Rede de Tipificação Molecular
para Vigilância de Doenças de
Transmissão Alimentar
PULSENET América Latina
3ª Reunião Internacional 17-18/06/2005
Dalia dos Prazeres Rodrigues, Ph.D
Laboratório de Enterobacterias
Laboratório de Referência Nacional de Cólera e
Enteroinfecções Bacterianas
Instituto Oswaldo Cruz/FIOCRUZ
[email protected] ou [email protected]
Protocolo da Rede PulseNet
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Teste piloto – problemas:
Longo intervalo de tempo para recepção das
cepas para controle;
Inicio do uso de NanoDrop (D.O. suspensão)09/2004
Defeito em equipo para controle D.O. da
suspensão bacteriana (NanoDrop), com tempo
para substituição superior a 3 meses;
Considerações relatadas INEI-ANLIS (resultados
recebidos em 06/06/2005) apontaram excesso
de DNA, resultante da realização da técnica sem
a infra-estrutura (equipamento) empregada na
rotina do Laboratório;
Sistema Nacional de Laboratórios de Saúde Pública
SNLSP
REDES
DE VIGILÂNCIA
EPIDEMIOLÓGICA
DE VIGILÂNCIA
AMBIENTAL EM
SAÚDE
NACIONAIS
DE VIGILÂNCIA
SANITÁRIA
DE ASSISTÊNCIA
Centros Colaboradores
Laboratórios de Referência
Nacional
Laboratórios de Referência Regional
Laboratórios de Referência Estadual
Laboratórios de Referência Municipal
Laboratórios Locais
Locais
Laboratórios de Fronteiras
CGLAB/SVS/MS
Ações quanto ao Programa
PULSENET
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Encaminhamento das informações: relatório de viagem e
reunião realizada em 2004 CGLAB/SVS/MS;
Utilização em paralelo da metodologia preconizada em
2004;
Disseminação junto aos Laboratórios da necessidade de
encaminhamento de cepas isoladas de surtos;
Recebimento e subseqüente processamento das cepas,
para diagnóstico conclusivo e rastreamento;
Resultados das avaliações seguem hierarquia do pais:
Encaminhamento dos resultados aos remetentes;
Notificação a CGLAB/SVS/MS do diagnóstico de
patógenos emergentes ou exóticos.
CEPAS PROCESSADAS: PRINCIPAIS CRITÉRIOS DE SELEÇÃO
PARA EXECUÇÃO DE DIFERENTES MÉTODOS DE
RASTREAMENTO
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Cepas isoladas de surtos de transmissão alimentar;
Cepas multirresistentes a drogas de última geração isoladas
de alimentos e animais (atividades de monitoramento)
Cepas multirresistentes, envolvidas em surtos hospitalares;
Sorovares que emergem como epidêmicos em outros países.
Métodos Clássicos de rastreamento:
Caracterização antigênica conclusiva;
Avaliação da suscetibilidade aos antimicrobianos;
Fagotipagem: S. Typhi, S.Typhimurium, S.Enteritidis,
S.Infantis, S.Hadar;
Métodos de rastreamento molecular:
PFGE - RFLP - Ribotipia - ERIC
Uso de PFGE na definição de Surtos –
Atividades de Rotina do
LABENT-Lab.Ref. Nacional Colera e
Enteroinfecções Bacterianas
Equipamentos e tipo de insumos (2004/2005)
Aparelhos: Nano Drop
CHEF DR III
Sistema de fotodocumentação: Gel Doc
Software: Bio Numerics 4.0 (Applied Maths)
Enzimas: SpeI, XbaI, XmaI, SfiI, NotI
Atividades desenvolvidas
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PFGE de Serratia marcescens (resistentes
aos carbapenemas)- hospitalar alimentar,
ambiental e humana
PFGE de S. Infantis (XbaI) – humana,
alimentar
Diferenciação de S.Enteritidis PT4 e
fagotipos correlatos isoladas de alimentos
de origem animal e humano empregando
SpeI
Diferenciação de V.parahaemolyticus PFGE –
surtos origem alimentar
Atividades executadas e sua relevância
para ampliar a Vigilância pela Rede Nacional de
Laboratórios de Saúde Pública - 2004
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Curso: Atualização em Métodos de Análise
dos Patógenos Bacterianos Veiculados
por Água e Alimentos para os Serviços de
Bromatologia e Vigilância Sanitária LRN/IOC e INCQS
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Curso: Diagnóstico Laboratorial de
Enterobactérias Patogênicas com ênfase
em Emergentes e Reemergentes – CentroOeste – LABENT/LRN/IOC -
Atividades propostas e sua relevância para
ampliar a Vigilância pela Rede Nacional de
Laboratórios de Saúde Pública
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Encaminhamento pelos Laboratórios de relatórios
mensais para o LRN, com informações consolidadas
pelo LABENT/LRN e encaminhadas trimestralmente
a CGLAB/SVS/MS- Janeiro/2005
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Curso: Patógenos Emergentes e Reemergentes
Veiculados pela Água e Alimentos e Detectados em
Espécimes Clínicos – Regiões Norte/Nordeste27/06 a 01/07/2005