DISCIPLINA de HISTOLOGIA e EMBRIOLOGIA Responsável: Prof. Dr. Miguel A. C. Salgado Histoquímica • Proteínas (fosfatase alcalina, fosfatase ácida, peroxidase) • Ácidos nucléicos - Reação de Feulgen • Lipídios - Sudan IV – Sudan III • Polissacarídeos - P A S Histoquímica - fosfatase alcalina Reação de Feulgen DNA - RNA PAS (polissacarídeos) Alcian blue (polissacarídeos) PAS - Glicogênio HE Sudan IV - lipídios Von Kossa – Ca Epitélio nitratado outros métodos Técnicas não usadas na rotina dos laboratórios de histologia, mas são utilizadas pelos pesquisadores conforme as necessidades de cada um. 1) Cultivo de Células • Mantém as células vivas e se multiplicando em frascos com soluções contendo sais minerais, nutrientes e fatores de crescimento (proteínas estimuladoras da proliferação celular). outros métodos 2) Centrifugação Fracionada • Rompe a membrana celular para liberar no meio (solução gelada de sacarose) os constituintes das células. • Isola componentes celulares, como núcleos, mitocôndrias, retículos endoplasmáticos. • Nas frações puras é mais fácil estudar a composição química, as atividades enzimáticas e as funções de cada componente celular. outros métodos 3) Radioautografia • Possibilita a localização de substâncias radioativas (marcadas) nos tecidos. • Permite também mensurar a quantidade relativa dessas substâncias Radioautografia outros métodos 4) Imunocitoquímica • Suas técnicas baseiam-se na reação antígeno-anticorpo. • Anticorpos são marcados de várias formas (composto fluorescente, isótopo radioativo, por ex) para permitir a sua localização nos preparados histológicos. • Locais do tecido que fixam o anticorpo são locais que contêm o antígeno. Imunocitoquímica (filamentos citoplasmáticos) MICROSCÓPIOS: - MICROSCOPIA DE CONTRASTE DE FASE – INTERFERÊNCIA - MICROSCOPIA DE POLARIZAÇÃO - MICROSCOPIA DE FLUORESCÊNCIA - MICROSCOPIA CONFOCAL - MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÂO - MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE VARREDURA Microscópio Eletrônico JEM-1200EX Line resolution: 0,14 nm Magnification: 50-1.200.000x MET MET MO MET JSM 810 SCANNING MICROSCOPE Resolution: 3,5 nm Magnification: 10- 300.000x MEV MEV JEM -1250 1000 Ultrahigh Voltage EM Point resolution: 0,2 nm Magnification: 150-1.500.000x DISCIPLINA de HISTOLOGIA e EMBRIOLOGIA Responsável: Prof. Dr. Miguel A. C. Salgado