19/08/2014 Obtenção de Energia Ciclo de Krebs, Cadeia de Transporte de Elétrons e Fosforilação Oxidativa • Para que um organismo possa realizar suas funções básicas: – Obtenção de nutrientes. – Crescimento. – Multiplicação. Prof. Dr. Bruno Lazzari de Lima Obtenção de Energia – Movimentação. Obtenção de Energia • A maior parte da energia utilizada está contida em moléculas e adenosina trifosfato (ATP). • Assim o estudo dos mecanismos de obtenção de energia consiste na análise dos processos pelos quais as células sintetizam ATP. • Tais processos dependem do habitat da espécie. Obtenção de energia por oxidação • Oxidação de Carboidratos. – Glicose. – Principal via da maioria dos organismos (unicelulares e pluricelulares). • Oxidação de Aminoácidos. • Oxidação de Lipídios. • Oxidação de hidrocarbonetos. Oxidação de Carboidratos • Oxidação Aeróbia. – Respiração Aeróbia. • Pode ser dividida em três etapas. – Conversão da glicose à piruvato. – Conversão de piruvato à acetil-CoA. – Oxidação de acetil-CoA pelo ciclo de Krebs (ciclo do ácido cítrico). 1 19/08/2014 Ciclo de Krebs Ciclo de Krebs • Via que promove a oxidação completa dos átomos de carbono presentes na acetil-CoA. • O resultado final é a formação de CO2 a partir dos átomos de carbono presentes na glicose. • Produção de um grande número de compostos utilizados como precursores para biossíntese. Acetil-CoA + GDP + Pi + 3 NAD+ + FAD = 2 CO2 + GTP + 3 NADH + FADH2 + Coenzima A + 2 H+ Ciclo de Krebs • A energia obtida a partir da oxidação do Acetil-CoA é conservada na forma de coenzimas reduzidas. – NADH e FADH2. Ciclo de Krebs • É realizado por um complexo localizado na matriz mitocondrial. multienzimático – 8 reações. • Os compostos adequadas. devem estar em concentrações • Primeira reação: – Serão utilizados posteriormente como doadores de elétrons na cadeia respiratória. Ciclo de Krebs – Condensação do oxalacetato (OAA) com acetil-CoA. – Formação de Ácido Cítrico. – OAA – principal composto limitante. Regulação do Ciclo de Krebs • Todos os compostos intermediários podem ser usados em outros processos metabólicos. • 4 reações resultam na redução de coenzimas. • A cada volta: – – – – – 2 CO2. H2O. 3 NADH + H. FADH2. GTP 2 19/08/2014 Regulação do Ciclo de Krebs • Complexo piruvato desidrogenase. – Produção de acetil-CoA. – É inibida pelos próprios produtos (controle alostérico). • Acetil-CoA. • NADH. • ATP – Estimulação • AMP. • NAD+. Regulação do Ciclo de Krebs • Enzima citrato sintetase: – Inibida pelos produtos. • Citrato. • NADH • Succinil-CoA – Estimulada pelos Oxalacetato. • Isocitrato desidrogenase desidrogenase. e α-cetoglutarato – Inibida pelo ATP. – Estimulada pelo ADP. • Concentração dos metabólicos intermediários. Caráter Anfibólico Caráter Anfibólico • Atua no catabolismo, oxidando o acetil-CoA. – Comum na oxidação: • Glicídeos. • Aminoácidos. • Ácidos graxos. • Pode atuar em processos anabólicos. – Precursores de aminoácidos. – Síntese de ácidos graxos. – Oxaloacetato – Precursor de glicose (gliconeogênese). Balanço energético • Para cada NADH é possível obter 3 ATPs. • Para cada FADH2 são obtidos 2 ATPs. – 3 NADH x 3 ATP = 9 ATPs. – 1FADH2 x 2 ATP = 2 ATPs. – 1GTP = 1 ATP – Total = 12 ATPs. Cadeia Respiratória • Consiste na utilização coenzimas reduzidas prótons e utilizar promover a síntese oxidativa). da energia contida nas em um gradiente de este gradiente para de ATP (fosforilação – Vias catabólicas de glicídios, ácidos graxos e aminoácidos. – ATP sintetase. • 2 acetil CoA = 24 ATPs. 3 19/08/2014 ATP Cadeia Respiratória • A energia utilizada para a geração do gradiente de prótons, provem do transporte de elétrons entre moléculas receptoras e doadoras. – Reações de Oxido-Redução. • O processo envolve a redução do O2 em H2O. • Enzimas localizadas na membrana interna da mitocôndria. Cadeia Respiratória NADH – Concentra elétrons de muitos substratos. Complexo I = Flavinamononucleotídeo (FMN). Coenzima Q. Cadeia Respiratória Complexo III = Transfere elétrons da coenzima Q para o citocromo c. Cadeia Respiratória Complexo II = Succinato desidrogenase. Parte integrante do ciclo de Krebs. Cadeia Respiratória Complexo IV = Transfere elétrons para o oxigênio. 4 19/08/2014 Cadeia Respiratória Desacopladores e Inibidores da Cadeia Respiratória • São substâncias tóxicas. • DESACOPLADORES – Permitem o transporte de elétrons, porém, desacoplam a transmissão de energia para a fosforilação oxidativa. – Estimulam a atividade da cadeia respiratória. • Aumentam o consumo de oxigênio. – Substâncias lipossolúveis. Fosforilação Oxidativa • • • • 2,4-dinitrofenol. CCCP (carbonilcianetom-clorofenil-hidrazona. Termogenina. Ácido Pícrico. – Substâncias inonôforas. Desacopladores e Inibidores da Cadeia Respiratória • Inibidores. – Impedem a fosforilação oxidativa e detêm a cadeia respiratória. – Alteração dos compostos intermediários. – Não existe consumo de oxigênio. – Exemplos. • • • • Cianeto. Monóxido de Carbono. Rotenona. Oligomicina. 5