Aulas práticas – Ensinos Fundamental II e Médio – Citologia – Ciclose MOVIMENTOS CITOPLASMÁTICOS: CICLOSE EM CÉLULAS VEGETAIS Objetivos: Observar a ciclose em células vegetais Duração: Aproximadamente 20 min. Local: Laboratório adequado. Material: Lâminas histológicas, lamínulas, folhas do ápice da planta de aquário Elodea, éter, água de aquário, substância ácida, substância básica, placa de Petri, gelo, bico de bunsen e microscópio de luz. Número de participantes: No máximo 30. Procedimentos: Utilizar três lâminas e intitulá-las de A, B e C. Em uma das extremidades da lâmina A depositar duas gotas da água de aquário e na outra extremidade duas gotas de éter. Em ambas as extremidades contendo os líquidos, acrescentar as folhas do ápice da Elodea e cobrir com a lamínula. Observar ao microscópio de luz sob o aumento de 400X. Repetir o procedimento com a lâmina B, porém utilizando desta vez a substância ácida e a substância básica. Acrescentar as folhas do ápice de Elodea, cobrir com lamínula e observar ao microscópio de luz sob o aumento de 400X. N lâmina C, que deverá ser previamente resfriada em uma placa de Petri contendo gelo, acrescentar gotas de água de aquário e folhas do ápice de Elodea, ambas resfriadas. Observar ao microscópio de luz. Em seguida, fornecer luminosidade total (diafragma e fonte luminosa) no microscópio e observar. Posteriormente, retirar a lâmina do microscópio e aquecer suavemente sobre o bico de bunsen, Observar novamente ao microscópio de luz. Todas as observações ao microscópio deverão ser realizadas sob um aumento de 400X. Resultados esperados: Na Lâmina A a folha de Elodea em contato com a água de aquário deverá apresentar movimento de ciclose esperado. Diversos cloroplastos farão ciclos unidirecionais ao redor da área vacuolar. Na folha mergulhada em éter, não ocorrerá ciclose e as membranas dos cloroplastos poderão sofrer lise, espalhando seus conteúdos pelo citoplasma da célula. Na lâmina B a folha de Elodea mergulhada na solução deverá apresentar o movimento de ciclose, porém lento, evidenciado pelos cloroplastos das células. Já na folha mergulhada na solução ácida não será evidenciado ciclose e alguns cloroplastos poderão apresentar suas estruturas modificadas. Na lâmina C, a primeira observação, da folha resfriada, deverá ser de uma ciclose muito lenta e a aparência das células era de maior volume celular.Com a estimulação luminosa total, observar-se-á um aumento da velocidade da ciclose. Já com a exposição ao calor fornecido pelo bico de bunsen, observar-se-á que, de início a ciclose será estimulada, porém após certo tempo de observação esse movimento citoplasmático será interrompido. Discussões esperadas: De acordo com a literatura, os movimentos citoplasmáticos são realizados pela polimerização e despolimerização de proteínas, como actina e miosina. Na extremidade da lâmina A contendo água de aquário a ciclose ocorrerá normalmente de acordo com os relatos da literatura. Já na outra extremidade, contendo éter, a amostra sofrerá paralisação devido ao caráter anestésico que esta substância possui, paralisando, portanto, a atividade do citoesqueleto podendo até quebrar suas ligações. Na extremidade da lâmina B contendo a solução ácida, os cloroplastos ficarão soltos, pois as ligações protéicas do complexo actina-miosina do Instituto Aprenda.bio 1 Aulas práticas – Ensinos Fundamental II e Médio – Citologia – Ciclose citoesqueleto serão rompidas (ocorrerá a desnaturação destas proteínas) devido à forte afinidade de ligação que as ligações protéicas – que são básicas – têm com os ácidos. Já na outra extremidade da lâmina B, a solução básica não só alterará o pH celular, mas como também acabará por retardar o movimento, devido sua alta concentração da solução. Isto se deve pelo fato das proteínas atuarem em um meio de pH, como diz a literatura, ótimo, o que não ocorrerá neste caso. Em seu resfriamento prévio, o preparado da lâmina C sofrerá um retardamento em seu metabolismo celular, assim como a interação de suas proteínas, que ao serem estimulados ao calor voltam a terem seu metabolismo regularizado, evidenciando, portanto, que as proteínas atuam em uma temperatura ótimo, condizendo com a literatura. Entretanto, se esse calor for fornecido em excesso como na presença da chama do bico de bunsen, as ligações protéicas do citoesqueleto acabam se desnaturando. Fato que ocorrerá neste experimento com a lâmina C, e mais uma vez o resultado será conivente com o que diz a literatura científica, onde as proteínas devem atuar em uma determinada temperatura ótima para seu funcionamento. E por fim, com o aumento de estímulo luminoso feito com o auxílio do microscópio, será possível perceber um aumento da velocidade no movimento citoplasmático, fato que, segundo a literatura, explica-se pela excitação elétrica dos feixes de luz ao atingirem os cloroplastos, os quais são facilmente excitáveis, pela presença de pigmentos sensíveis aos feixes de luz – a clorofila. Instituto Aprenda.bio 2