CROMOSSOMOPATIAS
Dra.Heirie Mendez
Histórico da Citogenética
• Pré-década de 50: estudos em meiose (48 ou 46
cromossomos ?)
• Década de 50 : Hsu descobre choque hipotônico
e uso da colchicina; 46 cromossomos, síndromes
de Down, Klinefelter e Turner
• Década de 60: Lejeune descreve o “cri-du-chat”;
uso da fitohemaglutinina em sangue periférico;
47,XYY em homem agressivo; instabilidade
cromossômica na síndrome de Bloom e anemia
de Fanconi
Histórico da Citogenética
• Década de 70: Casperson usa quinacrina e os
cromossomos mostram faixas fluorescentes
(bandas Q); Drets e Shaw usam soluções alcalinas
e Giemsa: faixas claras e escuras nos
cromossomos (bandas G)
• Década de 80: Conceitos: aneuploidia, deleção,
microdeleção, translocação, inversão, inserção e
mosaico
• Década de 90: Fluorescence in situ hybridization
(FISH)
Indicações para cariótipo:
•
•
•
•
•
Mulheres grávidas com >35 anos;
Crianças polimalformadas;
Crianças com retardo mental;
Pessoas com problemas reprodutivos;
Diagnóstico e prognóstico no câncer;
Exame de rotina
Material utilizado:
•
•
•
•
•
Linfócitos do sangue ou medula óssea;
Fragmentos de diversos tecidos;
Vilosidades coriônicas;
Líquido amniótico;
Efusões ( ascite, higroma, etc)
Condição essencial: células vivas em
divisão
Técnica: Sangue e Medula
• Sangue ou medula óssea coletados com heparina
sódica;
• Colocar em meio de cultura (RPMI 1640, TC 199), com
soro fetal bovino à 20% e fitohemaglutinina (sangue);
• Por 24/48hs (medula), 72hs (sangue) em estufa à 37 ºC ;
• Bloquear a divisão celular em metáfase por colchicina;
• Choque hipotônico (KCl ou solução similar);
• Fixar em solução de Carnoy (metanol : ác. acético);
• Preparar lâminas; produzir bandas, microscópio;
• Fotografar ou capturar imagem para computador.
metacêntrico
submetacêntrico
acrocêntrico
Anormais nos nascidos vivos:
23% dos cariótipos em sangue
• Trissomias autossômicas
• Alt.estruturais autossômicas
• Alt.em cromossomos sexuais
72%
10%
18%
• Suspeita de Turner confirmada em
• Alt.em casais com abortos confirmada em
21%
6%
Nº de indivíduos examinados: 1376
1569 indivíduos cariotipados
• Dentre eles, 370 (24%) por retardo mental como
motivo principal ou retardo do desenvolvimento
neuropsicomotor ou ambos, acompanhado de
malformações somáticas ou não.
• Destes, 184 (50%) apresentaram anomalia
citogenética.
Anomalias Citogenéticas
RDNPM isolado
c/malformações
suspeita de S.Down
T
A
%
41
54
149
10
28
126
32
52
85
RDNPM isolado : Cariótipos
46,XX
46,XY
Aneuploidias
[47,XXY e mosaicos ; 49,XXXXY ;
45,X/46,XX/47,XXX]
Alt.estruturais
[translocações, deleções, duplicações, inversões]
TOTAL
N
16
15
4
6
41
RDNPM: Causas
247 crianças com menos de 5 anos avaliadas
em um centro universitário :
%
• Complicações perinatais
21
• Disgenesia cerebral
18
• Anomalias cromossômicas
9
• Síndromes dismórficas e neurocutâneas 6
• Doenças metabólicas e hipotireoidismo
8
• Infecção intrauterina
2
• Desconhecida
36
RDNPM: Avaliação
•
•
•
•
•
•
História familiar
Observação do comportamento
Avaliação citogenética e molecular para FraXA
Ressonância magnética
Avaliação oftalmológica
Avaliação audiológica
RDNPM e malformações:
cariótipos
46,XY
46,XX
Aneuploidias
[+18 ; +13 ; +9 ; +mar e mosaicos]
Alt.estruturais
[deleções, duplicações, cromossomo em anel]
TOTAL
N
15
11
14
14
54
S. Down: Cariótipos
46,XX
46,XY
47,XY,+21
47,XX,+21
Mosaicos
Alt.estruturais
[t(14;21) ; t(13;21) ; t(21;22) ; t(21;21) e outras]
TOTAL
149
N
16
7
64
46
10
6
Anomalias Citogenéticas
RM isolado
Suspeita de FRAXA
homens
alt.estruturais
mulheres
T
A
%
7
2
23
82
9
3
7
11
34
26
Retardo mental
• Retardo mental ocorre em cerca de 3% da
população de regiões industrialisadas e tem
causa genética em 30%.
• Retardo mental ligado ao X é uma condição
extremamente heterogênea e e acontece em
15 à 25% de todos os pacientes com RM.
• Existem mais de 100 genes no cromossomo
X que provocam RM no homem.
Síndrome do X frágil
• É a causa hereditária mais comum de RM .
• Ocorre em 1/4000 homens e 1/6000 mulheres.
• Deve-se à expansão instável de uma região
de repetição de trinucleotídeos (CGG)
próximo ao gene FMR1, no local Xq27.3.
• Mais de 200 repetições silencia o gene e
impede a formação da proteina FMRP.
• Esta proteina controlaria os RNA
mensageiros nos neurônios.
Síndrome do X frágil
• Entre 50 e 200 repetições (pré-mutação) não
provocam RM mas ocorre em associacão
com alterações detectáveis mais tarde: falha
ovariana precoce e um quadro neurológico
de tremor/ataxia (FXTAS).
Caso clínico: RDNPM
• Paciente feminina, segunda filha de pais não
consangüíneos, ambos com 30 anos.
• Parto normal, após 39 semanas de gestação. RN
com 2700g (<3%), 47cm de estatura (10%), Apgar
7 no 1º e 9 no 5º minuto.
• Foi notado pé eqüino, estrabismo convergente à
E e dificuldade de sucção. No 2º mes foi
diagnosticada e tratada cirurgicamente hérnia
diafragmática.
• Encaminhada para avaliação genética no 6º mes
por RDNPM.
Ao exame físico observou-se:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
olhos amendoados, epicanto bilateral,
fenda palpebral estreitada e com inclinação mongólica,
hipoplasia do osso nasal, narinas antevertidas,
palato alto, boca em “V” invertido,
discreta micrognatia,
implantação baixa de orelhas,
proeminência ocipital, dolicocefalia,
sobreposição dos dedos em flexão,
mancha hipocrômica no flanco D, avançando em
direção à cicatriz umbelical.
Avaliação Citogenética
• Cariótipo no sangue periférico (bandas G) :
• 47,XX,+mar (havia um cromossomo a mais, menor
que o 21, não identificado).
• O pai tinha cariótipo 46,XY (normal).
• A mãe era 46,XX,t(15;16)(q15;q24) (portadora de
translocação equilibrada entre o braço longo do 15
e o braço longo do 16). Portanto :
• A menina tinha trissomia parcial do 15.
Avaliação familiar
• A história familiar não revela outros afetados. A
irmã da probanda é portadora equilibrada como
a mãe. A única tia materna tem cariótipo normal.
Os avós não quizeram ser examinados.
• O risco de recorrência é alto para a irmandade.
• A paciente tem 21 anos atualmente e está bem
inserida na sociedade apesar das limitações.
• A irmã pretende engravidar e fará
aconselhamento genético em data próxima.
Caso clínico: suspeita de FraXA
• Dois irmãos, um com 7 e outro com 3 anos.
• Consultaram por RDNPM, principalmente retardo da
fala. Sem outros casos ou consangüinidade familiar.
• Estatura, peso e PC normais. Hipertelorismo ocular,
fendas palpebrais estreitas e antimongólicas, face
triangular, testa curta, nariz alargado na ponta,
orelhas grandes e carnudas, micrognatia, lábios
espessos, clinodactilia de 5º dedo com prega única
de flexão bilateral, polegares alargados, nevos,
articulações frouxas, genitália normal.
Continuação do caso
• Família abandonou a investigação.
• Aos 14 e 9 anos voltam à consulta : similares entre si,
loiros, com orelhas de abano e aparente microcefalia,
alegres, dóceis, afetuosos e sem sinais de puberdade.
• O cariótipo no sangue periférico foi negativo para FraXA,
mas mostrou um cromossomo 14 com um braço curto
aumentado e um cromossomo 18 com o braço longo
aumentado. A alteração cromossômica estrutural
complexa foi esclarecida pelo cariótipo dos genitores.
Avaliação Citogenética
• O cariótipo do pai foi 46,XY, masculino normal.
• O cariótipo da mãe mostrou alteração estrutural
envolvendo os cromossomos 9, 14 e 18.
• Os irmãos receberam dois cromossomos derivados :
• der(9) contendo parte do braço curto do 9, parte do
braço longo do 18 e quase todo o braço longo do 14;
• der(18) contendo o que faltava do 18 e o que faltava do
braço curto do 9;
• Como receberam dois cromossomos 9 normais ambos
tem trissomia do braço curto do 9.
Acompanhamento
• Aos 19 anos o mais velho era ansioso, com dificuldade de
comunicação e crises de raiva. Continuamente ouvindo
rádio ou vendo TV, frequentando escola especial. Pouco
interesse sexual. Postura encurvada, movimentos bruscos,
alto (184 cm), com acne, pênis pequeno, testículos
normais.
• Seu irmão, aos 15 anos, tinha menos problemas sociais.
Tímido, mas relaciona-se bem com adultos e jovens, em
escola normal (mas não ultrapassa a 3ª série do 1º ciclo).
Altura de 160cm, pênis pequeno, testículos retráteis. Não
tinha postura ou deambulação similar ao irmão.Orelhas de
abano.
Dra.Heirie Mendez
Genética Clínica
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