ÁREA: CV (X) CHSA ( ) ECET ( ) TOXICIDADE IN VITRO DE DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE SURFACTANTE NO DILUENTE SALINA CONTENDO ÓLEO DE MAURITIA FLEXUOXA PARA ESPERMATOZOIDES EPIDIDIMÁRIOS DE BOVINOS DE CORTE Juliana Alves de Oliveira (ICV-UFPI), Janaina de Fátima Saraiva Cardoso (Orientadora, Departamento de Medicina Veterinária CPCE/UFPI) Introdução O aperfeiçoamento de técnicas para coletas de espermatozoides da cauda do epidídimo, como o desenvolvimento de produtos para a conservação das células espermática, tem sido rotineiramente pesquisado. O interesse na preservação de germoplasma tem grande importância, pois possibilita a recuperação de espermatozoides funcionais do epidídimo de animais mortos (FOOTE, 2000). A coleta de espermatozóides do epidídimo pode ser a única opção que existe para preservar gametas masculinos de animais de alto valor genético ou de espécies ameaçadas de extinção (FICKEL et al., 2007). O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficiência do diluente salina suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa e surfactante para a conservação de espermatozoides epididimários bovinos in vitro. Metodologia Foram coletados 15 pares de testículos de bovinos de corte oriundos de abatedouros da cidade de Bom Jesus-PI. As peças foram higienizadas com álcool 70%, os epidídimos dissecados e em seguida os espermatozoides recuperados da cauda do epidídimo por incisão e pressão manual em tubos de 15 mL contendo solução salina fisiológica. O óleo foi diluído em solução salina fisiológica na concentração de 20% e adicionado dodecil sulfato de sódio a 1% em solução salina perfazendo as seguintes concentrações finais; 0,5%, 0,25%, e 0,1%. Foram avaliados os parâmetros: motilidade, vigor e avaliação da morfologia espermática, integridade funcional de membrana plasmática após 5, 10, 15, 30, 60 e 120 minutos de incubação a 37ºC em banho-maria. Como grupo controle foi utilizado solução salina fisiológica. A motilidade espermática e vigor foram subjetivamente avaliados através de microscópio óptico em aumento de 10x e 40x, respectivamente. Esfregaços corados com Rosa Bengala foram preparados para avaliação da morfologia espermática (200 células/lâmina) através de microscópio óptico (100x) com óleo de imersão. Resultados e discussão Nos resultados para o parâmetro de motilidade (tabela 1), vigor (tabela 2) e morfologia (tabela 3) observou-se que o grupo controle apresentou diferença significativa (P ≤ 0,05), demonstrando melhores índices em relação aos diluentes a base de Mauritia flexuoxa nas concentrações de 0,1%, 0,5% e 0,25%. ÁREA: CV (X) CHSA ( ) ECET ( ) 0 , Tabela 1: Motilidade de espermatozoides bovinos epididimários diluídos em salina contendo óleo de Mauritia 5 TEMPO de dodecil sulfato de sódio. % flexuoxa em diferentes concentrações DILUENTES TEMPO GRUPO CONTROLE GRUPO CONTROLE 0,1% a,b a,b Letras diferentes na mesma linha indicam diferença estatística entre os tratamentos (P≤0,05). Letras diferentes na mesma linha indicam diferença estatística entre os tratamentos (P≤0,05). Tabela 2: Vigor de espermatozoides bovinos epididimários diluídos em salina contendo óleo de Mauritia flexuoxa em diferentes concentrações de dodecil sulfato de sódio. a,b a,b Letras diferentes na mesma linha indicam diferença estatística entre os tratamentos (P≤0,05). Letras diferentes na mesma linha indicam diferença estatística entre os tratamentos (P≤0,05). Tabela 3: Morfologia de espermatozoides bovinos epididimários diluídos em salina contendo óleo de Mauritia flexuoxa em diferentes concentrações de dodecil sulfato de sódio. a,b a,b Letras diferentes na mesma linha indicam diferença estatística entre os tratamentos (P≤0,05). Letras diferentes na mesma linha indicam diferença estatística entre os tratamentos (P≤0,05). Os resultados apresentados neste trabalho mostram que a solução contendo óleo de buriti apresenta toxicidade para espermatozoides bovinos coletado da cauda do epidídimo. Diferente dos resultados encontrados por Crespilho et al. (2012) que trabalharam com lecitina de soja, em criopreservação de sêmen bovino que mesmo apresentando resultados inferiores quando comparados com gema de ovo e leite em pó desnatado, possui maior segurança no uso devido ser de origem vegetal. Nesse trabalho foi observada a predominação de patologias de cauda, especialmente dobrada e quebrada. Estas alterações morfológicas, de acordo com Kavamoto et al. (1999), provocam movimentos circulares e oscilatórios dos espermatozóides, o que leva, por exemplo, à redução da taxa de fertilização. Conclusão A solução contendo 20% de óleo de Mauritia flexuoxa contendo dodecil sulfato de sódio nas concentrações; de 0,5%, 0,25%, e 0,1% mostrou-se tóxica para espermatozoides coletados do epidídimo bovino. Apoio: UFPI Referências Bibliográficas CRESPILHO, A. M.; PAPA, F. O.; ALBERTI, K.; SIQUEIRAFILHO, E. R.; MARTINSJR, A.; NOVAES, J. L. C.; DELL'AQUAJR, J. A.; 2006.Comparação da eficácia de dois diluentes de sêmen bovino com base em motilidade espermática e integridade da membrana após o descongelamento. Ars Vet. 22,229-235. FICKEL J, WAGENER A, LUDWIG A. Semen cryopreservation and the conservation of endangered species. Eur J Wildl Res, v.53, p.81-89, 2007. FOOTE, RH. Letter to the editor. J Androl. 2000;21:355. KAVAMOTO, E.T.; BARNABE, V.H.; CAMPOS, B. E. S.; TALMELLI, E.F.A. 1999 Anormalidades morfológicas nos espermatozóides do curimbatá, Prochilodus lineatus (Steindachner, 1881) (Osteichthyes, Characiformes, Prochilodontidae). Boletim do Instituto de Pesca, São Paulo, 25(único): 61-66. Palavras-Chave: Toxicidade. Óleo de buriti. Espermatozoides. 0 , 2 5 % 5 m i n 1 2 , 7 , 4 5 ,6 6 7 8 7 6 ± 7 ± 1 ± ,1 8 0 1 , 6 2 7 ,0 a 9 0 1 8 a 2 a 8 0 , 4 ,0 0 5 0 3 3 ± ± 0 6 , 5 ,0 0 7 0 6 b 8 b