DENGUE
Seminário Rede DENGUE: desafios para
Políticas Integradas de Ambiente, Atenção
e Promoção da Saúde
Rita M R Nogueira , PhD
Laboratório de Flavivirus, IOC/FIOCRUZ
[email protected]
VÍRUS DENGUE
Família Flaviviridae
Gênero Flavivirus



Possui 4 sorotipos distintos (DENV-1, 2, 3, 4)
Causa DC e FHD
É um arbovirus, transmitidos por mosquitos
Organização da Partícula e Genoma Virais
Nucleocapsídeo
M
Bicamada
Lipídica
E
prM
30-50nm
RNA fita simples (+)
3 ptns estruturais
7 ptns não- estruturais
Introdução dos Vírus Dengue no
Brasil
Roraima
1982 - DENV-1
DENV-4
Agosto de 2010- DENV-4
Belém
1989- DENV-2
Caso Importado
Rio de Janeiro
São Paulo
1998- DENV-3
Caso Importado
1986 - DENV-1
1990 - DENV-2
2000 - DENV-3
Casos de Dengue, FDH, Óbitos e sorotipos
circulantes no Brasil, 2010*
RR
Isolamento
DENV-4
DEN 1
DEN 2
DEN 3
Casos NOTIFICADOS :
942.153
Casos CONFIRMADOS:
482.284
FHD: 2.271
Óbitos : 367
Predomínio DENV-1
Isolamento DENV-4
DEN 1, DEN 2
DEN 2, DEN 3
DEN 1, DEN 2, DEN 3
Sem positivvos
sem circulação
Até a 22º SE
Fonte: SVS-MS
Rede Nacional de Diagnóstico de Dengue
*5 Laboratórios de Referencia Regional
AP
RR
(IAL/SP, FIOCRUZ/RJ, LACEN/DF, LACEN/PE e IEC/PA)
** Laboratorio de Referencia Nacional
AM
PA**
(IEC/PA)
CE RN
MA
PI
AC
TO
RO
SE
BA
MT
Isolamento de Virus 18 estados
GO
DF-*
(RR, AP, PA, TO, CE, RN, PE, AL, BA, MG, ES, RJ, SP, DF, GO, MS, PR e RS)
MS
SP*
Sorologia: 118 labs em estados
RT-PCR: 4 estados (CE, PE, AL, GO) e 3 instituto
PE*
MG
ES
RJ*
PR
SC
(IEC/PA, IAL/SP e
RS
FIOCRUZ/RJ)
SOURCE: SES/FUNASA
Unidades Sentinelas que utilizam o NS1 como Triagem: 59
Sorotipos de Dengue circulantes no Rio de Janeiro,
2001-2009
Re-emergência do Dengue tipo 2
160
DENV-1
DENV-2
DENV-3
8
140
7
120
6
100
5
80
4
60
3
40
2
20
1
0
0
70
J F M A M J J A S O N D J F M A M J J A S O N D J F M A M J J A S O N D
2001
2002
J
F
M
A
M
2003
60
J
J
A
S
O
N
D
J
F
M
2004
Abril/2007
40
30
20
DENV-1
Dezembro/2009
10
0
J
M
M
J
S
2006
N
J
M
M
J
S
2007
N
J
M
M
J
S
2008
N
J
M
J
J
A
2005
DENV-2
50
A
M
M
J
2009
S
N
J
M
M
2010
J
S
O
N
D
Diagnóstico Laboratorial do Dengue
Isolamento Viral
• Cultura de células de mosquito A. albopictus clone
C6/36
Detecção de ácido nucléico viral
• RT-PCR, PCR em tempo real
Sorologia
• Mac-ELISA,IgG-ELISA,Captura de antígeno NS1,
Kits comerciais, PRNT
Histopatologia e Imunohistoquímica
RESPOSTA IMUNE NAS INFECÇÕES POR
DENGUE
Infecção Secundária
(início dos sintomas)
(início dos sintomas)
Níveis de anticorpos e antígeno
Infecção Primária
IgG
Vírus
Vírus
IgM
NS1
NS1
Tempo
IgM
Sensibilidade dos testes de captura de NS1 de acordo com
o número de dias de sintomas (n=220)
90
Detecção de virus
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0-1
2
3
4
5
6
7
Número de dias após o início dos sintomas
8
9
10
Desconhecido
Diagnóstico de Dengue, Rio de Janeiro
LABFLA, IOC/FIOCRUZ
2010*
* Preliminares até 13/09/2010
Diagnóstico
Positivo/ Testado(%)
Sorotipo
29/106 (27,4)
-
76/254 (30,6)
23 DENV-1
52 DENV-2
1 DENV-3
170/381 (44,6)
33 DENV-1
134 DENV-2
3 DENV-3
NS1 Platelia (Biorad)
26/85 (30,6)
-
NS1 AG STRIP (Biorad)
26/73 (35,6)
-
MAC-ELISA (Panbio)
Isolamento Viral
RT-PCR
Weaver & Vasilakis (2009)
V
Filipinas (1956), Japão (1973), China (1980) América do Sul (2002-2004)
53
33
BR76012/ES/2002
33
BR69221/RJ/2001
59
BR75103/RJ/2002
51
BR77395/ES/2003
100
BR72308/RJ/2001
66
Análise filogenética de 25
amostras de DENV-2 baseada na
seqüência dos genes C/prM/M/E ,
1991-2010
BR67955/RJ/2000
BR63291/RJ/98
BR48578/CE/94
7
93
BR55803/BA/96
22
BR44298/BA/91
BR64625/RJ/99
63
17
19
Linha g e m I
BR51222/RJ/95
BR55769/RS/96
BR52477/RJ/95
31
92
86
BR58448/RN/97
BR59382/RN/97
66
51
AF489932.1/BR64022/1998
BR66985/RJ/2000
86
DQ364497.1/Col/1997
96
91
S ud e ste Asiá tico
DQ364511.1/EC/2000
GQ868540.1/VE/1990
M20558.1/Jamaica/1983
100
GQ868640.1/BR/2003
Método de neighbor-joining,
modelo Tamura Nei e bootstrap de 1000
pseudoréplicas.
97
99
GQ199895.1/NI/1999
GQ199868.1/NI/2007
EU482726.1/US/BID-V595/2006
97
EU687216.1/PR/2005
100
61
84
82
AB122022.1/DR59/2001
AB122020.1/DR/2001
93
51
BR0030/RJ/2008
Linha ge m I I
BR0199/RJ/2010
GU131885.1/BR/2008
98
BR0832/RJ/2008
45
BR0145/ES/2009
84
BR88034/RJ/2007
53
100
BR0066/BA/2009
44
BR86977/RJ/2007
31
66
BR0023/RJ/2010
AF204177.1/China/1989
100
100
AY858036.2/Indo/2004
100
100
Asiático II
AF038403.1/NG/1944
Asiático I
AB189124.1/Indo/1998
AF100467.1/Peru/1995
AF100469.1/Mexico/1992
100
63
EF457904.1/DakAr/1991
100
Americano
EU056812.1/PR/1977
Selvagem
EF105387.1/NIQ/BH/1966/DENV-3
AF289029.1/CHN/2000/DENV-4
GU370049.1/SGE/2008/DENV-1
78
82
AB111077.1/Thai/02
AB178040.1/Mic/04
99
DQ193572.1/FJ/04
EF508206.1/Shantou/Chi/06
64
90
Análise filogenética de 7
amostras de
DENV-1 baseada na
seqüência do gene E
EF113152.1/GzChi/06
AY732482.1/Thai/01
AY732418.1/Thai/97
18
99
AY732422.1/Thai/96
19
Genótipo I / Ásia
AY732408.1/Thai/00
45
AB111071.1/Cam/01
40
50
100
AY732458.1/Thai/99
AY732413.1/Thai/91
73
60
AY732378.1/Thai/82
AF350498.1/China/80
100
AF425630.1/Thai/80
AB074760.1/Mochizuki/43
100
95
100
82
Método de neighbor-joining,
modelo Tamura Nei e bootstrap
de 1000 pseudoréplicas.
EU848545.1/Hawai/US/44
AY630407.1/FP/01
AB074761.1/Indo/88
Genótipo IV / Pacífico Sul
AB232666.1/Indo/02
100
AF425627.1/Phil/74
99
100
42
82
U88535.1/Naur/74
AF425629.1/TH/63
Genótipo II / Thailandia
AF180817.1/TH/64
AF425622.1/Mala/72
Genótipo III / Malásia
AF298807.1/IvCo/99
AF425624.1/Mexi/83
39
63
99
88
AF513110.1/BR/01
74342/Mosq/RJ/BR/2001
99
AF425614.1/BR/97
Genótipo V / América/ África
31768/RJ/BR/1986
77
98
Linhagem I
AF226685.2/Den1BR/90
83
78
1986/Mosq/RJ/BR/1986
GU131863.1/DENV-1/BR/2008
55 2009/ES/BR/2009
100
19 2010/RJ/BR/2010
92
Linhagem II
1435 09/RJ/BR/2009
65
97
1433 09/RJ/BR/2009
FJ850094/DENV-3/BR/2008
FJ850091.1/DENV-2/BR/2007
100
EU478410.1/DENV-4/MYA/H27/2006
Investigação de casos fatais (n=29) por dengue
Rio de Janeiro, 2002
RESPOSTA IMUNE EM MENORES DE 15 ANOS COM AMOSTRAS
PAREADAS EM 2007, HMSF
n= 49
14
Primária
Secundária
Nº CASOS
12
10
8
6
4
2
0
DENV-2
DENV-3
Se m ide nt
CASOS FATAIS DE DENGUE CONFIRMADOS
LABORATORIALMENTE NO RIO DE JANEIRO
DE ACORDO COM A IDADE
10
9
8
2007
2008
7
Nº CASOS
6
5
4
3
2
1
0
<5
6--15
16--30
31--45
46--60
>60
IGN
FAIXA ETÁRIA
2007 n = 22
2008 n = 15
Laboratório de Flavivírus, Departamento de Virologia, IOC - FIOCRUZ
Casos Fatais confirmados de Dengue em 2007-2008
no Estado do Rio de Janeiro, de acordo com sorotipo e
resposta imune
35
30
25
20
15
10
5
0
DENV-2
DENV-3
Se m ide nt
Primário
Secundário
Total: 94/195
(48,2%)
Presença de sinais de gravidade de acordo com o
sorotipo, Rio de Janeiro, 2007-2008
(plaquetopenia < 50.000/mm3; choque; sangramento digestivo; derrame cavitário; insuficiência
renal, respiratória ou hepática)
35 (9,6%)
Graves
(DHF/DSS)
Clássicos
DENV-3 (n = 364)
329 (90,3%)
70 (37%)
DENV-2 (n = 189)
119 (63%)
Risco relativo = 3,85 (IC 95% = 2,67 – 5,55)
p < 0.001
Obrigada !