ESTABELECIMENTO DE VALORES DE HIPOXANTINA PARA AVALIAÇÃO DA QUALIDADE FÍSICO-QUÍMICA DE SARDINHAS INTEIRAS REFRIGERADAS ESTABLISHMENT VALUES OF HYPOXANTHINE FOR ASSESSMENT PHYSICALCHEMISTRY QUALITY OF CHILLED WHOLE SARDINES Sabrina da Costa Silva Andrade*1; Eliane Teixeira Mársico2; Ronoel Luiz de Oliveira Godoy3; Sidney Pacheco3 1 Programa de Pós Graduação em Higiene Veterinária e Processamento Tecnológico de Produtos de Origem Animal - Faculdade de Veterinária – U F F – Niterói – RJ 2 Departamento de Tecnologia de Alimentos - Faculdade de Veterinária – U F F – Niterói – RJ 3 Embrapa Agroindústria de Alimentos – Rio de Janeiro - RJ Palavras-chave: sardinhas, hipoxantina, qualidade Introdução A hipoxantina é um composto formado a partir da degradação do ATP por decomposição autolítica de nucleotídeos ou pela ação de bactérias. O acúmulo deste metabólito confere à matriz alimentar um sabor amargo, bastante característico em peixes em deterioração, sendo, portanto, um bom indicador do grau de frescor (GRAM & HUSS, 1996; HUSS, 1999; OGAWA & MAIA, 1999). O objetivo deste estudo foi estabelecer valores de hipoxantina que auxiliem na avaliação da qualidade físico-química de sardinhas inteiras mantidas sob refrigeração em gelo (0+2ºC) durante período de estocagem. Material de métodos Exemplares de sardinha verdadeira (Sardinella brasiliensis) e sardinha boca torta (Cetengraulis edentulus) foram adquiridos em um entreposto na Região dos Lagos do Estado do Rio de Janeiro e em uma fábrica de conservas de pescado no município de São Gonçalo (RJ), respectivamente. As amostras foram transportadas em recipientes isotérmicos de poliestireno com gelo à Faculdade de Veterinária da Universidade Federal Fluminense, lavadas em água corrente e mantidas sob refrigeração em gelo (0+2ºC) durante 18 dias de estocagem. Diariamente foram coletadas porções da musculatura dos peixes para determinação de hipoxantina realizada em duplicata no Laboratório de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência da Embrapa Agroindústria de Alimentos pela técnica de cromatografia líquida de alta eficiência, descrita por SILVA et al. (2009). A análise consistiu na pesagem em balança analítica de 50mg da amostra, homogeneização com ácido perclórico a 8% em agitador mecânico ultrasom por 10 minutos, neutralização com hidróxido de potássio 6 M com formação do precipitado perclorato de potássio, agitação em vortex e filtração em filtro Millipore Millex-GV (0,22 μm) diretamente no vial previamente identificado. A separação da hipoxantina foi realizada utilizando-se uma fase móvel com água Milli-Q:acetonitrila:ácido fórmico (97:1:2) e uma coluna de fase reversa YMCPack ODS (4,6 x 250 mm). O volume de amostra injetado automaticamente foi de 10µL e o tempo de corrida foi de 10 minutos. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de regressão linear através da utilização do programa computacional Bio Estat 5.0 (AYRES, 2007). Resultados e Discussão No dia 0 de estocagem o conteúdo médio de hipoxantina nas amostras de sardinha verdadeira e sardinha boca torta foi de 0,65 μmol.g-1 e 1,40 μmol.g-1, aumentando significativamente no decorrer do período de estocagem atingindo 2,62 μmol.g-1 e 2,09 μmol.g-1 no 18º dia, respectivamente, conforme apresentado graficamente na Figura 1. O elevado teor inicial de hipoxantina observado nas amostras de sardinha boca torta em comparação com as amostras de sardinha verdadeira pode ter ocorrido, conforme mencionado por ÖZYURT et al. (2007), em função do estresse durante a captura, manuseio e armazenamento que ocasiona uma rápida degradação do ATP. Nas condições desse estudo sugeriu-se que para os exemplares de sardinha verdadeira um conteúdo de hipoxantina de 0,70 µmol.g-1 seria indicativo de ótima qualidade, ao redor de 1,0 µmol.g-1 indicaria bom estado de frescor e, em torno de 1,5 µmol.g-1 seria indicativo de perda de qualidade da matéria-prima. Para os exemplares de sardinha boca torta, o conteúdo de hipoxantina entre 1,4-1,6 µmol.g-1 indicaria bom estado de frescor, sendo que um teor ao redor de 1,9 µmol.g-1 seria indicativo de perda de frescor. Neste caso, os valores iniciais mais elevados não possibilitaram sugerir valores que classificassem a ótima qualidade desta matéria-prima. Sardinha verdadeira Sardinha boca-torta 3,5 3 umol.g-1 2,5 2 1,5 1 0,5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 Dias de estocagem Figura 1 - Representação gráfica da concentração de hipoxantina (µmol.g-1) em sardinha verdadeira (S. brasiliensis) e sardinha boca torta (C. edentulus) mantidas sob refrigeração (0+2ºC) em diferentes dias de estocagem. Conclusões Conclui-se que o conteúdo de hipoxantina aumentou de forma significativa no decorrer do período de estocagem nas espécies estudadas, apresentando, portanto uma boa correlação com a qualidade do pescado e que valores ao redor de 1,5 µmol.g-1 para as espécies de sardinha verdadeira e valores ao redor de 1,9 µmol.g-1 para as espécies de sardinha boca-torta podem ser utilizados como alerta indicativo de deterioração. Referências bibliográficas AYRES, M. BioEstat: Aplicações estatíticas nas áreas das ciências bio-médicas. 5.ed. Pará, 2007. 364 p. GRAM, L.; HUSS, H. H. Microbiological spoilage of fish and fish products. International Journal of Food Microbiology, v. 33, p. 121-137, 1996. HUSS, H. H. El Pescado Fresco: Su Calidad y Cambios de su Calidad. Dinamarca: FAO, 1999. OGAWA, M.; MAIA, E. L. Manual de pesca: ciência e tecnologia do pescado. São Paulo: Livraria Varela, 1999. 430 p. ÖZYURT, G.; ÖZYURT, Y.; ÖZYURT, C. E.; POLAT, A.; ÖZOGUL, F.; GÖKBULUT, C.; ERSOY, B.; KÜLEY, E. Determination of the quality parameters of pike perch Sander lucioperca caught by gillnet, longline and harpoon in Turkey. Fisheries Science, v. 73, p. 412-420, 2007. SILVA, S. C.; MÁRSICO, E. T.; GODOY, R. L. O.; PACHECO, S. Determinação de hipoxantina em peixes refrigerados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). In: CONGRESSO NACIONAL DE SAÚDE PÚBLICA VETERINÁRIA, 3., ENCONTRO INTERNACIONAL DE SAÚDE PÚBLICA VETERINÁRIA, 1., 2009, Bonito. Anais... Bonito, 2009. CD-ROM. Autor a ser contactado: Sabrina da Costa Silva Andrade Endereço: Av. Roberto Silveira – 2258 – Flamengo – Maricá – RJ. 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