SISTEMA LC-MSMS
Sistema de cromatografia líquida (HPLC), com espectrômetro de massas
sequencial ou MSMS, com SPE on line, amostrador automático, no-break 10 Kva
e acessórios, para análises dos agrotóxicos citados na Portaria no. 2914/11 do
Ministério da Saúde e na Resolução Conama no. 357/05.
2- ESPECIFICAÇÕES
Sistema de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência MODULAR, compatível com cromatografia líquida
convencional e Ultra Alta Performance com alta resolução (UHPLC/HD), com emprego de colunas
cromatográficas de QUALQUER FABRICANTE, com diâmetros desde 2,1 até 4,6mm, comprimentos
desde 50 até 300mm e tamanhos de partículas desde 1,8um até 5um, acoplado a Espectrômetro de
Massas Triplo Quadrupolo (LC/MS/MS), composto de: Bomba Quaternaria e Degaseificador a Vácuo
com 4 canais integrados, Amostrador Automático com Termostatizador, Compartimento Termostatizado
para Colunas, modulo de SPE On Line, Detector de Arranjo de Diodos, Espectrômetro de Massas Triplo
Quadrupolo (QQQ), Fonte ESI de alta performance e Multimode, Gerador de Nitrogênio com Ar
Comprimido integrado, no-break de 10 Kva e Estação de Trabalho completa (incluindo PC, Monitor,
Impressora e Software de controle e aquisição de dados de TODO O SISTEMA – LC e MS).
Todos os módulos do Cromatógrafo Líquido deverão atender às seguintes especificações mínimas:
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Sistema MODULAR, consistindo de módulos individuais para a Bomba, Amostrador Automático,
e Compartimento Termostatizado de Colunas.
Faixa de operação de voltagem de 100 a 250 VAC.
O projeto dos módulos garante que os componentes elétricos estejam isolados das
tubulações/conexões onde passa a fase móvel.
As áreas onde a manutenção pode ser executada pelo usuário são fisicamente isoladas das
áreas de alta voltagem, e são acessíveis pela parte frontal do equipamento, sem a necessidade
de desempilhar os módulos do cromatógrafo. Possuem dispositivos para detecção de
vazamentos de solventes, que interrompe imediatamente o fluxo das bombas.
Controle TOTAL do equipamento através de protocolos de rede local LAN, “Local Area Network”
(TCP/IP em rede 10/100Base-T), incluindo o controle do espectrômetro de massas também via
protocolos de rede local LAN.
O equipamento deverá ser fornecido com manuais de uso e manutenção na versão em
português.
2.1- Sistema de cromatografia líquida quaternário de resolução rápida
Composto de bomba Quaternaria de duplo pistão em série, amostrador automático, compartimento
termostatizado para colunas com pré-aquecimento da fase móvel, modulo de SPE On Line e detector
DAD em série com o espectrômetro de massas.
Caraterísticas gerais: a alimentação de todo o sistema é Bivolt (110 ou 220 volts/60Hz); O projeto dos
módulos garante que os componentes elétricos estejam isolados das tubulações/conexões onde passa a
fase móvel.
As áreas onde a manutenção pode ser executada pelo usuário são acessíveis pela parte frontal do
equipamento, sem a necessidade de desempilhar os módulos do cromatógrafo. Deve possuir
dispositivos para detecção de vazamentos de solventes, que interrompe imediatamente o fluxo das
bombas.
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Controle TOTAL do equipamento através de protocolos de rede local LAN, “Local Area Network” (TCP/IP
em rede 10/100 Base-T) e comunicação entre os módulos através dos cabos CAN, que permite a troca
ou manutenção dos módulos sem necessidade de troca de todo sistema.
Acompanha detector DAD de alta sensibilidade e cela de 60 mm em série com o espectrômetro de
massas e com controle integrado pelo software de controle do LC/MS/MS.
2.1.1- Bomba Quaternária:
•
Mecanismo de duplo pistão em série com deslocamento variável de 20 a 100µl e ajustável pelo
usuário, bem como ajustado automaticamente;
•
Deverá possuir um conjunto de ferramentas para manutenção do sistema;
•
Deverá Possuir um sistema ativo de lavagem de selos que aumenta a vida útil e reduz o tempo
entre manutenções da bomba;
•
Deverá possuir materiais em contato com o solvente: Teflon, AF, FEP, PPS;
•
Deverá Incluir um Degaseificador “On-line” a vácuo de 4 canais, tolerante a vazões de até 10ml/
min.
•
Deverá possuir fluxo ajustável de 0.001 a 10ml/min em intervalos de 0.001ml/min
•
Precisão de fluxo: ≤0,07% RSD ou ≤ 0,02 min SD, o que for maior;
•
Exatidão de fluxo: ±1,0% ou 10µL/min, o que for maior;
•
Capacidade de operação de 600bar até 5mL/min ou de 0 a 200bar de 5,001 a 10,000ml/min,
com capacidade de ajuste de pressão mínima e máxima de trabalho pelo usuário.
•
Pulso de pressão: <2% em amplitude, normalmente <1,3% ;
•
Compensação de compressibilidade: ajuste automático, pré-definido, de compressibilidade de
solvente, para minimizar pulsos de pressão;
•
Faixa de pH: 1 a 12,5;
•
Formação de gradiente binário em alta pressão, com volume morto ("delay volume") < 600µL 800µL com mixer incluindo 400µL;
•
Composição de gradiente: Selecionável na faixa de 0,0 a 100,0%, recomendado 1,0 – 99,0%;
•
Precisão da composição: <0,15% RSD ou ≤0,04min SD, o que for maior, baseado em tempo de
retenção e em uma temperatura ambiente constante;
•
Válvula de injeção (“inlet valve”) ativada eletronicamente, para garantir operação sem bolhas de
ar, mesmo com o uso de solventes voláteis;
•
Inclui uma válvula de purga para conveniência na troca de solventes.
•
Permite a mudança de parâmetros de operação, mesmo durante uma análise.
•
Deverá ser fornecido software intuitivo de diagnostico e monitoramento das capacidades do
sistema, notificar sobre problemas, ajudando a gerenciar o laboratorio para melhor Qualidade do
Cromatografo Liquido. Possui recursos de diagnóstico como, por exemplo, contagem de litros de
solvente já bombeado e tempo de uso dos selos, entre outros; com capacidade de “reset” de parâmetros,
por exemplo, após um reparo ou substituição de componentes
•
Todos os componentes recicláveis.
2.1.2- Amostrador Automático:
A capacidade de amostras deverá atender no mínimo às seguintes configurações:
•
100 frascos de 2mL, em 1 bandeja ou
•
40 frascos de 2mL na metade da bandeja;
•
Contaminação cruzada “carryover”: < 0,1%, com lavagem externa da agulha;
•
Volume de Injeção: Capacidade de injetar volumes na faixa de 0,1 a 100uL, em incrementos de
0,1µL, com loop padrão e sem a necessidade de nenhuma alteração no "hardware"; E capacidade de
injeção de volumes maiores de até 1500uL com uso de outros loops, como opcional;
•
Precisão do volume de injeção: < 0,25% RSD na faixa de 5 a 100µL, e <1,0% na faixa de 1 a
5µL;
•
Possuir sistema de termostatização tipo “Peltier”, permitindo o controle da temperatura do
compartimento de amostras na faixa de 4oC a 40oC, em intervalos de 1oC;
•
Exatidão do volume de injeção: ±1% de variação para 10 injeções com um volume de 10µL;
•
Viscosidade de operação de 0,2 a 5,0cp;
•
Tempo do ciclo de injeção: < 50s em condições padrões;
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•
Possuir um sistema de lavagem da parte externa da agulha com bomba peristáltica;
•
Possuir um recurso de injeções sobrepostas, iniciando as tarefas de injeção antes mesmo de a
corrida anterior ter sido concluída, permitindo a injeção da amostra imediatamente após o sinal de
prontidão “ready” do instrumento;
•
Não há desperdício nenhum de amostra durante o ciclo de injeção;
•
Possuir recursos de preparação de amostras, tais como adição de padrões internos e reagentes
para derivatização pré-coluna;
•
Operação totalmente elétrica, não exigindo o uso de gases para acionamentos pneumáticos;
•
Permitir a mudança de parâmetros de operação mesmo durante uma análise;
•
Possuir recursos de diagnóstico como, por exemplo, contagem do número de injeções e número
de ciclos da válvula de injeção; com capacidade de “reset” de parâmetros, por exemplo, após um reparo
ou substituição de componentes;
•
Ter faixa de pressão de operação até 600bar;
•
Todos os materiais recicláveis.
2.1.3- Compartimento termostatizado para colunas:
•
Possuir Capacidade para no mínimo 3 colunas de 300mm com aquecimento individual de
solvente ou 3 colunas de 300mm em série ou 4 colunas de 100mm;
•
Possuir válvula de seleção de minimo de 6 colunas, permitindo a seleção entre uma coluna e
outra, ou o backflush de uma pré-coluna com pressão maxima 600 BAR.
•
Permitir o pré-aquecimento da fase móvel, antes de entrar na coluna, sem adição de módulo
externo, realizado pelo próprio compartimento termostatizado para colunas, mantendo todo o sistema,
compartimento, fase móvel e coluna na mesma temperatura favorecendo a estabilidade da análise;
•
Faixa de operação de 10ºC abaixo da temperatura ambiente até 100ºC a um fluxo de 5,0ml/min
e de 10ºC abaixo da temperatura ambiente até 100ºC, em intervalos de 0,1ºC; através de um “Elemento
de Peltier”;
•
Estabilidade de Temperatura: ±0,15ºC;
•
Exatidão de Temperatura: ±0,5ºC, após a calibração;
•
Estabilidade da temperatura: ±0,05ºC.
•
Permitir selecionar temperaturas diferentes para a parte esquerda e parte direita do
compartimento;
•
Todos os materiais recicláveis.
2.1.4- Modulo SPE ON LINE:
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Deverá incluir bomba de descarga integrada Flush, com faixa de pressão de até 50 Bar e
fluxo de até 4,0 mL/minuto;
Válvula de seleção solvente;
Válvula de mudança rápida e todas as peças para aplicações de encosto-nivelamento de
agulha;
Deverá possuir Carry Over normalmente de < 10 ppm (0,001%) em análise com UV e MS;
Numero de solventes: pelo menos 3 solventes;
Tempo de flush: selecionável. Com tempo de nivelamento da agulha com 1 ml de
solvente, incluindo troca de solvente de 38 s, paralelamente à execução de análise.
Sistema deverá ser automatizado e totalmente controlado pelo software do equipamento
de LCMS.
Capacidade para expansão para maior volume de amostra (amostragem de 5 ml).
2.1.5- Detector Ultravioleta por arranjo de diodos (DAD):
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Tipo de detecção: Arranjo de fotodiodos de 1024 elementos.
Fonte de Luz: Lâmpada Ultravioleta de Deutêrio, equipada com identificador por radiofreqüência, que
mantém o registro dos dados da lâmpada.
Faixa de operação: de 190 a 950nm.
Nível de Ruído: < ± 0.7x 10-5 AU no comprimento de onda de 254/4nm, e 750 nm.
Drift: < 0,9 x 10-3 AU/hr em 254nm.
Faixa de absorbância linear: > 2,0AU (5%) em 265nm.
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Exatidão do comprimento de onda: ± 1nm, com calibração de linhas de Deutério.
Número de sinais: 8.
Abertura da fenda: programavel de 1,2,4,8 e 16 nm.
Largura do diodo: 1nm.
Taxa de aquisição do sinal: 80 Hz.
Taxa de aquisição do espectro: 80 Hz.
Celas de fluxo: Cartuchos com comprimento de 10mm Padrão e Microcella;
Recursos de diagnóstico como, por exemplo, contagem do número de horas de uso da lâmpada;
com capacidade de “reset” de parâmetros, por exemplo, após um reparo ou substituição de
componentes.
Possui todos os materiais recicláveis.
2.1.6- Espectrômetro de massas do tipo triplo quadrupolo.
ANALISADOR DE MASSAS – do tipo triplo quadruplo de frequência RF/DC. Contendo uma cela de
colisão hexapolar para melhor focalização e transmissão dos íons e fragmentos.
INTERFACE - Módulo de interface direto da pressão atmosférica para o vácuo com cortina de gás
Nitrogênio para manter a limpeza do analisador. O equipamento deverá ter a capacidade de analisar
amostras complexas com grande robustez e excelente sinal-ruído.
DETECÇÃO - Eletro-multiplicadora de alto ganho com dinodo conversor de alta energia (HED) e
cartucho removível, posicionada fora do eixo (“off-axis”) com relação ao eixo do quadrupolo.
Polaridade do detector com trocas entre as varreduras alternadas em tempo de 30 milissegundos.
SISTEMA DE CONTROLE E AQUISIÇÃO - O Sistema deve ser capaz de executar os seguintes modos
de varredura:
• Varredura rápida MS de 12.500 Da/s sem comprometer a resolução na faixa de massa
de m/z 5 a 3000.
• Sensibilidade de 10.000:1 RMS medidos para 1 picograma (1x10^-12 gramas) de
reserpina injetados na coluna, no modo positivo com fonte de ionização ESI
monitorando a transição do íon m/z 609 para m/z 195. E sensibilidade de 10.000:1 RMS
medidos para 1 picograma (1x10^-12 gramas) de cloranfenicol injetados na coluna, no
modo negativo com fonte de ionização ESI monitorando a transição do íon m/z 321 para
m/z 152. Ambos os parâmetros deverão ser comprovados na instalação.
• Capacidade de alternar varreduras MS para MS/MS para obtenção de massa intacta do
íon e informação estrutural a partir de uma única injeção;
• “Product ion scan” (ou MS/MS) para elucidação estrutural;
• “Precursor ion” para a identificação de um íon precursor a partir de um fragmento;
• Neutral Loss para identificação de perdas característiscas. Ex: Perda de H2O, NH3,
CO2, H3PO4, etc.
• “Multiple Reaction Monitoring ou MRM” para quantificação de compostos com base no
seu quantificador e qualificador, podendo ser monitorados 500 transições por segmento
de tempo ou > 40.000 por método.
• MRM dinâmico para otimização dos métodos de quantificação, onde são definidas,
automaticamente, janelas de tempo para cada íon a ser monitorado, podendo ser
monitorados até 4.000 transições por método.
• MRM e MSMS simultâneos, permitindo a quantificação e confirmação de um composto
simultanemente, sem que haja influência sobre a quantificação e no tempo de
monitoramento do analito. Possibilitando a busca dos espectros de MS/MS em
bibliotecas de espectros.
FONTE DE IONIZAÇÃO – O sistema deverá acompanhar uma fonte ortogonal de ionização Electrospray
“ESI” de alta performance, com focalização térmica do spray e ajuste de temperatura da cortina de gás
para maximizar a dessolvatação das gotas garantindo melhora na robustez e sensibilidade do sistema. O
sistema também deverá acompanhar uma fonte tipo MULTIMODE com ionização por ESI e ionização
química a pressão atmosférica (APCI) que deverá operar de forma simultânea, para que não haja perda
de íons na fonte.
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SOFTWARE DE PROCESSAMENTO DE DADOS - Características:
• Controlar todas as funções dos modos scan mencionados acima;
• Controlar o sistema de dados do caminho óptico, interface eletrônica e fornecedores de
gás para o espectrômetro de massas e fontes de ionização;
• A tabela de íons para MRM permite associar nomes dos compostos aos íons e aos
padrões internos. A tabela de íons para MRM deverá permitir que parâmetros tais como
"dwell time", voltagem do fragmentador, EMV, e energia de colisão possam ser
especificados por íon.
• Capacidade de pesquisar e gerar uma biblioteca (pesquisa baseada em espectros de
massas e UV a partir de diferentes voltagens de fragmentação e polaridades);
• Operar um método de screening para pesticidas com biblioteca de pesticidas contendo
espectros de MS/MS dos pesticidas;
• Operar um método de screening para drogas e medicamentos em toxicologia forense
com biblioteca de drogas ilícitas e de medicamentos contendo informação estrutural e
espectros de MS/MS das drogas e medicamentos, voltados pra a toxicologia;
• Capacidade de visualização de espectros de massas e UV;
• Capacidade de reportar e processar dados de quantificações automaticamente;
• Capacidade de transferência fácil e direta para programas Microsoft;
RESOLUÇÃO: Possibilidade de resolução de massa (FWHM) em três ajustes:
• Unitária: 0.5 amu com tune manual e 0,7amu com auto tune.
• Intermediária: 1,2 amu
• Larga: 2,5 amu
EXATIDÃO DE MASSA:
• 0,1Da na faixa de massas correspondente ao intervalo: m/z 5 - 1000
• 0,01% na faixa de massas correspondente ao intervalo: m/z 1000 - 2000
• 0,02% na faixa de massas correspondente ao intervalo: m/z 2000 - 2250
FAIXA DINÂMINA > 6.0X106 ou maior que 6 ordens de magnitude.
Recursos de "Autotune" totalmente controlados pelo Software de controle do equipamento, incluindo
otimização automática da óptica de íons e da calibração do eixo de massas, através de calibrantes
internos ao equipamento e dispensados automaticamente quando executado o “Autotune”, sem a
obrigatoriedade de uso de bombas tipo seringa externas.
Modos de aquisição: MS Scan, MS/MS product ion scan, MRM, MS/MS neutral loss/gain scan, precursor
ion Scan, e SIM. Todos os modos de aquisição devem ser programáveis no tempo tanto em termos de
polaridade (íon positivo/íon negativo) quanto no tipo de Scan.
Tempo de “Dwell” mínimo no modo MRM: 1ms
Número de transições MRM: 500 por segmento de tempo; >40000 possíveis num único método.
Número de transições MRM agendados por segmento de tempo (Scheduled MRM): Até 4000 transições
MRM podem ser agendadas por segmento de tempo baseados no tempo de retenção cromatográfico e
na janela de tempo de retenção.
Cela de colisão: Hexapolar de alta pressão e com aceleração linear. Tempo de depuração da cela de
colisão é menor que 1ms. Efeito “cross-talk” (contaminação cruzada entre transições MRM) nenhum
detectável.
Sistema de vácuo composto de pelo menos 2 bombas turbomoleculares e bomba mecânica, afim de
garantir alto-vácuo.
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2.1.7- GERADOR DE NITROGÊNIO:
Gerador de gases capaz de gerar nitrogênio high-purity 5.0¨ (99,999% de pureza) para alimentação do
espectrômetro de massas compatível com o sistema, acompanhado de um compressor de ar ultrapuro
isento de óleo com tanque também compatível com o sistema.
Kit de manutenção do Gerador, com instalação incluída do gerador de nitrogênio próximo ao
equipamento de cromatografia. Acompanha peças de reposição para o gerador de nitrogênio e ar
ultrapuro suficientes para o período de 03 anos.
2.1.8- NO-BREAK.
Potência de 10kva com processador de sinais digitais, upgrade de firmware via internet,
bypass estático, display de cristal líquido. Banco de baterias com autonomia mínima de 15
minutos.
2.2- KIT DE CONSUMÍVEIS E PEÇAS DE REPOSICÃO
2 unidades - Coluna cromatográfica de rápida resolução e alta-definição (RRHD), igual ou
similar a Eclipse Plus C18, dimensão 2.1 x 150mm x 3.5um.
4 unidades - Pré-colunas.
2 unidades - Conjunto de conectores para colunas.
25 unidades – Filtros em linhas, caso necessário, com frit de pososidade de 0,3 um, frit de
entrada de 2,0 mm ID para pressões até 1200 BAR.
60 unidades – SPE Be Online PLRP-S 15-20um 2.1x12.5mm, ou compatível com o sistema
de extração on line oferecido.
03 pares de selos do pistão para bomba de HPLC;
03 filtros de reposição para a linha de fase movel;
Kit com vinte parafusos e anilhas para conexão de tubulações do sistema de HPLC;
Um conjunto sobressalente de tubos capilares para conexão do HPLC ao espectrômetro de massas;
03 litros de óleo para a bomba de vacuo rotativa ;
01 multiplicador de eletrons detector de espectrometria de massa;
01 solucão tunning e outra para calibracão do equipamento de espectrometria de massas;
01 seringa para infusão direta de amostra;
02 agulhas para seringas próprias para o injetor automático;
01 kit de filtração de solventes contendo: suporte para filtro em aço inox, funil de vidro com
capacidade para pelo menos 300mL, prendedor de alumínio, gasket em teflon, suporte para
funil de vidro e 500 unidades de membrana com o mesmo diâmetro de suporte para filtro;
04 frascos para solventes com capacidade de 1000mL.
Quatrocentos (400) vials de vidro com capacidade de 2mL com boca larga (wide open), base
plana, acompanhados de tampa e septo, com uma das faces revestidas de teflon;
Um mil (1000) vials de vidro com capacidade de 6mL com boca larga (wide open), base plana,
acompanhados de tampa e septo, com uma das faces revestidas de teflon;
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Quatrocentos (400) inserts para vials de 2mL com capacidade de 200ƒÝL, com suporte de polipropileno
na base (formato de mola);
01 Kit para LC/MS de aplicação em Pesticida composto de:
Livraria e Banco de dados tMRM com as condições até 10 transições/componentes em MRM para
pelo menos 700 Pesticidas, Inseticidas, Herbicidas, Fungicidas, e outros compostos da classe.
Total otimização de transições em MRM para pelo menos 600 compostos.
Biblioteca de Referência de espectros de tMRM para pelo menos 230 compostos.
Métodos de Aquisição em LCMS, métodos de screening LC/MS para análises de todos os
componentes da amostra teste fornecida. Compatibilidade para UHPLC e RRLC
Guias de partida e setup de métodos, detalhes dos protocolos para instalação e familiarização. Guia
para setup de métodos de aquisição de MRM para Pesticidas que estão inclusos na amostra teste.
Mistura teste de check de pesticidas, com compostos básicos, usados para instalação e
familiarização, com concentração de 100 µg/mL em acetonitrila.
Mistura teste de calibração e confirmação, com mais de 250 pesticidas, com concentração de 100 µg/
mL em acetonitrila.
2.3- PRAZO DE ENTREGA
Prazo de entrega limite de 90 dias, após a assinatura da ordem de fornecimento.
2.4- GARANTIA E MANUTENÇÃO PREVENTIVA
Garantia de no mínimo três anos e seis meses após a entrega ou três anos a partir da finalização do
processo de instalação, o que ocorrer primeiro, pelo contratante, sem limite de visitas, e já incluídas as
despesas de viagem, peças e mão-de-obra, além dos consumíveis utilizados nos reparos, caso ocorram.
Durante a vigência da garantia, deverão ser realizados três eventos de manutenções preventivas (uma
manutenção preventiva por ano).
2.5- INSTALAÇÃO E TREINAMENTO
O fornecedor será responsável pela instalação do equipamento e pelo treinamento da equipe de
servidores.
Deverá ser incluído treinamento total de 200 horas com instrutor qualificado após a finalização da
qualificação do sistema, distribuídos conforme segue:
- Familiarização e operação básica do instrumento e do software: carga horária de 40 horas
- Operação avançada e manutenção básica: carga horária de 40 horas
- Implantação, desenvolvimento e validação de métodos de análises de resíduos de agrotóxicos, citados
na Portaria 2914/11 – MS, por LC-MSMS: carga horária: 120 horas.
2.6- ASSISTÊNCIA TÉCNICA
O fornecedor deverá dispor de equipe técnica treinada para suporte pós-venda e assistência técnica
situada na cidade de Salvador-BA.
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