Caracterização de Vibrio spp. e Aeromonas spp. ocorrentes em animais marinhos capturados no litoral do Brasil. Dalia dos Prazeres Rodrigues Ambiente natural de Vibrio spp. e Aeromonas spp Microrganismo Microrganismos s Cadeia Alimentar Alimentos Alimentos Água Água ANIMAIS ANIMAIS Homem Homem Meio Ambiente Meio Ambiente Ambiente aquático Microrganismos predominantes Família Vibrionaceae Aeromonadaceae Gêneros: Gêneros: Vibrio: Photobacterium: Allomonas: Listonella: Enhydrobacter: Salinivibrio: Enterovibrio: 48 espécies Aeromonas: 26 espécies 8 espécies Oceanomonas: 2 espécies Tolumonas: 1 espécie 1 espécie 2 espécies 1 espécie 2 espécies 1 espécie Distribuição de Vibrio spp. em diferentes fontes aquáticas Espécie Isolamento Oceano Estuário Moluscos Sedimento V.aestuarinus Crustáceos Corais Água doce X X X V.alginolyticus X X X V.anguillarum X X X V.campbellii X X X X X X X X X V.carchariae X V.cholerae X V.cincinnatiensis V.damsela Peixes X X X X X X X X X X Distribuição de Vibrio spp. em diferentes fontes aquáticas Espécie Isolamento Oceano Estuário Moluscos Sedimento X X X V.fluvialis X V.furnissii X V.harveyi X X V.hollisae X X V.marinus Crustáceos Corais X X X X X X X V.mediterranei V.metschnikovii X X X X X X X X X X V.orientalis X V.parahaemolyticus V.pelagius X X V.mimicus V.ordalii Água doce X V.diazotrophicus V.fisheri Peixes X X X X X X Características Morfológicas Vibrio alginolyticus V.parahaemolyticus A.hydrophila Flagelo Pili Vibrio cholerae O1 Vibrio cholerae A.hydrophila (adesão- epitelio intestinal) Vibrio vulnificus Características Ecológicas: Vibrio spp • Habitat: ambiente aquático • Recursos: celulose e quitinase Aeromonas spp. • Habitat: ambiente aquático • Temperatura ótima: 17°C a 35°C • Contato com espécies de peixes e anfíbios • Salinidade: 0.5 a 3.5 % • Temperatura: 4°C a 37°C • Maior número de espécies: água com ótimo a 28°C salgada • Ocorrência espécies: • Áreas poluídas X Patógenos água doce> água salobra> água salgada Fatores de patogenicidade Vibrio spp Aeromonas spp • Enterotoxina CT, Zot, Ace • Camada S • • • • • • • • • • • Toxina semelhante a CT Toxina NAG-ST Citolisina Shiga Like Toxin TDH - TRH Colagenase, elastase, hemolisina,... • • • • Hemolisinas Enzimas Extracelulares Sideróforos Exotoxinas Enterotoxina Citotóxica e Citolítica Enterotoxinas citotônicas Invasinas Plasmídeos Adesinas Espécies patogênicas Vibrio spp Aeromonas spp Homem: 12 espécies (?) Animais: 14 espécies (?) Homem: (?) Animais: (?) • sangue quente • sangue frio Espécies patogênicas para o homem Vibrio spp. V.alginolyticus V.carchariae V.cholerae O 1, O139, não O1 V.cincinatiensis V.damsela V.fluvialis V.furnissii V.hollisae V.metschnikovii V.mimicus V.parahaemolyticus V.vulnificus Aeromonas spp. • • • • • • • A.hydrophila A.caviae A.veronii biog. sobria A.veronii biog.veronii A.media A.jandaei A.schubertii Vibrio spp. patogênicas para espécies animais Espécies de Vibrio Peixes V.alginolyticus Úlcera V.parahaemolyticus Úlcera V.anguillarum Inf. cutâneas septicemia V.carchariae Vasculite V.damsela Inf. cutâneas V.ordalli Inf.cutâneas V.cholerae Hemorragia petéquias V.vulnificus Inf. cutâneas V.harveyi Inf. cutâneas, Moluscos Úlcera Crustáceos Corais Úlcera Úlcera Inf. cutâneas Inf. cutâneas septicemia Inf. cutâneas Inf. cutâneas Inf. cutâneas Cnidários Inf.cutâneas Inf.cutâneas Inf. cutâneas V.splendidus V.furnissii Inf.cutâneas Inf cutâneas V.fluvialis Inf.cutâneas Inf cutâneas Inf. cutâneas V.metschnikovii V.fisheri Inf. cutâneas Inf. cutâneas V.orientalis V.campbelli Vibrio AK-1 Inf. cutâneas Vibrioses Fenoespécies de Aeromonas patogênicas para animais Animais aquáticos Furunculose Podridão: rabo, barbatanas Fenoespécies A.hydrophila A.salmonicida A.caviae A.media A.eucrenophila Septicemia hemorrágica Pneumonia Hemorragia: guelras, cutânea Úlceras e estomatite ulcerativa Abscessos e lesões cutâneas Exoftalmia Protrusão de escamas A.sobria Flacidez muscular A.veronii Distensão abdominal A.encheleia Aves e Animais terrestres A.schubertii Pneumonia Grupo 501 Dermatite A.trota Aborto em vacas Septicemia em cachorro Diarréia em porcos Exemplos de infecções em peixes Úlcera cutânea Septicemia hemorrágica Vermelhidão de barbatanas Furunculose crônica Exemplos de infecções em animais aquáticos Infecções cutâneas em crustáceos Infecções em Golfinhos Infecções em peixes Infecções em Corais Objetivo Monitorar a presença de microrganismos exóticos e seu risco para animais residentes em nosso ecossistema marinho e conseqüências para o homem. Objetivos específicos: Caracterização das diferentes espécies; Determinação fenotípica e genotípica de seus fatores de virulência; Avaliação da suscetibilidade aos antimicrobianos e metais pesados; Rastreamento molecular dos clones circulantes; Caracterização das espécies/clones epidêmicos ocorrentes em paises dos hemisférios norte/sul que representam risco para o homem. Equipe participante Coleta - Transporte GEMARS - Ignacio S. Moreno FEEVALE - Paulo H. Ott GEMM-Lagos DEENSP - Salvatore Siciliano Diagnóstico Laboratorial LABENT-LRNCEB Simone D. Amorim André F.M. Santos Christiane S. Pereira Evaldo Soares Grace Nazareth D. Theophilo Dalia dos P. Rodrigues Amostras Origem Coleta Transporte Animais marinhos Aves marinhas Diagnóstico Laboratorial Isolamento Isolamento Triagem LIA Enriquecimento Agar TCBS KIA Agua Peptonada Alcalina Agar GSP Agar Nutriente Exemplo de testes empregados na caracterização das espécies Oxidase Caracterização antigênica VM VP Via metabólica: glicose Aminoácidos Fatores de virulência 10µg 150µg Suscetibilidade antimicrobianos e metais pesados Fonte de Carbono Fermentação de Carbohidratos Sensibilidade O/129 Rastreamento Resultados: Período de análise: 2003-2005 Total de amostras analisadas: 198 Mamíferos marinhos - Vibrio spp.: 108 Aeromonas spp.: 93 Aves marinhas - Vibrio spp.: 37 V.orientalis V. alginolyticus V. carchariae V. harveyi V. vulnificus V. mediterranei V. parahaemolyticus V. cincinnatiensis V. fluvialis V. aestuarinus V. gazogenes V. furnisii V. pelagius biog. I V. pelagius biog. II V. damsela V. campbelli V.mimicus Vibrio sp. Total 1 1 1 1 1 8 9 1 2 1 5 2 1 3 4 2 2 1 4 2 1 2 1 1 Baleia de True Leão Marinho Baleia Minke Baleia Jubarte Golfinho Comum 4 1 1 4 5 4 12 108 1 2 5 1 1 1 1 1 1 9 1 1 1 2 3 48 4 21 2 1 1 3 1 8 1 2 Total 1 20 11 6 8 1 10 4 3 6 4 2 3 2 1 1 5 20 1 1 3 Boto Cinza Golfinho Pintado Boto Amarelo Microrganismo Baleia Bryde Baleia Franca Distribuição de Vibrio spp. caracterizadas em mamíferos marinhos A. veronii biog. sobria A. hydrophila A. veronii biog. veronii A. schubertii A. caviae A. media A. eucrenophila A. sobria A. jandaei A. trota Aeromonas sp. Plesiomonas shigelloides* Total 1 2 1 1 1 1 3 4 2 3 15 5 7 1 4 2 2 1 1 4 47 1 2 2 1 2 1 2 1 1 1 1 4 1 2 1 Baleia de True Leão Marinho 3 1 1 1 2 2 1 1 9 Golfinho Comum Boto Cinza Golfinho Pintado Boto Amarelo Golfinho de dentes rugosos Espécie Baleia Franca Distribuição de Aeromonas spp. caracterizadas em mamíferos marinhos 2 9 1 1 9 9 3 Total 12 9 22 6 12 2 5 8 4 2 5 6 93 Baleia- franca- do- sul Baleia- de- Bryde Categoria de ameaça: Vulnerável Espécies identificadas: •V. parahaemolyticus •V. cincinnatiensis •V. fluvialis Categoria de ameaça: ? Espécies identificadas: •V. vulnificus Baleia- de- True Baleia- Minke- anã Categoria de ameaça: ? Espécies identificadas: •V. vulnificus •V. parahaemolyticus •V. alginolyticus •V. fluvialis Categoria de ameaça: ? Espécies identificadas: •V. vulnificus •V. alginolyticus •V. carchariae Jubarte Categoria de ameaça: Vulnerável Espécies identificadas: •V. vulnificus •V. cincinnatiensis Boto-amarelo Categoria de ameaça: perigo Espécies identificadas: •V. parahaemolyticus •V. vulnificus •V. alginolyticus •V. fluvialis •V. cincinnatiensis •V. carchariae •V. furnisii •V. harveyi Golfinho-pintado-do-atlântico Boto- cinza Categoria de ameaça: ? Espécies identificadas: •V. vulnificus •V. alginolyticus •V. damsela •V. parahaemolyticus •V. mimicus •V. pelagius biog. I Golfinho-comum-de-bico-curto Categoria de ameaça: ? Espécies identificadas: •V. pelagius biog. I •V. alginolyticus Leão- marinho-do-sul Categoria de ameaça: baixo risco Espécies identificadas: • V. pelagius biog. II • V. aestuarinus Categoria de ameaça: ? Espécies identificadas: • V. parahaemolyticus • V. pelagius biog. I • V. mimicus • V. harveyi Distribuição de Vibrio spp. caracterizadas em aves marinhos Espécie Atobá V. orientalis 1 Vibrio sp. 4 V. alginolyticus 1 V. carchariae Ostreiro Pingüim Furabuxo Socozinho Pardella Fragata Garça Branca Total 1 1 2 6 1 3 1 14 1 1 2 8 1 2 V. harveyi 3 3 V. metschnikovii 1 1 V. logei 1 1 V. splendidus biog. I 1 1 V. vulnificus 1 1 V. mediterranei 1 1 V. natriegens 1 1 V. anguillarum 1 1 1 V. parahaemolyticus V. pelagius biog. II Total 1 1 7 2 8 13 1 1 1 1 4 37 Avaliação parcial dos resultados: Elevado percentual e diversidade de espécies patogênicas. Fatores que propiciam as patogenias em animais marinhos: Condições de stress resultantes de aprisionamento em redes de pesca; Elevados índices de poluição, com redução de alimentos e desvio da rota migratória; Relevância dos resultados : Possibilidade da introdução de espécies bacterianas exóticas com danos para aqüicultura; Introdução de bactérias exóticas que podem determinar surtos epidêmicos no homem; Possibilidade de transferência de genes de resistência antimicrobiana e/ou virulência para bactérias autóctones com conseqüentes danos para o homem; Principais aspectos a considerar: Complementar a análise das cepas feno e genotipicamente visando ampliar o conhecimento quanto as suas características. Necessidade de efetivar o monitoramento contínuo para determinar a introdução de microrganismos exóticos. Ampliar o conhecimento, contribuindo para preservação ambiental, particularmente em animais ameaçados de extinção. Laboratório de Enterobactérias Lab. Ref. Nacional de Cólera e Enteroinfecções Bacterianas Av. Brasil, 4365 – Pav. Rocha Lima Tel # 0 xx 21 2598-4277 R 316 e-mail: [email protected] E.Hofer Administração Informática