GENÉTICA MOLECULAR Tanto em organismos procariontes como em organismos eucariontes, qualquer classe de moléculas deve preencher certos requisitos básicos para servir como material genético. Capacidade de armazenar informação genética sob uma forma estável e de transferir essa informação a todas partes da célula. Capacidade de duplicar com precisão a informação e transferí-la às outras células durante a divisão celular. Capacidade de sofrer variações, sob a forma de mutações. Entre todas as moléculas existentes : DNA, RNA e PROTEÍNAS preenchem todos os requisitos. Atualmente não existe a menor dúvida que o DNA é o material genético para a grande maioria dos organismos vivos. Experimento de Griffth Demonstrou a transformação bacteriana Experimento de Avery, Macleod e McCarty: comprovou ser o DNA o material genético primário Oswald Avery (1877 – 1955): Colin Macleod (1909 – 1972) Maclyn McCarty (n.1911) ESTRURURA DOS ÁCIDOS NUCLÉICOS DNA constituído de nucleotídeos Cada nucleotídeo contém : 01 ácido fosfórico 01 açúcar de cinco carbonos 01 das quatro bases nitrogenadas BASES NITROGENADAS: Adenina (A) Grupo das purinas Guanina (G) Timina (T) Grupo das pirimidinas Citosina (C) Segundo o modelo formulado por Watson e Crick, a molécula de DNA é constituída por duas fitas enroladas para a direita formando a chamada hélice dupla. As fitas são ligadas por pontes de hidrogênio entre os pareamentos de bases. Devido ao grande número de pontes existentes, o DNA é uma molécula estável. PAREAMENTO DAS BASES NITROGENADAS A=T C=G A sequência de bases na fita oposta é predeterminada e complementar à primeira fita. Ex: RNA AGCATT TCGTAA Bastante similar ao DNA ocorrendo diferenças em três pontos 1 – o açúcar é a ribose 2 – em vez de timina, aparece a uracila (U) 3 – apresenta uma única fita RNA Mensageiro (mRNA) Responsável pelo transporte da informação genética contida no núcleo até o citoplasma, onde ocorre a síntese proteica. RNA Ribossômico (rRNA) Seu papel está associado com o fenômeno da tradução. É o tipo de RNA mais encontrado na célula. RNA Transportador (tRNA) Servem como receptores e transportadores dos aminoácidos tendo papel fundamental na síntese proteica. ARRANJAMENTO DO MATERIAL GENÉTICO EM ORGANISMOS SUPERIORES Procariontes Cromossomo é constituído apenas pelo DNA que se encontra no nucleoplasma da célula. Eucariontes DNA encontra-se associado com outras substâncias formando uma estrutura fibrosa conhecida como cromatina. Cada cromossomo de qualquer organismo eucarionte contém uma única molécula contínua, linear e não ramificada de DNA. FUNÇÕES DO MATERIAL GENÉTICO REPLICAÇÃO DNA TRANSCRIÇÃO RNA TRADUÇÃO PROTEÍNA REPLICAÇÃO OU DUPLICAÇÃO DE DNA As pontes de hidrogênio se rompem permitindo a separação das fitas complementares. Cada fita simples serve de molde para uma nova fita complementar sendo que a nova hélice dupla, apresenta uma fita velha e uma fita nova. Esse tipo de replicação é chamada de semiconservativa. A enzima responsável pela síntese de DNA : DNA polimerase REPLICAÇÃO SEMICONSERVATIVA TRANSCRIÇÃO O DNA se encontra no núcleo da célula enquanto a síntese protéica se dá no citoplasma. A transcrição é o processo onde o DNA transfere suas informações para as moléculas de RNA, as quais atravessam a membrana nuclear para comandar a síntese protéica no citoplasma. A fita transcrita recebe o nome de fita sense. Em eucariotos, o DNA possui segmentos que codificam aminoácidos (exons) e segmentos que não codificam aminoácidos (íntrons). O mRNA possui apenas exons, enquanto que os íntrons são cortados por enzimas específicas chamadas endonucleases. TRADUÇÃO Seria a síntese de proteína Cada proteína possui pelo menos vinte aminoácidos É um processo bastante complexo envolvendo centenas de macromoléculas como enzimas, mRNA, rRNA, tRNA, etc... CÓDIGO GENÉTICO Código Genético : Uma combinação de três nucleotídeos que codifica um aminoácido. Também conhecido como códon . Proteína : Arranjos lineares de aminoácidos. Ex: AAA códon para o aminoácido lisina PROPRIEDADES DO CÓDIGO GENÉTICO O código genético tem ponto inicial A leitura da fita de mRNA sempre começa por um ponto determinado. Esse ponto é o códon AUG que corresponde ao aminoácido metionina. O código não é sobreposto Ex: ACUGCA Não sobreposto: ACU GCA treonina alanina O código é degenerado Mais de um códon codifica o mesmo aminoácido. O código não é ambíguo Ele não codifica dois ou mais aminoácidos, ou seja, cada códon codifica apenas um aminoácido. O código genético é universal O código genético tem ponto final O término da fita de mRNA é determinada por códons de terminação Códons de terminação : UAA UAG UGA MUTAÇÕES DO MATERIAL GENÉTICO DEFINIÇÃO : Mudanças herdáveis que representam as bases genéticas da variação. MUTAÇÕES : Afetam as sequências de bases nitrogenadas do DNA. Modificando a cadeia polipeptídica a ser sintetizada CAUSAS QUE PROVOCAM UMA MUTAÇÃO A) SUBSTITUIÇÃO DE BASES : Alteração em um único códon no DNA Mutação silenciosa : A substituição de bases não altera a sequência de aminoácidos na cadeia polipeptídica. Ex: AGC : Fita sense de DNA UCG : serina MUTAÇÃO AGG : fita sense mutada UCC : serina Mutação de sentido errado : A substituição de uma base altera um aminoácido da cadeia polipeptídica. Ex: AGC : Fita sense de DNA UCG : serina MUTAÇÃO AAC : fita sense mutada UUG : Leucina Mutação sem sentido : Quando a substituição de uma base no DNA provoca o aparecimento de um códon de terminação no mRNA impedindo a síntese completa dessa cadeia polipeptídica. Ex: AGC : Fita sense de DNA UCG : serina MUTAÇÃO ATC : fita sense mutada UAG : códon de terminação B) ADIÇÃO OU DELEÇÃO DE BASES : A retirada ou a inclusão de uma única base provoca alterações na sequência de DNA a partir do ponto em que ocorreu a deleção ou adição. A frequência de mutação muito baixa Replicação do DNA é muito precisa