UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
CURSO DE FARMÁCIA
BIOFÍSICA MOLECULAR
Sabrina Homrich
Tanise Dalmolin
Vanessa Torbitz
Verônica Dias
O DESENVOLVIMENTO DA MICROSCOPIA
ELETRÔNICA
• J.J. Thomson - 1897
• De Broglie – 1924
• Bush – 1926 (Fundamentos da ótica eletrônica)
• Knoll – 1935 (MEV)
• Siemens – 1939 (MET)
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO
• Tem sido usado em todas as áreas das ciências Biológicas e
Biomédicas devido a sua capacidade de visualização das mais finas
estruturas celulares.
• Usa uma bobina em vez de uma lente
• Usa um feixe de elétrons em vez de luz
• Possui um poder de aumento útil de até um milhão de vezes e
uma resolução, com espécimes biológicas, de cerca de 2 nm.
• As técnicas de coloração empregadas para observação nestes
tipos de microscópio são metais pesados como o ouro, o ósmio,
urânio e chumbo.
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO – MODELO 906E
MET. Mais simples e mais avançado. ( Empresa Jeol)
MET mais antigo.
PRINCÍPIOS DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA
 Poder resolvente (ou poder de resolução)
É a capacidade de distinguir, 2 pontos adjacentes. (detalhes)
 Comprimento de onda
A natureza da luz LIMITA A QUANTIDADE DE DETALHES
QUE PODE SER RESOLVIDA NUM MICROSCÓPIO.
• Abertura numérica
Na prática, é considerada como sendo a quantidade de luz que
efetivamente penetra na objetiva.
COMPONENTES DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
• Propriedades ondulatórias dos elétrons
Aumento no PODER RESOLVENTE
• Canhão eletrônico
É a fonte de iluminação do microscópio eletrônico e consiste em um
pequeno fragmento de fio em forma de V.
Uma ALTA VOLTAGEM é aplicada nesse filamento, FAZENDO COM
QUE UMA CORRENTE FLUA ATRAVÉS DELE, O INCANDESÇA EMITINDO
ELÉTRONS.
• Lentes eletrônicas
As lentes eletrônicas consistem basicamente de uma bobina, formada
por milhares de voltas de fio através da qual passa uma corrente e focalizam
os feixes eletrônicos.
FUNCIONAMENTO DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
DE TRANSMISSÃO
CÁTODO → ÂNODO → AUMENTA VELOCIDADE
DOS ELETRONS → FORMAM FEIXES DE
ELÉTRONS → DESVIADOS NAS BOBINAS
ELÉTRICAS (campo magnético) → LENTE
CONDENSADORA (focaliza) → LENTE OBJETIVA
(aumenta imagem) → DETECTORES
PROCESSAMENTO BÁSICO DO MATERIAL PARA
VISUALIZAÇÃO ATRAVÉS DO MET
• Fixar o material por perfusão e/ou imersão;
• O fragmento geralmente é embebido em tetróxido de ósmio,
depois passa por processos de lavagens, desidratado em
concentrações crescentes de álcool e imerso em resina, onde
permanece até a polimerização;
• O excesso de resina polimerizada é retirado para expor o
material de estudo e permitir o seu fatiamento no
ultramicrotomo;
• As fatias ultrafinas são colocadas em telas de cobre ou
níquel, e são contracoradas geralmente com uranila e
chumbo;
• Após a obtenção de fotografias, caso não haja um sistema
de captação de imagens para CD-Rom, segue-se com a
revelação do negativo, revelação e ampliação das fotografias.
• Análise dos dados.
FORMAÇÃO DA IMAGEM
A imagem é também uma resultante da absorção diferenciada de
elétrons por diversas regiões da amostra, seja por variação de
espessura, seja por interação com átomos de maior ou menor
número atômico.
APLICAÇÃO DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA
DE TRANSMISSÃO
• Análises morfológicas
• Caracterização de precipitados
• Determinação de parâmetros de rede
APLICAÇÃO DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA
DE TRANSMISSÃO
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Estudo por microscopia eletrônica pode ser a
forma mais efetiva de estabelecer alguns
diagnósticos
A neurologia e a nefrologia são as
especialidades que mais utilizam esse recurso
Microscopia eletrônica de biópsia renal mostra podócito hipertrófico
com fusão de pedicelos sobre a membrana basal glomerular
Hepatócito visto por Microscopia Eletrônica de Transmissão
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Fotomicrografia eletrônica de transmissão de intestino de rato mostrando as microvilosidades
BIBLIOGRAFIA
Galleti , Silvia. INTRODUÇÃO A MICROSCOPIA ELETRÔNICA. Biológico,
São Paulo, v.65, n.1/2, p.33-35, jan./dez., 2003
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http://www.neurofisiologia.unifesp.br/eletronica.htm
http://www.youtube.com/watch?v=mYwki_1NkIE