Influência do genótipo no potencial
regenerativo de feijão-caupi cultivado
in vitro
Dra. Laureen Michelle Houllou-Kido
Lab. Genética Molecular - UFPE
Cultura de tecidos no gênero Vigna
• V. radiata, V. mungo, V. vexillata, V. sinensis, etc
• Tecidos vegetais
–
–
–
–
Cotilédones
Eixo embrionário
Ápices caulinares
Folhas jovens
• Recalcitrância
Dados gerais
• Quantidade de fitorregulador (BAP, TDZ)
– 2 a 35 mg.L-1
• Percentual de regeneração
– De 1 a 52%
• Número de plantas por explante
– De 1 a 12 / explante
Cultivares testadas
•
•
•
•
•
IPA 206
IPA 207
IT 85F
BR 14 Mulato
Guariba
Taxas de regeneração
IPA 206
Cotilédone 65% Eixo Emb. 70%
IPA 207
Cotilédone 40% Eixo Emb. 35%
BR 14 Mulato
Cotilédone 5%
Eixo Emb. 10%
Demais
Cotilédone 0%
Eixo Emb. 0%
Indução de regeneração
• Fitorregulador:
– BAP ou TDZ (sugestão – tratamento durante
15 dias com 15 mg.L-1 de BAP com posterior
transferência para meio zero)
• β-arabinogalactan (efeito estimulatório da
regeneração via cotilédone)
Necessidade de fitorregulador
• IPA 206 e IPA 207
– Regeneração ocorre na ausência de
fitorregulador
– BAP acelera o processo regenerativo e
estimula a regeneração.
• Demais cultivares testadas
– Necessitam de um estímulo (BAP) para iniciar
a regeneração
• Hipóteses:
– Diferença nas quantidades endógenas de
fitorregulador
– Diferença na quantidade dos receptores na
membrana celular (Células responsivas)
Características indicadoras de
potencial regenerativo
• Intumescimento do tecido
• Alteração da coloração
– Parcial ou total
Regeneração via cotilédones
• Início
– Com aproximadamente três semanas
• Região do explante
– Área em que foi retirado o embrião
Regeneração via cotilédones
IT85F
IPA 206
Regeneração de
meristema
Diferentes momentos da regeneração in vitro de feijãocaupi a partir de cotilédones
Cotilédone
Organogênese
direta
Organogênese indireta
• Regeneração via cotilédones
– Associada a restos da epiderme do embrião
– Observada, na maioria dos casos, em apenas
um dos cotilédones
Regeneração via eixo embrionário
• Início
– Com aproximadamente quatro semanas
• Região do explante
– Próxima a região do meristema apical
(polaridade da regeneração)
Meristemas
Organogênese direta
IPA206
IPA207
Eixo
embrionário
Indução de calos organogênicos
• Ambos explantes respondem ao 2,4 –D
• Resposta também é cultivar específica
• Coloração esverdeada do calo indica
potencial regenerativo
• Efeito do NaCl
Indução de calos
IPA 206
Aclimatação
• Baixa taxa de sobrevivência (20%)
• Alternativa
– alteração do hormônio para indução do
desenvolvimento do sistema radicular
– Alteração do substrato utilizado na
aclimatação
Desenvolvimento in vivo das
plantas regeneradas
• Todas as plantas produziram flores e
sementes (não afetou a fertilidade)
• Variação somaclonal – Novas
características (porte, precocidade)
• Características variantes são herdáveis
(S2).
Agradecimento
• UFPE
• EMBRAPA
• IPA
• UPE
• FACEPE
• BNB
• FINEP