OLIVEIRA, Greiciely André de. Efeito da proteína de superfície de pneumococo a
(PSPA) na Ação bactericida da lactoferrina sobre S. pneumoniae in vitro. (TCC).
Bragança Paulista. SP. FESB. 2012. N°43. P.
RESUMO
Streptococus pneumoniae é um patógeno causador de diversas doenças graves como
pneumonia, septicemia e meningite. A bactéria coloniza as vias respiratórias de
indivíduos sau7dáveis e geralmente é transmitida pelo contato com secreções dos
portadores. As doenças decorrem da invasão de sítios estéreis, onde o pneumococo se
multiplica causando intensa resposta inflamatória. A importância da colonização como
etapa inicial de todas as infecções pneumocócicas reforça a necessidade de se
compreender as interações entre o patógeno e a mucosa respiratória. Um importante
componente da imunidade inata nas mucosas é a lactoferrina (LF), uma proteína com
atividades bactericida e bacteriostática contra diversos microorganismos. Foi
demonstrado que o pneumococo é capaz de ligar-se á LF, e a molécula responsável por
essa interação é PSPA, uma proteína exposta que têm se mostrado imunogênica e
protetora em diversos modelos animais. Através dessa ligação, a bactéria fica
parcialmente protegida dos efeitos nocivos da LF. No entanto, PSDA apresenta
variabilidade estrutural, sendo classificada em 3 famílias e 6 clados. E o grau de
reconhecimento cruzado entre moléculas é bastante variável. O presente trabalho foi
desenvolvido com o objetivo de avaliar o grau de susceptibilidade de pneumococos de
diferentes sorotipos e clados de PSPA á ação da LF in vitro, bem como o papel da
adição de anticorpos anti-PSPA recombinastes solúveis nessa interação. Isolados de
pneumococos de clados de PSPA 1a 4 foram cultivados e incubados na presença de LF
em duas concentrações diferentes, com ou sem a adição de anticorpos anti-PspA ou
fragmentos recombinastes de PspA de clados 1 a 4. Diluições seriadas foram
plaqueadas, e as bactérias contadas após 15 horas. Foi observado que diferentes isolados
de S. pneumoniae foram sensíveis á ação lítica da LF. A adição de RPSPAS bloqueou a
lise bacteriana por LF. Enquanto anticorpos anti-PSPA ampliaram os efeitos os isolados
avaliados foram sensíveis á lactoferrina em graus variados. A adição de anticorpos antiPSPA foi capaz de aumentar a ação lítica da proteína sobre os isolados, possivelmente
por bloquear os efeitos protetores de PSPA e a adição de RPSPA foi capaz de bloquear
competitivamente a ligação da LF á bactéria, impedindo assim sua ação lítica.
Palavras - chave: Vacinas polissacarídeos: S.pneumoniae: Lactoferrina: PSPA.
ABSTRACT:
Streptococcus pneumoniae is a pathogen causing severe diseases such as pneumonia,
septicemia and meningitis. The bacterium colonizes the airways of individuals
sau7dáveis and is usually transmitted by contact with secretions of patients. The
diseases result from invasion from sterile sites, where the pneumococcus multiplies
causing intense inflammatory response. The importance of colonization as the initial
step of all pneumococcal infections reinforces the need to understand the interactions
between the pathogen and respiratory mucosa. An important component of innate
mucosal immunity is lactoferrin (LF), a protein with bacteriostatic and bactericidal
activity against many microorganisms. It was shown that the pneumococcus is able to
connect will LF, and the molecule responsible for this interaction is PSPA, a protein
exposed that have proven immunogenic and protective in several animal models.
Through this connection, the bacteria is partially protected from the harmful effects of
LF. However, PSDA has structural variability, being classified into 3 families and 6
clades. And the degree of cross-recognition between the molecules is highly variable.
The present work was to evaluate the degree of susceptibility of different pneumococcal
serotypes and clades PSPA to the action of LF in vitro, and the role of the addition of
anti-PSPA recombinastes soluble in this interaction. Pneumococcal strains of clades 4
PSPA were first cultured and incubated in the presence of LF at two different
concentrations, with or without the addition of anti-PspA or fragments of PspA clades
recombinastes of 1 to 4. Serial dilutions were plated, and the bacteria counted after 15
hours. It was observed that different isolates of S. pneumoniae were sensitive to lytic
action of LF. The addition of bacterial lysis RPSPAS blocked by LF. While anti-PSPA
amplified the effects tested isolates were sensitive to lactoferrin in varying degrees. The
addition of anti-PSPA is capable of increasing the lytic activity of the isolated protein,
possibly by blocking the protective effects of the addition of PSPA RPSPA was able to
competitively block the binding of LF to the bacteria, thereby preventing their lytic
action.
Keywords - Keywords: Vaccines polysaccharides: S.pneumoniae: Lactoferrin: PSPA.