Valor Total = 0,05 UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO Nota: INSTITUTO DE CIÊNCIAS EXATAS E BIOLÓGICAS DEPARTAMENTO DE QUÍMICA 5ª mini avaliação de QUI-346 - 13/04/15 - Prof. Mauricio X. Coutrim nome: __________GABARITO______________________ assinatura ________________________ A riboflavina (vitamina B2; C17H20N4O6, 376,36 g.mol-1, fórmula estrutural ao lado) é uma espécie que fluoresce quando excitada com energia radiante ( = 440 nm) emitindo uma luz verdeamarelada ( = 530 nm).1 Utilizando essa propriedade, a concentração de riboflavina foi determinada em um medicamento de vitamina B2 utilizando um espectrofluorímetro, em cujo equipamento o detector estava situado a 90o em relação à fonte. No procedimento, 1 mL da amostra foi transferido para um balão volumétrico de 100 mL e o volume aferido com água destilada. Na tabela ao lado são apresentadas as intensidades de fluorescência dessa solução e de uma série de soluções padrão de riboflavina, bem como suas respectivas concentrações. 1 - Farmacopéia Brasileira, 3a ed, Organização Andrei Editora S. A., São Paulo, pp. 694-696, 1977. Com base nessas informações responda as questões abaixo. Concentração (mol/L) 1,0 . 10-6 2,0 . 10-6 4,0 . 10-6 8,0 . 10-6 1,60 . 10-5 3,20 . 10-5 6,40 . 10-5 Sol. da Amostra Intensidade de Fluorescência 4,0 8,0 17,0 31,0 68,0 125,0 270,0 55,8 a. Qual a concentração de riboflavina da solução de amostra lida no espectrofluorímetro, em mg.L-1? Eq. da curva analítica: Y = y = 4186215,95.X - 1,2356; MM Riboflavina = 376,36 g/mol Conc. de riboflavina na solução da amostra = (55,8+1,2356)/4186215,95 = 1,36.10-5 mol/L Conc Riboflavina solução amostra = 1,36.10-5 x 376,36 x 1000 = 5,128 mg.L-1. b. Qual o percentual de riboflavina encontrada no medicamento avaliado em relação ao informado pelo fabricante, sabendo que no rótulo indicava que cada dose de 1 mL do medicamento continha 500 g de riboflavina? Conc Riboflavina encontrada no medicamento líquido foi 512,8 (5,128 mg.L-1 x 100 mL / 1 mL) mg.L-1. Dessa forma, 1 mL de medicamento deverá apresentar 512,8 (512,8 mg x 1 mL / 1000 mL) g de riboflavina. Então, conclui-se que foi encontrado na análise 102,6% (512,8 x 100 / 500) do valor esperado. c. Qual o deslocamento de Stokes dessa emissão fluorescente? O deslocamento de Stokes é a diferença entre a energia de excitação e de emissão da espécie fluorescente e, nesse caso, ele é igual a 90 nm (440 nm – 530 nm). d. Por que essa espécie apresenta deslocamento de Stokes? Muitas espécies que fluorescem emitem uma energia radiante menor do que a aquela que foi absorvida, isso porque, parte da energia absorvida é perdida principalmente em movimentos de vibração da molécula. Quanto mais rígida for a molécula fluorescente menor será o deslocamento de Stokes, a ponto de chegar a zero naquelas moléculas que apresentam fluorescência ressonante. e. Por que o detector do espectrofluorímetro estava situado a 90o em relação à fonte? As espécies fluorescentes absorvem a energia radiante de uma fonte de energia que incide em suas moléculas. Um detector colocado na mesma direção que a fonte irá captar a energia que as moléculas não absorveram (energia transmitida). Porém, a energia emitida pelas moléculas também ocorrerá nessa direção. Para que o detector não receba a energia transmitida pelas moléculas mas, apenas a energia emitida por elas, ele deve ser colocado à 90o da fonte.