UBAIII Biologia Molecular 1º Ano 2012/2013 Sumário: Capítulo IV. Síntese e processamento do RNA ribossomal e de transferência 2 a. Síntese e processamento dos percursores de rRNA b. Síntese e processamento do 5S rRNA c. RNA de transferência MJC 11/out/2012 3 MJC 11/out/2012 RNAs mRNA tRNA rRNA Todos são processados antes da forma madura (funcional) Reacções de “cut & paste” • Unidade de Transcrição snoRNA snoRNP • Transcripto primário • Associação com proteínas • RNA funcional RNA polimerase 4 MJC 11/out/2012 Transcrição do rRNA eucariota > 80% do RNA da célula. Unidades de transcrição aglomeradas em 5 “clusters” repertitivos em cromossomas diferentes. Visíveis na interfase celular como nucléolos 5 MJC 11/out/2012 Transcrição de rRNA 6 MJC 11/out/2012 Constituição do ribossoma eucariota 7 MJC 11/out/2012 Unidades Svedberg e rRNA Subunidade Ribossómica Coeficiente de Sedimentação Nº de nucleótidos Grande 28S 5 000 Pequena 18S 2 000 Grande 5.8S 160 Grande 5S 120 11/out/2012 MJC T03 8 Transcrição de rRNA 9 MJC 11/out/2012 Metilação e Alteração da uridina Os transcriptos 1ºs de rRNA são diferentes: •Pseudouridina (cerca de 95) •Grupos metilo (mais de 100) 10 MJC 11/out/2012 Processamento do rRNA 11 MJC 11/out/2012 snoRNAs snoRNA RNA alvo snoRPs (Box C/D) 12 (Box A/H) MJC 11/out/2012 snoRNAs Existem mais de 200 moléculas diferentes específicas para cada alteração. De onde originam os snoRNAs? 13 São codificados nos intrões dos genes. MJC 11/out/2012 Metilação e Box C/D snoRNAs 14 MJC 11/out/2012 Pseudouridinação e Box A/H snoRNAs 15 MJC 11/out/2012 Montagem das subunidades do Ribossoma No nucléolo 16 MJC 11/out/2012 Síntese e processamento do 5S rRNA Síntese fora do nucléolo Genes em repetições tandem mas fora do nucléolo Transcrito pela RNA polimerase III Reconhecimento do promotor dentro da zona transcrita Após transcrição é trazido para o nucléolo para sofrer processamento e ser montado o ribossoma. 17 MJC 11/out/2012 I RNA polimerase III Quais os efeitos de apagar 1? Quais os efeitos de apagar II? Quais os efeitos de alterar a posição de II? Transcreve tRNA e snoRNAs além do 5S RNA No caso dos snoRNA o reconhecimanto é diferente - é a montante da zona transcrita 18 MJC 11/out/2012 II Genes de tRNA Há cerca de 50 genes de tRNAs em células animais Repetidos cerca de 1300 vezes em humanos 19 MJC 11/out/2012 Processamento de tRNA Corte do transcripto primário 1. Ribonuclease P 1. 2. 3. 4. Splicing de intrões Adição do tripleto CCA no terminal 3’ Modificação de bases 20 MJC 11/out/2012 21 MJC 11/out/2012 Bibliografia Capítulo 5 secção 5.3 Capítulo 13 Capítulo 30 22 MJC 11/out/2012