REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA EM PROCARIOTOS 1 Porque Regular????? E. coli tem cerca de 4.200 genes, porém em um dado momento a bactéria não necessita mais do que 1.000 proteínas. Imaginem o custo se todas essas proteína fossem produzidas ao mesmo tempo! 2 Quem, Quando e Quanto... A síntese de proteínas requer grandes quantidades de energia. Os procariotos desenvolveram mecanismos elaborados para controlar a escolha de quais proteínas são feitas em diferentes momentos, sob diferentes condições ambientais. Isso é regulação Gênica 3 Genes constitutivos Genes que são constantemente expressos Genes induzíveis Genes cuja expressão varia de acordo com as condições da célula 4 Estrutura de um Genede A estrutura de um gene procarioto Promotor Região Codificadora Terminador DNA Ribossomo RNA PROTEÍNA 5 Organização na forma de operon Promotor/operador Regiões Codificadoras Terminador OPERON RNA MENSAGEIRO POLICISTRÔNICO E. coli 6 Regulação por Fatores Sigma • 70 - Fator sigma vegetativo • 32 - Choque térmico • 54 - Metabolismo de nitrogênio Especificidade de ligação da RNA polimerase nos diferentes promotores é dada pela interação com diferentes fatores sigma 7 Controle por ativadores e repressores CONTROLE POSITIVO Ativador ligado facilita a transcrição CONTROLE NEGATIVO Repressor ligado inibe a transcrição •Indução •Repressão •Indução •Repressão 8 REGULAÇÃO POSITIVA Ativador ligado facilita a transcrição Indução INDUTOR ATIVADOR INATIVADO 9 REGULAÇÃO POSITIVA Ativador ligado facilita a transcrição Repressão Co-repressor ATIVADOR INATIVADO 10 REGULAÇÃO NEGATIVA Repressor ligado inibe a transcrição Indução indutor REPRESSOR INATIVO 11 REGULAÇÃO NEGATIVA Repressor ligado inibe a transcrição Repressão Co-repressor REPRESSOR INATIVO 12 Operon lac 13 Regulação do operon lac CONTROLE NEGATIVO CONTROLE POSITIVO REPRESSOR COMPLEXO CAP:cAMP 14 Estrutura do Operon lac Operon Lac: ~6.000 pb 15 -Galactosidase 16 Controle negativo do Operon lac Ausência de lactose Presença de lactose 17 Controle positivo do operon lac Glicose CAP Proteína ativadora de catabólito AMPc 18 Situações 1. Presença de glicose e ausência de lactose 2. Ausência de glicose e presença de lactose 3. Presença de glicose e lactose 4. Ausência de glicose e lactose 19 Operon trp Operon trp Regulação Gênica em E. coli 20 Regulação do Operon trp trpR Repressor ter trpE trpD trpC trpB trpA P\O + Triptofano 21 Regulação do Operon trp Regulação por repressão Regulação por atenuação 22 Regulação do Operon do Triptofano 23 Regulação por atenuação 24 Regulação da Expressão Gênica Procariotos: Resposta direta a variações nas condições nutricionais (genes ativados e reprimidos) Transcrição pode ser acoplada com a tradução (simultânea) Eucariotos multicelulares: Limitação na resposta direta às variações nas condições nutricionais (células estão organizadas em tecidos e órgãos) Transcrição ocorre em compartimento distinto da tradução eliminando a possibilidade de acoplamento 25 Nucleossomo – unidade estrutural básica da cromatina • 150 a 250 pb associados a um octâmero de histonas (11 a 20 kDa, caráter básico acentuado, ou seja aa carregados +) • Histonas Centrais: 2 X (H2A, H2B, H3 e H4) * Alta conservação * Genes • Histona de ligação H1 A cromatina no início da transcrição Ativadores DNA de ligação ou superfície do nucleossomo Remoção H1 Deslocamento ou dissociação do nucleossomo Mecanismos para ativação da cromatina Acetilação de Histonas Desacetilação de histonas