Análise do sistema automatizado para coloração de Gram desenvolvido pela
Hemogram
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO
UNIFESP
Machado, A.M.O; Pereira, M.A.P; Palomo, F.S; Frigatto, E.A.M.
Resumo
A coloração de Gram é um dos mais importantes
métodos de coloração utilizados em laboratórios de
microbiologia, sendo quase sempre o primeiro passo
para a caracterização de amostras de bactérias. A
automação deste sistema tem como objetivo a
otimização do processo utilizando reagentes
suficientes para corar cada lâmina, sem desperdício, e
sem contaminação ambiental,
proporcionando
melhores condições de segurança, reduzindo o esforço
ou a interferência humana, sua autonomia é de 60
lâminas por hora.
Foi realizado o preparo de lâminas em duplicatas (300
amostras) contendo cepas ATCC e diversos tipos de
amostras biológicas, com e sem flora bacteriana. As
lâminas foram submetidas à coloração pelo método
automatizado SlideInk Gram - Hemogram e pelo
método manual de coloração de Gram, sendo este
usado como técnica padrão para a correlação das
lâminas. As lâminas foram analisadas por dois
técnicos, considerando flora bacteriana, formação de
precipitado, tempo e gasto de reagentes. Os resultados
foram comparados.
Houve concordância das amostras contendo Bacilos
Gram Negativos,Cocobacilos Gram Negativos, Cocos
Gram Positivos agrupados e leveduras em 100%; 90%
dos Bacilos Gram Positivos; 68% dos Cocos Gram
Positivos aos Pares e em Cadeia.
A técnica
automatizada obteve melhores resultado em relação a
formação de precipitado nas lâminas, menor gasto de
reagentes e otimização do tempo. A técnica de Gram
deve ser muito bem avaliada e executada dada sua
importância clínica uma vez que muitas das bactérias
associadas a infecções são prontamente observadas e
caracterizadas como Gram-positivas ou Gramnegativas. Essa informação permite ao clínico começar
o tratamento empírico e monitorar a infecção até que
dados de cultura estejam disponíveis. A automação
desta técnica trará também para o Laboratório de
Microbiologia padronização, precisão e menor emissão
de resíduos.
Nota: Este artigo encontra-se publicado na integra na
Revista NewsLab, Edição 102, novembro de 2010
120
100
80
60
40
20
0
Porce ntage m de Ade quação nas Me todologias:
Manual e Automatiz ada
B acilo Co co bacilo
Diplo co co
Co co Gram
Co co Gram B acilo Levedura
Gram
Gram
Gram P o sitivo P o sitivo Gram
Negativo NegativoNegativo A grupadoem CadeiaP o sitivo
Coloração M anual
Coloração Automatizada
Analysis of the Automated System for Gram Stain Developed by Hemogram
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO
UNIFESP
Machado, A.M.O; Pereira, M.A.P; Palomo, F.S; Frigatto, E.A.M.
Abstract
The Gram stain is one o the most important staining
methods used in microbiology laboratories, being
almost always the first step for the characterization o
samples of bacteria. The automation of this system
aims to optimize the process using sufficient reagents
to stain each glass microscope slide, with no waste and
no environmental contamination, providing better
security and reducing the effort or human interference.
Their autonomy is 60 slides per hour. Duplicated slides
were prepared of 300 samples, containing various
types of biological samples, with an without bacterial
flora, and ATCC strains .The microscope slides were
stained using the automated method SlideInk Gram Hemogram and the manual method of Gram stain. The
manual method was used as a standard technique for
the correlation of the results. The slides were analyzed
by two technicians, considering bacterial flora,
precipitate, time and expense of reagents. The results
were compared. There was agreement on of the
samples containing Gram Negative Bacilli,
Coccobacilli Gram Negative, Gram Positive Cocci
Grouped and Yeasts in 100%, 90% of Gram Positive
Bacilli, 68% Gram Positive Cocci in Pairs and Chain.
The automated technique showed the best results for
the formation of precipitate on the slides, lower cost of
reagents and optimization time. Gram's technique must
be carefully evaluated and implemented, given its
clinical importance, since many of the bacteria
associated with infections are readily observed and
characterized as Gram-positive or gram negative
bacteria. This information allows the clinician to start
empirical treatment and monitor the infection until the
culture results become available. The automation of
this technique will also bring to the microbiology
laboratory standardization, accuracy and lower
emissions of waste.
Note: The full Article was published in journal NewsLab, ,
edition 102, november ,2010
150
Percentage of Adequacy in Methodologies
Manual and Automated
:
100
50
0
Bacilli Cocbacili Diplococo Coco GramCoco Gram Bacilli Yeasts
Gram
Gram
Gram Positive Positive
Gram
Negative Negative Negative grouped in Chain Staining Positive
Staining Manual
Staining Automated
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