UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA
FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINÁRIA
______________________________________________________________________________
MAYARA LEAL FERNANDES
AVALIAÇÃO DAS CONDIÇÕES HIGIÊNICAS E SANITÁRIAS DA COMERCIALIZAÇÃO DE SORVETES E
REFRESCOS EM LANCHONETES DO CAMPUS DARCY RIBEIRO DA UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA.
BRASÍLIA
2013
MAYARA LEAL FERNANDES
AVALIAÇÃO DAS CONDIÇÕES HIGIÊNICAS E SANITÁRIAS DA COMERCIALIZAÇÃO DE SORVETES E
REFRESCOS EM LANCHONETES DO CAMPUS DARCY RIBEIRO DA UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA.
Monografia apresentada à Faculdade de
Agronomia e Medicina Veterinária da
Universidade de Brasília como requisito parcial
para obtenção do grau de médico veterinário.
Orientadora: Profa. Dra. Márcia de Aguiar
Ferreira
Brasília
2013
Nome da autora: Fernandes, Mayara Leal
Título: Avaliação das condições higiênicas e sanitárias da comercialização de sorvetes e
refrescos em lanchonetes do Campus Darcy Ribeiro da Universidade de Brasília.
Monografia de conclusão do Curso de Medicina Veterinária apresentada à Faculdade de
Agronomia e Medicina Veterinária da Universidade de Brasília.
Aprovado em: ____ de julho de 2013.
Banca Examinadora
Profa. Dra. Márcia de Aguiar Ferreira
Instituição: Universidade de Brasília
Julgamento:______________________
Assinatura:______________________
Profa. Dr. Ernandes Rodrigues de Alencar
Instituição: Universidade de Brasília
Julgamento:______________________
Assinatura:______________________
Med. Vet. Emanuel Pereira Couto
Instituição: Universidade de Brasília
Julgamento:______________________
Assinatura:_______________________
Dedico este trabalho a Deus, à Nossa
Senhora, aos meus pais, Sostenis e Teresinha,
e ao meu irmão Marcel, que sempre
estiveram ao meu lado em todos os
momentos felizes, todos os momentos
tristes e, principalmente, em todos os
momentos difíceis.
AGRADECIMENTOS
Agradeço a Deus por ter me concedido a graça de concluir essa etapa, pois é Dele toda
honra e a vitória alcançada em minha vida; e a minha querida mãezinha, Nossa Senhora, por
sempre estar na frente de todos os meus problemas e que por inúmeras vezes me deu força e
coragem nos momentos de insegurança e ansiedade.
Agradeço à minha mãe, minha maior fonte de inspiração, determinação e alegria da
minha vida. Se eu for metade do que ela é, já serei muito mais do que já imaginei.
Agradeço ao meu pai, meu mestre, meu maior exemplo de vida e de honestidade.
Agradeço ao meu irmão, o mais maravilhoso de todos e a melhor companhia de todas as
horas.
Agradeço a toda minha família, minha base e motivação para tudo. Amo vocês!
Aos professores da Universidade de Brasília, meus mestres brilhantes e dedicados que
são exemplo de profissionalismo e conhecimento, em especial, à professora Márcia, a melhor
orientadora do mundo.
Aos meus queridos amigos, pelo companheirismo e apoio de sempre e ainda por me
ajudarem de alguma forma nesse trabalho, não irei citar nomes, mas vou enfatizar a ajuda do M.
P., pois não teria conseguido realizar todas as tarefas, com eficiência, em tão pouco tempo.
Aos animais, principalmente, ao Éggus e à Bolota que foram à razão desse caminho.
E a todos que contribuíram para o meu crescimento pessoal e profissional.
Muito obrigada!
RESUMO
FERNANDES, Mayara Leal. Avaliação das condições higiênicas e sanitárias da comercialização de
sorvetes e refrescos em lanchonetes do Campus Darcy Ribeiro da Universidade de Brasília. 2013.
50 f. Monografia (Conclusão do Curso de Medicina Veterinária) – Faculdade de Agronomia e
Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Brasília, DF.
O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade higiênica e sanitária da comercialização de
sorvetes e refrescos em lanchonetes localizadas na Universidade de Brasília (UnB). Foram feitas
coletas e análises microbiológicas de 10 amostras de sorvete, 10 amostras de refrescos, 20
amostras de superfícies de equipamentos e utensílios e, duas da água de abastecimento. Os
padrões microbiológicos foram avaliados conforme a RDC nº. 12/2001 da ANVISA. Situações
insatisfatórias foram detectadas como a presença de coliformes totais (CT) em 100% das
amostras de sorvete analisadas e de 60% coliformes termotolerantes (CTt), acima dos padrões
microbiológicos estabelecidos. Com relação às amostras de refresco, 10% apresentaram
contagem de CT acima do padrão. Em 20% das amostras de sorvete foram isolados estafilococos
coagulase positiva e ausência nas amostras de refresco. Em nenhuma amostra de sorvete ou de
refresco, foi detectada a presença de Salmonella spp. Quanto aos equipamentos e utensílios
analisados, observaram-se presença de aeróbios mesófilos (AM) em 100% das amostras de
maçanetas, 50% das tampas dos freezers e ainda 75 % das conchas para sorvete. Outro ponto
de incorporação avaliado foi a água contida em baldes para acondicionamentos das conchas,
que apresentou 100% e 75% para, AM e CT, respectivamente. A partir dos resultados obtidos
pode-se concluir que, em geral, os alimentos pesquisados não apresentam qualidade
satisfatória, principalmente os sorvetes. Equipamentos e utensílios mal higienizados podem ter
contribuído para os níveis de contaminação encontrados. Observa-se que, as precariedades das
instalações, hábitos de higiene insuficientes, refletem a realidade atual dessas unidades de
alimentação, evidenciando a necessidade de instalações adequadas, reformulação das boas
práticas de manipulação dos alimentos, a capacitação contínua dos seus manipuladores e o
monitoramento das condições de produção e comercialização dos alimentos no campus.
Palavras-chave: Segurança Alimentar, Água, Utensílios, Estafilococos Coagulase Positivo,
Aeróbios Mesófilos, Salmonella spp.
ABSTRACT
FERNANDES, Mayara Leal. Evaluation of hygienic and sanitary conditions of ice cream and soft
drinks commercializaded on campus Darcy Ribeiro in Brasilia University. In 2013. 50p. Thesis
(Course Completion of Veterinary Medicine) - College of Veterinary Medicine and Agronomy,
Brasilia University, Brasilia, DF.
The aim of this study was to evaluate the quality of hygienic and sanitary conditions of ice
cream and soft drinks commercializaded in cafeterias located at the Brasilia University (UnB).
Samples were collected and microbiological analyzes of 10 ice cream samples, 10 soft drinks
samples, 20 surfaces of equipment and utensils samples and two water supplies. The
microbiological standards were evaluated according to RDC 12/2001 ANVISA. Showed
unsatisfactory conditions such as the presence of total coliforms (TC) in 100% of analyzed
samples of ice cream and 60% and thermotolerants coliforms (TTC), above the microbiological
standards established. In the samples of soft drinks count showed 10% TC above the standard.
In 20% of the ice cream samples isolated were coagulase positive and absent in samples of spft
drinks. In any sample of ice cream or refreshment, detected the presence of Salmonella spp.
Concerning to equipment and utensils analyzed, we observed the presence of aerobic
mesophilic (AM) in 100% of door handles, 50% of the covers freezers and even 75% of the shells
Sherbet. Another point of incorporation evaluated was the water contained in buckets
packaging for the shells, which showed 100% and 75% for, AM and CT, respectively. From the
results it can be concluded that food did not demonstrate satisfactory quality, especially ice
cream. Poorly sanitized equipment and utensils may have contributed to the levels of
contamination found. Besides, poor facilities, poor hygiene habits, reflects the current reality of
these power units, highlighting the need for adequate facilities, reformulation of good food
handling practices, continuous training of their handlers and condition monitoring production
and marketing of food on campus.
Keywords: Food Safety, Water, Utensils, Coagulase Positive Staphylococcus, Aerobic Mesophiles,
Salmonella spp.
Sumário
1. INTRODUÇÃO ............................................................................................................................9
2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA ...................................................................................................10
Importância da segurança alimentar ...............................................................................................10
Sorvetes ..........................................................................................................................................12
a . Breve Histórico ..................................................................................................................... 12
b. Definições .............................................................................................................................. 13
c. Consumo no Brasil e em outros países .................................................................................. 14
d. Composição ........................................................................................................................... 16
e. Método de fabricação............................................................................................................. 18
f. Qualidade do sorvete ............................................................................................................. 20
Refrescos ........................................................................................................................................21
Mercado e consumo de refrescos .............................................................................................. 21
Avaliação e critérios microbiológicos de sorvetes e refrescos .......................................................23
a.
Grupo dos Aeróbios Mesófilos ....................................................................................... 24
b.
Grupo dos Coliformes Totais e Termotolerantes ............................................................ 25
c.
Estafilococos Coagulase positiva.................................................................................... 26
d.
Salmonella spp. ............................................................................................................... 27
Qualidade microbiológica de sorvetes e refrescos .........................................................................28
3. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS .......................................................................................30
4. JUSTIFICATIVA .......................................................................................................................36
5. OBJETIVOS ...............................................................................................................................37
6. MATERIAIS E MÉTODOS.......................................................................................................38
7. RESULTADOS E DISCUSSÃO ...............................................................................................41
8. CONCLUSÃO ............................................................................................................................48
9. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS DA PESQUISA ............................................................49
9
1. INTRODUÇÃO
Após a Revolução Industrial, intensas transformações refletiram na sociedade mundial.
Fatores como as dificuldades impostas pelos longos deslocamentos e a extensa jornada de
trabalho fazem com que muitas pessoas realizem refeições fora do domicílio (CARDOSO et al.,
2005). Entretanto, o alimento consumido em estabelecimentos comerciais nem sempre possui
as condições de preparo adequadas para se evitar a contaminação, tornando-o um fator de
risco à saúde do consumidor (SANTOS et al., 2010). Os alimentos contaminados podem causar
doenças, chamadas DTA - Doenças Transmitidas por Alimentos, que se desenvolvem por
múltiplas falhas como refrigeração inadequada, manipuladores infectados/contaminados,
processamento térmico insuficiente e higienização incorreta (CARDOSO et al., 2005; ALVES &
UENO, 2010). Entre os principais patógenos veiculados por alimentos destacam-se Salmonella
spp., Escherichia coli e Staphylococcus aureus (CDC, 2010). Tais micro-organismos já foram
encontrados em pesquisas sobre qualidade microbiológica de sorvetes e refrescos.
O controle microbiológico de sorvetes e refrescos é importante uma vez que após seu
preparo final, não sofrem nenhum tipo de tratamento. No caso do refresco, há um agravante,
pois nem sempre a água utilizada para o preparo dessa bebida é adequada para o consumo.
Atualmente, tem-se verificado um aumento na comercialização de refrescos e sorvetes
em estabelecimentos comerciais, como lanchonetes e padarias. Por este motivo, há uma maior
preocupação com a qualidade sanitária desses produtos em espaços coletivos. Pesquisas sobre
alimentação em espaços educacionais demonstram a existência de problemas relacionados à
presença de roedores e insetos, ausência de controle de qualidade da água, além de
deficiências na higiene pessoal dos manipuladores (CARDOSO et al., 2005).
Nesse contexto, procurou-se avaliar as condições higiênicas e sanitárias da
comercialização de sorvetes e refrescos em lanchonetes situadas na Universidade de Brasília
(UnB) já que o número de indivíduos que consomem esses produtos nos campi é expressivo. O
presente trabalho visa à obtenção de dados que podem contribuir na proposição de diretrizes
para a melhoria da qualidade do serviço prestado à comunidade acadêmica e à comunidade em
geral, uma vez que na UnB não existem estudos publicados relacionados ao tema proposto.
10
2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
Importância da segurança alimentar
A alimentação adequada é direito fundamental do ser humano, inerente à dignidade da
pessoa humana e indispensável à realização dos direitos consagrados na Constituição Federal,
devendo o poder público adotar as políticas e ações que se façam necessárias para promover e
garantir a segurança alimentar e nutricional da população. A segurança alimentar e nutricional
consistem na realização do direito de todos ao acesso regular e permanente a alimentos de
qualidade, em quantidade suficiente, sem comprometer o acesso a outras necessidades
essenciais, tendo como base práticas alimentares promotoras de saúde que respeitem a
diversidade cultural e que sejam economicamente sustentáveis (BRASIL, 2006).
Caso aconteçam doenças e danos provocados por alimentos, estes na melhor das
hipóteses serão desagradáveis e na pior das hipóteses fatais. Os surtos de doenças causadas por
alimentos contaminados podem prejudicar o comércio e o turismo, gerando perdas econômicas,
desemprego e conflitos. Já os alimentos deteriorados causam desperdício e aumento de custos,
afetando de forma adversa o comércio e a confiança do consumidor (OPAS, 2006).
Nas últimas décadas, os hábitos alimentares têm passado por mudanças em muitos
países, acarretando o desenvolvimento de novas técnicas de produção, preparação e
distribuição de alimentos. Portanto, um controle eficaz de higiene tornou-se imprescindível para
se evitar consequências prejudiciais decorrentes de doenças e danos provocados pelos
alimentos à saúde humana e à economia. Todos os participantes da cadeia produtiva têm a
responsabilidade de garantir que o alimento seja seguro e adequado para consumo (OPAS,
2006).
Em qualquer setor da cadeia de alimentos, é necessário que sejam implementados os
programas tidos como pré-requisitos, tais como as Boas Práticas de Higiene (BPH) e as Boas
Práticas de Fabricação (BPF), de acordo com os Princípios Gerais de Higiene do Codex
Alimentarius, para se atingir um alto padrão de qualidade (SANTOS et al., 2010).
O Codex Alimentarius é um fórum internacional de normatização do comércio de
alimentos estabelecido pela Organização das Nações Unidas (ONU), por ato da Organização para
11
a Agricultura e Alimentação (FAO) e Organização Mundial de Saúde (OMS). Criado em 1963, o
fórum tem a finalidade de proteger a saúde dos consumidores e assegurar práticas equitativas
no comércio regional e internacional de alimentos. As normas Codex abrangem os principais
alimentos, sejam estes processados, semiprocessados ou crus. Também, tratam de substâncias
e produtos usados na elaboração de alimentos. Suas diretrizes referem-se aos aspectos de
higiene e propriedades nutricionais dos alimentos, abrangendo código de prática e normas de
aditivos alimentares, pesticidas, resíduos de medicamentos veterinários, substâncias
contaminantes, rotulagem, classificação, métodos de amostragem e análise de riscos (BRASIL,
2013).
As BPH são um conjunto de condições e medidas necessárias para garantir a segurança e
higiene dos alimentos em todas as etapas da cadeia alimentar. Já as BPF são normas definidas
para a operação e gestão das empresas alimentares, de modo a garantir a fabricação de
alimentos seguros (HOGG et al., 2004).
A principal meta das BPF é a máxima redução dos riscos e o aumento da qualidade e da
segurança dos alimentos (SANTOS et al., 2010). Complementando as BP, a Agência Nacional de
Vigilância Sanitária (ANVISA) aprovou os Procedimentos Operacionais Padronizados (POP) –
procedimentos escritos, estabelecendo instruções sequenciais de operações rotineiras e
específicas na produção, armazenamento e transporte de alimentos (BRASIL, 2002; SANTOS et
al., 2010).
O controle sanitário dos alimentos se constitui em um conjunto de normas e técnicas
utilizadas para verificar se os produtos alimentícios estão sendo produzidos, manipulados e
distribuídos de acordo com as Boas Práticas (BP). Quando não é obedecido, muitos microorganismos patogênicos podem contaminar o alimento, tornando-o um fator de risco à saúde
do consumidor (BENEVIDES & LOVATTI, 2004). Vale salientar que os perigos microbiológicos são
as principais causas de contaminação dos alimentos e que os manipuladores são os grandes
responsáveis (SOUZA, 2006).
Um perigo alimentar é um agente biológico, químico ou físico, ou as condições em que
os alimentos se encontram, com o potencial risco de causar um efeito adverso para a saúde.
Para evitar ou reduzir os riscos, medidas preventivas e de controle de higiene, incluindo as BP,
12
devem ser adotadas na cadeia produtiva, nas unidades de comercialização e nos domicílios,
visando à melhoria das condições sanitárias dos alimentos (BRASIL, 2005).
Os principais perigos de contaminação dos alimentos estão geralmente associados aos
seguintes fatores: ao estado de saúde dos manipuladores; à higiene corporal; ao vestuário
utilizado; e as práticas e comportamentos profissionais incorretos ou negligentes (CARRELHAS,
2008).
Portanto, a segurança dos alimentos é garantida principalmente pelo controle da origem;
pelo controle do processo e da formulação do produto; pela aplicação de Boas Práticas de
Higiene durante a produção, o processamento, a manipulação, a distribuição, o armazenamento,
a comercialização, a preparação e o uso; pela aplicação do Sistema Análise de Perigos e Pontos
Críticos de Controle - APPCC; e dos Procedimentos Operacionais Padrão – POP (OPAS, 2006).
Ainda hoje, os gelados comestíveis não têm sido considerados como importantes
veículos de contaminação bacteriana, por se constituir em um alimento congelado. Porém, a
resistência de micro-organismos ao congelamento é muito variável, já que não provoca a morte
de todos os micro-organismos e, muitos sobrevivem em diferentes estados fisiológicos (RIZZOBENATO, 2004).
Por isso, a qualidade microbiológica de produtos de confeitaria tais como bolos, pavês e
doces em geral é frequentemente, avaliada por serviços de microbiologia e vigilância sanitária
municipal e distrital. No Brasil, os órgãos governamentais responsáveis pela saúde pública já
registraram vários surtos envolvendo alimentos com elevada contaminação microbiana
(GRANADA et al., 2003).
Sorvetes
a . Breve Histórico
Segundo a Associação Brasileira de Indústrias de Sorvetes - ABIS, a história começa com
os chineses, que misturavam neve com frutas fazendo uma espécie de sorvete. Esta técnica foi
passada aos árabes, que logo começaram a fazer caldas geladas chamadas de sharbet, e que
mais tarde se transformaram nos famosos sorvetes franceses sem leite, os sorbets.
13
Nos banquetes de Alexandre, o Grande, na Grécia, e nas famosas festas gastronômicas
do Imperador Nero, em Roma, os convidados já degustavam frutas e saladas geladas com neve.
O Imperador mandava seus escravos buscarem neve nas montanhas para misturar com mel,
polpas ou suco de frutas. O gelo era estocado em profundos poços construídos pelo povo.
Porém, a grande revolução no mundo dos sorvetes aconteceu com Marco Polo, que trouxe do
Oriente para a Itália, em 1292, o segredo do preparo de sorvetes usando técnicas especiais.
Assim a moda dos sorvetes espalhou-se por toda a Itália, e quando Catarina de Médici casou-se
na França com o futuro Henrique II, entre as novidades trazidas da Itália para o banquete de
casamento, estavam às deliciosas sobremesas geladas, as quais encantaram toda a corte.
Mas, o grande público francês só teve acesso a estas especialidades um século depois quando
Francesco Procópio abriu um café, em Paris, que servia bebidas geladas e sorvete tipo sorbet.
(ABIS, 2013).
Os sorvetes se espalharam por toda a Europa e logo chegaram também aos Estados
Unidos. A primeira produção de sorvete em escala industrial ocorreu nos Estados Unidos, há 40
anos. Hoje, no mundo todo, quem mais fabrica sorvete são os norte-americanos (ABIS, 2013).
No Brasil, o sorvete ficou conhecido em 1834, quando dois comerciantes cariocas
compraram 217 toneladas de gelo, vindas em um navio norte-americano, e começaram a
fabricar sorvetes com frutas brasileiras. Na época, não havia como conservar o sorvete gelado e,
por isso, tinha que ser tomado logo após o seu preparo. Um anúncio avisava a hora exata da
fabricação. O primeiro anúncio apareceu em São Paulo, no dia 4 de janeiro de 1878, contendo a
seguinte mensagem: “SORVETES - Todos os dias às 15 horas, na Rua Direita, nº 44” (ABIS, 2013).
b. Definições
Segundo a Portaria nº 379, de 26 de abril de 1999, da ANVISA, os gelados comestíveis
podem ser classificados em:
a) Sorvetes: são os produtos elaborados basicamente com leite e/ou derivados lácteos e/
ou outras matérias-primas alimentares e nos quais os teores de gordura e ou proteína são total
ou parcialmente de origem não láctea, podendo ser adicionado de outros ingredientes
alimentares.
14
b) Sorvetes de creme: têm todas as especificações do sorvete, mas devem conter no
mínimo 3% de gordura e 2,5% de proteínas;
c) Sorvetes de leite: têm todas as especificações do sorvete, mas devem conter no
mínimo 2,5% de gordura e 2,5% de proteínas;
d) Sherbets: têm todas as especificações do sorvete, mas devem conter no mínimo 1%
de gordura e 1% de proteína;
e) Gelados de frutas ou Sorbets: elaborados com polpas, sucos ou pedaços de frutas e
açúcares, podendo ser adicionado de outros ingredientes alimentares.
f) Gelados: elaborados com açúcares, podendo ou não conter polpas, sucos, pedaços de
frutas e outras matérias primas, podendo ser adicionado de outros ingredientes alimentares.
Além disso, podem ser classificados de acordo com o processo de fabricação e
apresentação como: sorvetes de massa ou cremosos; picolés ou ainda produtos especiais
gelados (sanduíches de sorvete, bolos de sorvete, torta gelada).
c. Consumo no Brasil e em outros países
Mundialmente, o sorvete é um produto de boa aceitação sensorial, já que é versátil e
rico em opções. Esta aceitação se deve ao alto valor nutricional, às características como alta
digestibilidade, sabor doce e textura macia, tornando-o ideal para todas as idades, juntando
assim nutrição e prazer (RIZZO-BENATO, 2004).
O consumo anual brasileiro de sorvete, per capita, ainda é pouco expressivo, quando
comparado aos países nórdicos, por exemplo, mas o país tem potencial para aumentar
significativamente esse mercado (SOUZA et al., 2010).
Em 2008, este mercado movimentou cerca de US$ 1,378 milhões. De acordo com os
dados da ABIS, o consumo per capita em 2008 esteve na faixa de 4,98 litros de sorvete/ano por
habitante, superando a média dos anos anteriores que se situava ao redor de 3,59 a 3,81 litros.
Porém, esses números ainda ficam muito distantes da média per capita de alguns países, como
os EUA com 22,5, Canadá com 17,80, Austrália com 17,80, Itália com 8,20 e França com 5,40
litros de sorvete/ ano por habitante (SOUZA et al., 2010).
Em 2012, houve um crescimento de consumo de sorvete de 76,49% o que corresponde a
1209 milhões de litros/ano (Figura 1). Já em relação ao consumo per capita em litros/ano o
15
crescimento foi de 62,56% (Figura 2). Esses valores corroboram que as expectativas do setor são
animadoras. O Presidente da entidade, Eduardo Weisberg, disse em 2011:
“Nós estamos consumindo, produzindo quase um bilhão de litros e isso
dividido em 10 mil empresas, aproximadamente. Delas, 90% são micro e
pequenas empresas. Aquela empresa de bairro, aquela empresa familiar
(...). Nós temos mercado para todo mundo cada um tem que localizar e
achar o seu nicho” (ABIS, 2013).
Figura 1. Consumo em milhões de litros/ano. Fonte: ABIS, 2013.
16
Figura 2. Consumo per capita em litros/ano. Fonte: ABIS, 2013.
d. Composição
O sorvete é um produto complexo, que contém muitos ingredientes em distintos
estados. É fabricado a partir de uma emulsão estabilizada, também chamada de calda,
pasteurizada, que por meio de um processo de congelamento mantém a coesão; além disso,
sob agitação contínua (batimento) e incorporação de ar (overrun), produz uma substância
cremosa, suave e agradável ao paladar. Esta emulsão é composta de produtos lácteos, água,
gordura, açúcar, estabilizante, emulsificante, corante e aromatizante. Esse produto também é
rico em vitaminas A, B1, B2, B6, C, D, E e K, cálcio, fósforo e outros minerais, sendo considerado
um alimento completo e de alto valor nutricional (SOUZA et al., 2010), quando comparado com
outros alimentos (Tabela 1).
17
Tabela 1. Valores nutricionais do sorvete comparados com outros alimentos.
Alimento
(100g)
Carne de gado
assada
Frango assado
com pele
Arroz cozido
Pão francês
Cachorro
quente
Pão torrado
Ovo frito
Sorvete a base
de água
Sorvete a base
de leite
Calorias
(Kcal)
287,7
Glicídios Proteínas
(g)
(g)
0
25,5
Lipídios
(g)
20,75
Cálcio
(mg)
9,0
Fósforo
(mg)
303,0
Ferro
(mg)
3,2
226,0
0
26,3
13,50
11,0
140,0
1,3
109,7
269,0
283,0
24,4
57,4
0
2,8
9,3
11,0
0,1
0,2
14,7
20,0
22,0
34,0
25,0
107,0
99,0
--1,2
2,4
388,0
216,0
126,3
3,0
57,4
30,0
10,0
3,80
1,50
5,0
17,2
*
42,0
65,0
65,0
130,0
2,67
165,0
1,3
2,67
0,25
186,0
20,0
4,01
8,1
144,0
120,0
0,2
*Valores médios podem variar de acordo com formulação e 100g correspondem a aproximadamente duas bolas de
sorvete. Fonte: ABIS, 2013.
Estruturalmente trata-se de uma espuma na qual as bolhas de ar estão cobertas por
cristais de gelo, glóbulos de gordura individualizados ou parcialmente fundidos (grânulos
gordurosos) e cristais de lactose (LORA et al., 2006). Essa gordura apresenta-se na forma de
emulsão; proteína, estabilizantes e açúcares insolúveis apresentam-se na forma de suspensão
coloidal; e a lactose e sais em forma de dissolução verdadeira. Já a água se encontra no estado
líquido como solvente de sais e açúcares, e na forma sólida como cristais de gelo. (SOUZA et al.,
2010). Assim, um fato importante para os atributos sensoriais do sorvete é a estrutura dos
glóbulos parcialmente fundidos e sua união às bolhas de ar que fornecem ao sorvete uma
firmeza residual depois da fusão dos cristais de gelo (LORA et al., 2006).
Do ponto de vista físico-químico, em geral, o sorvete é constituído basicamente de 10 a
17% de gordura, 8 a 12% de extrato seco desengordurado, 12 a 17% de açúcares ou adoçantes,
0,2 a 0,5% de estabilizantes e emulsificantes e 55 a 65% de água. Cada componente contribui
em aspectos particulares nas características do produto final (QUEIROZ et al., 2009).
A gordura interfere na textura, corpo e diminuição da sensação de frio; as proteínas
melhoram a estrutura, interferindo na emulsificação e batimento; os açúcares, sacarose e
glicose contribuem no aumento de viscosidade, diminuindo, assim, o ponto de congelamento e
18
aumentando o sabor e fixação de compostos aromáticos; os estabilizantes melhoram a
estabilidade da emulsão e o corpo, e ainda, influenciam na velocidade e temperatura de fusão
da mistura; os emulsificantes além de evitar a floculação excessiva, facilitam a incorporação de
ar (overrun); os aromatizantes e corantes atuam na incorporação de sabores e cores (QUEIROZ
et al., 2009).
e. Método de fabricação
A elaboração de sorvete inicia-se com a mistura de ingredientes, previamente pesados e
dosados, de acordo com a formulação. A posterior homogeneização dessa mistura, aliada à
pasteurização, que é obrigatória, traz vários efeitos benéficos na qualidade do produto final:
destruição de micro-organismos patogênicos, destruição uniforme dos glóbulos de gordura, cor
mais brilhante e atraente, maior resistência à oxidação, aumento da viscosidade e facilidade de
batimento e aeração (XAVIER, 2009).
Em seguida, a calda formada sofre um resfriamento rápido, seguindo um período de
maturação sob refrigeração, onde podem ser adicionados flavorizantes, polpas de frutas,
emulsificantes e acidulantes. O batimento aliado ao congelamento é uma das etapas que mais
influem na qualidade do sorvete final. Quanto menor for à temperatura de congelamento,
maior proporção de água se congelará, com maior número de pequenos cristais. O ar
incorporado durante o batimento (overrun) torna o sorvete leve, macio e saboroso (XAVIER,
2009; QUEIROZ et al., 2009).
Após atingir o ponto de consistência esperado, o sorvete é acondicionado em
embalagens definitivas, mediante o enchimento automático ou manual e essa operação deve
ocorrer sem elevação significativa da temperatura do produto. As câmaras de estocagem para
sorvete devem operar entre temperaturas de –30 a –35ºC, com o objetivo de manter a
temperatura do produto final. É importante que não ocorram grandes variações de temperatura.
Já o transporte, deve ser feito em caminhões frigoríficos, com temperaturas inferiores a -18°C, e
de maneira que o aumento da temperatura do sorvete, durante o transporte, não exceda a 4°C
sobre a temperatura de estocagem. Os sorvetes podem ser transportados junto com outros
produtos alimentícios também congelados, desde que estejam devidamente embalados (SENAI,
1999). A Figura 3 demonstra o fluxograma do processo de fabricação do sorvete.
19
Recepção e estocagem da
matéria-prima
Pesagem
Preparo da mistura
Homogeneização
Pasteurização
Maturação
Congelamento
Envase
Estocagem
Transporte
Figura 3. Fluxograma do processo de fabricação do sorvete.
Os riscos próprios à fabricação artesanal e industrial de sorvetes estão relacionados com
os diversos ingredientes utilizados em sua elaboração. Estas matérias-primas, principalmente as
ricas em proteínas, como os ovos e leite, oferecem aos micro-organismos com altas exigências
(entre os quais se encontram a maioria das bactérias patogênicas) a oportunidade para se
multiplicarem rapidamente (XAVIER, 2009).
20
f. Qualidade do sorvete
Segundo Rizzo-Benato, 2004, apesar dos sorvetes passarrem pelo processo de
pasteurização, maturação no frio, congelamento, podem conter micro-organismos patogênicos
e deteriorantes, se não for mantido em condições ideais. Contaminações secundárias por
Staphylococcus aureus, Salmonella spp, entre outros micro-organismos, podem ocorrer por falta
de boas práticas de fabricação.
Fatores durante a venda como a manipulação no local de produção e as condições
sanitárias durante o seu armazenamento congelado, podem alterar a qualidade microbiológica
do sorvete. Além disso, as condições climáticas que prevalecem em países tropicais aumentam a
probabilidade de oscilação de temperatura durante o transporte e distribuição de sorvete
(RIZZO-BENATO, 2004).
O consumidor não associa que o sorvete ingerido em momentos de lazer e descontração
possa apresentar riscos de natureza microbiológica, pois julga que a baixa temperatura assegure
sua inocuidade. Como relatado por diversos estudos, à resistência de micro-organismos ao
congelamento é muito variável e, se houver alguma contaminação durante o processo e os
micro-organismos forem resistentes, podem permanecer viáveis e serem ingeridos pelos
consumidores podendo causar toxinfecções (PINTO et al., 2000).
O controle microbiológico de sorvetes é de fundamental importância já que não passa
por qualquer processo de esterilização após seu preparo final, como acontece com outros
alimentos, desse modo, pode se constituir num veículo de disseminação de micro-organismos
(OLIVEIRA et al., 2012).
Entretanto, não foram relatadas nos últimos anos doenças causadas pela ingestão de
sorvetes elaborados por estabelecimentos industriais e/ou comerciais e sim, por produtos
caseiros, devido a práticas inadequadas de manuseio. Dentre essas práticas, pode-se citar a
utilização de leite cru, creme e ovos contaminados, o emprego inadequado de tratamento
térmico, contaminação através do ambiente ou mesmo por pessoas infectadas (RIZZO-BENATO,
2004).
21
Refrescos
Atualmente, tem-se verificado um aumento na comercialização de refrescos em
estabelecimentos comerciais, como lanchonetes, padarias e restaurantes. Esse aumento devese à praticidade dessas bebidas, que podem ser preparadas de forma rápida e ficam
armazenadas em equipamentos dotados de refrigeração, denominados “refresqueiras”, e ao
preço de mercado bastante inferior aos sucos (PILÓ, 2010).
Entretanto, há uma diferença entre refrescos e sucos, que poucos consumidores
conhecem. O conjunto de bebidas de frutas é conhecido por grande parte dos consumidores
apenas como “suco”. Para eles as informações mais consultadas na embalagem são as datas de
fabricação e de validade, e o os fatores que mais importam na decisão do produto são marca, o
preço e o sabor (FERRAREZI, 2008).
Suco é a bebida não fermentada, não concentrada, e não diluída, destinada ao consumo.
É obtido da fruta madura e sã, ou parte do vegetal de origem, por processamento tecnológico
adequado, submetida a tratamento que assegure a sua apresentação e conservação até o
momento do consumo. É permitida a adição de açúcar, desde que mencionado no rótulo
“adoçado”, porém é proibida a adição de aromas e corantes artificiais. Para mais de uma fruta
processada, a nomenclatura correta é sucos mistos, compostos ou blends (BRASIL, 1994).
Já o refresco ou bebida de fruta ou de vegetal não fermentada, é obtido pela diluição,
em água potável, do suco de fruta, da polpa ou, do extrato vegetal de sua origem, com ou sem
adição de açúcares. Os refrescos são diferentes dos refrigerantes com frutas e contém uma
quantidade de suco maior, porém inferior aos néctares. É permitido adição de açúcar, corantes
e aromatizantes (BRASIL, 1998).
Mercado e consumo de refrescos
O Brasil é o terceiro maior produtor mundial de frutas tropicais e detém uma das
maiores áreas cultiváveis do planeta, além de uma ampla variedade de solos e climas que o
habilitam a explorar praticamente todas as espécies de cultura que agregam valor econômico.
Dentre estas, as frutas de clima tropical têm mercado garantido e elevado valor comercial (DAL
RI, 2006). Para a fruticultura, independente do tipo de bebida de fruta, o crescimento desse
22
mercado pode ser uma alternativa para manter ou ampliar a rentabilidade e a sustentabilidade
econômica do setor. Este segmento pode também ser uma opção para algumas hortaliças,
como o tomate, que também pode ser comercializado em suco (PIRILLO & SABIO, 2009).
O mercado brasileiro de sucos e néctares prontos para beber está em franca expansão,
acompanhando a tendência mundial de consumo de bebidas saudáveis, convenientes e
saborosas. Segundo a Associação Brasileira das Indústrias de Refrigerantes e de Bebidas Não
Alcoólicas (ABIR), em 2008, somente o setor de sucos e néctares de frutas prontos para beber
faturou US$ 1,9 bilhão com a venda de 476 milhões de litros (PIRILLO & SABIO, 2009).
Apesar de tradicionalmente os brasileiros preferirem sucos preparados na hora do
consumo, a urbanização aliada ao ritmo de vida acelerado abre espaço para sucos e néctares de
frutas prontos. Com a globalização da indústria de alimentos, a oferta por sucos de qualidade e
variedades tem expandido visivelmente (PIRILLO & SABIO, 2009).
A Figura 4 demonstra como todas as categorias de bebidas não alcoólicas tiveram bons
resultados, na qual se verifica o crescimento no consumo de cada categoria em 2010 (primeira
coluna) e, ao lado, a média do crescimento nos últimos cinco anos (segunda coluna) (ABIR,
2011).
Figura 4. Crescimento de bebidas não-alcoólicas, onde Still Drink são os refrescos e S&N são os sucos e
néctares . FONTE: ABIR, 2011.
23
Avaliação e critérios microbiológicos de sorvetes e refrescos
A Diretoria Colegiada da Agência Nacional de Vigilância Sanitária considera como uma
necessidade constante de aperfeiçoamento, as ações de controle sanitário na área de alimentos,
visando à proteção à saúde da população e a regulamentação dos padrões microbiológicos para
alimentos. Desse modo, foi publicada a Resolução da Diretoria Colegiada (RDC) No. 12, de 02 de
janeiro de 2001, que dispõe do regulamento técnico sobre padrões microbiológicos para
alimentos e determina a tolerância máxima contaminação de amostra indicativa e de amostra
representativa para cada grupo de alimentos, incluindo sorvetes (Tabela 2) e refrescos (Tabela
3), com o(s) seu(s) micro-organismo(s) específico(s).
Tabela 2. Limites máximos de micro-organismos em sorvete. Fonte: ANVISA - RDC 12/2001.
Micro-organismo
Coliformes a 45°C/g
Tolerância
(amostra indicativa)
5 x 10
n
5
Tolerância
(amostra representativa)
c
m
M
2
10
5 x 10
Estafilococos
Coagulase +/g
5 x 102
5
2
102
5 x 102
Salmonellaspp/25g
Ausência
5
0
Aus.
----
Tabela 3. Limites de micro-organismos em refrescos. Fonte: ANVISA - RDC 12/2001.
Micro-organismo
Coliformes a
35°C/50 mL
Tolerância
(amostra indicativa)
Ausência
n
5
Tolerância
(amostra representativa)
c
m
M
0
Aus.
----
Legenda: m: é o limite que, em um plano de três classes, separa o lote aceitável do produto ou
lote com qualidade intermediária aceitável. M: é o limite que, em plano de duas classes, separa
o produto aceitável do inaceitável. n: é o número de unidades a serem colhidas aleatoriamente
de um mesmo lote e analisadas individualmente. c: é o número máximo aceitável de unidades
de amostras com contagens entre os limites de m e M (plano de três classes).
24
A análise microbiológica é utilizada para se verificar quais e quantos micro-organismos
estão presentes e fundamental para se conhecer as condições de higiene em que o alimento foi
preparado, os riscos que pode oferecer à saúde do consumidor e a vida útil pretendida. Essa
análise é indispensável também, para verificar se os padrões e especificações microbiológicos
para alimentos, nacionais ou internacionais, estão sendo atendidos adequadamente (FRANCO &
LANDGRAF, 1996).
É importante lembrar que no Brasil, o perfil epidemiológico das DTA ainda é pouco
conhecido. Somente alguns estados ou municípios dispõem de estatísticas e dados publicados
sobre os agentes etiológicos mais comuns, alimentos mais frequentemente implicados,
população de maior risco e fatores contribuintes. De acordo com os dados disponíveis de surtos,
apontam-se como agentes mais frequentes os de origem bacteriana e, dentre eles, Salmonella
spp, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Bacillus cereus e Clostridium perfringens
(BRASIL, 2010).
A qualidade higiênica e sanitária de alimentos pode ser avaliada por meio da pesquisa
dos chamados micro-organismos indicadores que, segundo Franco & Landgraf (1996), são
grupos ou espécies, de micro-organismos que, quando presentes em um alimento, podem
fornecer informações sobre: a ocorrência de contaminação de origem fecal, a provável presença
de patógenos ou a deterioração potencial do alimento, além de poderem indicar condições
sanitárias inadequadas durante o processamento, produção ou armazenamento. Os principais
micro-organismos indicadores da qualidade higiênica e sanitária de alimentos são os grupos dos
aeróbios mesófilos e dos coliformes totais e termotolerantes.
a. Grupo dos Aeróbios Mesófilos
As bactérias aeróbias mesófilas compreendem a maioria dos micro-organismos
patogênicos responsáveis por toxinfeções alimentares. Estas podem aparecer tanto em
alimentos perecíveis a temperatura ambiente como em alimentos mantidos sob refrigeração
(SILVA, 2012).
A sua temperatura ótima de crescimento situa-se entre 30ºC e 40ºC, mas o crescimento
é possível a partir de aproximadamente 10º ou 15ºC até 45ºC e poucas conseguem se
desenvolver em temperaturas inferiores a 7º C (SILVA, 2012).
25
A presença de micro-organismos mesófilos em grande número pode ser indicativa de
qualidade higiênica insatisfatória da matéria-prima, processo tecnológico inadequado,
higienização ineficiente ou conservação dos alimentos inadequada, resultando em diminuição
da vida de prateleira dos alimentos (SIQUEIRA, 1995).
b. Grupo dos Coliformes Totais e Termotolerantes
O grupo dos coliformes totais inclui as bactérias na forma de bastonetes Gram-negativos,
não esporogênicos, aeróbios ou anaeróbios facultativos, capazes de fermentar a lactose com
produção de gás, em 24 a 48 horas a 35ºC. O grupo inclui cerca de 20 espécies, dentre as quais
se encontram tanto bactérias originárias do trato gastrointestinal de humanos e outros animais
de sangue quente, como também diversos gêneros e espécies de bactérias entéricas, como
Serratiae Aeromonas, por exemplo. Por essa razão, sua enumeração em água e alimentos é
menos representativa, como indicação de contaminação fecal, do que a enumeração de
coliformes fecais ou de E.coli. Porém, sua presença em alimentos processados é considerada
uma indicação útil de contaminação pós-sanitização (SILVA et al., 1997).
A denominação “coliformes fecais” foi utilizada durante muitos anos para descrever
coliformes que fermentavam a lactose com produção de gás em 24h, a 44,5-45,5ºC. Entretanto
pelo menos três gêneros como a Escherichia coli, Klebsiella e Enterobacter apresentam esta
característica de termotolerância e se diferem no seu habitat. E. coli tem como habitat primário
o intestino humano e de animais e é o melhor indicador de contaminação fecal conhecido até o
momento,já a Klebsiella e Enterobacter podem ser encontrados em outros ambientes, como
vegetais e solo, onde persistem por tempo superior ao das bactérias patogênicas de origem
intestinal. Portanto, não é correta a relação direta da presença de coliformes termotolerantes
em alimentos e água com contaminação de origem fecal, o que levou à necessidade de
modificar, na legislação brasileira, a denominação coliforme fecal para coliformes a 45ºC (SILVA
et al., 2006).
Assim, o Ministério da Saúde, por meio da Resolução nº 12, de 2 de janeiro de 2001, da
Agência Nacional de Vigilância Sanitária adotou a denominação coliformes
a 45ºC,
considerando os padrões “coliformes de origem fecal” e “coliformes termotolerantes” como
equivalentes a coliformes a 45ºC (BRASIL, 2001).
26
c. Estafilococos Coagulase positiva
Os estafilococos são cocos Gram-positivos, com aproximadamente 1 µm de diâmetro e
que tendem a formar agrupamentos em arranjos semelhantes a cachos de uva. O nome deriva
das palavras gregas staphyle e kokkos para designar cachos de uva e grão, respectivamente. No
mínimo 30 espécies de Staphylococcus spp., ocorrem como comensais de pele e membranas
mucosas; algumas podem atuar como patógenos oportunistas, causando infecções piogênicas.
A maioria dos estafilococos é anaeróbia facultativa e catalase positiva. São imóveis, oxidasepositiva e não formam esporos, porém existem duas espécies que são anaeróbias e catalase
negativas. A produção de coagulase está relacionada à patogenicidade. Embora os estafilococos
coagulase negativos sejam poucos virulentos, alguns ocasionalmente causam doença nos
animais e no homem (QUINN et al., 2005).
As espécies de estafilococos são hospedeiros adaptadas, e metade das espécies
conhecidas habita somente humanos ou humanos e outros animais. Um maior número tende a
ser encontrado próximo a aberturas do corpo e superfície da pele, como, por exemplo, nas
narinas, axilas e na área das virilhas. Em locais úmidos, o número por cm 2 pode alcançar 103 a
106 e em hábitat secos, 10 a 10 3 (QUINN et al., 2005).
As duas fontes mais importantes de contaminação para alimentos são fossas nasais,
mãos e braços de manipuladores de alimentos com furúnculos e carbúnculos (JAY, 2005). Atos
como de o manipulador levar a mão à boca ou nariz e de coçar lesões estafilocócicas presentes
na pele do funcionário que trabalha diretamente com o alimento, são formas de transmitir o
micro-organismo (PICOLI et al., 2006).Outro fato importante é a falta de higienização durante o
período de trabalho, já que estes micro-organismos são encontrados de forma natural em 30 a
50% das pessoas (MESQUITA et al., 2006).
Em geral, pode-se esperar a presença de estafilococos, mesmo que em pequenas
quantidades, em quase todos os alimentos de origem animal ou naqueles diretamente
manipulados, a não ser que tenham sido aplicados tratamentos térmicos para a destruição
desses micro-organismos em um grande número de alimentos comerciais (JAY, 2005).
Dos micro-organismos reconhecidos como potenciais causadores de doenças, o principal
envolvido nos surtos provocados por manipulação inadequada é o S.aureus que possui uma
27
ampla distribuição na natureza e capacidade de sobreviver e se multiplicar facilmente nos
alimentos quando encontra as condições adequadas (SILVA, 2012). Mesmo que o aquecimento
do alimento após sua manipulação aconteça para prevenir as toxinfecções, as enterotoxinas dos
estafilococos podem estar presentes, pois são termoestáveis, atingindo o consumidor mesmo
após o processo de pasteurização (BARRETO et al., 2012). Por isso, os cuidados como a
refrigeração devem ser tomados após o aquecimento, caso contrário, o micro-organismo
poderá multiplicar-se e produzir a toxina (CORTEZ et al., 2004).
A contagem de estafilococos coagulase positiva em alimentos pode ser feita com dois
objetivos diferentes, um relacionado com a saúde pública, para confirmar o envolvimento em
surtos de intoxicação alimentar, e outro relacionado com o controle de qualidade higiênicosanitária dos processos de produção de alimentos, condição em que esse micro-organismo
serve como indicador de contaminação pós-processamento ou, das condições de sanificação
das superfícies destinadas ao contato com alimentos (SILVA et al., 1997).
d. Salmonella spp.
Esse micro-organismo pertence à família Enterobacteriaceae. São bactérias anaeróbias
facultativas, oxidase negativa, catalase positiva e os membros deste gênero geralmente são
móveis (QUINN et al., 2005). São pequenos bastonetes Gram-negativos, não esporulados. Estão
amplamente distribuídas na natureza e têm o homem e os animais como seus principais
reservatórios. Doenças alimentares causadas por Salmonella spp. resultam da ingestão de
alimentos contendo número significativo de determinadas linhagens de gênero (JAY, 2005).
A sua temperatura ótima de crescimento é entre 35ºC e 37ºC, no entanto crescem numa
ampla gama de temperaturas (≤54ºC) e exibem também propriedades psicotróficas que se
refletem na sua habilidade de crescimento em alimentos armazenados entre 2 e 4ºC (SILVA,
2012).
O habitat primário de Salmonella spp. é o trato intestinal de animais principalmente,
animais de granja como aves e suínos, seres humanos e ocasionalmente, insetos. Como forma
intestinal, os micro-organismos são excretados nas fezes, das quais podem ser transmitidos por
insetos e por outros organismos vivos, para um grande número de localidades. Dessa forma,
28
Salmonella spp. pode também ser encontrada na água, especialmente em águas poluídas (SILVA,
2012).
Qualidade microbiológica de sorvetes e refrescos
A avaliação da qualidade microbiológica do sorvete é uma prática de extrema relevância
para a manutenção da saúde pública. Existem relatos na literatura científica de vários surtos
relacionados ao consumo de sorvete em países de continentes como a Ásia, América do Norte e
Europa. Pesquisas realizadas por Chug (1996), Dodhia et al. (1998) e Hennessy et al. (1996)
apresentaram dados de surtos de salmonelose na Índia, no Reino Unido e nos Estados Unidos,
respectivamente.
Ainda, Daniels et al. (2002) fizeram um estudo epidemiológico em que houve ocorrência
de surtos em escolas e universidades americanas. Uma pesquisa na Líbia (El Sharef, 2006), em
que se avaliou a qualidade microbiológica de sorvetes comercializados em estabelecimentos de
pequeno e grande porte, apontou alta Contagem Bacteriana Total e presença de patógenos
como Staphylococcus aureus e Salmonella spp. em todas as amostras.
Na China, Zhou et al. (2010), utilizando técnicas de biologia molecular, concluíram que
80% de suas amostras de sorvete apresentaram presença de Bacillus cereus psicrotolerantes,
enquanto na Turquia, Kuplulu & Sarimehmetoglu (2004) encontraram Brucella abortus em 6,25%
de suas amostras de sorvete de baunilha.
No Brasil, algumas pesquisas buscaram avaliar a qualidade microbiológica do sorvete.
Silveira et al. (2009) detectaram a presença de Salmonella spp. em 75% das amostras de sorvete
tipo tapioca produzidos e comercializados na cidade de Fortaleza – Ceará, enquanto em
Londrina, Paraná, Ferrari et al. (2007) observaram que 50% das amostras de uma indústria da
cidade estavam fora dos padrões exigidos por lei quanto a presença de coliformes
termotolerantes.
Oliveira et al. (2012) encontraram altas contagens de Staphylococcus aureus em todas as
amostras, coletadas de supermercados de Maceió, Alagoas. Na cidade de Piracicaba, São Paulo,
29
Rizzo-Benato (2004) avaliou amostras coletadas de uma indústria, as quais apresentaram
contagens de coliformes termotolerantes acima do limite estabelecido pela ANVISA.
Com relação à qualidade microbiológica do refresco, não existem muitas pesquisas que
buscaram avaliar tal parâmetro. Piló (2010) fez uma caracterização da microbiota de refrescos
coletados em lanchonetes de Belo Horizonte, Minas Gerais, e concluiu que as amostras tinham
uma qualidade higiênico-sanitária insatisfatória, já que houve altas contagens de aeróbios
mesófilos, coliformes totais e termotolerantes, assim como estafilococos produtores de
enterotoxina estafilocócica A.
Por outro lado, existe uma quantidade maior de dados relativos à qualidade de
diferentes tipos de sucos. Dantas (2012) relata a presença de Salmonella spp. em amostras de
polpa de frutas comercializadas em Campina Grande, Paraíba. Ruschel (2001), observou
amostras de suco de laranja contaminadas por coliformes, Salmonella spp. e grande quantidade
de bolores e leveduras, sendo que o produto era comercializado em vias públicas de Porto
Alegre. Em Ipatinga, Souza (2009) avaliou sucos de manga e constatou que 75% das amostras se
apresentaram com coliformes termotolerantes, ao contrário de Pinheiro (2006), que afirmou
que todas as amostras analisadas, em Fortaleza, estavam dentro dos padrões estabelecidos pela
legislação.
Malagueta Júnior et al. (2012) avaliaram as condições microbiológicas das mãos dos
manipuladores de alimentos e utensílios de um mercado do Ceará, obtendo altas contagens de
aeróbios mesófilos e chegando a conclusão de que a falta de informação e treinamento são
pontos de extrema importância na manutenção da qualidade dos alimentos comercializados em
ambientes coletivos.
Cardoso et al. (2005), ao avaliarem as unidades de alimentação nos campi da
Universidade Federal da Bahia, detectaram situações inadequadas como presença de roedores
e insetos, ausência de controle de qualidade da água, além de deficiências na higiene pessoal
dos manipuladores.
30
3. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
ABIR. Associação Brasileira das Indústrias de Refrigerantes e Bebidas Não Alcoolicas. BNA Brasil
Relatório anual. Consumo de todas as bebidas comerciais de 2005 a 2010. Canadean Liquid
Inteligence, 2011.
ABIS. Associação Brasileira das Indústrias de Sorvete. Estatística, Histórico. Disponível em:
http://www.abis.com.br/. Acesso em: 25 de maio 2013.
ALVES, M. G.; UENO, M. Restaurantes self-service: segurança e qualidade sanitária dos
alimentos servidos. Rev. Nutr., Campinas, 23 (4):573-580, jul./ago., 2010.
BARRETO, N. S. E., SANTOS, G. C. F., CREPALDI, A. L., SANTOS, R. A. R.Qualidade microbiológica
e suscetibilidade antimicrobiana do leite in natura comercializado em Cruz das Almas, Bahia.
Semina: Ciências Agrárias, Londrina, v. 33, n. 6, p. 2315-2326, nov./dez, 2012.
BENEVIDES, C. M. J.; LOVATTI, R. C. C. Segurança alimentar em estabelecimentos
processadores de alimentos.Hig. Alim., v. 18, n. 125, p. 24-27, 2004.
BRASIL, 1994. Ministério Da Agricultura, Pecuária E Abastecimento – MAPA. Instrução
Normativa Nº 12, de 4 de setembro de 2003. Aprova o Regulamento Técnico para Fixação dos
Padrões de Identidade e Qualidade Gerais para Suco Tropical; os Padrões de Identidade e
Qualidade dos Sucos Tropicais de Abacaxi, Acerola, Cajá, Caju, Goiaba, Graviola, Mamão,
Manga, Mangaba, Maracujá e Pitanga; e os Padrões de Identidade e Qualidade dos Néctares
de Abacaxi, Acerola, Cajá, Caju, Goiaba, Graviola, Mamão, Manga, Maracujá, Pêssego e
Pitanga.
Disponível
em:
http://www.aladi.org/nsfaladi/normasTecnicas.nsf/09267198f1324b64032574960062343c/420
7980b27b39cf903257a0d0045429a/$FILE/IN%20N%C2%BA%2012-2003.pdf. Acesso em 14 jun
2013.
BRASIL, 1998. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Portaria n º 544, de 16 de
novembro de 1998. Aprova os regulamentos técnicos para fixação dos padrões de identidade
e qualidade para refresco, refrigerante, preparado ou concentrado líquido para refresco ou
refrigerante, preparado sólido para refresco, xarope e chá pronto para consumo. Disponível
em: <http://www.engetecno.com.br/port/legislacao/beb_rtfiq_refresco.htm>. Acesso: 24 maio
2013.
BRASIL, 1999. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Portaria n º 379, de 26 de abril de 1999.
Regulamento técnico referente a gelados comestíveis, preparados, pós para o preparo e bases
para gelados comestíveis. Diário Oficial da União, Brasília, DF, 29 abr 1999. Disponível em:
http://portal.anvisa.gov.br/wps/wcm/connect/e824d8804a9bdce99854dc4600696f00/Portaria
_n_379_de_26_de_abril_de_1999.pdf?MOD=AJPERES. Acesso: 24 maio 2013.
31
BRASIL, 2001. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Agência Nacional de
Vigilância Sanitária. Resolução RDC nº 12, de 2 de janeiro de 2001. Dispõe sobre Regulamento
Técnico
sobre
Padrões
Microbiológicos
para
Alimentos.
Disponível
em:http://portal.anvisa.gov.br/wps/wcm/connect/a47bab8047458b909541d53fbc4c6735/RDC
_12_2001.pdf?MOD=AJPERES. Acesso em: 14 jun 2013.
BRASIL, 2002. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Agência Nacional de
Vigilância Sanitária. Resolução RDC nº 275 de 21 de outubro de 2002. Aprova o Regulamento
Técnico de Procedimentos Operacionais Padronizados aplicados aos Estabelecimentos
Produtores/ Industrializadores de Alimentos e a Lista de Verificação das Boas Práticas de
Fabricação em Estabelecimentos Produtores/Industrializadores de Alimentos. Disponível em:
http://www.colombo.pr.gov.br/downloads/saude/vig_sanitaria/resolucao_rdc_n_275_de_21_d
e_outubro_de_2002.pdf. Acesso em: 1 maio 2013.
BRASIL, 2005. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Agência Nacional de
Vigilância Sanitária. Resolução RDC nº 266 de 22 de setembro de 2005. Aprova o Regulamento
Técnico para gelados comestíveis e preparados para gelados comestíveis. Disponível em:
http://www.cabreuva.sp.gov.br/pdf/VISA/Alimentos/RDC%20266%20%20Produtos%20Gelados.pdf. Acesso em: 24 maio 2013.
BRASIL, 2006. Presidência da República. Casa civil. Subchefia para Assuntos Jurídicos. Lei nº11.
346 de 15 de setembro de 2006 cria o Sistema Nacional de Segurança Alimentar e Nutricional SISAN com a finalidade de assegurar o direito humano à alimentação adequada e dá outras
providências.
Disponível
em:
http://www.planalto.gov.br/ccivil_03/_ato20042006/2006/lei/l11346.htm Acesso em: 18 jul 2013.
BRASIL, 2009. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde - Análise
Epidemiológica dos Surtos de Doenças Transmitidas por Alimentos no Brasil, 1999 – 2009.
Disponível
em:
<http://portal.saude.gov.br/portal/arquivos/pdf/analise_ep_surtos_dta_brasil_2009.pdf>.
Acesso em: 18 jun 2013.
BRASIL, 2010. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde - SVS. Manual
integrado de prevenção e controle de doenças transmitidas por alimentos. Disponível
em:<http://portal.saude.gov.br/portal/arquivos/pdf/manual_dta.pdf>. Acesso em: 18 jun
2013.
BRASIL, 2013. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, 2013. Codex Alimentarium.
Disponível em: <http://www.agricultura.gov.br/internacional/negociacoes/multilaterais/codexalimentarius> .Acesso em: 15 maio 2013.
32
CARDOSO, R. C. V.;SOUZA, E. V. A.; SANTOS, P. Q. Unidades de alimentação e nutrição no campi
da Universidade Federal da Bahia: um estudo sob a perspectiva do alimento seguro.Rev. Nutr.,
Campinas, 18(5):669-680, set./out., 2005.
CARRELHAS, H.M. Código de Boas Práticas de Higiene e Segurança Alimentar – Aplicação dos
Princípios de HACCP para a Hotelaria e Restauração, APHORT – Associação Portuguesa de
Hotelaria, Restauração e Turismo; Porto, 2008.
CDC - Centers for Disease Control and Prevention. Preliminary FoodNet data on the incidence
of infection with pathogens transmitted commonly through food – 10 states.Morbidity and
Mortality Weekly Report, 59(14): 418-422,2010.
CORTEZ, A. L. L., CARVALHO, A. C. F. B., AMARAL, L. A., SALOTTI, B. M., VIDAL-MARTINS, A.
M. C. Coliformes fecias, estafilococos coagulase positiva (ECP), Salmonella spp. e
Campylobacter spp. em linguiça frescal.Alim.Nutr.,Araraquara, v. 15, n. 3, p. 215-220, 2004.
CHUG, K., Salmonella outbreak from ice cream. Indian Pediatrics, 33, pp. 976–977,1996.
DAL RI, E. S. Avaliação do processo produtivo e da qualidade de polpas de frutas
comercializadas em Boa Vista/PR. Dissertação apresentada ao Curso de Mestrado em Recursos
Naturais do Programa de Pós-graduação em Recursos Naturais – PRONAT da Universidade
Federal de Roraima como pré-requisito para obtenção do título de Mestre em Recursos
Naturais, com área de concentração em Bioprospecção. Boa Vista, 2006.
DANTAS, R. L., ROCHA, A. P. T., ARÁUJO, A. S., RODRIGUES, M. S. A., MARANHÃO, T. K. L.
Qualidade Microbiológica de Polpa de Frutas Comercializadas na Cidade de Campina Grande,
PB. Revista Brasileira de Produtos Agroindustriais, Campina Grande, v.14, n.2, p.125-130, 2012.
DODHIA, H. et al., A birthday party, home-made ice cream, and an outbreak of Salmonella
enteritidis phage type 6 infection. Communicable Disease and Public Health, 1, pp. 31–34,
1998.
DANIELS, N.A. et al. Foodborne disease outbreaks in United States schools.Pediatrics Infectious
Disease Journal, 21 (2002), pp. 623–628., 2002.
EL-SHAREF, N., K. S. et al. Bacteriological quality of ice cream in Tripoli - Libya. Food
Control17(8): 637-641, 2006.
FRANCO, B.D.G.M.; LANDGRAF, M. Microbiologia de alimentos. São Paulo: Atheneu, 182p, 1996.
FERRARI, R. G, WINKLER, S. M., OLIVEIRA, T. C. R. M. Avaliação microbiológica de alimentos
isentos de registro no Ministério da Saúde. Semina: Ciências Agrárias, Londrina, v.28, n.2,
p.241-250, abr./jun.2007.
33
FERRAREZI, A. C.; Interpretação do consumidor, avaliação da intenção de compra e das
características físico-químicas do néctar e do suco de laranja pronto para beber. Dissertação
de mestrado, Faculdade de Ciências Farmacêuticas da Universidade Estadual Paulista “Júlio de
Mesquita Filho”, Araraquara - SP, 2008.
GRANADA, G. G., MENDONÇA, C. R. B., PORTO, C., ROSA, F., SILVA, E., SILVA, W. P., KOETZ, P. R.,
ZAMBIAZI, R. C. Perfil higiêncio-sanitário de quindins comercializados em Pelotas –RS.Alim.
Nutr., Araraquara, v. 14, n.1, p. 57-61, 2003.
HOGG, T., CALDEIRA, M., MOREIRA, R. e TEIXEIRA, P.Indústria e Segurança Alimentar.
Federação das Indústrias Portuguesas Agro-Alimentares. Portugal. 2004.
HENNESSY, T. W. et al. A national outbreak of Salmonella enteritidis infections from ice cream.
New England Journal of Medicine, 334, pp. 1281-1286, 1996.
JAY, J. M. Microbiologia de alimentos. 6. ed.Porto Alegre: Artmed,2005.
KUPLULU, O. & SARIMEHMETOGLU, B. Isolation and identification of Brucella spp. in ice
cream.Food Control 15(7): 511-514, 2004.
LORA, S. C. P.; PRUDÊNCIO, E. S.; BENEDET, H. D. Avaliação sensorial de sorvetes elaborados
com leite de cabra. Semina: Ciências Agrárias, Londrina, v 27, n2, p. 221-230, abri/jun, 2006.
MALAGUETA JUNIOR, SILVA, M. E. T., SOUZA, G. C. Avaliação Higiênico-Sanitário das Mãos de
Manipuladores, Equipamentos e Utensílios no Mercado da carne de Limoeiro do Norte-CE. VII
CONNEPI - Congresso Norte Nordeste de Pesquisa e Inovação, Cien. Agrarias, Cen Tecnol. Alim.,
2012.
MESQUITA, M. O., DANIEL, A. P., SACCOL, A. L. F., MILANI, L. I. G., FRIES, L. L. M. Qualidade
microbiológica no processamento do frango assado em unidade de alimentação e nutrição.
Ciênc. Tecnol. Aliment., Campinas, 26(1): 198-203, jan.-mar, 2006.
OLIVEIRA, E. T., BATISTA, P. J. S., OLIVEIRA, E. G., SILVA, I. T. F. S., FROEHLICH, A. Avaliação
Microbiológica de Sorvetes Comercializados nos Principais Supermercados de Maceió-AL. VII
CONNEPI- Congresso Norte Nordeste de Pesquisa e Inovação, Palmas, Tocantins, 2012.
OPAS - Organização Pan-Americana da Saúde. Higiene dos Alimentos – Textos Básicos; Agência
Nacional de Vigilância Sanitária; Food and Agriculture Organization of the United Nations. –
Brasília: Organização Pan-Americana da Saúde, 64 p.: Il, 2006.
PICOLI, S. U., BESSA, M. C., CASTAGNA, S. M. F.,GOTTARDI, C. P. T., SCHMIDT, V., CARDOSO,
M.Quantificação de coliformes, Staphylococcus aureus e mesófilos presentes em diferentes
etapas da produção de queijo frescal de leite de cabra em laticínios.Ciênc. Tecnol. Aliment.,
Campinas, 26(1): 64-69, jan.-mar, 2006.
34
PILÓ, F. B. Caracterização microbiológica e físico-química de refrescos comercializados em Belo
Horizonte, Minas Gerais. Dissertação mestrado- Universidade Federal de Minas Gerais, 2010.
PINHEIRO, A. M; FERNANDES, A. G.; FAI, A. E. C.; PRADO, G. M.; SOUSA, P. H. M.; MAIA, G. A.
Avaliação química, físico-química e microbiológica de sucos de frutas integrais: abacaxi, caju e
maracujá. Ciênc. Tecnol. Aliment., Campinas, 26(1): 98-103, jan.-mar, 2006.
PIRILLO, C. P., SABIO, R. P. 100 % suco, nem tudo é suco nas bebidas de frutas. Hortifuti, Brasil,
2009.
PINTO, M.F.; PONSANO, E.H.G.; DELBEM, A.C.B. et al. Condição higiênico-sanitária de sorvetes
fabricados por indústrias artesanais no município de Araçatuba – S.P.Higiene Alimentar, v.14,
n.72, p.50-52, 2000.
QUEIROZ, H. G. S.; SAMPAIO NETA, N. A.; PINTO, R. S.; RODRIGUES, M. C. P.; COSTA, J. M. C.
Avaliação da qualidade físico-química e microbiológica de sorvetes do tipo tapioca. Centro de
Ciências Agrárias - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, CE. Revista Ciência Agronômica, v.
40, n. 1, p. 60-65, jan-mar, 2009.
QUINN, P. J., MARKEY, B. K., CARTER, M. E., DONELLY, W. J., LEONRD, F. C. Microbiologia
veterinária e doenças infecciosas. Porto Alegre, Artmed, 2005.
RIZZO-BENATO, R. T. Qualidade microbiológica do leite e do sorvete de massa de uma
indústria de pequeno porte do município de Piracicaba –SP. Dissertação mestrado- Escola
Superior de Agricultura Luiz de Queiros, 62 p. Il, 2004.
RUSCHEL, C.K.; CARVALHO, H.H.; SOUZA, R.B.; TONDO, E.C. Qualidade Microbiológica e FísicoQuímica de sucos de laranja comerciados nas vias públicas de Porto Alegre/RS. Rev. Ciência e
Tecnologia de Alimentos, Campinas, v.21, p, 94-97, jan-abr, 2001.
SANTOS, M. O. B., RANGEL, V. P., AZEREDO, D. P. Adequação de restaurantes comerciais às
Boas Práticas. Higiene Alimentar — Vol. 24 — nº 190/191 nov./dez., 2010.
SENAI - SERVIÇO NACIONAL DE APRENDIZAGEM INDUSTRIAL. Guia de elaboração do plano
APPCC; geral. Série Qualidade e Segurança Alimentar. Projeto APPCC. Convênio CNI / SENAI
/SEBRAE. Brasília, SENAI / DN, (a). 317 p, 1999.
SILVA, C. S. A. Avaliação Microbiológica de Enchidos de Ovino e Caprino. Dissertação
apresentada à Escola Superior Agrária de Bragança para obtenção do Grau de Mestre em
Qualidade e Segurança Alimentar, Bragança, Portugal, 2012.
35
SILVA, M. P; CAVALLI, D. R., OLIVEIRA, T.C. R. M. Avaliação do Padrão Coliformes a 45ºC e
comparação da eficiência das técnicas dos tubos múltiplos e petrifilm EC na detecção de
coliformes totais e Escherichia coli em alimentos.Ciênc. Tecnol. Aliment., Campinas, 26(2): 352359, abr.-jun. 2006.
SILVA, N., JUNQUEIRA, V. C. A., SILVEIRA, N. F. A. S. Manual de métodos de análise
microbiológica de alimentos. São Paulo Livraria Varela, 1997.
SILVEIRA, H. G., QUEIROZ, N. A. S. N.,PINTO, R. S., RODRIGUES, M. C. P., COSTA, J. M. Avaliação
da qualidade físico-química e microbiológica de sorvetes do tipo tapioca1 Revista Ciência
Agronômica, v. 40, n. 1, p. 60-65, jan-mar, Centro de Ciências Agrárias - Universidade Federal do
Ceará, Fortaleza, CE, 2009.
SIQUEIRA, R. S. Manual de microbiologia de alimentos. EMBRAPA. Centro Nacional de Pesquisa
de Tecnologia Agro-industrial de Alimentos; Rio de Janeiro, 1995.
SOUZA, A. P. F.; MARTINS, C. M.; BADARÓ, A. C. L. Análise das características microbiológicas
do suco de manga comercializado em Ipatinga-M, em relação aos diferentes tipos de
embalagens. Nutrir Gerais – Revista Digital de Nutrição, Ipatinga, v. 3, n. 4, p. 299-311, fev./jul.
2009.
SOUZA, J. C. B.; COSTA, M. R.; DE RENSIS, C. M. V. B.; SIVIERI, K. Sorvete: composição,
processamento e viabilidade da adição de probiótico. Alim. Nutr., Araraquara v.21, n.1, p. 155165, jan./mar, 2010.
SOUZA, L. H. L. A manipulação inadequada dos alimentos: fator de contaminação. Rev. Higiene
Alimentar, São Paulo, v.20, n. 146, p. 32-39, set. 2006.
XAVIER, L. P. S. Processamento de sorvetes. Trabalho acadêmico apresentado ao Curso de
Bacharelado em Química de Alimentos da Universidade Federal de Pelotas como requisito
parcial da disciplina de Seminários em Alimentos, 2009.
ZHOU, G. et al. Occurrence of psychrotolerant Bacillus cereus group strains in ice creams.
International Journal of Food Microbiology 137, pp. 143-146, 2010.
36
4. JUSTIFICATIVA
Considerando o exposto e a importância destes produtos na alimentação humana
cotidiana, torna-se fundamental a avaliação da sua qualidade final e dos ambientes onde e
como são comercializados. Dentre os principais pontos de venda podem-se destacar os
ambientes universitários, onde a demanda por esse tipo de produto é, em geral, muito alta.
Assim justifica-se plenamente a realização dessa pesquisa que pretende avaliar a
situação existente, em termos de segurança alimentar, desses produtos nas lanchonetes
instaladas no Campus da Universidade de Brasília (UnB) e contribuir com dados que possam
servir de base para uma implementação futura, de BPF e BPH, já que são escassas as
informações sobre o modo de funcionamento dessas lanchonetes.
37
5. OBJETIVOS
OBJETIVO GERAL

Avaliar a qualidade das condições higiênicas e sanitárias na comercialização de sorvetes
e refrescos em lanchonetes do Campus Darcy Ribeiro da Universidade de Brasília.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Avaliar a presença de micro-organismos indicadores da qualidade higiênica e sanitária
em amostras de sorvetes e refrescos.

Avaliar a presença de micro-organismos estafilococos coagulase positiva e Salmonella
spp. em amostras de sorvetes e refrescos.

Verificar os principais pontos de incorporação de micro-organismos em equipamentos e
utensílios utilizados no armazenamento e comercialização de sorvetes.

Avaliar a qualidade microbiológica da água utilizada pelos estabelecimentos do Campus.
38
6. MATERIAIS E MÉTODOS
Coleta e Tratamento das amostras
Foram coletadas amostras de sorvetes (n=10), de refrescos (n=10), de superfícies de
equipamentos como maçanetas e tampas de vidro dos freezers, de utensílios como conchas e
água do recipiente para acondicionamentos destas (n=16), dos estabelecimentos que
comercializam esses produtos; ainda, foram coletadas amostras da água da rede de
abastecimento (n=2). Para os produtos alimentícios, os sabores foram escolhidos
aleatoriamente. Os estabelecimentos utilizados para a pesquisa estão localizados no Instituto
Central de Ciências (ICC) Sul e Norte, do Campus Darcy Ribeiro, da Universidade de Brasília- UnB.
As amostras de sorvetes e refrescos foram coletadas em frascos estéreis e para as
coletas de superfície, utilizou-se swabs estéreis e moldes delimitadores de: 50 cm2 para interior
e exterior da tampa do freezer e de 3 cm2 para o cabo das conchas de sorvete e para a área total
da superfície da maçaneta do freezer. Os swabs foram acondicionados em tubos contendo 10
mL de solução salina a 0,85%. Para as amostras de água do recipiente, foram coletados 10 mL e
para as amostras de água de abastecimento, observaram-se os procedimentos padrões para
coleta. Todas as amostras foram mantidas e transportadas refrigeradas em caixas isotérmicas,
para o Laboratório de Análise de Leite e Derivados, da Faculdade de Agronomia e Medicina
Veterinária, da UnB.
Análises Microbiológicas
Para a realização das análises microbiológicas foram realizadas diluições seriadas
decimais até 10-2 para as amostras de refrescos, conchas, maçanetas e tampas dos freezers, de
10-4 para as amostras de sorvete e de água do recipiente. As amostras de sorvetes foram
submetidas às análises para enumeração de coliformes totais (CT) e termotolerantes (CTt),
Estafilococos coagulase positiva (ECP) e Salmonella spp., já os refrescos se diferem na
enumeração de ECP pois não foram submetidos a essa enumeração, sendo os resultados
expressos em Unidades Formadoras de Colônias (UFC/mL/g/cm2) ou (NMP/ml/g/cm2). Para as
39
amostras de equipamentos e utensílios realizou-se pesquisa de aeróbios mesófilos (AM), CT, CTt
e ECP. As amostras de água de abastecimento foram analisadas para contagem de CT.
Contagem de Aeróbios Mesófilos (AM)
A contagem de AM foi realizada de acordo com o preconizado pelo American Public
Heath Association (APHA, 1992), por meio da técnica pour plate. Para isso, foi semeado 1,0 mL
de duas diluições, escolhidas aleatoriamente, em placas de Petri estéreis, em duplicata. Em
seguida, acrescentou-se 15 a 20 mL de Ágar para Contagem Padrão (PCA), mantido líquido a
45ºC em banho-maria. As placas foram homogeneizadas e após a solidificação, foram incubadas
por 48 horas a 35ºC, em estufa bacteriológica. Posteriormente, foram selecionadas para
contagem, as placas com contagens entre 30 - 300 colônias. Os resultados foram expressos em
Unidades Formadoras de Colônias (UFC/cm2).
Enumeração de Coliformes (CT) e Termotolerantes (CTt)
As determinações de CT e CTt, foram realizadas usando a técnica dos tubos múltiplos,
em triplicata. Inicialmente, foi inoculado 1,0 mL em três séries de três tubos, utilizando as
diluições 10-1, 10-2 e 10-3 (salvo as amostras de sorvete e da água do recipiente para conchas,
nas quais se utilizou as diluições 10-2, 10-3 e 10-4), sendo que cada tubo continha 9,0 mL de Caldo
Bile Verde Brilhante 2% Lactose (CBVBL) com tubos de Durhan invertidos. Após incubação a
35°C ±1 por 24 a 48 horas, foi realizada a leitura dos tubos positivos (turvação do meio e
presença de gás nos tubos de Durhan). Os resultados obtidos foram representados
numericamente segundo a tabela de Número Mais Provável (NMP/mL/g ou cm2), conforme
Anexo III da Instrução Normativa 62/2003, do Ministério da Agricultura (BRASIL, 2003; FERREIRA,
2007).
A partir de cada um dos tubos positivos de CT, foram semeadas alíquotas de 0,3 mL, em
tubos contendo caldo EC e caldo Triptona. Ambos foram incubados a 44,5°C (± 0,5°C), por 24 48 horas em banho-maria com agitação. Consideraram-se como positivas, as amostras que
apresentaram presença de gás no caldo EC e de indol no caldo Triptona, a partir do
aparecimento de coloração vermelho-escura após adição de reativo de Kovacs (BRASIL, 2003).
40
Os resultados obtidos foram representados numericamente segundo a tabela de Número Mais
Provável (NMP/mL/g ou cm2), conforme Anexo III da Instrução Normativa 62/2003, do
Ministério da Agricultura (BRASIL, 2003; FERREIRA, 2007).
Pesquisa de Estafilococos Coagulase-Positiva (ECP)
A contagem de ECP foi realizada por spread plate usando alça de Drigalski. Inoculou-se
0,1 mL de duas diluições, selecionadas aleatoriamente, em Ágar Baird-Parker, em duplicata, e
incubou-se a 35°C/ 48 h. Em seguida, foi realizada a contagem do número de colônias que
apresentavam características típicas, ou seja, colônias negras, circulares, brilhantes, pequenas,
lisas, convexas, com bordas perfeitas e rodeadas por uma zona opaca e halo transparente. O
número de colônias contadas foi multiplicado pelo fator 10 e pela diluição correspondente. As
colônias características foram submetidas aos testes de coloração de Gram, catalase e
coagulase positivas (SILVA et al., 2007). As placas que não apresentaram colônias típicas não
foram submetidas a tais testes. Os resultados foram expressos em Unidades Formadoras de
Colônias (UFC/mL/g/cm2).
Pesquisa de Salmonella spp.
Para a pesquisa de Salmonella spp, inicialmente realizou-se o pré-enriquecimento,
homogeneizando-se 5,0 mL de cada amostra em 45 mL de água peptonada 0,1% com incubação
à 35ºC/24 h. Em seguida, alíquotas de 1,0 mL e 0,1 mL foram inoculadas em 10 mL de caldo
Tetrationato (TT) e caldo Rappaport (RV), respectivamente, com incubação à 35°C/24 h (TT) e
42°C/24 h (RV). Posteriormente, as amostras foram estriadas nos meios seletivos Ágar Xilose
Lisina Desoxicolato (XLD) no qual, as colônias típicas aparecem róseas com ou sem o halo preto,
e em Ágar Manitol Lisina Cristal Violeta Verde Brilhante (MLCB), em que as colônias típicas
aparecem com ou sem, centro negro. A incubação foi realizada a 35°C/24 h. Em caso de
positividade, seriam realizadas as análises bioquímicas e sorológicas, conforme preconizado
(BRASIL, 2003). Os resultados foram expressos como presença ou ausência de Salmonella spp.
em 5g/mL.
41
7. RESULTADOS E DISCUSSÃO
As frequências dos micro-organismos encontrados nas amostras de sorvete e refresco
estão contidas na tabela 4 e os resultados obtidos das análises microbiológicas desses produtos
estão contidos na Tabela 5. Já as frequências dos micro-organismos presentes em amostras de
equipamentos e utensílios estão contidas na tabela 6 e os resultados das análises
microbiológicas dessas amostras estão na Tabela 7.
Todas as amostras de sorvetes e refrescos apresentaram ausência de Salmonella spp.,
demonstrando que em relação a esse patógeno, os produtos apresentaram-se seguros.
Resultados semelhantes foram encontrados em pesquisa realizada por Rizzo-Benato (2004),
analisando amostras de sorvete fabricado em pequenas empresas de Piracicaba, São Paulo.
Por outro lado, Silveira et al., (2009) detectaram 75% de amostras de sorvete do tipo
tapioca, de diferentes fábricas no Ceará, com presença de Salmonella ssp. Mesma frequência
foi encontrada por Hoffmann et al., (2000) que constataram a presença de Salmonella spp. em
75 % de amostras de sorvetes processados artesanalmente, em São José do Rio Preto- SP. Em
ambas as pesquisas, os autores afirmam que tais resultados são consequência de má
higienização no processo de fabricação.
Em relação aos ECP, observou-se desenvolvimento de colônias típicas em 20% das
amostras de sorvete provenientes de lanchonetes localizadas no ICC Norte, em contagens
abaixo do valor estabelecido pela ANVISA, que é de 5x102 UFC/g. Entretanto, mesmo essas
contagens sendo consideradas baixas devem ser avaliadas com cuidado, porque, se esses microorganismos encontrarem condições para a sua multiplicação, podem representar risco à saúde
dos consumidores já que a principal espécie patogênica, Staphylococcus aureus, pode estar
presente.
Armondes et al. (2003) observaram presença de S. aureus em 10% das amostras de
sorvete colhidas em dez fábricas com produção artesanal em Goiânia, Goiás. Já, Silveira et al
(2009) constataram que 100% das marcas de sorvetes analisadas em Fortaleza, apresentaram
contagens de ECP acima do padrão estabelecido.
A ausência de estafilococos coagulase positiva nos gelados comestíveis industrializados
pode ser explicada pelo fato de o processamento desses alimentos não necessitar da
42
manipulação direta do homem, principal fonte de contaminação. Quando se observa
contaminação por esses micro-organismos, as causas mais prováveis são devidas à manipulação
inadequada, contaminação excessiva da matéria prima, tratamento inadequado ou por
equipamentos e utensílios mal higienizados.
Apesar da RDC º12/2001 não estabelecer limites para a contagem de CT nos produtos
pesquisados, verificou-se a presença desses micro-organismos em 100% das amostras de
sorvete analisadas, sendo que a média das contagens foi de 5,3 x 104 NMP/g nas amostras
coletadas no ICC Sul e, de 3,6 x 103NMP/g nas coletadas no ICC Norte (Tabelas 4 e 6). Altas
contagens de CT podem indicar falhas de higiene pessoal dos manipuladores, ambientes
insalubres ou problemas na fabricação do sorvete como matéria-prima de baixa qualidade e
tratamento térmico ineficiente, interferindo na vida de prateleira e representando riscos ao
consumidor.
Na enumeração de CTt observou-se que 60 % das amostras estavam acima dos padrões
estabelecidos, constatando-se diferença entre as médias obtidas nas análises das amostras
coletadas no ICC Sul em relação às coletadas no ICC Norte, que foram de 5,3 x 103 NMP/g e 72
NMP/g, respectivamente (Tabelas 4 e 6). Esse resultado pode indicar que a lanchonete
localizada no ICC Norte adota medidas de higienização e armazenamento, mais adequadas.
Altas contagens de CTt em alimentos podem indicar a presença de enteropatógenos, como
Escherichia coli e, possível contaminação de origem fecal.
Resultados semelhantes também foram encontrados por outros autores como Richards
et al., (2002), que constataram que 56% das amostras de sorvetes artesanais estavam
contaminadas por CTt, assim como Gomes et al. (2006), que ao analisarem amostras de
sorvetes fabricados e comercializados em Muriaé, Minas Gerais, observaram a presença de CT e
CTt em 100% e 50% das amostras, respectivamente. Da mesma forma, Pinto et al (2000) após
avaliar amostras de sorvete industrializado em Araçatuba, São Paulo, verificaram presença de
CT em 83,3% e de CTt em 50%.
Consideramos importante ressaltar que muitas pessoas acreditam que o fato dos
sorvetes serem conservados a temperaturas muito baixas, as bactérias patogênicas não irão se
43
desenvolver. Porém, isso não é verdade já que estes micro-organismos podem permanecer
viáveis por longos períodos e serem veiculados pelo produto.
Com relação às amostras de refrescos, observou-se que uma amostra (10%) apresentou
contagem de 62 NMP/g/mL para CT e de 6,2 NMP/g/mL para CTt, podendo ser considerada
imprópria para o consumo, por estar em desacordo com o limite estabelecido pela RDC n°
12/2001, que é de ausência. Essa amostra era proveniente de lanchonete localizada no ICC Sul e
a contaminação pode ser devida à higienização inadequada da “refresqueira”, que não foi
objeto de avaliação dessa pesquisa, tendo em vista a impossibilidade de amostragem por estar
com seu volume total no período de coleta.
Estudos sobre a qualidade microbiológica de refrescos, não foram encontradas na
literatura consultada. Em pesquisas análogas, analisando amostras de sucos, destaca-se a de
Pinheiro et al., (2006) que não observaram contaminação por CT ou CTt em amostras de sucos
integrais de diferentes sabores, adquiridas em mercados da cidade de Fortaleza, Ceará.
Tabela 4. Frequências das amostras de sorvetes e refrescos (n=20) contaminadas por estafilococos
coagulase positivos (ECP), coliformes totais (CT), coliformes termotolerantes (CTt) e Salmonella spp.,
coletadas em lanchonetes do Campus Darcy Ribeiro, UnB.
Amostras
ECP
CT
CTt
Salmonella
Sorvetes (n=10)
0% (0/0)
100% (10/10)
50% (5/10)
0% (0/10)
Refrescos (n=10)
--
10% (1/10)
10% (1/10)
0% (0/10)
Legenda: CT=Coliformes Totais; CTt=Coliformes Termotolerantes; ECP=Estafilococos Coagulase Positivo
44
Tabela 5. Resultados das análises microbiológicas de amostras de sorvetes (n=10) e de refrescos (n=10)
coletadas em lanchonetes localizadas no ICC Sul e ICC Norte, do Campus Darcy Ribeiro UnB.
Amostras
(n=20)
4
CTt
(NMP/g)
ECP
(UFC/g/mL)
Salmonella
(presença/5g)
2
4,6x10
4,6x10
<1
Ausência
5
3
1,1x10
1,1x10
<1
Ausência
5
3
1,1x10
1,1x10
<1
Ausência
3
1,4x10
3,6
<1
Ausência
ICC
2
9,20x10
<3
<1
Ausência
Sul
4
3
Média
5,3x10
5,3x10
<1
Ausência
1
<3
<3
-Ausência
2
<3
<3
-Ausência
Refrescos
3
<3
<3
-Ausência
(n=5)
4
62
6,2
-Ausência
5
<3
<3
-Ausência
Média
12
1,2
-Ausência
1
92
<3
3,63
Ausência
4
2
2
1,1x10
1,5x10
<1
Ausência
2
2
1
Sorvetes
3
2,1x10
2,1x10
1,3x10
Ausência
3
(n=5)
4
4,6x10
<3
<1
Ausência
3
5
2,4x10
<3
<1
Ausência
3
Média
3,6x10
72
2,6
Ausência
1
<3
<3
-Ausência
2
<3
<3
-Ausência
Refrescos
3
<3
<3
-Ausência
(n=5)
4
<3
<3
-Ausência
5
<3
<3
-Ausência
Média
<3
<3
-Ausência
Legenda: CT=Coliformes Totais; CTt = Coliformes Termotolerantes; ECP = Estafilococos
Coagulase Positivo.
Sorvetes
(n=5)
1
2
3
4
5
CT
(NMP/g)
Os resultados obtidos nas análises de equipamentos e utensílios mostraram
contaminações significativas por AM (tabelas 6 e 7) sendo que as contagens mais altas foram
encontradas na lanchonete localizada no ICC Sul, destacando-se as maçanetas dos freezers (3,3
x102UFC/cm2) e a água do recipiente em que eram acondicionadas as conchas de sorvete
(2,57x106 UFC/cm2). Como não há um limite estabelecido para esse tipo de avaliação, utilizou-se
o critério da ABER - Associação Brasileira das Empresas de Refeições Coletivas descrito por Picoli
et al., (2006), que determinam que as superfícies devem conter, no máximo, 50 UFC/cm2 de AM
e ausência de micro-organismos potencialmente patogênicos ou indicadores de contaminação
fecal.
45
Na lanchonete ICC Norte, a média das contagens de AM da água do recipiente, foi de
6,95x104 UFC/cm2, que também pode ser considerada elevada. Esses resultados podem indicar
manipulação inadequada da água ou limpeza insuficiente do balde. Outro fator que pode
favorecer o desenvolvimento microbiano são os resíduos de sorvete que ficam aderidos a essas
conchas e, servem como substrato, propiciando inclusive, a formação de biofilmes nos
utensílios.
Siqueira (1995) corrobora essa afirmação ao expressar que a presença de altas
contagens de aeróbios mesófilos em superfícies pode ser indicativa de manipulação higiênica
incorreta, desinfecções inadequadas de superfícies e higiene insuficiente na produção ou
conservação dos alimentos.
Essa contaminação, em especial da água dos recipientes, é preocupante já que no grupo
dos aeróbios mesófilos estão incluídos diversos micro-organismos patogênicos assim, esse
utensílio pode representar um importante ponto de incorporação de agentes patogênicos ao
sorvete, representando risco à saúde dos consumidores.
Da mesma forma, destacam-se as altas contagens de CT e CTt observadas nessa água
residual dos recipientes que, apresentaram médias de 1,1x10 4 UFC/cm2 para CT e 5,5x103
UFC/cm2 para CTt, nas amostras da lanchonete do ICC Sul.
Para confirmar que a água do balde era contaminada nos estabelecimentos comerciais,
foram analisadas duas amostras de água de abastecimento da rede, das torneiras de uso
comum, localizadas no ICC Sul e ICC Norte. As lanchonetes não contam com rede de
abastecimento de água, utilizando a água destas duas torneiras, recolhida em galões, para a
higienização dos equipamentos/utensílios e para a fabricação dos refrescos.
Os resultados das amostras de água demonstraram boa qualidade, com ausência de CT.
Assim, ficou comprovado que a água residual desses recipientes, torna-se contaminada devido à
falta de cuidados com a higienização do recipiente e das conchas de sorvete. Segundo Battaglini
et al (2012) a utilização de água das “bicas” é uma prática comum observada em diversos
estabelecimentos alimentícios.
Na análise de ECP, verificou-se apenas uma amostra (10%) com contagem de 6,0
UFC/cm2 correspondente à maçaneta do freezer da lanchonete localizada no ICC Norte que
46
inclusive, foi à mesma que apresentou contaminação por ECP no sorvete. Apesar de poder ser
considerada baixa, essa contagem suscita a hipótese de que pode ter ocorrido incorporação
desses micro-organismos, por meio de manipulação inadequada.
Observa-se nestas lanchonetes, a prática do self-service na qual o próprio consumidor
abre o freezer e retira o alimento para pesagem, não sendo possível estabelecer relação com a
manipulação dos funcionários. Entretanto, independentemente disso, constata-se falha na
higienização desses equipamentos e utensílios.
A
avaliação
geral
dos
resultados
obtidos
nas
análises
das
amostras
de
equipamentos/utensílios das duas lanchonetes, incluídas nessa pesquisa, sugere que a
localizada no ICC Norte, apresentou melhor condição de higiene em relação à do ICC Sul.
Diversas deficiências nas instalações desses estabelecimentos são observadas
cotidianamente como, por exemplo: falta de uma área própria para o armazenamento do lixo,
que pode contribuir para o aparecimento de roedores e insetos; falta de material de higiene
adequado, como álcool em gel para os funcionários e para a comunidade universitária; o uso de
panos de limpeza, que por diversas vezes são utilizados nos procedimentos de higienização dos
equipamentos e utensílios e, não são adequadamente limpos.
Tabela 6. Frequências das amostras de equipamentos/utensílios (n=20) contaminadas por estafilococos
coagulase positivos (ECP), coliformes totais (CT), coliformes termotolerantes (CTt) e aeróbios mesófilos
(AM), coletadas em lanchonetes do Campus Darcy Ribeiro, UnB.
Amostras
Maçanetas
freezers (n= 6)
Conchas p sorvete
(n= 6)
Tampa do freezer
(n= 4)
Água recipiente de
conchas (n= 4)
ECP
CT
CTt
AM
16,6% (1/6)
0% (0/6)
0% (0/6)
100% (6/6)
0% (0/6)
0% (0/6)
0% (0/6)
50% (3/6)
0% (0/4)
0% (0/4)
0% (0/4)
50% (2/4)
0% (0/4)
75% (3/4)
50% (2/4)
100% (4/4)
Legenda: CT=Coliformes Totais; CTt=Coliformes Termotolerantes; ECP=Estafilococos Coagulase Positivo; AM=
Aeróbios Mesófilos.
47
Tabela 7. Resultados das análises microbiológicas de amostras de equipamentos e utensílios (n=20)
utilizados na comercialização de sorvetes e sucos, coletadas em lanchonetes localizadas no ICC Sul e ICC
Norte, do Campus Darcy Ribeiro da UnB.
Equipamentos/
utensílios
Amostra
1
CT
(NMP/cm2)
<3
CTt
(NMP/cm2)
<3
ECP
(UFC/cm2)
<1
AM
(UFC/cm2)
2
1,65x10
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
4
1,1x10
4
1,1x10
4
1,1x10
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
<3
4
1,1x10
30
3
5,5x10
<3
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
6
5,36x10
2
3,3x10
<1
1
3,86x10
<1
2
4,83x10
2
2,6x10
2,56
1
1,11x10
6,83
6
1,7x10
6
3,45x10
6
2,57x10
1
4,85x10
Maçaneta (n=2)
ICC
Sul
2
Média
Concha (n=4)
1
2
3
4
Média
Tampa do freezer (n=2)
1
2
Média
Água do balde (n=2)
1
2
Média
1
2
<3
<3
<1
2,46x10
1
<3
<3
<1
2,5x10
2
<3
<3
<1
1,5x10
ICC
2
Média
<3
<3
<1
1,17x10
Norte
1
<3
<3
<1
<1
Concha (n=2)
1
2
<3
<3
<1
1,7x10
Média
<3
<3
<1
8,5
1
<3
<3
<1
<1
Tampa do freezer (n=2)
2
<3
<3
<1
<1
Média
<3
<3
<1
<1
2
4
1
2,3x10
<3
<1
2,9x10
Água do balde (n=2)
5
2
<3
<3
<1
1,1x10
2
4
Média
1,15x10
<3
<1
6,95x10
Legenda: CT=Coliformes Totais; CTt=Coliformes Termotolerantes; ECP=Estafilococos Coagulase Positivo.
Maçaneta (n=4)
2
3
4
2
48
8. CONCLUSÃO
Os resultados obtidos demonstraram que, no momento dessa pesquisa, as amostras de
sorvetes analisadas, não apresentam qualidade microbiológica satisfatória, podendo
representar risco à saúde dos consumidores. As amostras de refrescos, no geral, apresentaram
qualidade microbiológica satisfatória quanto aos micro-organismos pesquisados.
Ficou evidenciado, que a higienização inadequada de equipamentos e utensílios,
contribuiu para os resultados encontrados e podem ser considerados como importantes pontos
de incorporação de micro-organismos para produtos como o sorvete. Aliado a isso, as
instalações precárias das lanchonetes que não contam com abastecimento de água próprio e os
hábitos de higiene insuficientes dos manipuladores e dos consumidores agravam a situação
atual, que pode se estender para outros alimentos.
Para que essa situação mude é essencial uma atuação conjunta da Universidade e dos
serviços. A Universidade deve fornecer condições adequadas das instalações, assim como, os
manipuladores devem ser treinados e capacitados de forma contínua, para trabalharem nesses
estabelecimentos. Somente assim será possível exigir mais qualidade nos serviços prestados,
estabelecer critérios sanitários mais rigorosos e possibilitar o monitoramento das condições de
produção e comercialização dos alimentos no Campus universitário.
Esses resultados serão encaminhados aos funcionários das lanchonetes para alertá-los
sobre os principais pontos de incorporação de micro-organismos em sorvetes e refrescos e
também para que eles melhorem os hábitos de higiene.
49
9. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS DA PESQUISA
ABERC - Associação Brasileira das Empresas de Refeições Coletivas, 2008. Disponível em:
http://www.aberc.com.br/index.asp. Acesso em: 4 jul 2013.
APHA. Compendium of methods for the microbiological examination of foods.3. ed.
Washington, AmericanPublicHeathAssociation, 1219 p, 1992.
ARMONDES, M. P.; ISSY, P. N.; ANDRÉ, M. C. D. P. B.; SERAFINI, A. B. Aspectos higiênicossanitários de sorvetes e caldas de sorvetes produzidos artesanalmente na cidade de Goiânia,
GO. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v.17, n.107, p.86-94, 2003.
BATTAGLINI, A. P. P., FAGNANI, R. TAMANINI, R., BELOTI, V. Qualidade microbiológica do
ambiente, alimentos e água, em restaurantes da Ilha do Mel/PR Semina: Ciências Agrárias,
Londrina, v. 33, n. 2, p. 741-754, abr. 2012.
BRASIL, 2001. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Agência Nacional de
Vigilância Sanitária. Resolução RDC nº 12, de 2 de janeiro de 2001. Dispõe sobre Regulamento
Técnico
sobre
Padrões
Microbiológicos
para
Alimentos.
Disponível
em:http://portal.anvisa.gov.br/wps/wcm/connect/a47bab8047458b909541d53fbc4c6735/RDC
_12_2001.pdf?MOD=AJPERES.Acesso em: 14 jun 2013.
BRASIL, 2003. Ministério Da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Instrução Normativa nº 62,
de 26 de Agosto de 2003 oficializa os Métodos Analíticos Oficiais para Análises
Microbiológicas para Controle de Produtos de Origem Animal e Água, com seus respectivos
capítulos e anexos, determinando que sejam utilizados no Sistema de Laboratório Animal do
Departamento de Defesa Animal. Diário Oficial da União; Poder Executivo, de 10 de janeiro de
2001.
Disponível
em
http://extranet.agricultura.gov.br/sislegisconsulta/consultarLegislacao.do?operacao=visualizar&id=2851. Acesso em: 3 jul 2013.
FERREIRA, M. A. Análises Microbiológicas para Qualidade do Leite Fluído. Dossiê Técnico.
Centro de Apoio ao Desenvolvimento Tecnológico da Universidade de Brasília – CDT/UnB, 22p.
Set, 2007.
GOMES, D. M.; MENDES, L. T.; BASTO, K. P. L.; POVOA, H. C. C.; AREDES, E. M. Detecção de
microrganismos em sorvetes fabricados e comercializados no município de Muriaé- MG e
região. Revista Científica da Faminas, Florianópolis, v. 02, n. 01, p. 34-35, 2006.
HOFFMANN, F. L.; PENNA, A. L. B.; COELHO, A. R. Qualidade higiênico-sanitária de sorvetes
comercializados na cidade de São José do Rio Preto-SP-Brasil. Revista Higiene Alimentar, v. 11,
n. 76, p. 62-68, 2000.
50
PICOLI, S. U., BESSA, M. C., CASTAGNA, S. M. F.,GOTTARDI, C. P. T., SCHMIDT, V., CARDOSO,
M.Quantificação de coliformes, Staphylococcus aureus e mesófilos presentes em diferentes
etapas da produção de queijo frescal de leite de cabra em laticínios. Ciênc. Tecnol. Aliment.,
Campinas, 26(1): 64-69, jan.-mar, 2006.
PINHEIRO, A. M., FERNANDES, A. G., CAVALCANTE, A. E., PRADO, G. M., SOUSA, P. H. M., MAIA,
G. A. Avaliação Química, Físico-Química E Microbiológica De Sucos De Frutas Integrais:
Abacaxi, Caju E Maracujá. Tecnol. Aliment., Campinas, 26(1): 98-103, jan.-mar, 2006.
PINTO, M. F.; PONSANO, E. H. G.; DELBEM, A. C. B.; DE LARA, J. A. F. Condição higiênicosanitária de sorvetes fabricados por indústrias artesanais no município de Araçatuba, SP.
Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v.14, n.72, p.50-52, 2000.
RICHARDS, N. S. P. S; SILVA, M. E.; PEREIRA, D.; SANTOS, F. I.; FLECK, A.; COUTINHO, M. P. M. D.
Avaliação das condições higiênico-sanitárias de sorvetes tipo italiano (soft), comercializados
na cidade de São Leopoldo – RS. Higiene Alimentar, São Paulo, nº 92/93, p. 57-62, 2002.
RIZZO-BENATO, R. T. Qualidade microbiológica do leite e do sorvete de massa de uma
indústria de pequeno porte do município de Piracicaba –SP. Dissertação mestrado- Escola
Superior de Agricultura Luiz de Queiros, 62 p. Il, 2004.
SILVA, N.; JUNQUEIRA, V. C. A.; SILVEIRA, N. F. A.; TANIWAKI, M. H.; SANTOS, R. F. S.; GOMES,
R.A.R. Manual de métodos de análise microbiológica de alimentos.3. ed. São Paulo: Varela, 536
p., 2007.
SILVEIRA, H. G., QUEIROZ, N. A. S. N.,PINTO, R. S., RODRIGUES, M. C. P., COSTA, J. M. Avaliação
da qualidade físico-química e microbiológica de sorvetes do tipo tapioca1 Revista Ciência
Agronômica, v. 40, n. 1, p. 60-65, jan-mar, Centro de Ciências Agrárias - Universidade Federal do
Ceará, Fortaleza, CE, 2009.
SIQUEIRA, R. S. Manual de microbiologia de alimentos. EMBRAPA. Centro Nacional de Pesquisa
de Tecnologia Agro-industrial de Alimentos; Rio de Janeiro, 1995.