Pós-Graduação em
Genética
Basofilia e Acidofilia: coloração do
Panótico
Disciplina: Preparações citológicas e análises citogenéticas
Maria Isabel Afonso da Silva
Reações Citoquímicas Mediadas por Ligações Eletrostáticas
Afinidade eletrostática: um corante ionizado em uma
solução reage com um substrato de carga iônica oposta.
Substrato
catiônico
Substrato
aniônico
Acidofilia
Corante
aniônico
Basofilia
Corante
catiônico
Basofilia
Corantes Básicos (Catiônicos)
Substrato carregado negativamente (aniônico) reage
eletrostaticamente
com
um
corante
carregado
positivamente (catiônico).
Corantes:
Azul de metileno
Azul de alcian
Azul de toluidina
Basofilia
Basofilia
Fosfatos
(ácidos nucléicos)
Grupamentos
negativos
Sulfatos
(Glicosaminoglicanos sulfatados)
Carboxilas
(Proteínas e açúcares ácidos)
Reação de Acidofilia - Corantes ácidos (Aniônicos)
Os corantes reagem com os elementos que possuem
cargas positivas na célula
Ex: proteínas, que podem apresentar radicais básicos de
seus aminoácidos ionizados (NH3+).
Fast green
Orceína
Xilydine Ponceau
Sírius Red
Reação de Acidofilia
 Grupamentos se ionizam na dependência de pHs
diferenciados
 Obtidos a partir de solução tampão em que os corantes são
diluídos
SUBSTRATO
BASOFILIA -  aniônico
CORANTE
EXEMPLOS
+  catiônico -
Azul de Toluidina
Azul de metileno
Azul de alcian
Hematoxilina
-
Xylidine ponceau
Sirius red
Fast Green
Eosina
Orceína
ACIDOFILIA +  catiônico -  aniônico
Hematoxilina Eosina
Hematoxilina (+)
Eosina (-)


Substratos (-)
Substratos (+)


Núcleos
Citoplasma
(grupam/o NH2+)
(grupam/os fostato do DNA e
RNA)
aminoácidos básicos (lisina,
ácidos nucleicos, aminoácidos ácidos arginina, histidina)
(aspártico, glutâmico).


Rosa
Azul
Hematoxilina Eosin
(Mus muscullus)
(ASSIS & AZEREDO-OLIVEIRA, 2002)
G
Ep
L
ML
A
A
5.0
µm
Normal
V
Próstata
Glândulas acessórias de morcego
5.0
µm
Panótipo (HematocorBiológicaR)
Reação de Acidofilia/Basofilia
-Mediadas por Ligações Eletrostáticas
• Coloração de rotina para análise geral da morfologia das células
sanguíneas
• Facilita a identificação e diferenciação dos leucócitos
Basofilia:
Como a hematoxilina
- grupamentos fosfatos dos ácidos nucléicos (Núcleo)
Acidofilia:
Como a eosina
Amino de resíduos protéicos (NH3)- (núcleo e Citoplasma)
PANÓTICO RÁPIDO LB
1)Finalidade:
Conjunto para coloração rápida em hematologia.
2) Princípio:
A extensão hematológica é submetida à ação de um fixador e
duas soluções corantes, por meio de imersões, ao final da
última, encontra-se pronto para leitura.
CORANTE RAPIDO PARA HEMATOLOGIA COM
1 FIXADOR-TRIARILMETANO E CORANTES / 2XANTENO / 3-TIAZINA (de 500 ml)
Panótico rápido 1: compõe-se por uma
solução de triarilmetano a 0,1%.
Panótico rápido 2: compõe-se por uma
solução de xantenos a 0,1%.
Panótico rápido 3: compõe-se por uma
solução de tiazinas a 0,1%.
O material deve ser mantido em temperatura ambiente, em local
fresco, seco e protegido da incidência direta de luz solar
Phrynops geoffroanus ou “Cágado-de-Barbelas”
Punção Cardíaca
Amostras Sanguíneas
Seio venoso cervical
Descartada a primeira gota – técnica de esfregaço –
extensões sangüíneas - fixação.
Hemograma
• Contagem de trombócitos
• Contagem diferencial dos leucócitos:
- monócitos
- linfócitos
- neutrófilos
- azurófilos
- heterófilos
- eosinófilos
- basófilos
Células Vermelhas de Quelônios
Atuam na inflamação, promovem fagocitose; como célula hemostática
Células brancas de Quelônios
Monócito
• Combate a doenças infecciosas.
• 3% a 20%
Linfócitos
• Citoplasma basofílico.
• Resposta imune - infecção viral.
•15% a 90%
Neutrófilo
Azurófilo+Monócito
• Respondem à infecções bacterianas.
• 0,5% a 10%
2% a 5%
Células brancas de Quelônios
Heterófilo
• Combate a infecções bacterianas.
• 20% a 40%
Eosinófilo+Heterófilo
• Encontrados em infecções
parasitárias.
• 7% a 20%
• Reações imunes.
• 10% a 25%
Basófilo
Constituem o maior nº de células do sangue
Em média 4,5 milhões na mulher e 5,5 milhões no homem.
Medem aproximadamente 7,5 um de diâmetro
Agranulócitos:
• Núcleo sem segmentação e apenas granulações azurofílicas,
quase imperceptíveis:
• linfócitos e monócitos.
Granulócitos:
• Núcleos lobulados de forma variável (polimórficos)
• grânulos citoplasmáticos proeminentes, cujas características
tintoriais diferem conforme a classe à qual pertence o
granulócito:
• neutrófilos, eosinófilos ou basófilos.
Neutrófilo
• 40-70%
• Medem 12-15um de diâmetro.
• O citoplasma é acidófilo, com
muitos grânulos finos.
• O núcleo possui cromatina em
grumos, com 2-5 lóbulos
distintos
• Função fagocitária.
Linfócito
•20-50%
• Medem de 6-12 um de diâmetro.
• Possuem citoplasma basófilo,
pequeno, escasso.
• O núcleo apresenta-se esférico com
cromatina bastante condensada.
Linfócitos T: imunidade celular
Linfócitos B: produção de anticorpos.
Monócito
•2-10%
• diâmetro de 12-20 um.
• Apresenta um núcleo irregular,
frequentemente lobulado, e citoplasma
cinza-azulado opaco, com grânulos
azurófilos finos.
• São células precursoras do sistema
fagocítico mononuclear.
Eosinófilo
•0-8%
• São ligeiramente maiores do
que os neutrófilos: 12-17 um.
• O núcleo é geralmente
bilobulado, mas pode ser
trilobulado.
• Os grânulos são esféricos e
maiores, preenchem o
citoplasma e coram-se de
avermelhado (eosina).
• São importantes nas doenças
alérgicas e parasitárias
Basófilo
• 0-3%
• Apresentam o citoplasma com
granulações pretas e grandes,
irregulares, que têm afinidade
por corantes básicos.
• O núcleo tem dois segmentos,
geralmente encobertos pelas
granulações.
• Estão envolvidos nas reações
imediatas de hipersensibilidade
(asma).
Plaquetas
• São pequenos fragmentos
citoplasmáticos presentes no
sangue circulante.
• Medem 2-4um de diâmetro.
• Atuam na coagulação
sanguínea, na retração e
dissolução de coágulos