DISCIPLINA de HISTOLOGIA e EMBRIOLOGIA
Responsável: Prof. Dr. Miguel A. C. Salgado
Histoquímica
• Proteínas (fosfatase alcalina, fosfatase ácida, peroxidase)
• Ácidos nucléicos - Reação de Feulgen
• Lipídios - Sudan IV – Sudan III
• Polissacarídeos - P A S
Histoquímica
- fosfatase alcalina
Reação de Feulgen
DNA - RNA
PAS
(polissacarídeos)
Alcian blue
(polissacarídeos)
PAS
- Glicogênio
HE
Sudan IV
- lipídios
Von Kossa – Ca
Epitélio nitratado
outros métodos
 Técnicas não usadas na rotina dos
laboratórios de histologia, mas são
utilizadas pelos pesquisadores conforme
as necessidades de cada um.
1) Cultivo de Células
• Mantém as células vivas e se
multiplicando em frascos com soluções
contendo sais minerais, nutrientes e
fatores de crescimento (proteínas
estimuladoras da proliferação celular).
outros métodos
2) Centrifugação Fracionada
• Rompe a membrana celular para liberar
no meio (solução gelada de sacarose) os
constituintes das células.
• Isola componentes celulares, como
núcleos, mitocôndrias, retículos
endoplasmáticos.
• Nas frações puras é mais fácil estudar a
composição química, as atividades
enzimáticas e as funções de cada
componente celular.
outros métodos
3) Radioautografia
• Possibilita a localização de substâncias
radioativas (marcadas) nos tecidos.
• Permite também mensurar a quantidade
relativa dessas substâncias
Radioautografia
outros métodos
4) Imunocitoquímica
• Suas técnicas baseiam-se na reação
antígeno-anticorpo.
• Anticorpos são marcados de várias formas
(composto fluorescente, isótopo radioativo, por
ex) para permitir a sua localização nos
preparados histológicos.
• Locais do tecido que fixam o anticorpo são
locais que contêm o antígeno.
Imunocitoquímica
(filamentos citoplasmáticos)
MICROSCÓPIOS:
- MICROSCOPIA DE CONTRASTE DE FASE – INTERFERÊNCIA
- MICROSCOPIA DE POLARIZAÇÃO
- MICROSCOPIA DE FLUORESCÊNCIA
- MICROSCOPIA CONFOCAL
- MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÂO
- MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE VARREDURA
Microscópio Eletrônico
JEM-1200EX
Line resolution: 0,14 nm
Magnification: 50-1.200.000x
MET
MET
MO
MET
JSM 810
SCANNING MICROSCOPE
Resolution: 3,5 nm
Magnification: 10- 300.000x
MEV
MEV
JEM -1250 1000
Ultrahigh Voltage EM
Point resolution: 0,2 nm
Magnification: 150-1.500.000x
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Responsável: Prof. Dr. Miguel A. C. Salgado
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17:35 ME_II_2015_A.