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Química Analítica Qualitativa Experimental - Profa Mara Braibante
CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA: É um método utilizado para purificação, separação, identificação e quantificação
de substâncias orgânicas e Inorgânicas.
O termo adsorção é utilizado para a retenção seletiva de substâncias sobre a superfície de sólidos
finamente divididos por efeitos de forças físico-químicas. A cromatografia (do grego chroma = cor,
graphos = escrita ) é um procedimento que permite separar os componentes de uma mistura em
movimento por adsorção ou migração diferencial destes componentes sobre uma superfície estacionária.
Durante a passagem da fase móvel pela fase estacionária, os componentes da mistura são
distribuídos entre as duas fases, de tal forma que um dos componentes ficará mais retido na fase
estacionária e o outro na fase móvel (migração diferencial).
Foi atribuído ao botânico MIKHAIL TSWESTT (1906) a introdução dos termos cromatografia e
cromatograma.
Para o estudo proposto na Química Analítica Qualitativa Experimental trataremos da
CROMATOGRAFIA EM PAPEL (CP) e CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA(CCD).
TERMOS UTILIZADOS NA CP E CCD
CROMATOGRAFIA EM PAPEL (CP) (paper chromatography): separação das substâncias ou
componentes de uma mistura por migração diferencial sobre a superfície de um papel de filtro.
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA (CCD):(thyn layer chromatography)
CROMATOGRAMA:(Chromatogram): papel ou placa onde as substâncias estão distribuídas depois de
sua separação.
SUPORTE:(plate)placa de vidro, papel , plástico ou metal no qual se deposita a fase estacionária
ELUENTE:(eluent)solvente polar(ou mistura de solventes) utilizado na cromatografia em papel ou
camada delgada para desenvolver o cromatograma, (constituem a fase móvel )
APLICAÇÃO;(to apply)colocar no ponto de origem do papel ou camada delgada a mistura de cujas
substâncias se deseja separar.
DESENVOLVIMENTO CROMATOGRÁFICO: processo de separação onde a fase móvel passa através
da fase estacionária , distribuindo os componentes de uma mistura em uma superfície.
FRENTE DE SOLVENTE:(solvent front) linha frontal da fase móvel, visível durante o desenvolvimento
cromatográfico.
REVELADOR:(color reagent) agente físico como: luz U.V., luz solar, aquecimento, ou agente químico
como : vapores de iodo ou outras substâncias químicas apropriadas que permitam a visualização das
substâncias separadas por cromatografia.
RESOLUÇÃO:(resolution)é a distância mínima necessária entre duas manchas para que possam ser
distinguidas individualmente. Ë o grau de separação entre duas substâncias sobre o cromatograma . Mede
a eficiência da separação cromatográfica.
Um dos mais importantes aspectos da cromatografia é que em um dado sistema cromatográfico o
movimento (relativo ) de um composto em relação a frente do solvente é uma propriedade característica e
reprodutível. No caso da CP e CCD este movimento é expresso pelo RF: relação de fluxo (rate factor):
sendo a relação entre a distância percorrida simultaneamente da origem até o centro da mancha (ds) e o
limite do eluente(frente do solvente)(de)
Rf = ds / de
Polaridade
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CROMATOGRAFIA
MATERIAL BÁSICO PARA CP E CCD
CUBAS DE VIDRO(Câmaras) utilizadas para o desenvolvimento do cromatograma, devem ser
tampadas (tampas próprias ou vidros de relógio) para permitir uma perfeita saturação.
PAPEL DE FILTRO : Os indicados para CP são da marca Whatman nos 1 e 3 .
PLACAS CROMATOGRÁFICAS:podem ser preparadas com silica gel, alumina ou outro adsorvente
apropriado, e depositados sobre placas de vidro, metal ou material plástico.
CAPILARES: utilizados para aplicação da amostra no papel (CP) ou na placa cromatográfica (CCD).
RECIPIENTES PARA IMERSÃO: utilizado quando o cromatograma deve ser revelado pela técnica de
imersão na substância reveladora, pode ser pouco profundo mas de tamanho suficiente que permita que o
papel possa ser banhado na solução.
PULVERIZADOR OU GARRAFA DE SPRAY: utilizado quando o cromatograma deve ser revelado
pela técnica de pulverização da substância. reveladora .
LÂMPADA DE U.V.: utilizada quando a substância é visível na região do U.V.
PROCEDIMENTOS GERAIS PARA CP E CCD
1-PREPARAÇÃO DA AMOSTRA:-tanto em CP quanto em CCD as amostras são utilizadas em forma
de solução.
2-APLICAÇÃO DA AMOSTRA:-aplica-se uma gota da amostra a 2 ou 3 cm da borda do papel ou placa
cromatográfica, marcando-se com um lápis o ponto de origem, deixando-se a mancha secar.
3-SATURAÇÃO DA CUBA: coloca-se o eluente apropriado na cuba , de modo que sua altura não
ultrapasse 1 cm , a cuba deve conter um papel de filtro envolvendo as paredes internas, tampa-se
aguardando o tempo necessário para que o solvente percorra o papel ( o papel é utilizado para regular e
acelerar a saturação).
4-RESULTADOS- os resultados cromatográficos deverão ser registrados mediante os valores de RF,
guardando-se os cromatogramas quando possível através de plastificação.
BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA
1. VOGEL,A.I., „Química Analítica Qualitativa”, Ed. Mestre Jou, São Paulo, 5a ed., 1981.
2. BOBBITT, J. M.; SCHAWARTING, A.E.; GRITTER, R.J., “Introduction to Chromatography “Litton
Educational Publishing, Inc. 1968.
3. BROWNIMG, D.R., “Chromatography”, McGraw-Hill, England, 1969.
4. ABBOTT, D.; ANDREWS, R.S., “Introducción a la cromatografia”, Ed. Alhambra, S.A., Madrid 3a
ed., 1970.
5. VAITSMAN, D.S.; BITTENCOURT, O.; PINTO,A.A.; “Análise Química Qualitativa” Ed. Campus
Ltda, Rio de Janeiro, 1981.
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CROMATOGRAFIA
 CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA (CCD)
A técnica utilizada nas experiências a seguir é a técnica cromatográfica ascendente
EXPERIÊNCIA 1- SEPARAÇÃO DOS PIGMENTOS DA TINTA DE CANETA.
Material necessário:canetas hidrográficas, placas cromatográficas de silica gel, capilares,cubas de vidro
com tampa.
Eluente: álcool n-butílico 3 volumes, álcool etílico 1 volume, hidróxido de amônio 1 volume
Procedimento: Em uma placa cromatográfica, marca-se com um lápis o ponto de origem do
cromatograma, aplica-se através de capilares, separadamente uma gota de cada solução obtida e uma gota
da mistura das duas soluções, coloca-se na cuba saturada, desenvolve-se o cromatograma. Retira-se a
placa cromatográfica da cuba e marca-se a frente do solvente. Deixa-se secar e mede-se o Rf de cada
mancha observada.
 CROMATOGRAFIA EM PAPEL (CP)
EXPERIÊNCIA 2- SEPARAÇÃO DOS IONS METÁLICOS Pb2+, Ag+
Soluções necessárias: Solução aquosa molar de: Nitrato de chumbo, Nitrato de prata.
Eluente: água destilada ou desionizada.
P)rocedimento: Aplica-se uma gota de cada solução, conforme o procedimento anterior e uma gota da
mistura das duas soluções, deixa-se o cromatograma se desenvolver até que a frente do solvente atinja
quase o final do papel, marca-se a frente do solvente e seca-se cuidadosamente o papel.
Revelação: O papel seco é introduzido em uma solução 0,25 M de K2CrO4, podendo-se observar duas
cores. O excesso de cromato de potássio pode ser eliminado lavando-se com muita água. Pode-se
submeter o papel aos vapores de amoníaco, desaparecerá somente a cor do cromato de prata .
Resultado: Mede-se o Rf de cada mancha observada.
A partir dos dados de Rf obtidos responda :
a) Qual a cor de caneta possui a substância mais polar ? Como você chegou a esta conclusão?
b) Qual o Rf para a Prata?
c) Qual o Rf para o Chumbo?
d)Qual o íon mais polar o Pb2+ ou a Ag+ ? Explique.