5
6,6
17,8
Captano
29,9
51,9
47,1
Procimidona
6,8
14,3
22,5
Bupirimato
6,8
10,4
20,7
Endrin
8,3
12,6
24,1
Sulfato de endosulfan
8,5
12,1
22,4
DDT
21,6
22,4
42,6
Iprodiona
11,0
10,7
40,0
Permetrina
6,8
11,8
18,8
Paration-etil
11,8
7,2
13,0
TPP
9,1
19,9
28,3
Após uma centena de execuções
de análises de amostras com
alto teor de gordura, a limpeza
eficiente da EMR—Lipídios
resulta em % RSDs menores e
maior confiança nos resultados,
em relação a procedimentos
QuEChERS alternativos. Dados de
mais qualidade com resultados
mais precisos resultam em menor
necessidade de reverificar os
dados, justificativas e menos
reexecuções.
Figura 8. Reprodutibilidade dos
pesticidas analisados (%RSD) após
várias injeções de amostras de abacate
no GC/QQQ. Amostras de abacate de
50 ppb fortificadas foram testadas a
cada cinco injeções e as matrizes em
branco foram injetadas entre elas.
RSD > 20% são considerados
inaceitáveis e estão marcados
em vermelho.
Os benefícios da utilização da nova e inovadora EMR—Lipídios
para QuEChERS são evidentes
• Maior produtividade: a melhor sensibilidade e
sinal/ruído devido a menos interferências da matriz
permitem um processamento de dados mais rápido
e maior produtividade da amostra.
• Redução dos custos do laboratório: amostras
mais limpas usando EMR—Lipídios podem
proporcionar manutenções na fonte do MS bem
menos frequentes, oferecendo mais tempo para
analisar amostras evitando a perda de tempo com
resolução de problemas, tempo de inatividade
e reparo nos instrumentos.
• Fluxos de trabalho simplificados: padronize
um procedimento com sorvente único e fácil de
usar que maximiza a recuperação do analito em
uma grande variedade de amostras com alto teor
de gordura. Economize tempo e dinheiro reduzindo
custos de material, estoque, tempo de treinamento
e documentação, e consequentemente agilize
a produtividade do laboratório.
• Resultados com maior qualidade: um perfil
de amostra mais limpo gera maior integridade dos
dados e confiança nos resultados, processamento
de dados mais rápido e menos reexecuções.
Descrição do part number
5982-1010
Bond Elut QuEChERS EMR—Lipid dSPE
5982-0101
Bond Elut QuEChERS EMR—Lipid Final polish
7
Uma boa análise exige um bom fluxo de trabalho
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Aumente a produtividade da análise com os instrumentos atuais
e o mínimo de investimento – veja como aumentar a produtividade
do seu laboratório aqui:
Fluxo de trabalho em análise por cromatografia líquida
agilent.com/chem/ProductivityLC
Fluxo de trabalho em análise por cromatografia gasosa
agilent.com/chem/ProductivityGC
Saiba mais
agilent.com/chem/EMR-Lipid
Encontre um centro de atendimento local ao cliente Agilent
www.agilent.com/chem/contactus
Brasil
0800 7281405
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Índia
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Somente para uso em pesquisas. Não devem ser usados em procedimentos de diagnóstico.
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© Agilent Technologies, Inc., 2015
Publicado nos Estados Unidos, 27 de julho de 2015
5991-6052PTBR