51º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005
Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4
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Palavras-chave: microssatélites, peixe ornamental, rio Negro
D’Assunção, AAA1; Porto, JIR2 ; Farias, IP3 & Hrbek, T3
(1) INPA/Pós-Graduação, (2) INPA/CPBA, (3) UFAM/ICB.
Desenvolvimento e testes
com marcadores microssatélites
em cardinal (Paracheirodon axelrodi):
um peixe ornamental da bacia
do rio Negro, Amazonas
A pescaria ornamental na bacia do rio Negro tem como base a captura, coleta e transporte do cardinal
(Paracheirodon axelrodi). Típico dos principais tributários dos trechos médio e superior do rio Negro, o colorido
horizontal azul e vermelho dessa pequena espécie de peixe ornamental torna-a uma das mais populares no
Brasil e no mundo. Estima-se que cerca de 15 a 20 milhões de cardinais sejam retirados dos rios amazônicos
por ano; sua comercialização se dá principalmente nos municípios de Barcelos e Santa Isabel do Rio Negro
distantes 396 e 620 Km, respectivamente, da capital Manaus. Infelizmente, não há qualquer plano de manejo
e conservação dessa espécie na região e os poucos estudos genéticos feitos até o momento não elucidaram por
completo como esta espécie se comporta geneticamente nos diversos igarapés que habita. Este estudo teve como
objetivo desenvolver e testar marcadores microssatélites de Paracheirodon axelrodi e utilizá-los na estimativa
da variabilidade genética dessa espécie. O material genético foi extraído pelo protocolo fenol-clorofórmio
e posteriormente digerido com a enzima Sau3AI. Os fragmentos entre 200 a 900pb foram recuperados e
ligados a adaptadores específicos, em seguida foram hibridizados usando-se sondas CT marcadas com biotina
e ligados a esferas magnéticas. O isolamento das regiões de microssatélites foi realizado numa varredura de
182 clones de bactérias transformantes. Quatro populações estão sendo analisadas: rio Urubaxi (n=15) e rio
Iahá (n=15) no município de Santa Isabel do Rio Negro; rio Cajarizinho (n=15) e igarapé Zamula (n=15) no
município de Barcelos. As genotipagens foram realizadas em um seqüenciador automático de DNA (MegaBace
- Amersham Bioscence). Como resultados preliminares foram isolados 11 microssatélites com variação de
tamanho entre 200 e 400 pb, sendo 5 deles considerados perfeitos e 6 imperfeitos. Adicionalmente, foram
efetuados testes de amplificação com os 14 primers desenvolvidos por Beheregaray et al. (2004). A amplificação
das regiões repetitivas foi realizada usando-se o primer universal M13 forward, com fluorescência na porção 5’.
Observou-se que dentre os primers desenhados, 4 foram polimórficos, 4 monomórficos e 3 não apresentaram
boas amplificações. A variação alélica máxima encontrada foi de 12 alelos por loco. Nos primers de Beheregaray
et al (2004), os 14 primers foram considerados polimórficos. Testes de amplificação interespecífica foram feitas
em outras três espécies de peixes ornamentais (P. innesi, P. simulans e Hyphessobrycon pyrrhonotus) tendo sido
evidenciados ausência de amplificação, monomorfismo e polimorfismos variados. A análise preliminar do
polimorfismo encontrado indica que o rio Negro não funciona como uma barreira ao fluxo gênico entre as
populações de P. axelrodi e que existe variação genética entre as populações amostradas. Tais resultados poderão
subsidiar futuros planos de manejo e conservação.
Suporte Financeiro: INPA-PPI 2-3750, PRONEX/ Projeto Piaba, FAPEAM, IFS.
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