Manutenção do FACSCalibur Manutenção Diária INICIALIZANDO O FACSCalibur PS: É recomendado o uso de luvas para os procedimentos abaixo. 1. Ligar FACSCalibur no botão verde à direita do instrumento. 2. Ligar o computador (FACStation). Se você ligar o computador antes do instrumento, no momento de correr as amostras aparecerá uma tela dizendo que há erro de conexão entre o computador e instrumento. 3. Verifique se a válvula de Pressão, localizada entre os reservatórios de fluídos e lixo, do instrumento está desligada (sentido contrário da seta, para trás). 4. Desenrosque a tampa do reservatório de fluído, retirando o sensor de detecção do reservatório. 5. Utilize um funil e preencha o reservatório de fluído com FACSFlow (BDIS) ou PBS, até 3/4 de sua capacidade. Se utilizar o funil, passe para a etapa 11. 6. Caso não tenha um funil disponível, recomenda-se retirar o reservatório de fluído, pressione o clip de metal e retire as válvulas de fluído (branco) e de ar (azul). 7. Deslize o protetor de metal que fica sobre o reservatório de fluido para a frente, ou seja em sua direção. 8. Retire o reservatório de fluído do instrumento e preencha-o com FACSFlow (BDIS) ou PBS, até 3/4 de sua capacidade. 9. Coloque o reservatório de fluído de volta no instrumento. 10. Recoloque o protetor de metal, ajustando-o sobre os pinos e deslizando-o para trás, ou seja, na direção contrária de sua posição. Recoloque as válvulas de fluído (branco) e de ar (azul). 11. Posicione a tampa do reservatório inserindo o sensor de detecção de fluído e enrosque a tampa. 12. Verifique se o reservatório do lixo está cheio. Se estiver cheio, desenrosque a tampa, retire o sensor de detecção do lixo e esvazie o reservatório em uma pia com a torneira aberta. Antes de jogar o conteúdo na pia é recomendado que o material contaminado tenha permanecido em contato com o hipoclorito do reservatório para inativar o mesmo, pelo menos 30 minutos, se isto não ocorreu, troque o reservatório cheio por um sobressalente (reservado somente para esta finalidade). 13. Coloque aproximadamente 400 mL de hipoclorito 1% no reservatório de lixo. 14. Recoloque o reservatório de lixo no instrumento. Insira o sensor de detecção do lixo no reservatório e enrosque a tampa. 15. Ligue a válvula de pressão para a direção da seta (para a frente, ou seja em sua direção). 16. Verifique se o botão da velocidade de fluxo está em HIGH e o botão de controle de fluído está em RUN (verde) 17. Verifique se há bolhas de ar na mangueira do filtro de salina. Caso observe a presença de bolhas, desconecte a mangueira do filtro, bata levemente na mesma para que as bolhas subam e usando uma gaze ou papel toalha pressione a entrada da mangueira, até a retirada de todas as bolhas do sistema. 18. Conecte a mangueira do filtro de salina novamente. 19. Retire as bolhas de ar das mangueiras do frasco de FACSFlow e do frasco de lixo, abrindo e fechando a válvula do filtro até que as bolhas não estejam visíveis nas mangueiras. 20. Pressione a tecla STAND BY caso não vá adquirir as amostras no momento. FINALIZANDO OPERAÇÃO NO FACSCalibur PS: Antes de desligar o instrumento ou após utilizar amostras viscosas ou contendo corantes como: PI (propidium iodide) AO (acridine orange) ou TO (thiazole orange), é necessário utilizar os procedimentos abaixo para prevenir entupimentos e remover os corantes aderentes. 1. Coloque um tubo contendo 3 mL de hipoclorito 0.5% na injeção de amostra (SIP) e deixe o braço do suporte de amostra aberto por 1 minuto. 2. Feche o braço do suporte da amostra e deixe correr o hipoclorito 0.5% por 5 minutos.O botão de controle de velocidade da amostra deve estar em HI (Alta). 3. Coloque um tubo contendo 3 mL de água destilada na injeção de amostra (SIP) e deixe o braço do suporte da amostra aberto por 1 minuto. 4. Feche o braço do suporte da amostra e deixe correr a água destilada por 5 minutos. O botão de controle de velocidade da amostra deve estar em HI (Alta). 5. Coloque o botão de controle de fluído em STANDBY. 6. Coloque um tubo contendo não mais do que 1 mL de água destilada na injeção de amostra (SIP). Este tubo deverá permanecer no SIP para prevenir formação de depósito de sais no tubo de injeção. Se tiver terminado de correr as amostras, desligue o computador e em seguida o instrumento FACSCalibur. MANUTENÇÃO MENSAL 1. Ligue o instrumento FACSCalibur. 2. Verifique se a válvula de Pressão, localizada entre os reservatórios de fluídos e lixo, do instrumento está desligada (sentido contrário da seta, para trás). 3. Pressione o clip de metal e retire a válvula de fluído (branco) e mantenha a válvula de ar (azul) conectada. 4. Desenrosque a tampa do reservatório de fluído, retirando o sensor de detecção de fluído do reservatório. 5. Deslize o protetor de metal que fica sobre o reservatório de fluido para a frente, ou seja em sua direção. 6. Remova o reservatório de fluído. 7. Instale um reservatório sobressalente (usado somente para esta finalidade) no lugar do reservatório de fluído, contendo 1 a 2 litros de hipoclorito 0.5%. 8. Recoloque o protetor de metal, ajustando-o sobre os pinos e deslizando-o para trás, ou seja, na direção contrária de sua posição. 9. Pressione o clip de metal, retire a válvula que está sobre a porta de entrada do filtro salina. 10. Conecte a válvula do fluído (branco) na porta de entrada da válvula do filtro salina que foi retirado. Deixe o conector do filtro salina solto. 11. Pressione o botão de velocidade de fluxo em HI (Alto) e coloque um tubo contendo 3mL de hipoclorito 0.5% na injeção de amostra (SIP), com braço fechado. 12. Pressione o botão de controle de fluído RUN e deixe a solução correr entre 20 e 30 minutos. 13. Remova o tubo contendo hipoclorito que está na injeção da amostra (SIP). 14. Repita as etapas 6 a 11 substituindo o reservatório de hipoclorito 0.5% pelo reservatório sobressalente de água destilada (reservado apenas para essa finalidade). O tubo com hipoclorito também deve ser substituído por um tubo contendo 3mL de água destilada. 15. Terminada as etapas, substitua o reservatório de água destilada pelo reservatório contendo FACSFlow ou PBS. 16. Coloque um tubo contendo não mais do que 1 mL de água destilada na injeção de amostra (SIP). Este tubo deverá permanecer no SIP para prevenir formação de depósito de sais no tubo de injeção. 17. Pressione o botão STANDBY. 18. Neste ponto você pode desligar o FACSCalibur ou seguir as etapas de inicialização do instrumento para correr suas amostras.