PROBIC/FAPERGS
AVALIAÇÃO DA RESISTÊNCIA DE LEVEDURAS A FUNGICIDAS
William Gava Ulbrich, Fernando Joel Scariot, Cleonice Bremm, Sergio Echeverrigaray, Ana Paula Longaray Delamare.
Universidade de Caxias do Sul, Instituto de Biotecnologia, Laboratório de Biotecnologia Vegetal e Microbiologia Aplicada
INTRODUÇÂO
Na produção de vinhos, especialmente artesanal, a fermentação ocorre com leveduras presentes nas uvas durante a vindima ou
leveduras comerciais. O número de leveduras presente na uva depende de uma vasta gama de fatores, entre as quais, os fungicidas
aplicados.
OBJETIVO
O presente trabalho teve por objetivo avaliar a suscetibilidade de isolados de leveduras a fungicidas recomendados para o cultivo
da videira.
MATERIAIS E MÉTODOS
Determinação da concentração inibitória
Para a realização dos testes, os fungicidas (tabela 1) foram preparados nas concentrações estipuladas pelo fabricante para
cultura da videira (calda). Os isolados V2 (Pichia spp.), N2 e CF4 (Issatchenkia spp.), CF1 e I1 (Hanseniaspora spp.), CF2
(Torulaspora spp.), TF5 e TM2K (Saccharomyces spp.), Y904 e QD145 (Saccharomyces cerevisiae - comerciais) foram inoculados
em placa de ELISA com YNB + dextrose, fungicida e verde de bromocresol.
Efeito do etanol associado aos fungicidas
O isolado Y904 foi inoculado em placas de ELISA contendo
concentrações decrescentes dos fungicidas Delan, Dithane,
Mythos, Score e Ridomil associados a concentrações de
etanol variando de 0 a 16%, após incubação de 48 horas a
28ºC. O crescimento foi quantificado através da densidade
ótica.
Tabela 1. Lista de fungicidas
Fungicida
Sumiex
Folpan
Cercobin
Score
Delan
Mythos
Dithane
Ridomil
Dosagem recomendada (100 L)
150-200 g
135 g
70 g
12 ml
50 g
200 ml
250-350 g
250 g
Composto ativo
Procimidona (500 g/Kg)
Folpete (500 g/Kg)
Tiofanato Metílico (700 g/Kg)
Difeconazol (250 g/L)
Dithianon (700 g/Kg)
Pyrimethanil (300 g/L)
Mancozeb (800 g/Kg)
Melaxil-m (40 g/Kg)
Mancozeb (640 g/Kg)
RESULTADOS E DISCUSSÃO
V2
Os fungicidas Dithane, Ridomil e Folpan foram os
fungicidas que inibiram as leveduras com as frações mais
baixas em relação á quantidade inicial adicionada (0,78, 2,50,
e 0,7 %)(Tabela 2). O fungicida Cercobin não apresentou
efeito sobre nenhum isolado. A figura 1 mostra o resultado do
efeito de diferentes concentrações de Score sobre os
isolados.
A ação múltipla (Dithane e Delan) mostraram efeito
sinérgico com etanol (figura 2), fato que poderia ocorrer em
fermentações alcoólicas, explicando a parada de
fermentação, hipótese que será testado em trabalhos futuros.
Tabela 2- Concentração inibitoria mínima (CIM)
V-2
N-2
CF-4
CF-1
mg/L
%*
mg/L
%
mg/L
%
mg/L
%
Delan
87,50 25,00 87,50 25,00 >350 >100 >350 >100
Cercobim > 490 > 100 >490 >100 >490 >100 >490 >100
Mythos 150,00 25,00 150,00 25,00 150,00 25,00 >600 >100
Sumilex 500,00 50,00 43,75 12,50 175,00 50,00 >350 >100
Score
15,00 50,00
7,50 25,00 3,75 12,50 0,47 1,56
Dithane
43,75
1,56
43,75 1,56 43,75 1,56 43,75 1,56
Ridomil
12,50
0,78 100,00 6,25 100,00 6,25 12,50 0,78
Folpan
5,27
0,78
10,55 1,56 10,55 1,56 10,55 1,56
N2
CF4
CF1
I1
Branco
CF2
Y904
QD145
TF5
TM2K
Branco
100%
50%
25%
12,5%
6,25%
3,12%
1,56%
0%
Figura 1: Placas de ELISA mostrando o efeito de diferentes concentrações do fungicida
Score. A cor amarela indica crescimento e azul ausência de crescimento.
I-1
mg/L
10,94
>490
>600
>350
3,75
43,75
25,00
10,55
%
3,13
>100
>100
>100
12,50
1,56
1,56
1,56
CF-2
mg/L
%
43,75 12,50
>490 >100
>600 >100
>350 >100
>30 >100
43,75 1,56
400,00 25,00
5,27 0,78
Y904
mg/L
%
43,75 12,50
>490 >100
>600 >100
>350 >100
>30 >100
43,75 1,56
50,00 3,13
10,55 1,56
QD145
mg/L %
43,75 12,50
>490 >100
>600 >100
>350 >100
>30 >100
43,75 1,56
25,00 1,56
10,55 1,56
TF-S
mg/L %
43,75 12,50
>490 >100
>600 >100
>350 >100
>30 >100
43,75 1,56
25,00 1,56
10,55 1,56
TM-2K
mg/L %
87,50 25,00
>490 >100
>600 >100
>350 >100
>30 >100
43,75 1,56
50,00 3,13
10,55 1,56
*porcentagem da dose recomendada para cada fungicida
Figura 2: Efeito do etanol na atuação dos fungicidas sobre o isolado Y904. As diferentes concentrações de fungicida estão em mg L-1 do ingrediente ativo.
APOIO:
CONSIDERAÇÕES FINAIS
Os resultados mostram que a utilização de fungicidas próximo à
vindima pode causar um desequilíbrio nas populações de leveduras,
podendo também interferir em fermentações alcoólicas.