CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 PRONTUÁRIO ODONTOLÓGICO: O TEMPO DE GUARDA E A QUEM COMPETE Fabiano de Sant’Ana dos SANTOS; Zaiden GERAIGE NETO; Fábio Luiz Ferreira SCANNAVINO; Alex Tadeu MARTINS RESPOSTAS DE CULTIVARES DE SOJA À INOCULAÇÃO E USO DE COBALTO E MOLIBDÊNIO Ivana Marino BÁRBARO; Eduardo VOLPE TOLLER; Laerte Souza BÁRBARO JÚNIOR; Marcelo TICELLI; Fernando Bergantini MIGUEL; Jósé Antonio ALBERTO DA SILVA; Paulo Cesar RECO INFLUÊNCIA DE VITAMINAS DO COMPLEXO B NO EFEITO ANTIINFLAMATÓRIO E ANTINOCICEPTIVO DO DICLOFENACO E DO NIMESULIDE Luiz Alves RODRIGUES, José Francisco FRACASSO, Clarissa Ezaki de SIQUEIRA FRATURA RADICULAR HORIZONTAL NO TERÇO CERVICAL: CICATRIZAÇÃO POR CALCIFICAÇÃO. CASO CLÍNICO José Umberto BAMPA; Vera Lucia BERNARDES ; Fabiano de Sant’Ana dos SANTOS UTILIZAÇÃO DE RESÍDUOS AGROINDUSTRIAIS PARA A PRODUÇÃO DE PROTEASES POR FERMENTAÇÃO SUBMERSA USANDO O TERMOFÍLICO BACILLUS SP SMIA-2 Andréia Boechat DELATORRE; Marcela Vicente Vieira ANDRADE; Silvania Alves LADEIRA; Victor Haber PEREZ; Meire Lélis Leal MARTINS CARACTERIZAÇÃO PRODUTIVA DA PECUÁRIA LEITEIRA NA ÁREA DO ESCRITÓRIO DE DESENVOLVIMENTO RURAL DE JABOTICABAL/SP André Dias LOPES, Mauro Dal Secco de OLIVEIRA, Maria Imaculada FONSECA AVALIAÇÃO DA INFILTRAÇÃO MARGINAL DE UM CIMENTO À BASE DE POLÍMERO DE MAMONA EM RETRO-OBTURAÇÕES. ESTUDO PILOTO DE EFICÁCIA IN VITRO Devanir de Araújo CERVI, Liliane Hitomi SUNTO, Carlos Alberto MOSQUINI, Elizangela Partata ZUZA, Maria José Pereira de ALMEIDA INTERRELAÇÃO ENTRE A DOENÇA PERIODONTAL CRÔNICA E A RESPOSTA PULPAR AO ESTÍMULO: AVALIAÇÃO CLÍNICA E RADIOGRÁFICA Elizangela Partata ZUZA, Benedicto Egbert Corrêa de TOLEDO, Ana Luiza Vanzato CARRARETO, Marcela Milanezi de ALMEIDA, Elizabeth Pimentel ROSETTI, Osvaldo Eduardo AIELO AVALIAÇÃO DOS PARÂMETROS MICROBIOLÓGICOS E FÍSICO-QUÍMICOS DE IOGURTES COMERCIALIZADOS NO MUNICÍPIO DE CAMPOS DOS GOYTACAZES, RJ Thamy Lívia Ribeiro CORRÊA, Silvania Alves LADEIRA, Raphael Cardoso RODRIGUES, Sílvia Menezes de Faria PEREIRA, Fábio da Costa HENRY, Meire Lelis Leal MARTINS NOVILHAS DE CORTE SUBMETIDAS À SUPLEMENTAÇÃO EM PASTAGEM NA ÉPOCA DAS SECAS: DESEMPENHO E CARACTERES GENÉTICOS POLIMÓRFICOS DO SANGUE Maria Margareth Theodoro CAMINHAS, Sílvia Helena Venturolli PERRI e Marcelo Pereira MACEDO FILMES BIODEGRADÁVEIS COM ÓLEOS ESSENCIAIS DE LARANJA E CANELA: ESTUDO SOBRE PRODUÇÃO E INIBIÇÃO DO CRESCIMENTO DE MICRORGANISMOS Lais Martins FERREIRA; Everton MARTINES; Márcia Luzia RIZZATTO e Esamir Ribeiro AKL AMELOGÊNESE IMPERFEITA: ALTERNATIVA DE TRATAMENTO Fábio Luiz SCANNAVINO; Marlei Seccani GALASSI; Letícia Paula OLIVEIRA; Renata Marçon SPECHOTO; Fabiano de Sant´Ana dos SANTOS; Alex Tadeu MARTINS Ciência e Cultura 1 2 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 CENTRO UNIVERSITÁRIO DA FUNDAÇÃO EDUCACIONAL DE BARRETOS PRÓ-REITORIA DE PÓS-GRADUAÇÃO E PESQUISA CIÊNCIA E CULTURA Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos Endereço: POSGRAD - Pró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos Av. Prof. Roberto Frade Monte, 389 – Aeroporto 14783-226 – Barretos – SP – Brasil [email protected] www.feb.br/revista/revista.htm Publicação Semestral / Semi-annual publication Solicita-se permuta / Exchange desired / Si chiede lo cambio / On demande l’échange / Man bittet um Austausch Ciência e Cultura 3 4 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 CIÊNCIA E CULTURA CENTRO UNIVERSITÁRIO DA FUNDAÇÃO EDUCACIONAL DE BARRETOS Reitoria Reitor: Prof. Dr. Álvaro Fernandez Gomes Pró-Reitor de Graduação: Profa. Dra. Luiza Maria Pierini Machado Pró-Reitor de Pós-Graduação: Prof. Dr. Romildo Martins Sampaio Superintendente de Administração e Finanças: Manoel Nunes Filho Conselho Diretor Luiz Carlos Diniz Buch - Presidente Rogério Ferreira da Silva - Vice Presidente Orlando de Paula Filho - Tesoureiro Paulo Roberto Teixeira Júnior- Secretário Ezisto Hélio Fernandes Césari - Conselheiro Ronaldo Fenelon Santos Filho - Conselheiro Augusto César Arcuri Antoniazzi - Suplente Roberto Arutim - Suplente Ciência e Cultura Editor: Editores Adjuntos: Prof. Dr. Romildo Martins Sampaio (UNIFEB) Prof. Dr. João Antonio Galbiatti (Unesp/Jaboticabal) Profa. Dra. Ana Emília Farias Pontes (UNIFEB) Profª. Dra. Regina Helena Porto Francisco (USP/São Carlos) Prof. Dr. Victor Haber Perez (UENF/RJ) Prof. Dr. Sebastião Hetem (Unesp/Araçatuba e UNIFEB) Comissão Editorial Adriana Galvão Moura Abílio (Direito – UNIFEB) Benedicto Egbert Correa de Toledo (Odontologia – UNESP/Araraquara) Agnaldo Arroio (Ensino de Química – Educação – USP/São Carlos) Camila Ferreira de Avila (UNIFEB) Alberto Cargnelutti Filho (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Caren Elisabeth Studer (UNIFEB) Alex Tadeu Martins (Odontologia-UNIFEB) Carlos Eduardo Angeli Furlani (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Alexandre Bryan Heinemann (CIRAD – França) Carlos José dos Santos Pellegrino (Odontologia – UNIFEB) Alfredo Argus (Serviço Social – UNIFEB) Carlos Reisser Junior (Agrometeorologia – EMBRAPA/Clima Temperado) Álvaro Fernandes Gomes (Física – UNIFEB) Carlos Teixeira Puccini (Engenharia Civil – UNIFEB) Ana Carolina Garcia Canoas (UNIFEB) Celso Eduardo Sakakura (Odontologia-UNIFEB) Ana Maria de Souza (Farmácia – USP/Ribeirão Preto) Cesar Augusto Moreira Amendola (UNIFEB) Ana Emília F. Pontes (Odontologia-Unifeb) Ciro Sérgio Abe (Administração – UNIFEB) André Cordeiro Leal (Direito - PUC MG e Milton Campos/MG) Claudia Regina Bonini Domingos (Biologia – UNESP/São José do Rio Preto) André Del Negri (Direito – UNIUBE) Cláudio Roberto Pacheco (Engenharia Elétrica - UNIFEB) Andréia Raquel Simoni (UNIFEB) Clovis Sansigolo (INPE) Ângelo Rubens Migliore Júnior (Engenharia Civil – UNIFEB) Cristina Cunha Carvalho Terrone (Química – UNIFEB) Antonio Aparecido Pupim Ferreira (Química - Unesp/Araraquara) Daniela Cristina Z. P. David (Agronomia - UNIFEB) Antonio Baldo Geraldo Martins (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Daniela Jorge de Moura (Engenharia Agrícola – UNICAMP) Antonio Carlos Delaiba (Engenharia Elétrica – UFU) Daniela Russo Leite (UNIFEB) Antonio Carlos Pizzolitto (Farmácia – UNESP/Araraquara) Danilo Cesar Checchio Grotta (UNIFEB) Antonio de Paulo Peruzzi (UNIFEB) Danísio Prado Munari (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Arlindo José de Souza Júnior (Educação Matemática – UFU) David Chacon Álvares (Eng. Alimentos – Univ. Est. Paraná/Guarapuava) Ciência e Cultura 5 v. 3, nº 2, Novembro/2008 - ISSN 1980 - 0029 CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB David Luciano Rosalen (Engenharia Civil - UNIFEB) Jaqueline Aparecida Bória Fernandes (UNIFEB) Deise Maria Fontana Capalbo (Meio Ambiente - EMBRAPA/Jaguariúna) Jean Carlo Alanis (Engenharia de Alimentos – UNIFEB) Deise Pazeto Falcão (Farmácia - UNESP/Araraquara) Jeosadaque José de Sene (Química – UNIFEB) Delly Oliveira Filho (Engenharia Agrícola – Universidade Federal de Viçosa) João Antonio Galbiatti (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Deny Munari Trevisani (Odontologia – UNIFEB) João Domingos Biagi (Engenharia Agrícola – UNICAMP) Diana Maria Serafim (UNIFEB) João Marino Júnior (Administração – UNIFEB) Dietrich Schiel (Ensino de Física – USP/São Carlos) Jorge Aberto Vieira Costa (Eng. de Alimentos – Univ. Fed. do Rio Grande/RS) Dílson Gabriel dos Santos (Administração – FEA/USP) José Carlos Barbosa (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Dirceu da Silva (Educação – UNICAMP) José Eduardo Cora (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Durval Dourado Neto (Ciências Agrárias - USP) José Luiz Guimarães (Educação – UNESP/Assis) Édson Alves Campos (Odontologia – UNIFEB) José Marques Júnior (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Eduardo Katchburian (Medicina – UNIFESP) José Tadeu Jorge (Engenharia Agrícola – UNICAMP) Eduardo Teixeira da Silva (Eng. Agrícola – Universidade Federal do Paraná) José Walter Canoas (Serviço Social – UNESP/Franca) Elcio Marcantonio Junior (Odontologia – UNESP/Araraquara) Juliana Rico Pires (Odontologia - UNIFEB) Eleny Balducci Roslindo (Odontologia – UNESP/Araraquara) Juliemy Aparecida de Camargo Scuoteguazza (Odontologia – FEB) Elisabete Frollini (Química – USP/São Carlos) Júlio César dos Santos (Engenharia Química – FAENQUIL/Lorena) Elisabeth Pimentel Rosseti (Odontologia – UNIFEB) Jurnadyr Carneiro Nobre de Lacerda Neto (UNIFEB) Elizangela Partata Zenza (Odontologia - UNIFEB) Karina Silva Moreira Macari (Odontologia – FEB) Emanuel Carlos Rodrigues (UNIFEB) Késia Oliveira da Silva (Engenharia Agrícola – ESALQ/USP) Fernanda Scarmato de Rosa (Farmácia – UNIFEB) Khosrow Ghavami (Engenharia Civil – PUC/RJ) Fábio Luiz F. Scannavino (Odontologia - UNIFEB) Kil Jin Park (Engenharia Agrícola – UNICAMP) Fernando Horta Tavres (Direito – PUC/MG) Kleiber David Rodrigues (Engenharia Elétrica – UFU) Fernando Salimon Ribeiro (Odontologia - UNIFEB) Lindamar Maria de Souza (Farmácia – FEB) Flávio Dutra de Rezende (Zootecnia - APTA/AM – Secret. Agricultura de SP) Lisete Diniz Ribas Casagrande (Educação – FEB/UNAERP) Francisco José Vela (Engenharia Civil – UNIFEB) Letícia Helena Theodoro Geraldo Nunes Correa (Sistema de Informação – UNIFEB) Lizeti Toledo de Oliveira Ramalho (Odontologia – UNESP/Araraquara) Gláucia Heloisa Malzone Bastos de Aquino (UNIFEB) Lorival Larini (Farmácia – FEB) Gustavo Rezende Siqueira (Zootecnia - APTA/AM – Secret. Agricultura de SP) Lucas de Souza Lehfeld (UNIFEB) Helcio Zanetti Bocatto (Zootecnia / Administração - UNIFEB) Lúcia Helena Sipaúba Tavaraes (Engenharia Agrícola – UNESP/Jaboticabal) Heizir Ferreira de Castro (Engenharia Química – FAENQUIL/Lorena) Luciana Rezende Alves de Oliveira (UNIFEB) Helio Grassi Filho (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Luiz Alves Rodrigues (UNIFEB) Hélio Massaiochi Tanimoto (Odontologia – UNIFEB) Luiz Carlos Pardini (Odontologia – USP/Ribeirão Preto) Hérida Regina Nunes Salgado (Farmácia – UNESP/Araraquara) Luiz Fernando Rimoli (UNIFEB) Hidetake Imasato (Química – USP/São Carlos) Luiz Macelaro Sampaio (Odontologia – FEB) Holmer Savastano Júnior (Eng. Civil/Agrícola – FZEA/USP Pirassununga) Luiz Manoel Gomes Junior (Direito – UNAERP) Hugo Barbosa Suffredini (Química – UNIJUÍ) Luiz Paulo Geraldo (Física – FEB) Humberto Tonhati (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Luiz Rodrigues Wambier (Direito - UNAERP) Ignácio Maria dal Fabro (Engenharia Agrícola – UNICAMP) Luiz Rogério Dinelli (Química – FEB) Irenilza de Alencar Naas (Engenharia Agrícola – UNICAMP) Luiza Maria Pierini Machado (Engenharia de Alimentos – FEB) Isabel Cristina Moraes Freitas (Engenharia de Alimentos – UNIFEB) Manoel de Jesus Simões (Medicina – UNIFESP) Jackson Rodrigues de Souza (Química – Universidade Federal do Ceará) Manoel Victor Franco Lemos (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Jairo Osvaldo Cazetta (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Marcelo Borges Mansur (Engenharia Química – Univ. Federal de Minas Gerais) Janice Rodrigues Perussi (Química – USP/São Carlos) Marcelo Henkemeier (Engenharia de Alimentos - Univ. de Passo Fundo) 6 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Marcelo Henrique de Faria (Zootecnia - APTA/AM – Secret. Agricultura de SP) Rael Vidal (Biologia – FEB) Márcia Justino Rossini Mutton (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Ranulfo Monte Alegre (Engenharia de Alimentos – UNICAMP) Márcia Luzia Rizzatto (Engenharia de Alimentos – FEB) Raphael Carlos Comeli Lia (Odontologia – FEB) Marcia Maisa de Freitas Afonso (UNIFEB) Regina Célia de Matos Pires (Recursos Hídrico – IAC/Campinas) Marco Aurélio Neves da Silva (Zootecnia – ESALQ/USP- Piracicaba) Regina Helena Porto Francisco (Química – FEB) Marcos Eduardo de Mattos (Administração – FEB) Regina Kitagawa (Engenharia de Alimentos – ITAL) Maria Auxiliadora Brigliador Conti (Química – FEB) Reginaldo da Silva (Direito – FEB) Maria Cristina Thomaz (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Reginele Steluti (UNIFEB) Maria José de Almeida (Educação – UNICAMP) Renata Camacho Miziara (Odontologia – FEB) Maria José Soares Mendes Giannini (Farmácia – UNESP/Araraquara) Renato de Mello Prado (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Maria Teresa do Prado Gambardella (Química – USP/São Carlos) Renato Moreira Ângelo (Física – Univ. Federal do Paraná) Maria Tereza Ribeiro Silva Diamantino (Engenharia de Alimentos – FEB) Ricardo Dias Signoretti (Eng. Agronômica - APTA/AM – Secret.Agricultura- SP) Marília Oetterer (Agroindústria – ESALQ/USP – Piracicaba) Rinaldo César de Paula (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Marilú Pereira Serafim Parsekian (Engenharia Civil – FEB) Rober Tufi Hetem (Medicina – UNICAMP) Mário José Filho (Serviço Social – UNESP/Franca) Roberta Toledo Campos (Direito – UNIUBE) Mário Rolim (Engenharia Agrícola – Univ. Federal Rural de Pernambuco) Roberto Braga (Planejamento Urbano – UNESP/Rio Claro) Marlei Aparecida Seccani Galassi (Odontologia – FEB) Roberto Holland (Odontologia – UNESP/Araçatuba) Marta Regina Farinelli (UNIFEB) Romildo Martins Sampaio (Engenharia de Alimentos – FEB) Mauro dal Secco de Oliveira (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Rosemiro Pereira Leal (Direito – UFMG e PUC/MG) Miguel Carlos Madeira (Odontologia – UNESP/Araçatuba) Rouverson Pererira da Silva (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Miriam Eiko Katuki Tanimoto (Odontologia – FEB) Salete Linhares Queiroz (Química – USP/São Carlos) Neyton Fantoni Junior (Direito – FEB) Sally Cristina Moutinho Monteiro (Farmácia – FEB) Nilza Maria Martinelli (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Sebastião Hetem (Odontologia – FEB) Norberto Luiz Amsei Júnior (UNIFEB) Sérgio de Freitas (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Odair A. Fernandes (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Sérgio Henrique Tiveron Juliano (Direito – UNIUBE) Odila Florêncio (Química – UFSCAR) Shirley Aparecida Garcia Berbari (Engenharia de Alimentos – ITAL) Orlando Fatibello Filho (Química – UFSCAR) Silvano Bianco (Agronomia – UNESP/Jaboticabal) Oselys Rodrigues Justo (Engenharia de Química - FEQ/UNICAMP) Simone Barone Salgado Marques (UNIFEB) Osvaldo Eduardo Aielo (Física – FEB) Sissi Kawai Marcos (Engenharia de Alimentos – FEB) Patrícia Amoroso (Odontologia – FEB) Sônia Maria Alves Jorge (Química – UNESP/Botucatu) Patrícia Helena Rodrigues de Souza (Odontologia – FEB) Sonia Regina Meira (Educação - FAEX) Patrícia Maria Nassar (Química – FEB) Sylvio Luís Honório (Engenharia Agrícola – UNICAMP) Paula Homem de Mello (Química – USP/São Carlos) Telmo Antonio Dinelli Estevinho (Sociologia/Ciência Política – UFMT) Paulo César Hardoim (Engenharia Agrícola – Univ. Federal de Lavras) Tetuo Okamoto (Odontologia – UNESP/Araçatuba) Paulo Estevão Cruvinel (Embrapa – São Carlos) Ueide Fernando Fontana (Odontologia – FEB) Paulo Sérgio Cerri (Odontologia – UNESP/Araraquara) Valdir Gouveia Garcia (UNESP-Araçatuba) Pedro Leite de Santana (Engenharia Química – Univ. Federal de Sergipe) Victor Haber Perez (UENF/RJ) Pedro Paulo Scandiazzo (Educação Matemática – UNESP/S. J. do Rio Preto) Walter Antonio de Almeida (Odontologia – FEB) Zaiden Geraige Neto (UNIFEB) Ciência e Cultura 7 v. 3, nº 2, Novembro/2008 - ISSN 1980 - 0029 CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB Editorial É com grande satisfação que chegamos à 6ª edição impressa e eletrônica da “Ciência e Cultura”, mantendo ao longo desses três anos de circulação, a periodicidade e a abordagem multidisciplinar nos artigos e contribuições recebidas. Além de ser um instrumento de divulgação científica dos trabalhos de pesquisa realizados pelos docentes e discentes do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos - Unifeb, cada vez mais, a “Ciência e Cultura” tem sido escolhida por pesquisadores de outras instituições e centros de pesquisa. Prova disso é que dos onze artigos publicados nesta edição, seis são contribuições oriundas de outras instituições. O caráter multidisciplinar, que é um dos pilares da publicação, se faz presente, em trabalhos que abordam temas ligados à odontologia, engenharia de alimentos, agronomia, zootecnia, e biotecnologia. Reiteramos assim o nosso compromisso de crescer e nos consolidar como um veículo de divulgação científica aberto à comunidade científica interna e externa à nossa instituição. Apesar do grande esforço dos editores, membros do corpo técnico-científico e diagramador para que tenhamos sempre edições limpas, sem erros, eles às vezes acontecem. Fica aqui registrado nossas desculpas, especialmente em relação ao trabalho “Determinação do teor de urânio em amostras de sedimentos do Ribeirão Pitangueiras” de José Mário Segala Junior, Ione Makiko Yamazaki e Luís Paulo Geraldo, cujos nomes dos autores foram trocados na última edição (novembro de 2008) e ao trabalho “Avaliação da infiltração marginal de um cimento à base de polímero de mamona em retro-obturações. Estudo piloto de eficácia in vitro”, de autoria de Devanir de Araújo Cervi e colaboradores, que teve problema de impressão na parte final, e que por isso, está sendo publicado novamente. Redobraremos os nossos cuidados e atenção para que fatos como esses não se repitam. Finalmente, gostaríamos de renovar os agradecimentos a todos os que contribuíram nesta edição, esperando poder continuar recebendo contribuições científicas de pesquisadores do Unifeb e de outras instituições. Lembramos aina, que a versão eletrônica desta e de todas as edições anteriores da “Ciência e Cultura” está disponível para consulta livre no endereço www.unifeb.edu.br/revista/revista.php Até a próxima edição! Prof. Romildo Martins Sampaio Editor 8 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 SUMÁRIO Artigos Científicos Original Articles Prontuário odontológico: O tempo de guarda e a quem compete Dentistry records: Guard´s time and to who competes Fabiano de Sant’Ana dos SANTOS; Zaiden GERAIGE NETO; Fábio Luiz Ferreira SCANNAVINO; Alex Tadeu MARTINS ............................................................................................................................................................................................................................11 Respostas de cultivares de soja à inoculação e uso de cobalto e molibdênio Responses of the soybean cultivars to the inoculation and application of cobalt and molybdenum Ivana Marino BÁRBARO; Eduardo VOLPE TOLLER; Laerte Souza BÁRBARO JÚNIOR; Marcelo TICELLI; Fernando Bergantini MIGUEL; Jósé Antonio ALBERTO DA SILVA; Paulo Cesar RECO ..........................................................................................................................................................................................................................17 Influência de vitaminas do complexo B no efeito antiinflamatório e antinociceptivo do diclofenaco e do nimesulide Luiz Alves RODRIGUES, José Francisco FRACASSO, Clarissa Ezaki de SIQUEIRA ............................................................................................................................................................................................................................25 Fratura radicular horizontal no terço cervical: cicatrização por calcificação. Caso clínico Horizontal root fracture in the cervical third: healing for calcification. Clinical case José Umberto BAMPA; Vera Lucia BERNARDES ; Fabiano de Sant’Ana dos SANTOS ............................................................................................................................................................................................................................33 Utilização de resíduos agroindustriais para a produção de proteases por fermentação submersa usando o termofílico Bacillus sp SMIA-2 Utilization of agroindustrial residues for protease production by submerged fermentation using thermophilic bacillus sp SMIA-2 Andréia Boechat DELATORRE; Marcela Vicente Vieira ANDRADE; SilvaniaAlves LADEIRA; Victor Haber PEREZ; Meire Lélis Leal MARTINS ...........................................................................................................................................................................................................................41 Caracterização produtiva da pecuária leiteira na área do escritório de desenvolvimento rural de Jaboticabal/SP Productive characterization of the cattle milk at the area of the agricultural development office of Jaboticabal/SP André Dias LOPES, Mauro Dal Secco de OLIVEIRA, Maria Imaculada FONSECA ............................................................................................................................................................................................................................49 Avaliação da infiltração marginal de um cimento à base de polímero de mamona em retro-obturações. Estudo piloto de eficácia in vitro Marginal leakage evaluation of a castor bean polymer cement used in retrofilling. A pilot study of in vitro eficacy Devanir de Araújo Cervi, Liliane Hitomi Sunto, Carlos Alberto Mosquini, Elizangela Partata Zuza, Maria José Pereira de Almeida Este artigo foi originalmente publicado na edição de novembro de 2008, e por problemas de impressão está sendo novamente publicado ...........................................................................................................................................................................................................................57 Interrelação entre a doença periodontal crônica e a resposta pulpar ao estímulo: avaliação clínica e radiográfica Inter-relation between chronic periodontal disease and the response pulp to stimulus: Clinical and radiographic evaluation Elizangela Partata ZUZA, Benedicto Egbert Corrêa de TOLEDO, Ana Luiza Vanzato CARRARETO, Marcela Milanezi de ALMEIDA, Elizabeth Pimentel ROSETTI, Osvaldo Eduardo AIELO ..........................................................................................................................................................................................................................65 Avaliação dos parâmetros microbiológicos e físico-químicos de iogurtes comercializados no município de Campos dos Goytacazes, RJ Microbiological and physico-chemical parameters evaluation of yogurts sold in Campos dos Goytacazes, RJ. Thamy Lívia Ribeiro CORRÊA, SilvaniaAlves LADEIRA, Raphael Cardoso RODRIGUES, Sílvia Menezes de Faria PEREIRA, Fábio da Costa HENRY, Meire Lelis Leal MARTINS ...........................................................................................................................................................................................................................73 Novilhas de corte submetidas à suplementação em pastagem na época das secas: desempenho e caracteres genéticos polimórficos do sangue Beef heifers before supplementation to pasture in the dry season: performance characteristics and genetic polymorphism of blood. Maria Margareth Theodoro CAMINHAS, Sílvia Helena Venturolli PERRI e Marcelo Pereira MACEDO ..........................................................................................................................................................................................................................81 Filmes biodegradáveis com óleos essenciais de laranja e canela: estudo sobre produção e inibição do crescimento de microrganismos Biodegradable films with essential oils of orange and cinnamon: study about production and inhibition of the growth of microorganisms Lais Martins FERREIRA; Everton MARTINES; Márcia Luzia RIZZATTO e Esamir Ribeiro AKL ..........................................................................................................................................................................................................................93 Amelogênese imperfeita: Alternativa de tratamento Amelogenesis imperfect: Palliative treatment Fábio Luiz SCANNAVINO; Marlei Seccani GALASSI; Letícia Paula OLIVEIRA; Renata Marçon SPECHOTO; Fabiano de Sant´Ana dos SANTOS; Alex Tadeu MARTINS .........................................................................................................................................................................................................................105 Ciência e Cultura 9 10 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Prontuário odontológico: O tempo de guarda e a quem compete Dentistry records: Guard´s time and to who competes Fabiano de Sant’Ana dos SANTOS1; Zaiden GERAIGE NETO2; Fábio Luiz Ferreira SCANNAVINO1; Alex Tadeu MARTINS1 1. Cirurgiões-Dentistas, Professores Doutores do Curso de Odontologia do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos, SP. 2. Advogado, Professor Doutor do Curso de Direito do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos, SP. Endereço para correspondência: Fabiano de Sant’Ana dos Santos Av. 27, n. 931, Centro, CEP:14780-340 – Barretos,SP. - Fone 17 8132-6963 RESUMO Esta revisão de literatura teve como objetivo pesquisar na legislação brasileira o tempo de guarda do prontuário odontológico, uma vez que a Odontologia, é uma ciência que lida diretamente com a saúde do homem sendo, portanto, necessário registrar cada etapa do tratamento no sentido de resguardar o cirurgião-dentista contra eventuais questionamentos jurídicos e até mesmo em processos de identificação post-mortem. PALAVRA-CHAVE: Prontuário, Odontologia, Jurisprudência. ABSTRACT This literature review had as aim to research in the brazilian legislation the time of guard of the treatment in the sense of protecting the dentist against eventual litigation and even in processes dentistry records, once the dentistry is a science that worked directly with the man’s health being, of identification post-mortem. therefore, necessary to register each stage of the KEYWORDS: Records, Dentistry, Jurisprudence. Ciência e Cultura 11 Prontuário odontológico: O tempo de guarda e a quem compete INTRODUÇÃO SANTOS et al. produzida em função do tratamento dentário, como as Sob a influência direta do pensamento grego, fichas clínicas, radiografias, modelos, traçados, cópias de receitas, descrição dos procedimentos, entre outros. notadamente aristotélico, nossa ciência nasceu, cresceu e amadureceu sempre observando, classificando, O Conselho Federal de Odontologia, por meio do Parecer no 125/92, apresenta as normas e os padrões organizando, arquivando (LANA, 2007). Esta frase sintetiza o escopo da disciplina de Odontologia Legal e para elaboração do prontuário clínico odontológico, devendo ser usado, para identificação dos elementos Deontologia do Curso de Odontologia do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos. dentários, o Sistema Decimal da Federação Dentária Internacional - FDI. Segundo este Parecer, o prontuário A palavra prontuário, de acordo com o Dicionário da Língua Portuguesa Aurélio, significa I - “lugar onde odontológico está sujeito às implicações legais e deve ser corretamente preenchido e arquivado. Ressalta-se se guardam ou depositam coisas das quais se pode necessitar a qualquer instante”. II – Ficha (médica, ainda que a posse do prontuário é do paciente e a sua guarda é do profissional, devendo ser arquivado, por no policial, etc...) com os dados referentes a uma pessoa. Desta forma, não deve causar qualquer surpresa mínimo, dez anos após o último procedimento. O aludido documento recomenda ainda que o prontuário deva ser o fato de que, como ocorre na Medicina e em outras ciências correlatas, na Odontologia o profissional legível, podendo ser manuscrito, datilografado, digitado. Segundo França (2007), durante muito tempo, necessita cuidar do registro gráfico, radiográfico e, mesmo documentos de todos os procedimentos aprendeu-se e ensinou-se que o prontuário do paciente deveria ficar sob a guarda do profissional durante, no odontológicos realizados nos pacientes. Tal cuidado, por ser uma constante obrigatória na prática odontológica, mínimo, 20 anos. O referido autor destaca que: tal afirmação se devia tem sido objeto de intensa orientação em escolas e associações de classe (VANRELL, 2002; SANTOS, por dois motivos: 1) porque se entendia que o prontuário 2005). Com a caracterização do erro médico, os pertencia ao profissional. Tanto isso é lógico, que os pacientes raramente demandavam judicialmente contra cirurgiões-dentistas têm experimentado um sentimento freqüente de “caça às bruxas”, no qual as vítimas são os os profissionais médicos e cirugiões-dentistas, porque sem acesso à documentação dificilmente conseguiriam odontólogos, então responsáveis pelo cometimento de erros técnicos (VANRELL, 2002; MACIEL et al., provar os fatos alegados no processo. Por isso, havia um número insignificante de processos judiciais contra 2003). Sendo assim, os profissionais da Odontologia deveriam ficar mais preocupados, no sentido de melhor esses profissionais. Por esse mesmo motivo, as seguradoras que, nessa mesma época, começaram a guardar as informações técnico-profissionais (SANTOS & GERAIGE-NETO, 1996; VANRELL, 2002; ofertar o seguro de responsabilidade civil para estes profissionais desistiram de fazê-lo. Para quê um seguro ALMEIDA et al., 2004; SANTOS, 2005). O presente artigo tem por objetivo rever o tempo desta natureza se o risco de um processo praticamente inexistia? de guarda do prontuário clínico dos pacientes atendidos pelos cirurgiões-dentistas. 2) porque o tempo de guarda da documentação se vinculava ao prazo da prescrição da ação civil (20 anos), como estabelecia o Código Civil Brasileiro de 1916. REVISÃO DA LITERATURA Com a promulgação da Constituição Federal de 1988, foi reconhecido e garantido, no art. 5o, o direito O prontuário clínico é um documento fundamental e obrigatório. É composto de toda a documentação do consumidor, cujas diretrizes seriam estabelecidas por uma nova lei. Em 1990, entrou em vigência a Lei 8078 12 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 de 11/09/90, Código de Defesa do Consumidor (CDC), violados pelo profissional liberal, o Inciso III do Art. resguardando a dignidade do consumidor e estabelecendo os seus direitos básicos, até então 6º e Artigos 8º e 9º do CDC. Deste ponto em diante, surgiram diferentes inexistentes. Inclusive no que se refere às informações arquivadas sobre ele, como dispõe na Seção VI – DOS interpretações sobre quem detinha a posse da documentação clínica do paciente, chegando-se, depois BANCOS DE DADOS E CADASTROS DO CONSUMIDORES – Art. 43. O consumidor, sem de muitos debates, à conclusão de que a documentação é do paciente e que o profissional tem a sua guarda prejuízo do disposto no Art. 86, terá acesso às informações existentes em cadastros, fichas, registros provisória (FRANÇA, 2007). A dúvida, então, voltou a ser a mesma de antes, e dados pessoais e de consumo arquivados sobre ele, bem como sobre as suas respectivas fontes. por quanto tempo deve o profissional guardar o prontuário? A orientação que tem prevalecido, de acordo Conforme salienta a doutrina de Silva (2008), nota-se que a elaboração do prontuário está também com França (2007) é a do prazo vinculado ao tempo da prescrição da ação civil, agora não mais de 20 anos uma intimamente ligada à obrigação (=dever) do cirurgiãodentista de informar o paciente sobre os riscos do vez que o Código Civil Brasileiro de 1916 foi revogado e o que está em vigência é o promulgado em 2002, que procedimento e suas possíveis conseqüências. O direito do paciente à informação e o dever do prestador de entrou em vigência em 2003, e dispõe no Art. 205 – A prescrição ocorre em 10 anos, quando a lei não lhe serviços de informar estão previstos no Inciso III do Art. 6º do Código de Defesa do Consumidor, que determina, haja fixado prazo menor. França (2007) relatou que esta tem sido a como direito básico do consumidor, a informação adequada e clara sobre os diferentes produtos e serviços, orientação. Que se deve guardar a documentação por 10 anos, porque decorrido esse prazo o paciente perde com especificação correta de quantidade, características, composição, qualidade e preço, bem como sobre os o direito de demandar judicialmente contra o profissional. Devido a essa orientação, tem-se visto contratos de riscos que apresentem. Completa o artigo 8º do mesmo Código: Os prestação de serviços odontológicos escritos com cláusulas que informam que, após o término do produtos e serviços colocados no mercado de consumo não acarretarão riscos à saúde ou segurança dos tratamento, o prontuário somente será entregue ao contratante depois de decorridos 10 anos, tal conduta consumidores, exceto os considerados normais e previsíveis em decorrência de sua natureza e fruição, configura má fé. Não obstante, o próprio Código fixa um prazo obrigando-se os fornecedores, em qualquer hipótese, a dar as informações necessárias e adequadas a respeito. menor para o caso de responsabilidade de reparação de dano, no Art. 206 – Prescreve: § 30. Em três anos: Interessante acórdão do Tribunal de Justiça do Rio Grande do Sul, de 17 de novembro de 2004, do V – a pretensão de reparação civil. A pretensão do paciente quando demanda Desembargador Adão Sérgio do Nascimento Cassiano, ao julgar questão sobre o tratamento cirúrgico judicialmente o profissional na área civil, é a reparação de dano e para esta, o prazo é de 3 anos e não de 10. bucomaxilofacial, em que a paciente, após a realização de seis cirurgias, não apresentava condições de usar Porém, no Código de Defesa do Consumidor (Lei 8078 de 11 de setembro de 1990), esse prazo é maior, de prótese, ao contrário do que lhe havia prometido o profissional no início do tratamento. Condenou o acordo com o disposto no Art. 27 – “Prescreve em cinco anos a pretensão à reparação pelos danos cirurgião ao pagamento de indenização principalmente porque não cumprido o dever de informar causados por fato de produto ou de serviço prevista na Secção II deste Capítulo, iniciando-se a contagem adequadamente a consumidora sobre a forma e os riscos do tratamento cirúrgico prescrito, restam do prazo a partir do conhecimento do dano e de sua autoria” (ALMEIDA et al., 2004; FRANÇA, 2007) Ciência e Cultura 13 Prontuário odontológico: O tempo de guarda e a quem compete Nota-se que, além do tempo maior, a contagem SANTOS et al. DISCUSSÃO desse prazo se inicia “a partir do conhecimento do dano e de sua autoria”. Apesar dos Cursos de Odontologia brasileiros Importante salientar, contudo, que mesmo estando a maioria da jurisprudência inclinada a entender disponibilizarem em seus currículos a disciplina de Odontologia Legal e Deontologia, como uma ciência ser o prazo prescricional aquele previsto no diploma consumerista (Art. 27 da Lei 8078/90 – 5 anos), há odontológica a serviço da justiça, o que se percebe é a existência de pouca informação e comunicação sobre o decisões, inclusive, que entendem que referido prazo deve ser aquele capitulado no diploma material civil, no tempo de guarda do prontuário odontológico. Em virtude deste fato, é prudente disponibilizar informações visando parágrafo 3º do Art. 206 (3 anos), senão veja-se no Recurso Especial nº 790090 – RR, de relatoria da o resguardo do profissional, bem como, do seu paciente (SANTOS, 2005). Ministra Denise Arruda, 1ª Turma, julgado em 2/8/2007: PROCESSUAL CIVIL. RECURSO Desta forma, indagações como as que se seguem: por que guardar o prontuário do paciente? Por que não ESPECIAL. RESPONSABILIDADE CIVIL DO ESTADO. ERRO MÉDICO. MORTE DE lhe entregar o que é dele? Por que o cirurgião-dentista mantém seus armários lotados de documentos que não PACIENTE. DANO MORAL. PRESCRIÇÃO. ALEGADA VIOLAÇÃO DOS ARTS. 206, § 3º, V, E lhe pertencem? Fazem parte do cotidiano dos profissionais da Odontologia, que segundo Vanrell 2.028 DO CC/2002. IMPUGNAÇÃO DEFICIENTE. INADMISSIBILIDADE. SÚMULA 283/STF. NÃO- (2002), nos Cursos de Odontologia nota-se à conivência com docentes improvisados, ora pela falta de DESIGNAÇÃO DE AUDIÊNCIA PRELIMINAR DE CONCILIAÇÃO (CPC, ART. 331). NULIDADE conhecimento jurídico, ora pelo interesse em não comprometer sua imagem com a emissão de juízos de (NÃO-COMINADA) INEXISTENTE. PRECLUSÃO. 1. O Tribunal de Justiça rejeitou a valor, ora, enfim, pela tendência comodista – laissez faire, laissez passer – de quem pontifica em uma disciplina prescrição porque: (I) o prazo de três anos previsto no art. 206, § 3º, V, do CC/2002, somente será computado com carga horária exígua e considerada, por muitos, apenas complementar na formação do Cirurgião- a partir da sua entrada em vigor, ou seja, 11 de janeiro de 2003; (II) a pretensão à indenização por danos Dentista. Assim sendo, encerrada a relação (paciente e causados por agentes de pessoas jurídicas de direito público e de pessoas jurídicas de direito privado cirurgião-dentista cumpriram com suas obrigações), a melhor conduta sugerida deve ser a devolução do prestadoras de serviços públicos prescreve em cinco anos (Lei 9.494/97, art. 1º-C)... prontuário ao seu legítimo dono, mediante recibo onde se discrimina todos os documentos entregues, de acordo Retornando ao raciocínio anterior: se o prontuário pertence ao paciente e o profissional tem com Santos & Geraige-Neto; 1996; Vanrell, 2002; Santos, 2005; França, 2007. Ainda, de acordo com somente a sua guarda provisória, então fica claro que quem determina o tempo de guarda pelo profissional é o França (2007) com relação ao ônus da prova, este é de quem alega e se, por ventura, pensar-se em uma inversão paciente e não o tempo da prescrição da ação. Donde se conclui que o período de guarda pelo profissional se desse ônus, basta apresentar o recibo provando quais e quantos são os documentos que estão sob a guarda de encerra no momento em que o paciente solicitar o seu prontuário e este lhe for entregue, e não determinado quem alegou e que este deverá apresentar todos sob pena de estar agindo de má fé. pelo tempo da prescrição da ação civil (FRANÇA, 2007). A atitude do cirugião-dentista em entregar o 14 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 prontuário para o seu paciente ao término do tratamento que o Cirurgião-Dentista esteja organizado é uma conduta ética com significado importante: a demonstração clara e cristalina de sua segurança documentalmente, para que não seja surpreendido com investidas descabidas de pacientes profissional, e também, favorecer a família, em caso de infortúnio, uma agilização na localização da oportunistas. Ademais, quanto à dicotomia existente entre obrigações de meios e de resultado, documentação em caso de identificação post-mortem (FRANÇA, 2007). interessante destacar comentário de Yagüez (1993), ao reproduzir julgado do Tribunal Supremo Por outro lado, nada impede que o cirurgiãodentista, além de se resguardar com o recibo de entrega espanhol: “... a atividade dos profissionais da saúde é do prontuário, também mantenha para si uma cópia integral do mesmo, de preferência autenticada. Tal de meios e não de fins, devendo haver prova cabal da conduta danosa decorrente da culpa. Isto é, deve conduta se justifica para evitar que o paciente malicioso ou mal intencionado possa, de alguma forma, deturpar a haver nexo de causalidade entre conduta do profissional e o resultado lesivo...” verdade dos fatos, por meio da adulteração do documento (SANTOS, 2005). CONCLUSÕES CONSIDERAÇÕES FINAIS Como se trata de um tema polêmico e pouco difundido, os autores sugerem que os cirurgiões-dentistas O cirurgião-dentista deve estar atento à legislação quanto ao estabelecido pelo Código Civil devam optar por uma das seguintes condutas: 1. Se o prontuário não for entregue ao paciente, Brasileiro e pelo Código de Defesa do Consumidor sobre o tempo de guarda do prontuário odontológico, deverá o cirurgião-dentista conservar o citado documento em arquivo próprio, por tempo bem como, devolver este prontuário ao término do tratamento mediante um detalhado recibo de entrega ao indeterminado, até que se tenha uma legislação definitiva para tratar esse tema. seu verdadeiro dono, o paciente. A importância de tais verificações se deve ao 2. Se o prontuário for entregue ao paciente -deverá ser mediante recibo de entrega e na presença fato de que nem sempre a doutrina ou a jurisprudência entendem ser algumas especialidades da Odontologia de pelo menos duas testemunhas, desta forma passará toda responsabilidade da guarda deste importante como de meios e sim de resultado, de acordo com Kfouri-Neto (2002) que diz: documento ao paciente quem é o verdadeiro proprietário. “...ao contrário, nas obrigações de resultado, o imponderável está ausente – ou deve ser desconsiderado. O exemplo mais constantemente lembrado de especialidade médica que obriga ao REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS atingimento do resultado previsto é o da cirurgia plástica, com finalidade exclusivamente ALMEIDA, C.A.P.; ZIMMERMANN, R.D.; embelezadora. Na Odontologia, caracterizam-se como obrigações de resultado especialidades como CERVEIRA, J.G.V.; JULIVALDO, F.S.N. Prontuário odontológico - uma orientação para o cumprimento da a prótese dentária, dentística restauradora e a ortodontia...”. Dessa forma, para se evitar um exigência contida no inciso VIII do art. 50 do Código de Ética Odontológica. Disponível em <http:// natural desgaste, decorrente de um possível questionamento judicial, é extremamente prudente www.cfo.org.br/download/pdf/prontuario_2004.pdf>. Acesso em 02 jan. 2008. Ciência e Cultura 15 Prontuário odontológico: O tempo de guarda e a quem compete SANTOS et al. BRASIL. Lei n. 8.078/1990. Código de Defesa MALUF DE ARAÚJO, ANDRÉ LUIS. do Consumidor. São Paulo: Saraiva; 2005. Responsabilidade civil dos cirurgiões-dentistas. In: Responsabilidade civil médica, odontológica e hospitalar. BRASIL. Lei n. 10.406 de 10 jan. 2002. Código Civil. São Paulo: Saraiva, 2006. Coordenação de Carlos Alberto Bittar. São Paulo: Saraiva, 1991, p. 155-175. BRASIL. Ministério da Saúde. Agência Nacional NOGUEIRA FILHO, Gualberto. 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Madrid: Civitas; 1993. 208p. 16 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Respostas de cultivares de soja à inoculação e uso de cobalto e molibdênio Responses of the soybean cultivars to the inoculation and application of cobalt and molybdenum Ivana Marino BÁRBARO1; Eduardo VOLPE TOLLER2; Laerte Souza BÁRBARO JÚNIOR2; Marcelo TICELLI3; Fernando Bergantini MIGUEL3; Jósé Antonio ALBERTO DA SILVA3; Paulo Cesar RECO4 * Parte do trabalho de graduação em desenvolvimento pelo segundo autor, para conclusão do Curso de Agronomia da Faculdade de Agronomia Doutor Francisco Maeda. 1 Autora responsável - Pesquisadora Científica da APTA Regional Alta Mogiana. Avenida Rui Barbosa, s/nº, CEP: 14770-000, Caixa Postal 35, Colina, SP. Fone/Fax: (17) 3341-1400/1155; E-mail: [email protected] 2 Estudantes da Faculdade de Agronomia Doutor Francisco Maeda. Rodovia Jerônimo Nunes Macedo Km 1, CEP: 14500-000. Ituverava, SP. 3 Pesquisadores Científicos da APTA Regional Alta Mogiana. Avenida Rui Barbosa, s/nº, CEP: 14770-000, Caixa Postal 35, Colina, SP. 4 Pesquisador Científico da APTA Regional Médio Paranapanema, Caixa Postal 263, CEP: 19800-000, Assis, SP. RESUMO Objetivou-se avaliar caracteres em cultivares de soja em resposta à inoculação e aplicação de cobalto e molibdênio via pulverização foliar, na safra 2007/08. O delineamento foi em blocos ao acaso com testemunhas adicionais com três repetições, consistindo de 18 tratamentos: 15 cultivares tratadas e mais três cultivares eleitas entre as 15 e utilizadas como testemunhas (não tratadas). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância pelo teste F e as médias comparadas pelo teste de Scott Knott (pd”0,05). As médias gerais e das cultivares para a maioria dos caracteres principalmente para produtividade de grãos mostraram-se superiores as médias das testemunhas indicando que o tratamento das sementes das cultivares com inoculante e aplicação de cobalto e molibdênio promoveu efeitos positivos na maioria das variáveis analisadas. A cultivar M-SOY 8008 (4362,00 kg/ha) destacou-se em relação as outras tratadas, enquanto a testemunha da cultivar IAC 23 (1284,67 kg/ha) mostrou pior desempenho quanto a produtividade de grãos. Valores adequados quanto aos caracteres altura de planta, altura de inserção da primeira vagem e acamamento compatíveis com a colheita mecanizada, valor agronômico, massa de grãos, número de nós, ramos, vagens e sementes, também foram encontrados, demonstrando a aptidão de várias cultivares para cultivo em Colina-SP, desde que seja efetuado um eficiente tratamento de sementes envolvendo inoculante e fungicida, bem como, aplicação de cobalto e molibdênio em V5 via foliar. Palavras-Chave: comportamento, inoculante, micronutrientes, variedades, Glycine max. ABSTRACT It was objectified to evaluate traits in soybean cultivars in response to the inoculation and foliar application of cobalt and molybdenum, in the crop 2007/ 08. The experimental design was the complete randomized block with additional checks, with three replications, consisting of 18 treatments: 15 soybean cultivars treated and more three cultivars chosen among the 15 cultivars and used as checks (not treated). The obtained data were submitted the variance analysis by the test F and the averages compared by Scott Knott’s test (pd”0.05). The general averages and of the soybean cultivars for most of the traits mainly for productivity of grains were superiors the averages of the checks were shown indicating that the treatment of the seeds of the soybean cultivars with inoculant and foliar application of cobalt and molybdenum promoted positive effects in most of the analyzed variables. The M-SOY 8008 (4362.00 kg/ha) stood out in relationship the another soybean cultivars treated, while the check IAC 23 (1284.67 kg/ ha) it showed worse acting as the productivity of grains. Appropriate values with relationship to the traits as the height of plants, height of insert of the first pod and loyding compatible with the automated crop, agronomic value, mass of grains, number of nodes, branches, pods and seeds, were also found, demonstrating the potential of several soybean cultivars for cultivation in Colina-SP, since an efficient treatment of seeds is accomplished involving inoculant and fungicide, as well as, foliar application of cobalt and molybdenum in V5 . Keywords: behavior, inoculant, micronutrients, varieties, Glycine max. Ciência e Cultura 17 Respostas de cultivares de soja à inoculação e uso de cobalto e moibdênio INTRODUÇÃO BÁRBARO et al. que há diferenças significativas entre cultivares de soja A maximização do processo de fixação biológica quanto a sua aceitação por Bradyrhizobium e essa especificidade, em relação à bactéria e à planta, ocorre de nitrogênio (FBN), para que a cultura da soja expresse a totalidade de seu potencial genético, requer um ao nível de cultivar. Também Vernetti (1971) verificou que há variação hereditária, dependendo da constituição conjunto de procedimentos. Entre esses, a escolha do inoculante assume importância, estando, contudo, genética das plantas em relação à bactéria. Além disso, vale ressaltar que o desenvolvimento de cultivares de estreitamente associado à rotação de culturas, ao manejo de solo e ao manejo integrado de pragas, doenças e soja é usualmente direcionado á obtenção de materiais com ampla adaptação ambiental e elevada produtividade. plantas daninhas. A bactéria em simbiose com a planta de soja poderá suprir a demanda de nitrogênio (N) sem Para tanto, é fundamental a avaliação do desempenho de linhagens e/ou cultivares de soja regionalmente, devido a necessidade complementar de fertilizante nitrogenado, sendo que pesquisas relatam que a obtenção total de N a provável existência de interação do tipo genótipo x ambiente, para atestar a viabilidade técnica da cultura fixado pelo complexo soja e Bradyrhizobium tem sido estimado em 80% a 95% (HUNGRIA e CAMPO, na região. A partir dessas considerações, conduziu-se o 2006). A inoculação de sementes associada à co- presente trabalho, em condições de campo, com o objetivo de avaliar caracteres agronômicos em cultivares aplicação de fungicidas e micronutrientes é prática agrícola usualmente recomendada, podendo afetar à de soja, em resposta a inoculação e aplicação dos micronutrientes cobalto e molibdênio via pulverização sobrevivência dos rizóbios e, conseqüentemente, reduzir a nodulação e a fixação biológica de N (CAMPO e foliar. HUNGRIA, 2000). Os micronutrientes cobalto e molibdênio são MATERIAL E MÉTODOS moléculas indispensáveis para a eficácia da FBN. Esses podem afetar consideravelmente o número de células O ensaio foi instalado no dia 12/12/2007, em área de Bradyrhizobium junto às sementes. Quando micronutrientes forem empregados conjuntamente a de reforma de pastagem (Latossolo Vermelho textura arenosa) pertencente à sede do Pólo Regional de fungicidas no tratamento de sementes antes da inoculação, haverá redução do número de nódulos e, Desenvolvimento Tecnológico dos Agronegócios da Alta Mogiana, situada em Colina, SP. conseqüentemente, haverá deficiência na FBN. Portanto, quando há necessidade de tratamento com fungicidas, é O solo foi preparado de maneira convencional. Posteriormente a área foi sulcada e adubada. A adubação indicado aplicar os micronutrientes em pulverização foliar, preferencialmente, nos estádios de desenvolvimento V3- da área foi feita com base na interpretação dos resultados da análise química do solo, distribuindo-se no sulco de V5 (CAMPO e HUNGRIA, 2000). Por outro lado, Caldwell e Vest (1968) observaram semeadura a quantidade equivalente de 350 kg/ha da fórmula 0-20-20 (Quadro 1). Quadro 1. Relatório de análise de solo referente a área onde foi conduzido o ensaio em área de reforma de pastagem, em Colina,SP. Safra 2007/08. 18 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Utilizou-se o delineamento experimental de blocos de colheita mecanizada, resistência à debulha prematura ao acaso com três repetições, composto por 15 cultivares de soja na presença do tratamento: inoculação das vagens e menor retenção foliar após a maturidade, sendo 1 (planta ruim) a 5 (planta excelente) e estande associada a aplicação de cobalto + molibdênio via pulverização foliar. Foram eleitas três cultivares (IAC final de plantas (EF), expresso em metro linear. Após a colheita foram realizadas as seguintes 23, BRS 184 e Embrapa 48) que foram utilizadas também como testemunhas (ausência de tratamento) para avaliações em 10 plantas ao acaso por parcela útil: altura de plantas na maturação (APM), expressa em cm; altura comparação. Cada parcela constituiu-se de quatro linhas de 5 metros de comprimento, espaçadas de 0,5 m, de inserção da primeira vagem (AIV), expressa em cm; número de ramos por planta (NR); número de vagens considerando-se como área útil, apenas as duas linhas centrais. por planta (NV); número de sementes por planta (NS), número de nós na haste principal por planta (NN) e massa Para o tratamento das sementes, utilizou-se um inoculante comercial turfoso que contêm as estirpes de grãos por planta (MG), expresso em g (obtido através do valor médio do peso de sementes/planta em três Semia 5079 e Semia 5019 atualmente recomendadas, na dose de 200 g/50 kg de sementes. No estádio repetições por parcela). A partir dos valores médios referentes a produção das parcelas de cada tratamento, fenológico V5, as parcelas foram pulverizadas via foliar com uma formulação comercial contendo 1,5% de calculou-se a produtividade das cultivares (PG), sendo expressa em kg/ha (valores corrigidos para 13 % de cobalto e 15% de molibdênio na dose de 100 ml/ha. Além disso, as sementes foram tratadas com o fungicida umidade). Os dados obtidos foram submetidos à análise de comercial Vitavax + Thiran 200 SC, visando controle de fungos patogênicos do solo, sendo o inoculante, variância pelo teste F, e as médias comparadas pelo teste de Scott Knott a 5 % de significância, através do aplicado por último, no dia da semeadura. Adotaram-se também alguns cuidados para garantir uma maior programa computacional Genes (CRUZ, 2001). eficiência do inoculante, como a inoculação realizada à sombra e distribuição uniforme do inoculante em todas RESULTADOS E DISCUSSÃO as sementes. Todas as técnicas de cultivo da soja, como escolha de cultivares, época de semeadura, população Através das análises de variância (Tabela 1), foi de plantas, controle de plantas daninhas, insetos e doenças seguiram as recomendações técnicas para a detectada alta significância (P<0,01) pelo teste F para a Fonte de Variação (FV) tratamentos (trat) com relação cultura da soja da Embrapa (2005). Foram avaliados os seguintes caracteres as variáveis NDF, APM, AIV, MG, NS, NV, NN, EF e PG; para a FV cultivares (cult) com as variáveis NDF, agronômicos: número de dias para o florescimento (NDF), expresso em dias; número de dias para a APM, AIV, Ac, MG, NS, NV, NN, EF e PG e testemunhas (test) com as variáveis NDF e PG; e para a maturação (NDM), expresso em dias; acamamento das plantas (Ac), através de uma escala de notas visuais, FV cult vs test para as variáveis NDF, APM, NN e PG. Apenas foi detectada significância (P>0,05) para a FV variando de 1 (quase todas as plantas eretas) até 5 (todas as plantas acamadas), proposta por Bonetti (1983); valor trat e as variáveis Ac e VA; FV cult e a variável VA; FV test e as variáveis NV e EF, assim como para cult vs test agronômico (VA), através de uma escala de notas visuais baseada na observação do aspecto global médio das junto as variáveis NR e EF. Em relação as demais observações não foi detectada significância estatística plantas avaliadas para cada uma das cultivares, levandose em consideração uma série de caracteres visuais pelo teste F. As médias para NDF, APM, Ac, VA, NS, NN, adaptativos, tais como: arquitetura da planta, quantidade de vagens cheias, vigor e sanidade da planta, viabilidade EF e PG das testemunhas se apresentaram inferiores as médias gerais e das cultivares (todos os tratamentos Ciência e Cultura 19 Respostas de cultivares de soja à inoculação e uso de cobalto e moibdênio BÁRBARO et al. excluindo-se as testemunhas), fornecendo indícios que GNATTA, 2006). Não obstante, têm-se observado o tratamento das sementes das cultivares com inoculante e aplicação de cobalto e molibdênio via foliar promoveu ganhos médios de 4,5 % no rendimento de grãos com a inoculação em áreas já cultivadas com essa leguminosa efeitos positivos com acréscimos no número de dias para florescimento, estatura de plantas e consequentemente (EMBRAPA, 2005). Como a soja é uma leguminosa introduzida e uma das poucas espécies que se associam no índice de acamamento, valor agronômico, número de sementes, nós, estande e produtividade de grãos. com Bradyrhizobium japonicum e B. elkanni, é pouco provável a ocorrência natural dessa bactéria em solos Para NDM, AIV, MG e NR não houve grandes variações, estando as médias ao redor de 126,79 dias, ainda não cultivados com soja. Entretanto, apesar da dificuldade de estabelecimento de novas estirpes de 11,97 cm, 16,22 g e 3,36 ramos por planta, respectivamente (Tabela 1). rizóbio em relação às nativas do solo (EVANS, 2005), existe a possibilidade de que algumas das estirpes A inoculação associada ao uso de cobalto e molibdênio via pulverização foliar na cultivar IAC 23, introduzidas no solo, juntamente com as sementes ou por meio de inoculação artificial, sobrevivam e se teve efeito positivo e significativo, quanto aos caracteres MG, VA, NS, NV e PG, resultando em um incremento naturalizem (LIMA et al., 1998). Na Tabela 2, o parâmetro NDF variou médio de, respectivamente, 5,26 g de peso de grãos, 0,33 de nota de valor agronômico, 31,54 de sementes, significativamente, sendo as cultivares transgênicas BRS 245 RR e CD 219 RR as que apresentaram maiores 11,29 de vagens e 524,66 kg/ha de grãos a mais que sua testemunha não tratada. Quando se considera a valores médios (49 dias) e com menores valores as cultivares Embrapa 48 tratada e sua testemunha, CD cultivar BRS 184, o incremento nas variáveis NDF, APM, AIV, VA e PG foi de respectivamente, 1 dia, 8,13 202 e BRS 184 testemunha com cerca de 42 a 43 dias. Em relação ao NDM, as cultivares comportaram-se cm de altura de planta, 3,38 cm de altura de inserção da primeira vagem, 0,16 de nota de valor agronômico e como semi-precoces para o Estado de São Paulo (EMBRAPA, 2005). Os resultados também evidenciam 1125,33 kg/ha de grãos. Já, para a cultivar Embrapa 48 o aumento foi apenas em produtividade de grãos, que não houve diferenças significativas pelo teste de Scott Knott (pd”0,05) tanto para as cultivares tratadas, bem mostrando 1144,34 kg/ha a mais quando comparada com sua testemunha (Tabela 2). Essas diferenças como, para as testemunhas adicionais. Assim, pode-se inferir que não houve resposta ao tratamento inoculação significativas observadas pelo teste de Scott Knott quando se compara cada cultivar tratada com sua e aplicação de cobalto e molibdênio em relação ao ciclo. Para APM (Tabela 2), os resultados mostram que respectiva testemunha não tratada, induz a acreditar que é provável que o solo da área de reforma de pastagem a cultivar tratada que obteve melhor média de crescimento foi a CD 219RR (84,65 cm) com onde o ensaio foi conduzido não dispunha de populações estabelecidas de bactérias que proporcionassem boa superioridade estatística em relação as demais cultivares testadas. No segundo grupo, cinco cultivares (BRS 184, nodulação e fixação biológica do N2, e/ou essas foram pouco eficientes e não competitivas com as estirpes CD 225 RR, BRS 245 RR, BRS 244 RR e M-SOY 8008) mostraram médias de altura variando de 64,62 a contidas no inoculante comercial. Segundo informações da estação experimental de Colina, a área onde o ensaio 70,07 cm. Num terceiro grupo pelo teste de Scott Knott a 5% ficaram com menores alturas de planta as cultivares foi instalado, não foi anteriormente cultivada com essa leguminosa, daí o incremento substancial principalmente M-SOY 5942, M-SOY 7210, IAC 23, BRS 133, CD 214RR, CD 213RR, Embrapa 48, CD 202 e as três em produtividade de grãos. Ganhos em produtividade decorrentes da inoculação, em áreas já cultivadas testemunhas, com valores médios variando de 52,31 a 62,57 cm. Apesar dessas cultivares do terceiro grupo anteriormente com soja, são menos expressivos do que os obtidos em solos de primeiro ano (CAMPOS e terem apresentado alturas inferiores as demais, ainda se encontram dentro dos padrões mínimos para colheita 20 Ciência e Cultura /1 NDF NDM ———dias———46,00c 127,67a 48,00b 128,00a 45,67c 126,33a 47,00b 125,67a 44,67c 128,33a 44,67c 127,67a 44,33c 126,33a 42,67d 126,67a 45,33c 127,67a 49,33a 125,67a 47,33b 126,67a 49,33a 125,67a 44,67c 127,00a 42,00d 127,00a 47,67b 124,67a 43,67d 127,67a 45,67c 126,00a 42,33d 127,00a /1 /1 APM AIV ———cm———60,55c 10,97b 55,89c 8,11b 55,79c 12,64a 60,18c 11,22b 58,02c 10,24b 65,54b 14,32a 52,31c 12,66a 55,56c 10,57b 68,09b 9,43b 64,77b 12,69a 64,62b 15,06a 84,65a 15,97a 58,01c 11,82b 62,57c 10,57b 70,07b 11,48b 57,41c 10,94b 54,52c 14,63a 59,68c 10,90b /1 Ac -notas1,00b 1,17b 1,17b 1,33b 2,00a 1,33b 1,00b 1,17b 2,33a 1,67b 1,67b 2,00a 1,33b 1,50b 2,50a 1,67b 1,33b 1,00b /1 MG —g—13,85c 19,68b 18,91b 19,86b 25,84a 17,76b 6,84d 14,56c 14,99c 15,12c 10,47d 19,93b 11,86d 15,96c 16,60c 19,98b 13,65c 15,39c /1 VA -notas3,83a 3,17b 3,50a 3,50a 3,50a 3,33a 3,00b 3,67a 3,17b 3,67a 3,67a 3,50a 3,33a 2,83b 2,83b 3,17b 3,17b 3,50a /1 /1 /1 /1 NS NV NN NR ——————-———/planta———— 78,67b 39,75b 12,00a 2,42b 102,13a 53,92a 11,33b 2,21b 107,25a 51,38a 9,84b 3,21b 113,88a 56,21a 11,29b 3,00b 123,00a 69,63a 10,67b 3,96a 106,63a 51,79a 11,25b 3,84a 55,17b 34,30b 10,13b 2,75b 95,29a 47,71b 9,17b 3,42a 97,59a 47,75b 12,46a 2,59b 84,17b 51,38a 12,82a 3,00b 64,92b 32,04b 11,00b 3,00b 124,38a 62,21a 14,17a 3,00b 83,75b 45,71b 10,79b 3,04b 99,50a 52,71a 10,34b 3,84a 113,61a 61,23a 12,04a 3,76a 105,67a 60,79a 10,04b 4,13a 75,71b 40,09b 9,75b 3,00b 96,79a 56,84a 9,50b 3,96a /1 EF /mlinear 18,73a 12,10b 9,73b 14,53a 10,73b 9,80b 15,57a 19,97a 11,03b 15,70a 17,50a 13,73a 16,83a 14,40a 18,17a 9,57b 10,63b 15,93a /1 PG -kg/ha2641,33e 3352,00c 1809,33f 2600,00e 3061,33d 3984,00b 3084,00d 4010,67b 2642,67e 3873,33b 3010,67d 3424,00c 3172,00d 2698,67e 4362,00a 2858,67e 1284,67g 2866,33e /1 1/ Médias na mesma coluna seguidas pela mesma letra minúscula não diferem entre si pelo critério de Scott Knott, a 5% de probabilidade; 2/Cultivares utilizadas como testemunhas; NDF = número de dias para o florescimento; NDM = número de dias para a maturação, APM = altura de planta na maturação; AIV = altura de inserção da primeira vagem; Ac = acamamento; MG = massa de grãos por planta; VA = valor agronômico; NS = número de sementes por planta; NV = número de vagens por planta; NN = número de nós por planta; NR = número de ramos por planta; EF = estande final e PG = produtividade de grãos. NK 7059RR M-SOY 5942 IAC 23 BRS 133 M-SOY 7210 BRS 184 CD 214RR Embrapa 48 CD 225RR BRS 245RR BRS 244RR CD 219 RR CD 213 RR CD 202 M-SOY 8008 BRS 184/2 IAC 23/2 Embrapa48/2 Cultivares Tabela 2. /1Médias de caracteres agronômicos avaliados em cultivares de soja em resposta a inoculação e aplicação de cobalto e molibdênio via pulverização foliar. Colina-SP. 2007/2008. F.V. = fonte de variação; Q.M. = quadrados médios; NDF = número de dias para o florescimento; NDM = número de dias para a maturação, APM = altura de planta na maturação; AIV = altura de inserção da primeira vagem; Ac = acamamento; MG = massa de grãos por planta; VA = valor agronômico; NS = número de sementes por planta; NV = número de vagens por planta; NN = número de nós por planta; NR = número de ramos por planta; EF = estande final e PG = produtividade de grãos. Tabela 1. Quadrados médios obtidos pelas análises de variância em blocos ao acaso com testemunhas adicionais, para vários caracteres agronômicos. Colina-SP. 2007/2008. CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Ciência e Cultura 21 Respostas de cultivares de soja à inoculação e uso de cobalto e moibdênio BÁRBARO et al. mecanizada (BONETTI, 1983; BARROS et al. 2003; testemunha da Embrapa 48 e o segundo representado SEDIYAMA et al. 2005). Apesar dos resultados para AIV (Tabela 2) não pelo restante das cultivares (variando de 2,83 a 3,17) e as testemunhas de BRS 184 e IAC 23 com 3,17 de detectarem diferença estatística significativa quando é efetuada uma comparação das cultivares IAC 23 e nota. Embrapa 48 tratadas com suas respectivas testemunhas não tratadas nota-se um ligeiro incremento na estatura M-SOY 7210 apresentou o maior número de sementes e vagens/planta (123 sementes e 69,63 vagens), do primeiro legume de cerca de 2 cm e 0,33 cm, respectivamente com a ausência de inoculação e enquanto as cultivares CD 214 RR (55,17 sementes) e BRS 244 RR (32,04 vagens) detiveram os piores aplicação de cobalto e molibdênio via foliar. Entretanto, a mesma situação não foi observada para a cultivar desempenhos quanto a esses parâmetros. Estes resultados obtidos para NV estão de acordo com tratada BRS 184, que destacou-se estatisticamente pela superioridade de 3,38 cm em relação a sua testemunha Câmara (1998) que relatou que uma planta de soja pode produzir até 400 vagens, mas em média as cultivares não tratada. Ainda considerando o caráter AIV, as cultivares brasileiras produzem de 30 a 80 vagens/planta. Quanto ao caráter NN foi determinado que há tratadas que sobressaíram foram IAC 23, BRS 184, CD 214 RR, BRS 245 RR, BRS 244 RR e CD 219 RR diferenças significativas para o mesmo, tendo a cultivar CD 219 RR apresentado o maior número de nós (14,17 com respectivamente, 12,64; 14,32; 12,66; 12,69; 15,06 e 15,96 cm. Já, algumas cultivares como a M-SOY 5942 nós) não diferindo, de outras 4 cultivares. Já o menor valor ficou para a cultivar Embrapa 48 tratada (9,17 nós), (8,11 cm) e CD 225 RR (9,43 cm), apresentaram as menores alturas de inserção da primeira vagem. Para o que por sua vez, não diferiu da maioria das cultivares tratadas e das testemunhas. Em relação ao NR, observa- sistema produtivo moderno, valores de inserção da primeira vagem inferiores a 12 cm (YOKOMIZO, 1999) se diferenças estatísticas significativas pelo teste de Scott Knott a 5% de probabilidade, sendo que o maior valor podem resultar em perdas na colheita e, em conseqüência, reduzir os ganhos dos produtores. de ramos (4,13 ramos) foi obtido para a testemunha da BRS 184 que não diferiu de outras cinco cultivares e a Quatro das cultivares testadas demonstraram tendência ao acamamento, apresentando índices de 2,00 testemunha da Embrapa 48. Dez cultivares tratadas não diferiram entre si pelo a 2,50, baseado numa escala compreendida entre 1 (quase todas as plantas eretas) e 5 (mais de 80% das teste de Scott Knott e apresentaram EF superior a 14 plantas/metro linear, correspondendo a 280.000 plantas/ plantas acamadas), encontrando-se em níveis aceitáveis (BONETTI, 1983), porém com riscos de aumento de ha. Entretanto, o restante das cultivares apresentaram estandes mais reduzidos, com valores médios de 9 a 12 perdas no caso de eventual colheita mecânica, o que requer maiores cuidados na operação. plantas/metro linear. Foi verificado também, que o baixo estande encontrado em algumas cultivares provavelmente Em relação a MG nota-se que a M-SOY 7210 sobressaiu com 25,84 g diferindo significativamente das não influenciou na produtividade, visto que a soja possui a capacidade de compensar o baixo estande, com maior demais cultivares avaliadas. Com pior desempenho quanto a este caráter, ficou a cultivar CD 214 RR (6,84 desenvolvimento das plantas (ramificações laterais), as quais terão maior número de vagens e estas apresentarão g) que não diferiu significativamente das cultivares BRS 244 RR e CD 213 RR. maior quantidade de grãos, conseqüentemente, assim compensando na produtividade final (YUSUF et al., Quando se considera as notas de VA, verifica-se que formaram dois agrupamentos pelo teste de Scott 1999). Na avaliação da produtividade de grãos, Knott, sendo o primeiro com as maiores médias de notas (3,83 a 3,33) constando de dez cultivares tratadas e a observou, de forma geral, rendimentos elevados para as cultivares quando submetidas ao tratamento. Formaram- 22 Ciência e Cultura Em relação ao NS e NV, nota-se que a cultivar CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 se sete agrupamentos pelo teste de Scott Knott REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS (pd”0,05), sendo o primeiro composto por apenas uma cultivar M-SOY 8008 (4362,00 kg/ha) que superou BARROS, H.B.; PELUZIO. J.M.; SANTOS, todas as outras cultivares tratadas, bem como, as testemunhas. No segundo agrupamento representado M.M.; BRITO, E.L.; ALMEIDA, R.D. Efeito das épocas de semeadura no comportamento de cultivares pelas cultivares BRS 184, Embrapa 48 e BRS 245 RR (com produtividades variando de 4010,67 a 3873,33 de soja ,no sul do estado do Tocantins.Revista Ceres,Viçosa,MG, v.50,n.291, p.565-572, 2003. kg/ha); no terceiro com a M-SOY 5942 que teve 3352,00 kg/ha; no quarto com as cultivares M-SOY BONETTI, L.P. Cultivares e seu melhoramento 7210, CD 214RR, BRS 244RR e CD 213 RR com PG que variam de 3172,00 a 3084,00 kg/ha; no quinto genético. In: VERNETTI, F.J. (Ed.) Soja: genética e melhoramento. Campinas: Fundação Cargill, 1983. p. formado por quatro cultivares tratadas (NK 7059RR, BRS 133, CD 225RR, CD 202) e duas não tratadas 741-800. (testemunhas de BRS 184 e Embrapa 48) com PG de 2866,33 a 2600 kg/ha e finalmente ocupando o sexto e CALDWELL, B.E.; VEST, G. Nodulation interaction between soybean genotypes and serogroups sétimo posto ficou a cultivar IAC 23, respectivamente, tratada (1809,33 kg/ha) e não tratada (1284,67 kg/ha), of Rhizobium japonicum. Crop Science, v.8, p.680682, 1968. o que confirma a importância econômica de inocular e aplicar o cobalto e molibdênio via pulverização foliar na CÂMARA, G.M.S. Soja: tecnologia e produção. cultura da soja. CONCLUSÕES É importante economicamente proceder ao Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”. Piracicaba: Publique, 1998. 293p. CAMPO, R.J.; HUNGRIA, M. Compatibilidade de uso de inoculantes e fungicidas no tratamento de sementes de soja. Londrina: Embrapa Soja (Embrapa tratamento de sementes com inoculante a base de Bradyrhizobium e fungicida, bem como, a aplicação de Soja. Circular Técnica, 26), 32p. 2000. cobalto e molibdênio via foliar em soja na região de Colina-SP em área de reforma de pastagem CAMPOS, B.H.C. & GNATTA, V. Inoculantes e fertilizantes foliares na soja em área de populações anteriormente não cultivada com soja; As cultivares IAC 23, BRS 184 e Embrapa 48 estabelecidas de Bradyrhizobium sob sistema plantio direto. R. Bras. Ci. Solo, v. 30, p. 69-76, 2006. respondem ao tratamento, visto que, mostram incrementos substanciais principalmente em CRUZ, C.D. Programa Genes – Versão Windows produtividade de grãos em relação as suas testemunhas não tratadas; – Aplicativo computacional em genética e estatística. Viçosa: UFV, 2001. 648p. Quando submetidas ao tratamento, várias cultivares demonstram aptidão para cultivo em área de EMBRAPA, 2005. Tecnologia de produção de reforma de pastagem em Colina-SP, principalmente, devido à adequação de seus caracteres para uma soja – região central do Brasil- 2005. Londrina: Embrapa Soja: Embrapa Cerrados: Embrapa Agropecuária Oeste: eficiente colheita mecanizada (altura de planta e inserção da primeira vagem e acamamento), além de elevadas Fundação Meridional, 2004. 239p. produtividades, sendo muitas delas superiores a média nacional. EVANS, J. An evaluation of potential Rhizobium inoculant strains used for pulse production in acidic soils Ciência e Cultura 23 Respostas de cultivares de soja à inoculação e uso de cobalto e moibdênio of south-east Australia. Aust. J. Exp. Agric., v. 45, p. BÁRBARO et al. VERNETTI, F.J. Inoculação da soja. Pelotas: 257-268, 2005. Ministério da Agricultura. Departamento Nacional de Pesquisa Agropecuária. Instituto de Pesquisas HUNGRIA, M.;CAMPOS, R. J. Fixação Biológica no Brasil é um exemplo de sucesso. Visão Agropecuária do Sul, 1971. 31p. (Boletim Técnico, 75). Agrícola. USP, ESALQ. Piracicaba, SP. 2006 v.5, p. 152. YOKOMIZO, G. K. Interação genótipos x ambientes em topocruzamentos de soja tipo alimento com LIMA, S.C.; LOPES, E.S. & LEMOS, E.G.M. tipo grão. 1999. 170 f.Tese (Doutorado) - Escola Superior de Agricultura Luis de Queiroz , Piracicaba, Caracterização de rizóbios (Bradyrhizobium japonicum) e produtividade da soja. Sci. Agric., v. 55, 1999. p. 360-366, 1998. YUSUF, R.I.; SIEMENS, J.C.; BULLOCK, D.G. Growth analysis of soybean under notillage and SEDIYAMA, T.; TEIXEIRA, R.C.; REIS, M.S. Melhoramento da soja. In: BORÉM, A. Melhoramento conventional tillage systems. Agronomy Journal, v.91, p.928-933, 1999. de espécies cultivadas. Viçosa: UFV, 2005. p.553-603. 24 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Influência de vitaminas do complexo B no efeito antiinflamatório e antinociceptivo do diclofenaco e do nimesulide Influence of some B vitamins on effects anti-inflammatory and antinociceptive of nimesulide and diclofenac Luiz Alves RODRIGUES* 1, José Francisco FRACASSO 2, Clarissa Ezaki de SIQUEIRA 2 1*- Faculdade de Farmácia-Bioquímica da Fundação Educacional de Barretos. 2. Departamento de Princípios Ativos Naturais e Toxicologia, Disciplina de Farmacologia, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade Estadual Paulista, UNESP, Araraquara, SP, Brasil Autor Correspondente:Prof. Dr. Luiz Alves Rodrigues- Faculdades Unificadas da Fundação Educacional de Barretos Av. Prof. Roberto Frade Monte, 389 B. Aeroporto - 14783-226 –Barretos - SP - Brasil. - E-mail: [email protected] RESUMO O edema de pata produzido pela carragenina em ratos, e as contorções abdominais produzidas pelo ácido acético em camundongos, constituem modelos experimentais de inflamação. O edema foi produzido pela injeção intraplantar de 200 µg de carragenina e foi medido a espessura (em mm) da pata injetada. A contorção abdominal foi produzida pela injeção intraperitoneal de 0,1 mL/100 g de peso corporal de ácido acético à 0,6%. As medidas foram feitas nos tempos 0, 1, 2, e 4 horas após a injeção intraperitoneal dos agentes inflamatórios. Avaliamos os efeitos antiinflamatórios do diclofenaco (Diclo) e do Nimesulide (Nime) e das vitaminas B: tiamina (B1), piridoxina (B6) e cianocobalamina (B12), isoladas ou administradas conjuntamente. O Diclo e o Nime não inibiram totalmente o edema e as contorsões abdominais. Por outro lado, os efeitos antiinflamatórios do Diclo (25 e 50mg/kg) ou Nime [5mg/kg] reduziram o edema de pata e a associação das três vitaminas à estes antiinflamatórios, potencializaram os efeitos do Diclo no tempo de quatro horas e do nimesulide, nos tempos de duas, três e quatro horas. As contorções abdominais em camundongos foram inibidas pelo Diclo e a associação das três vitaminas ou apenas da B12, potencializou os efeitos do Diclo. As contorções abdominais foram reduzidas também pelo Nime e a associação das três vitaminas, foram capazes de potencializar estes efeitos. O presente estudo mostrou que os efeitos do Diclo e do Nime são potenciados pelas vitaminas B1, B6 e B12 , preconizando o uso destes antiinflamatórios, combinados com estas vitaminas, em doenças inflamatórias crônicas, permitindo a possibilidade de redução da dose destes antiinflamatórios e conseqüentemente a diminuição dos seus efeitos colaterais, durante tratamentos de longa duração. Palavras-chave: diclofenaco; nimesulide; contorção abdominal; edema. ABSTRACT The paw edema of carrageenan in rats produced by, and the abdominal contorsions produced by acetic acid in mice are experimental models of inflammation. The edema was produced by intraplantar injection of 200 micrograms of carrageenan and the thickness was measured (in mm) of the injected paw. The abdominal twitch was produced by intraperitoneal injection of 0.1 mL/100 g body weight of acetic acid to 0.6%. Measurements were taken at 0, 1, 2 and 4 hours after injection of inflammatory agent. Evaluate the antiinflammatory effects of diclofenac (Diclo) and Nimesulide (Nime) and B vitamins: thiamine (B1), pyridoxine (B6) and cyanocobalamin (B12), administered alone or together. The Dicle and Nime not completely inhibited the edema and abdominal contorsões. Furthermore, the effects of anti Dicle (25 and 50mg/kg) or Nime [5mg/kg] reduced the edema of foot. The combination of these three vitamins to anti, potentiate the effects of Diclo time of four hours and Nime, at times two, three and four hours. The abdominal contorsions. Diclo and were inhibited by the association of three or just the vitamins B12, potentiated the effects of Diclo. The abdominal contorsions were also reduced by Nime and association of the three vitamins, potentiated these effects. This study showed that the antiinflammatory effects of Diclo and Nime are enhanced by vitamins B1, B6 and B12, corroborating the use of anti-inflammatory, combined with these vitamins in chronic inflammatory diseases, allowing the possibility of reducing the dose of anti-inflammatory and consequently reduction of side effects during treatment of long duration. Keywords: diclofenac; nimesulide; abdominal contortion; paw edema. Ciência e Cultura 25 Influência de vitaminas do complexo B no efeito antiinflamatório e antinociceptivo do diclofenaco e do nimesulide INTRODUÇÃO RODRIGUES et al. potencialização do efeito antiinflamatório do diclofenaco Vários estudos clínicos têm mostrado que a e do nimesulide no pré-tratamento agudo, com as vitaminas do complexo B, utilizando o modelo de duração do tratamento de dor na coluna vertebral pode ser reduzida usando uma combinação de vitaminas do contorções abdominais em camundongos induzidas pelo ácido acético (antinocicepção). Além disso, utilizamos complexo B com diclofenaco (BRUGGEMANN et al., 1990; KUHWEIN et al., 1990; REYES-GARCIA et o modelo do edema de pata em ratos produzido pela carragenina injetada por via intra-plantar (hiperalgesia), al., 1999). O diclofenaco e o nimesulide são drogas para avaliar os efeitos dessas vitaminas quando empregadas no tratamento agudo de forma isolada ou antiinflamatórias não esteroidais (DAINES) muito utilizadas atualmente e toleradas pelo organismo, porém associadas ao diclofenaco ou nimesulide. com alguns efeitos colaterais no tratamento crônico em patologias inflamatórias crônicas (ESCRIBANO et al., MATERIAL E MÉTODOS 2003; DeLucia et al., 2007). Vitaminas são nutrientes essenciais para a Neste estudo foram utilizados ratos machos da manutenção das funções normais das células e ainda que as vitaminas do complexo B, por serem hidrossolúveis, raça Wistar, (n=6 para cada grupo), pesando entre 200300 g e camundongos da raça Swiss pesando entre 40 não se acumulem no organismo, são conhecidas por serem pouco tóxicas. A toxicidade no entanto acontece e 55 g, oriundos do Biotério Central da UNESPBotucatu. quando grandes quantidades são consumidas sem o controle médico (Hu et al., 1995). Drogas O pré-tratamento com uma associação das vitaminas desta classe, tiamina (B1), piridoxina (B6) e Heparina [Liquemine Roche] Nimesulide [RBI, USA] cianocobalamina (B12) ou com piridoxina e riboflavina isoladas, induziram efeito antinociceptivo no modelo de Diclofenaco , Tiamina HCl [B1], Piridoxina HCl [B6], Cianocobalamina [B12] e Carragenina foram obtidas contorções abdominais induzidas por ácido acético no camundongo. O efeito de alguns tipos de vitaminas do junto a Sigma Chemical. CO, St Louis – USA. complexo B já havia sido testado em modelos de hiperalgesia térmica e química (REYES-GARCIA et al., Edema de pata Para os estudos com diclofenaco, foram utilizados 2002). Esses tratamentos inibiram ainda, a resposta nociceptiva induzida pelo formaldeído (teste da três grupos de animais tratados com carragenina por injeção intra-plantar (i.pl.) para a produção do edema. formalina), mas não houve inibição no modelo da placa quente (ESCRIBANO et al., 2003). O tratamento A droga inflamatória/edematogênica, carragenina foi administrada por via i.pl. (200mg/pata), em um volume crônico com a associação das vitaminas, durante sete dias, ou o tratamento agudo com riboflavina, também constante de 0,1 mL por pata. A administração do diclofenaco (50 ou 25mg/Kg reduziram parcialmente o edema de pata produzido pela formalina (FRANÇA et al., 2001). p.o) foi feita 40 minutos antes da carragenina e as vitaminas (B1 = 100 mg/kg; B6 = 100 mg/kg e B12 = 5 Estudos recentes tem indicado favoravelmente para os benefícios que as vitaminas do complexo B mg/kg ip.) 60 minutos antes da carragenina. O volume da pata foi medido com a utilização de paquímetro podem produzir quando em associação com o diclofenaco ou mesmo com outros antiinflamatórios não [Mitutoyo 2050-08] (FRACASSO et al., 1996), imediatamente antes da injeção das drogas. Registros esteroidais (DeLucia et al., 2007). O presente estudo teve como objetivo avaliar a subseqüentes dos volumes da mesma pata foram realizados duas, três e quatro horas após as injeções 26 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 das drogas e comparados com as leituras iniciais, sendo que F: controle [salina 0,9% + carragenina];F2 vitaminas B1(100mg/kg), B6(100mg/kg) e B12(5mg/kg) por via intra-peritoneal [i.p.] 60 minutos antes do ácido diclofenaco + carragenina; F3: Vitaminas B1, B6 e B12 + diclofenaco + carragenina. acético (0.6%, 0,1ml/10g) i.p. e do nimesulide (5mg/kg i.p.) 40 minutos antes do ácido acético, como descrito Em outros três grupos de animais, tratados com carragenina, a dose do diclofenaco foi reduzida em 50%, para o diclofenaco. Este procedimento foi realizado com os seguintes grupos de animais: F1: Controle (salina para certificar se o antiinflamatório, por si só, não estava produzindo uma resposta antiedematogênica máxima. 0,9% + carragenina); F2: + carragenina + nimesulide; F3: Vitamina B1 + nimesulide + carragenina; F4: Vitamina Este mesmo protocolo foi seguido para o nimesulide. A administração do nimesulide (5 mg/Kg, via oral) foi feita B6 + nimesulide + carragenina; G 5: Vitamina B12 + nimesulide + carragenina; F6: Vitaminas B1, B6 e B12 + antes da carragenina e as vitaminas [B1 = 100mg/kg; B6 = 100 mg/kg e B12 = 5 mg/kg ip.] 60 minutos antes da nimesulide + carragenina. carragenina. O volume da pata (edema) foi determinado como descrito anteriormente. Foram utilizados sete Análise estatística A análise estatística dos resultados foi realizada grupos[F] de animais: F1: Controle [salina 0,9% + carragenina]; F2: Nimesulide + carragenina; F3: Vitamina através da ANOVA e as comparações múltiplas foram feitas através do teste de Bonferroni, tendo como B1 + nimesulide + carragenina; F4: Vitamina B6 + nimesulide + carragenina; F5: Vitamina B12 + nimesulide resultado significativo P<0,05 (WINER et al., 1991). + carragenina; F6: Vitaminas B1, B6 e B12 + nimesulide + carragenina e F7: Vitaminas B1 e B6 + diclofenaco + RESULTADOS ácido acético. O tratamento com as Vitaminas B1, B6 e B12 Contorsões abdominais Utilizamos o modelo de contorções abdominais isoladas não apresentou atividades antiedematogênica ou antinociceptiva, assim como as vitaminas em camundongos, causadas pela injeção de ácido acético. Antes da administração das vitaminas B1(100mg/ administradas isoladamente não potencializaram a inibição do edema pelo diclofenaco (não mostrados). Os kg), B6(100mg/kg) e B12(5mg/kg) por via intra-peritoneal [i.p.] 60 minutos antes do ácido acético (0.6%, 0,1ml/ resultados mostraram que o diclofenaco inibiu significativamente o edema de pata, produzido pela 10g) i.p. e do diclofenaco (50 ou 25mg/kg) via oral [p.o.] 40 minutos antes do ácido acético. Logo após, o animal carragenina (P< 0,05) [Figura 1]. A associação de vitaminas ao antiinflamatório não potencializou os efeitos foi mantido em um funil de vidro para a observação do número de contorções abdominais. Este procedimento do diclofenaco na dose de 50 mg/kg p.o (Figura1) nos tempos de duas e três foi realizado com os seguintes grupos de animais: F1: controle [salina 0,9% + ácido acético i.p.]; F2: horas após a carragenina, mas a potencialização do efeito do diclofenaco, pelas vitaminas, foi significativa (P< 0,01) Diclofenaco + ácido acético; F3: Vitamina B1 + diclofenaco + ácido acético; F4: Vitamina B6 + no tempo de quatro horas [Figura 1]. É provável que, nos tempos de duas e três horas, a concentração do diclofenaco + ácido acético; F5: Vitamina B12 + diclofenaco + ácido acético; F6: Vitaminas B1, B6, B12 diclofenaco no sangue esteja produzindo efeito máximo. Com o decorrer do tempo, a diminuição da concentração + diclofenaco + ácido acético; F7: Vitaminas B1 e B6 + diclofenaco + ácido acético. A resposta antinociceptiva plasmática pelo metabolismo, pode estar reduzindo a atividade antiinflamatória e com isto, as vitaminas foi observada após a administração das drogas durante um período de vinte minutos. Utilizamos o modelo de conseguem potencializar os efeitos antiinflamatórios (tempo de quatro horas após a carragenina). Quando contorções abdominais, para a avaliação do efeito das utilizou-se a dose de 25 mg/kg p.o do diclofenaco (Figura Ciência e Cultura 27 Influência de vitaminas do complexo B no efeito antiinflamatório e antinociceptivo do diclofenaco e do nimesulide RODRIGUES et al. 2), houve também potencialização significativa pelas vitaminas, do efeito antiinflamatório, no tempo de não foi diferente significativamente de quando o diclofenaco foi administrado isoladamente. Entretanto, quatro horas após a carragenina, mas duas ou três horas após a carragenina, a potencialização pelas vitaminas não a injeção de cianocobalamina associada ao diclofenaco [50mg/kg], produziu uma inibição significativa [P<0,005] foi estatisticamente significativa. É provável que na dose de 50 mg/kg o diclofenaco produza inibição máxima, no número de contorções abdominais. A cianocobalamina e a associação das três vitaminas assim, o tratamento agudo com estas vitaminas não altera as respostas da sua ação antiinflamatória. Porém, mesmo apresentaram resultados significativos na potencialização do diclofenaco, quando a dose deste antiinflamatório foi com dose menor, a associação das vitaminas, apesar de melhorar a atividade antiedematogênica do diclofenaco, diminuída em 50% (Figura 2). Apesar da diminuição da dose do diclofenaco para 25mg/kg, a tiamina e piridoxina não foi estatisticamente significativa. não foram capazes de potencializar o efeito do diclofenaco. Figura 1 - Potencialização do efeito antiedematogênico do diclofenaco (50 mg/kg p.o.), pelas vitaminas B1, B6 e B12, no edema de pata induzido por carragenina em ratos. * P< 0,05 em relação ao controle ** P< 0,01 em relação ao grupo Diclofenaco + Carragenina no tempo de 4h Figura 2 -Potencialização do efeito anti-edematogênico do diclofenaco (25 mg/kg p.o.), pelas vitaminas B1, B6 e B12, no edema de pata induzido por carragenina em ratos. * P< 0,05 em relação ao controle ** P< 0,01 em relação ao grupo Diclofenaco + Carragenina no tempo de 4h A administração da associação tiamina/piridoxina/ cianocobalamina com o diclofenaco (50 ou 25 mg/kg) inibiu significativamente (P<0,001) o número de contorções (Figuras 3 e 4). O efeito provocado pela administração do diclofenaco com tiamina ou piridoxina 28 Ciência e Cultura Figura 3 - Potencialização do efeito antinociceptivo do diclofenaco (50 mg/kg) pela Cianocobalamina isolada e pela associação tiamina/piridoxina/cianocobalamina, no modelo de contorções abdominais. *P<0,001 em relação ao controle (salina + ácido acético) **P<0,001 em relação ao grupo diclofenaco [diclo] + ácido acético [Hac] Figura 4 - Potencialização do efeito antinociceptivo do diclofenaco (25 mg/kg) pela Cianocobalamina isolada e pela associação tiamina/piridoxina/cianocobalamina no modelo de contorções abdominais em camundongos. * P<0,05 em relação ao controle ** P<0,05 em relação ao grupo Diclofenaco [Diclo] + ácido acético [Hac] Os resultados mostraram que o nimesukide (Ni) inibiu significativamente o edema de pata produzido pela CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 carragenina [P<0,01] (Figura 5). A associação das vitaminas tiamina/piridoxina/cianocobalamina DISCUSSÃO potencializou os efeitos do nimesulide [5 mg/kg i.p]. nos tempos de duas, três e quatro horas após a carragenina, A eficácia das DAINEs, como o diclofenaco e o nimesulide (RANG, DALE, 1993; MITCHELL et al, sendo estatisticamente significativo [P< 0,01]. Essa potencialização do efeito do nimesulide não se deve a 1994) em reduzir a dor é resultado da capacidade em inibir as ciclooxigenases 1 e 2, enzimas importantes na uma dessas três vitaminas em especial e sim ao conjunto delas, pois os resultados obtidos com a associação de síntese de prostaglandinas, que se constituem importantes mediadores endógenos no processo inflamatório e cada uma das vitaminas, não se mostraram significativas estatisticamente. contribuem para a sensibilização do nociceptor (ESCRIBANO et al., 2003). O diclofenaco também dessensibiliza os nociceptores, através da estimulação da via NO/GMPc (FERREIRA, 2002). Existem dados na literatura mostrando que as vitaminas B, quando usadas isoladas ou em associação diminuem o efeito antinociceptivo (Reyes-GARCIA et al., 2002 e FRANÇA et al., 2001). A associação das vitaminas B 1, B 6 e B12 potencializou o efeito antiedematogênico do diclofenaco Figura 5: Potencialização da ação antinociceptiva do Nimesulide [Ni] (5 mg/kg i.p.) pela Tiamina/Piridoxina/ Cianocobalamina isoladas ou em associação no edema de pata em ratos causado pela carragenina (Car) i.pl. após 2, 3 e 4 hs. * P<0,05 em relação ao controle ** P<0,05 em relação ao grupo cotrole [sal + car] · · P<0,05 em relação ao controle # P<0,01 em relação ao grupo cotrole [sal + car] nas doses de 25 e 50 mg/kg após 4 horas e do nimesulide na dose de 5 mg/kg, avaliadas duas, três e quatro horas após a carragenina, no modelo do edema de pata em ratos, assim como inibição das contorções abdominais O nimesulide também inibiu significativamente o ao ácido acético intraperitoneal em camundongos, sendo que apenas a vitamina B12 administrada isoladamente, número de contorções abdominais [P<0,05] (Figura 6). Seu efeito analgésico foi potencializado com a foi eficaz em potencializar esta ação do diclofenaco. Novos estudos com redução maior da dose de administração da tiamina, piridoxina e cianocobalamina, quando administradas isoladamente ou em associação diclofenaco (menor que 25 mg/kg) serão conduzidos, objetivando a confirmação do efeito potencializador [P<0,05] (Figura 6). A associação da vitamina B e B não alteraram os efeitos anti-inflamatórios do nimesulide destas vitaminas B, afim de preconizar o uso combinado deste antiinflamatório com estas vitaminas ou (Figura 6). principalmente com a vitamina B12, em doenças crônicas, com farmacoterapia prolongada, reduzindo assim os efeitos colaterais (MARTINELLI e DURIGHETO JÚNIOR, 1986). Um dos efeitos colaterais mais proeminentes das DAINES é a ocorrência de eventos gástricos importantes (gastrite, úlcera), que atualmente são contidos com antagonistas histamínicos H2 (DeLucia et al., 2007). Figura 6: Potencialização da ação antinociceptiva do Nimesulide [Ni] (5 mg/kg i.p.) pela Tiamina/Piridoxina/Cianocobalamina isoladas ou em associações nas contorsões abdominais induzidas pelo ácido acético em camundongos. * P<0,05 em relação ao controle · · P<0,01 em relação ao controle # P<0,01 em relação ao grupo controle [sal + Hac] O nimesulide apresentou perfil semelhante ao diclofenaco. Embora não tenhamos comparado os resultados do nimesulide com os resultados do diclofenaco, observa-se uma tendência para efeitos antiinflamatórios mais pronunciados do diclofenaco, embora Ciência e Cultura 29 Influência de vitaminas do complexo B no efeito antiinflamatório e antinociceptivo do diclofenaco e do nimesulide RODRIGUES et al. as doses utilizadas do nemesulide tenham sido Silva e Elisabete Zocal Paro Lepera pelos excelentes menores. Devemos salientar que as concentrações das trabalhos técnicos prestados e pela assessoria em informática e estatística e a senhora Ana Lucia Minale vitaminas e do diclofenaco utilizadas são comparáveis às concentrações utilizadas no homem. É interessante Barbosa da Silva pela prestimosa revisão do manuscrito. notar também, que os animais foram tratados por via oral com o diclofenaco, o que estabelece uma correlação REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS mais próxima com a via que é normalmente mais utilizada em humanos. É sabido que as vitaminas do complexo B BROMM K, HERMANN, WM, SCHULS, H. são indispensáveis a uma série de reações do metabolismo intermediário e que sua ausência determina o Do the B-vitamins exhibit antinociceptive efficacy in men? Results of a placebo-controlled repeated-measures aparecimento de várias patologias, como o próprio edema. Nossos estudos de nocicepção em double-blind study. Neuropsychobiology 31(3):156-65, 1995. camundongos, como contorção abdominal, confirmam as propriedades analgésicas destas vitaminas descritas BRUGGEMANN, G., KOEHLER, C.O., por BROMM et al., 1995. A aplicação de um estímulo inflamatório, como a KOCH, E.M.W. The therapy of acute lumbago with diclofenac and B-vitamins – Results of a double-blind carragenina, produz liberação de uma cascata de citocinas iniciada pelo TNF-á, que ativa duas vias: uma clinical study. Klin Wochenschr 68(2):116-20, 1990. que é responsável pela indução da ciclooxigenase 1 e 2 e subseqüente síntese de eicosanóides via liberação de DeLUCIA, R.; OLIVEIRA-FILHO, R. M.; PLANETA, C.S.; GALLACCI, M.; AVELLAR, interleucina 1â; a outra que promove a indução da produção de aminas via interleucina 8. Dependendo da M.C.W. Farmacologia Integrada 3a . ed. Rio de Janeiro: Revinter; q339-362, 2007. intensidade e natureza do estímulo, a liberação de TNFá é precedida pela formação de bradicinina (RIBEIRO et al., 2000). A participação da Interleucina 1â e do TNFá não foi avaliada neste estudo. ESCRIBANO, E., CALPENA, A.C., QUERALT, J., OBACH, R., DOMÉNECH, J. Assessment of diclofenac permeation with different formulations: anti-inflammatory study of a selected formula. Eur J Pharm Sci 19:203-10, 2003. CONCLUSÃO FERREIRA, S.H. Peripheral analgesic sites of Os dados obtidos neste estudo corroboram para a indicação do uso dos antiinflamatórios Diclofenaco e action of anti-inflammatory drugs. Int J Clin Pract Suppl (128): 2-10, 2002. Nimesulide, combinados com as vitaminas tiamina[B1], piridoxina[B6] e cianocobalamina [B12], em doenças FRACASSO, J.F., NUNES-DE-SOUZA, R.L., inflamatórias crônicas, na intenção de reduzir a dose destas drogas e conseqüentemente diminuindo seus efeitos TEIXEIRA, C.E., CASTRO, R.C., LEPERA, E.Z.P., SILVA, R.F.P. Effect of dipyrone, L-name and L-arginine colaterais indesejáveis, durante tratamentos crônicos. on endotoxin-induced rat paw edema. Braz J Med Biol Res 29(11):1543-8, 1996. AGRADECIMENTOS Agradecemos às senhoras Rosana Finoti Pupim 30 Ciência e Cultura FRANÇA, D.S., SOUZA, A.L.S., ALMEIDA, K.R., DOLABELLA, S.S., MARTINELLI, C., COELHO, M.M. B vitamins induce an antinociceptive CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 effect in the acetic acid and formaldehyde models of nociception in mice. Eur J Pharmacol 421(3):15764, 2001. RANG, H.P., DALE, M.M., RITTER, R.T. Farmacologia. 4a.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; p.550-61, 1998. HU, M.L., CHEN, Y.K., LIN, Y.F. The antioxidant and prooxidant activity of some B vitamins and vitamin-like compounds. Chem. Biol. Interact. REYES–GARCIA, G., MEDINASANTILLÁN, R., TERÁN-ROSALES, F., CASTILO- 97(1): 63-73, 1995. HENKEL, C., MATEOS-GARCIA, E. Characterizaton of the potentiation of the antinociceptive KUHLEIN, A., MEYER, H.J., KOEHLER, C.O. Reduced need for diclofenac with concomitant B-vitamin effect of diclofenac by vitamin B complex in the rat. J Pharmacol Toxicol Methods 42(2):73-7, 1999. therapy: results of a double-blind clinical study with reduced diclofenac- dosage (75 mg diclofenac vs. 75 REYES-GARCIA, G., MEDINA-SANTILÁN, mg dicofenac plus B-vitamins daily). Klin Wochenschr 68(2):107-15, 1990. R., TERÁN-ROSALES, F., CASTILLO-HENKEL, C., VIADAL-CANTÚ, G.C., CARAM-SALAS, N.L., MARTINELLI, C., DURIGHETO JÚNIOR, GRANADOS-SOTO, V. B vitamins increase the antihyperalgesic effect of diclofenac in the rat. Proc West A.F. Efeito antiedema e antiinflamatório das vitaminas do complexo B. RGO 34(2): 132-4, 1986. MITCHEL, J. A., AKARASEREENONT, P. THIEMERMANN, G., FLOWER, R. J., VANE, J.R. Selectivity of nonsteroidal antiinflammatory drugs as Pharmacol Soc 45:147-9, 2002. WINER, B.J., BROWN, D.R., MICHELIS, K.M. Statistical principles in experimental design. 3rd.ed. New York: McGraw Hill, p.100-65, 1991. inhibitors of constitutive and inducible cycloxigenase. Proced. Nat. Acad. Science, USA 90: 11693-11697, 1994. Ciência e Cultura 31 32 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Fratura radicular horizontal no terço cervical: cicatrização por calcificação. Caso clínico. Horizontal root fracture in the cervical third: healing for calcification. Clinical case. José Umberto BAMPA1 ; Vera Lucia BERNARDES1 ; Fabiano de Sant’Ana dos SANTOS1 1. Professores do Curso de Odontologia do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos, SP. Autor responsável: Fabiano de Sant’Ana dos Santos - Av. 27 n. 931 – Barretos-SP CEP: 14780-340 Fones: 17 3323 2224, 3323 2312, 8132-6963 - e-mail [email protected] RESUMO Os autores relataram um caso de fratura radicular horizontal no terço cervical do canino superior direito, motivado por um traumatismo e que permaneceu com vitalidade pulpar. A terapia proposta foi à redução da fratura e posterior contenção rígida. Após sete anos de proservação clínica e radiográfica, foi observado que o dente se manteve com vitalidade pulpar e que houve cicatrização por deposição de tecido mineralizado. Palavras-chave: Trauma dental. Fratura radicular. Cicatrização dental. Consolidação da Fratura. ABSTRACT The authors describe a case of dental traumatism with horizontal root fracture in the cervical third of the upper right canine tooth due to a trauma and that it maintained the pulpal vitality. The proposed therapy went to the reduction of the fracture and subsequent rigid contention. After seven years of clinical follow-up and radiographic, they observed that the tooth stayed with pulpal vitality and that there was healing for deposition of mineralized tissue. Keywords: Dental trauma. Root fracture. Dental Healing. Fracture healing. Ciência e Cultura 33 Fratura radicular horizontal no terço cervical: cicatrização por calcificação. Caso clínico. INTRODUÇÃO BAMPA et al. faz-se uma radiografia-controle e confirma-se a posição Na presença de algum traumatismo na dentição do dente em relação à oclusão. O dente é então contido com uma contenção rígida ou semi-rígida permanente é muito importante estabelecer um correto diagnóstico, para isto deve-se realizar uma boa (ANDREASEN e ANDREASEN, 2000). O resultado da cicatrização, após a fratura anamnese, um detalhado exame clínico e complementar por meio de exame radiográfico. O exame clínico deve radicular, pode ser dividido em três grupos: cicatrização do tecido duro (TD), onde dentina e cemento fecham a primeiramente iniciar pela investigação das lesões de tecido mole externo e interno, e por último, os dentes. O fenda da fratura; cicatrização de tecido conjuntivo (TC), onde células do LPD invadem toda a fenda da fratura e exame dos dentes tem por objetivo detectar eventual presença de infrações e fraturas. O teste de mobilidade, envolvem ambos os fragmentos; interposição de tecido de granulação (TG), quando a polpa coronariana torna- percussão e sensibilidade elétrica devem receber especial atenção. Todavia, freqüentemente, o teste de vitalidade se infectada e necrosada devido ao rompimento inicial no LPD. Os indícios clínicos e radiográficos seguintes pulpar não é um indicador da exata condição pulpar imediatamente após o acidente, porque embora o feixe podem ser registrados, indicando o tipo de cicatrização: TD: mobilidade dental normal, sensibilidade pulpar nervoso esteja danificado e não funcional, o suprimento sangüíneo poderá estar intacto (ILDEFONSO, 2002). normal, linha de fratura levemente discernível e porção coronária do canal radiograficamente intacta; TC: O mecanismo da fratura radicular consiste no impacto horizontal que desloca o dente no sentido mobilidade aumentada do dente envolvido, sensibilidade pulpar normal, linha de fratura marcadamente visível e palatino e em uma direção ligeiramente extruída. Deste modo, a polpa pode ser estirada, podendo ou não ser obliteração do canal pulpar coronal radiograficamente; TG: mobilidade excessiva do dente envolvido, por vezes danificada devido a sua elasticidade inerente. As fraturas radiculares são lesões relativamente incomuns, mas extrusão, sensibilidade pulpar negativa, crescente distância radiográfica entre fragmentos e reabsorção representam padrões de cicatrização complexos devido à lesão concomitante da polpa, do ligamento periodontal, óssea ao nível da fratura (ADREASEN e ANDREASEN, 2000; CVEK et al., 2002). da dentina e do cemento (ANDREASEN e ANDREASEN, 1991). O presente relato tem como proposta orientar os profissionais a realizarem um diagnóstico preciso seguido A imagem radiográfica revela linhas radiolúcidas que aparentemente separam a raiz em dois ou mais de uma conduta correta frente à fratura radicular cervical, buscando um prognóstico favorável ao remanescente fragmentos, para isso, é fundamental que seja realizada mais de uma exposição, variando-se a angulação vertical radicular, coronário e à polpa dental. para assegurar a detecção de todas as possíveis fraturas radiculares (WALTON e TORABINEJAD, 1997; RELATO DO CASO ANDREASEN e ANDREASEN, 2000). Biologicamente, esta é uma lesão complexa ao Paciente do sexo masculino, 18 anos de idade, ligamento periodontal (LPD), à polpa, à dentina e ao cemento. Para facilitar a cicatrização, um correto leucoderma, compareceu a clínica particular relatando ter sido vítima de um acidente que provocou danos na reposicionamento é considerado essencial. O efeito de uma contenção firme, bem como, o tempo de boca. imobilização, não é atualmente conhecido, mas estão sendo investigados. No caso de fratura radicular com envolvendo os dentes 11, 12, 13 e dilaceração do lábio superior. No exame clínico e radiográfico foi constatado luxação associada, o fragmento coronal deslocado deve ser suavemente reposicionado. Após o reposicionamento, luxação no dente 11; fratura coronorradicular com envolvimento de dois terços da coroa e 34 Ciência e Cultura Durante a anamnese foi constatado traumatismo CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 aproximadamente 0,5 mm da raiz palatina com exposição que os autores optaram pela remoção da contenção pulpar e mobilidade do dente 12; e finalmente, fratura radicular horizontal no terço cervical com discreto rígida. Decorridos 7 anos, o dente encontra-se com suas funções fisiológicas e funcionais normais (Figura 5). deslocamento da coroa para palatino do dente 13 (FIGURA 1). O atendimento clínico emergencial consistiu em limpeza, anti-sepsia e sutura do lábio superior; foi DISCUSSÃO realizada polpotomia no dente 12 com emprego do curativo de demora Otosporin® sobre o remanescente De acordo com a literatura pesquisada e com o que foi observado no presente relato, há consenso entre pulpar radicular e restauração provisória da câmara pulpar com Cavit®; em seguida, foi realizada a redução os autores que clinicamente, o dente com fratura radicular mostra-se alongado, em geral estando deslocado para da fratura do dente 13 por meio de contenção rígida com fio ortodôntico Morelli® 0,60 mm. Essa contenção palatal; a imagem radiográfica demonstra linhas radiolúcidas separando aparentemente a raiz em dois ou foi realizada por vestibular e fixada com resina composta fotopolimerizável, sendo utilizado os elementos: 15, 14, mais fragmentos, sendo que o fragmento apical é sempre deixado in situ, ao passo que o coronal é freqüentemente 11 e 21 como suporte de contenção aos dentes traumatizados, finalmente, orientou-se o paciente sobre deslocado (SANTOS e BAMPA, 1996; SANTOS e BAMPA, 1997; ANDREASEN e ANDREASEN, a importância da manutenção da higiene oral para recuperação das lesões (Fuguras 2 e 3). Após sete dias, 2000). As cicatrizações que ocorrem subseqüentemente foi instituída a terapêutica endodôntica no dente 12, e realizado os testes de vitalidade pulpar térmico com gás dependem de duas condições: eventual dano da polpa e da eventual invasão bacteriana na linha de fratura para isqueiro Kingás® no dente 13, sempre utilizando comparativamente como parâmetro da dor o mesmo (ANDREASEN e ANDREASEN, 1991). Nesse relato houve cicatrização livre de contaminação bacteriana e elemento do lado oposto, que respondia positivamente. Nessa oportunidade, que o paciente já estava de reabsorção radicular, fatores esses complicadores do prognóstico do dente. Para facilitar a cicatrização, o psicologicamente equilibrado, repetiu-se às orientações de higiene oral visando à manutenção e integridade da correto reposicionamento coronal é considerado essencial, bem como a realização de uma contenção saúde periodontal, e informando a importância das consultas de acompanhamento, que deveriam ocorrer a rígida, porém ainda não é conhecida pelos autores quanto tempo deve permanecer uma contenção dental cada período de três meses. Nesses acompanhamentos eram realizados, além dos exames clínicos e (ANDREASEN e ANDREASEN, 1991; GONÇALVES, 1996; CVEK et al., 2002; RODD et radiográficos, os testes de vitalidade pulpar pelo método acima descrito, bem como, inspecionado as condições al., 2002). A cicatrização em dentes maduros é da saúde periodontal e a qualidade da contenção rígida, que foi mantida por um período de dois anos, visando predominantemente por TC e a não-cicatrização com TG, além disso, a cicatrização por TD está relacionada induzir uma cicatrização de TD. Nesse período, o paciente não relatou a ocorrência de qualquer tipo de com fraturas em que a polpa estava intacta desde a ocasião da lesão, e ainda, com dano pulpar moderado dor nos dentes envolvidos. No primeiro ano da contenção rígida, o exame devido ao deslocamento menor do fragmento coronal (ANDREASEN e ANDREASEN, 2000; SAROGLU radiográfico revelou uma área radiopaca característica do padrão de cicatrização de TD, decorridos dois anos, e SONMEZ, 2008). Esse fato provavelmente ocorreu no presente caso clínico, uma vez que os exames foi notado um aumento de radiopacidade sugerindo que o objetivo proposto foi alcançado (Figura 4), momento radiográficos sugeriram cicatrização por TD. POI et al. (2002) relataram que há cicatrização, Ciência e Cultura 35 Fratura radicular horizontal no terço cervical: cicatrização por calcificação. Caso clínico. Figura 1. Imagem radiográfica sugestiva de fratura radicular horizontal do dente 13. Figura 2. Imagem radiográfica apresenta contenção rígida do dente 13. Figura 3. Redução da fratura do dente 13 por meio de contenção rígida. 36 Ciência e Cultura BAMPA et al. CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Figura 4. Após dois anos de contenção rígida, a imagem radiográfica sugere aumento de radiopacidade compatível com padrão de cicatrização por calcificação. Figura 5. Decorridos 7 anos de acompanhamento, a imagem radiográfica sugere que ocorreu cicatrização por calcificação. Ciência e Cultura 37 Fratura radicular horizontal no terço cervical: cicatrização por calcificação. Caso clínico. BAMPA et al. quando a vitalidade pulpar é preservada, já que os de qualquer alteração indesejada nas estruturas odontoblastos e as células do cemento são responsáveis pelo processo de cicatrização, esse fato foi importante envolvidas pelo traumatismo dental. na cicatrização da fratura radicular horizontal do elemento 13. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS As seqüelas das fraturas radiculares são freqüentemente caracterizadas por metamorfose ANDREASEN, J.O.; ANDREASEN, F.M. calcificante (obliteração) em um ou em ambos os seguimentos; portanto os resultados dos testes pulpares Traumatismo dentário: soluções clínicas. Tradução de Frieda Werebe. São Paulo: Panamericana, 1991. 168p. elétricos (TPE) podem ser muito altos ou ausentes. A falta de resposta ao TPE por si só, contudo, na ausência ANDREASEN, J.O.; ANDREASEN, F.M. de outras evidências de necrose pulpar, como: lesões ósseas apicais ou laterais, sintomas adversos, não Essentials of Traumatic Injuries to the Teeth. 2nd ed. Copenhagen: Munksgaard, 2000. 188p. indicam a necessidade de tratamento de canal radicular (WALTON e TORABINEJAD, 1997, ILDEFONSO, CVEK, M.; MEJÀRE, I.; ANDREASEN, J.O. 2002; SAROGLY e SONMEZ, 2008). Nesse relato, durante os acompanhamentos não foram realizados TPE, Healing and prognosis of teeth with intra-alveolar fractures involving the cervical part of the root. Dent. optou-se pela utilização do teste pulpar térmico, uma vez que o dente 13 respondia positivamente a esse Traumatol., v.18, n2, p.57-65, 2002. procedimento clínico, apesar da câmara pulpar apresentar aspectos radiográficos sugestivos de ILDEFONSO, P.R.E. Fratura radicular horizontal – relato de caso. Rev. Bras. Odontol., v.59,n5,p.299- calcificação. Outro fator interessante nesse caso clínico foi à 301, 2002. tomada de consciência do paciente com relação à importância da higienização da cavidade oral para GONÇALVES, P.M.J. Fratura radicular dos incisivos centrais superiors – relato de caso clínico. Arq. manutenção da saúde periodontal, fator que segundo a literatura é essencial para prognóstico favorável destes Cent. Est. Curso. Odontol., v.32,n.1,p.9-19, 1996. casos (SANTOS e BAMPA, 1996; SANTOS e BAMPA, 1997). POI, W.R.; MANFRIN, T.M.; HOLLAND, R.; SONODA, C.K. Repair characteristics of horizontal root fracture: a case report. Dent. Traumatol.,v.18,n.2,p.98102, 2002. CONCLUSÃO RODD, H.D.; DAVIDSON, L.E.; LIVESEY, S.; Esse caso clínico demonstrou que a contenção rígida é uma conduta terapêutica que induz a cicatrização COOKE, M.E. Survival of intentionally retained permanent incisor roots following crown root fractures da fratura radicular horizontal, sendo favorável à vitalidade e manutenção da atividade pulpar. Embora o in children. Dent. Traumatol., v.18,n.2,p.92-97, 2002. período de tempo que o paciente deva permanecer com a contenção rígida seja variável, sugeriu ser uma boa SANTOS, F.S.; BAMPA, J.U. Fratura dental, um dente vivo após 17 meses: apresentação de caso clínico. opção terapêutica a manutenção da contenção até que se visualize por meio do exame radiográfico a linha In: JORNADA ODONTOLÓGICA DE RIBEIRÃO PRETO, 18ª, 1996, Ribeirão Preto. Anais Ribeirão sugestiva de cicatrização da fratura. O acompanhamento é uma conduta clínica fundamental para detecção precoce Preto: Universidade de São Paulo, 1996. p. 122. 38 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 SANTOS, F.S.; BAMPA, J.U. Traumatismo SAROGLU, I.; SONMEZ, H. Horizontal root dental. In: SEMANA ODONTOLÓGICA DA UNIVERSIDADE DE RIBEIRÃO PRETO, 8ª, 1997, fracture followed for 6 years. Dent. Traumatol., v.24,n.1,p.117-119, 2008. Ribeirão Preto. Anais Ribeirão Preto: Universidade de Ribeirão Preto, 1997, p. 32. WALTON, R.E.; TORABINEJAD, M. Princípios e prática em endodontia. Tradução de Ana Julia Perroti Garcia. 2 ed. São Paulo: Santos; 1997. 558p. Ciência e Cultura 39 40 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Utilização de resíduos agroindustriais para a produção de proteases por fermentação submersa usando o termofílico Bacillus sp SMIA-2 Utilization of agroindustrial residues for protease production by submerged fermentation using thermophilic bacillus sp SMIA-2 Andréia Boechat DELATORRE1; Marcela Vicente Vieira ANDRADE2; Silvania Alves LADEIRA2; Victor Haber PEREZ3; Meire Lélis Leal MARTINS3 1- Bolsista da FAPERJ atuando como Técnico de nível Superior do Setor de Engenharia de Processos da Universidade Estadual do Norte Fluminense (UENF). [email protected] 2- Mestranda do Laboratório de Tecnologia de Alimentos da Universidade Estadual do Norte Fluminense (UENF). [email protected] 3- Professor associado do Laboratório de Engenharia de Alimentos do Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias da Universidade Estadual do Norte Fluminense (UENF). Av. Alberto Lamego, 2000, Pq. Califórnia, Campos dos Goytacazes-RJ, 28013-602, Fone: (22)27261460. E-mails: [email protected]; [email protected] RESUMO Este trabalho teve como propósito avaliar a produção contendo 0,1% de proteínas do soro de leite, 0,2% de de protease pelo Bacillus sp. SMIA-2 por fermentação submersa em meio de cultura contendo resíduos água de maceração de milho e 0,5% de melaço de cana. Neste contexto, a cinética de crescimento celular e da agroindustriais. Basicamente, o meio de cultura foi protease produzida revelaram que a produção desta enzima atingiu seu valor máximo, 27 U/mg de proteína, constituído por melaço de cana de açúcar suplementado com proteínas do soro de leite e água de maceração de milho, incluindo sais minerais, entre outros, micronutrientes. Aumentos da concentração de melaço de cana até 0.3% favoreceram ao crescimento do microrganismo, assim como a produção de protease. Entretanto, o meio que proporcionou a obtenção de maiores níveis de atividade da enzima foi aquele com aproximadamente 30 h de fermentação. Então um ligeiro declínio do valor pH sinalizou o estágio final de produção da protease, sugerindo a importância do acompanhamento dos níveis de pH no monitoramento deste processo. Palavras-chaves: Proteases, Bacillus sp., Resíduos agroindustriais, fermentação ABSTRACT The production of protease by the thermophilic Bacillus sp SMIA-2 cultivated in a medium containing sugar cane molasses was studied. Increasing sugar cane molasses concentration in the medium until 0,3%, improved the growth of the microorganism and the enzyme activity. The supplementation of the culture medium with 0.1% cheese whey proteins and 0.2% corn steep liquor improved the enzyme activity. In these conditions the best concentration of sugar cane molasses for enzyme production was 0.5%. The profile of the growth and protease activity by Bacillus sp revealed that the enzyme production reached a maximum at 30h of culture incubation with levels of 27 U/mg protein. The end of enzyme production was signalled by a slightly decrease of pH, suggesting that the pH levels provides a useful means of monitoring the production process. Key word: Proteases, Bacillus sp. Agro-byproducts. Ciência e Cultura 41 Utilização de resíduos agroindustriais para a produção de proteases por fermentação submersa usando o termofílico Bacillus sp SMIA-2 INTRODUÇÃO DELATORRE et al. Conforme estudo realizado sobre o controle Proteases, enzimas que degradam proteínas, ambiental de pequenos e médios laticínios, constatou-se que o soro de leite, parte líquida obtida na fabricação constituem um dos mais importantes grupos de enzimas industriais as quais encontram aplicações em diferentes do queijo, se constitui no resíduo que causa maior preocupação pela sua alta taxa de matéria orgânica. segmentos industriais, tais como alimentos, têxtil, farmacêutico e detergentes (PHADATARE et al., 1993; Segundo os pesquisadores, o soro lácteo em si não é poluente, mas quando é lançado em curso d’água MAURER, 2004; JOO e CHANG, 2005; KOSIKOWSKI, 1979). As proteases termoestáveis provoca efeito poluidor devido ao consumo do oxigênio da água. A utilização do soro na elaboração de produtos produzidas por microrganismos do gênero Bacillus são o grupo mais importante de enzimas produzidas lácteos ou como substrato biotecnológico para produção de enzimas, contribui em muito para a redução do custo industrialmente e representam cerca de 20% do total de enzimas comercializadas no mundo (BEG et al., 2003; operacional da produção, bem como para a preservação do meio ambiente (FERREIRA E MOSQUIM, 1998). BEG et al., 2002). Atualmente, o maior empecilho ao uso de enzimas Sendo assim, a produção de enzimas microbianas utilizando soro de leite foi realizada por diversos em processos industriais está relacionado ao alto custo desse catalisador (GANDHI, 1997). Estima-se que por pesquisadores (FEIJOO et al., 1999; ROMERO et al., 2001; KOSIKOWSKI, 1979), tendo-se observado volta de 30-40% do custo envolvido na produção de proteases esteja relacionada ao meio de cultura utilizado aumentos da produtividade enzimática com o uso deste substrato. para o crescimento do microrganismo (KONA et al., 2001). Milho e outros grãos são processados para a produção de óleo, amido, adoçantes, etanol e outros Por outro lado, o mercado brasileiro de enzimas, embora ainda pouco representativo (cerca de 2% do produtos. Destes processamentos são gerados resíduos como a água de maceração de milho, resultando em um total mundial), revela grande potencial, devido à enorme geração de resíduos agroindustriais e ao dinamismo das subproduto rico em carboidratos, aminoácidos, peptideos, minerais, metais vitaminas e fosfato. Vários indústrias de alimentos, medicamentos, tecidos e papel e celulose. Neste contexto, a redução do custo de autores (WANG e RAKSHIT, 1999; LEE et al., 2003; TARI et al., 2006) sugeriram a utilização da água de produção de enzimas é favorecida no país, pela possibilidade de bioconversão de subprodutos agrícolas maceração de milho para a redução do custo do meio de cultura utilizado para o crescimento e produção de como farelo de trigo, farelo de algodão, casca de soja, soro de leite e água de maceração de milho dentre outros. enzimas por microrganismos. Por outro lado, melaço de cana de açúcar, Acredita-se, por isso, em um aumento rápido do uso de enzimas de forma geral, e em particular em processos subproduto da indústria açucareira, apresenta uma alta concentração de sacarose e outros açucares redutores, industriais (MUSSATO et al., 2007). Particularmente, a indústria de alimentos produz além de substâncias importantes para processos fermentativos. Neste caso em particular, este subproduto uma série de resíduos com alto valor de reutilização. Desta forma, inúmeros estudos utilizando resíduos tem sido tradicionalmente empregado como substrato biotecnológico com a finalidade de reduzir os custos de industriais do processamento de alimentos têm sido realizados visando seu aproveitamento. Com isso, produção de vários produtos importantes industrialmente (PAYOT et al., 1999; RHEE et al., 1984). minimiza-se o impacto ambiental destes tipos de indústrias na região onde estão situadas e ainda agrega-se valor Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a utilização dos resíduos agroindustriais aos produtos do mercado (TIMOFIECSYK. e PAWLOWSKY, 2000) melaço de cana de açúcar, soro de leite e água de maceração de milho como substratos na produção de 42 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 proteases por fermentação submersa usando como forma, uma vez concluído a fermentação, a remoção das microorganismo uma linhagem termofílica de Bacillus sp. SMIA-2, o qual foi isolado de solos de Campos dos células, do meio de cultura foi realizada por centrifugação a 4500g por 15 minutos à temperatura de 4oC, usando Goytacazes, na região Norte Fluminense do Estado do Rio de Janeiro. centrífuga modelo Hermle Z382. Subseqüentemente, a atividade enzimática do sobrenadante livre de células, foi determinada pela quantificação de peptídeos solúveis em ácido tricloroacético (TCA) 15%. O substrato MATERIAIS E MÉTODOS Microrganismo e condições de crescimento utilizado para essa determinação foi uma solução de azocaseína 0,2% (p/v) preparada em tampão TRIS/HCl (pH 8,5). Foi adicionado 0,5 mL do extrato enzimático em 1,0 mL do substrato e incubado em banho-maria à O microrganismo utilizado neste estudo foi uma bactéria termofílica, Bacillus sp SMIA-2, isolada por temperatura de 70oC por 10 minutos. A reação foi interrompida pela adição de 0,5 mL de TCA e a solução NUNES e MARTINS (2001). Para a produção da protease o seguinte meio de cultura foi utilizado centrifugada a 15000g por 5 minutos a 4oC (Hermele Z 382K). O mesmo procedimento foi realizado com o inicialmente: melaço de cana de açúcar - 1,0 - 7,0g; peptona - 1,0g; MgSO4 – 0,5g; K2HPO4 – 0,87g; KCl controle, exceto que o TCA foi adicionado antes do extrato enzimático (JANSEN et al., 1994 ). – 0,3g; CaCl2 – 0,29g e traços de metais (ZnO – 2,5´103 g FeCl3.6H2O - 2,7´10-2g; MnCl2.4H2O – 1,0´ 10-2g; Uma unidade de atividade foi definida como a quantidade da enzima requerida para produzir um CuCl2.2H2O – 8,5´10-4g; CoCl2.6H2O – 2,4´10-3g; NiCl3.6H2O – 2,5´10-4g; H3BO3 – 3,0´10-4g e Na2MoO4 aumento na absorbância a 420 nm igual a 0,1 em 60 minutos. A concentração de proteínas foi determinada – 1,0´10-3g) dissolvidos em 1 L de água destilada. Posteriormente, o meio de cultura foi suplementado com pelo método de Lowry, com as modificações propostas por PETTERSON (1977). água de maceração de milho (0,2%) e proteínas do soro de leite (0,1%). O pH dos meios de cultura foram ajustados para 7,5 com solução de NaOH 1,0 M e posteriormente esterilizados em autoclave à 121°C por 15 minutos. O meio de produção foi inoculado com 5 mL de uma cultura de véspera e incubado em um Shaker orbital modelo Thermo Forma (Ohio, USA), a 150 rpm e temperatura de 50oC. Os experimentos foram realizados em triplicata, sendo cada um constituído por 25 mL de meio de cultura em erlenmeyer de 250 mL. Em intervalos de tempo pré-determinados, foram retirados frascos para medida da densidade ótica a 600 nm, com a utilização de um espectrofotômetro SHIMADZU UVmini 1240, pH e dosagem da atividade da enzima nos filtrados do caldo de cultura. RESULTADOS E DISCUSSÃO O Bacillus sp SMIA-2 cresceu e produziu proteases quando cultivado em meio líquido contendo melaço de cana de açúcar. Um aumento do crescimento do microrganismo e da atividade da protease foi observada à medida que se aumentou a concentração do melaço de cana no meio de cultura para 0,3%. Subseqüente aumento na concentração do melaço além de reprimir a atividade da protease, inibiu o crescimento do microrganismo (Figura 1). Portanto, a concentração de melaço de 0,3% foi considerada a mais satisfatória tanto para o crescimento do microrganismo como para favorecer a produção da protease em estudo. Atividade enzimática A produção de protease foi estimada em função da atividade enzimática do caldo de fermentação. Desta Ciência e Cultura 43 Utilização de resíduos agroindustriais para a produção de proteases por fermentação submersa usando o termofílico Bacillus sp SMIA-2 DELATORRE et al. Figura 1. Cinética de crescimento celular (5) e da atividade de protease de (=) de Bacillus sp cultivado em meio líquido em função da concentração de melaço de cana, durante 36 horas de fermentação à temperatura de 50ºC e 150 rpm. A suplementação do meio de cultura com 0,2% de água de maceração de milho e 0,1% de proteínas do soro de beneficiar o meio de crescimento pelo fornecimento de fonte de nitrogênio, este resíduo fornece vários micro- leite estimulou a atividade da protease, embora não afetasse o crescimento do microrganismo (Figura 2). nutrientes, vitaminas e fatores estimulantes do crescimento microbiano (KUMAR e TAKAGI, 1999). Portanto, a Nestas condições, a melhor concentração do melaço de cana no meio de cultura foi de 0,5%. De fato, meios utilização do melaço de cana em combinação com a proteína do soro e da água de maceração de milho no de cultura ricos em proteínas, como aqueles contendo o soro de leite, possuem indutores que levam à produção meio de cultura, além de favorecer a redução dos custos para a produção de proteases, contribui para a redução de protease. Por isso, grandes quantidades desta enzima foram produzidas utilizando o soro de leite, um resíduo de poluentes ambientais. De acordo com Maurer (2004) o meio de cultura utilizado para a fermentação industrial das indústrias de laticínios (Romero et al., 2001). Alem disso, a água de maceração de milho tem sido contribui muito no custo de produção de enzimas em larga escala, devido à utilização de grandes volumes de considerada em alguns trabalhos como sendo uma fonte de nitrogênio relativamente barata e satisfatória para a meio. Portanto, é necessário aliar elevada produtividade com fontes de carbono e de nitrogênio, para que a produção de proteases (TARI et al., 2006). Além de produção seja mais viável. 44 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Figura 2. Cinética de crescimento celular (5) e da atividade de protease de (=) de Bacillus sp cultivado em meio líquido em função da concentração de melaço de cana, suplementado com 0,2% de água de maceração de milho e 0,1% de proteínas do soro, durante 36 horas de fermentação à temperatura de 50ºC e 150 rpm. O crescimento do Bacillus sp. SMIA-2 e a de oxigênio ou mesmo pela composição do meio de atividade da protease em função do tempo de fermentação foram observados por 42 horas em meio cultura, podem ter um marcante efeito na produção destas enzimas (MING CHU et al., 1992). líquido contendo 0,5% de melaço de cana de açúcar e suplementado com 0,1% de proteína de soro de leite e A partir de 30 horas de incubação, a enzima permaneceu ainda estável por 6 horas e após 42 horas 0,2% de água de maceração de milho (Figura 3). A atividade máxima da protease foi alcançada após 30 ocorreu uma queda da sua atividade sugerindo que a mesma sofreu um rápido processo de desativação, cujo horas de incubação do microrganismo, com níveis de 27,82 U/mg de proteína, quando o crescimento já havia fato tem sido reportado como um fenômeno característico na produção de proteases a partir de fontes microbianas terminado. Posteriormente, foi observada uma redução da atividade da protease, o que sugere que a produção (JANSSEN et al.,1994). Durante as primeiras 6 horas de incubação, desta enzima está parcialmente associada ao crescimento microbiano, porque parte dela foi produzida, quando a observou-se uma queda acentuada do pH do meio de cultura de 7,5 para 5,5. Provavelmente essa queda inicial cultura estava metabolicamente ativa. Estes resultados estão em correspondência com o trabalho publicado por do pH do meio pode ser devida à formação de ácidos orgânicos durante consumo da fonte de carbono, que é Ward (1985), o qual tem relatado que os microrganismos do gênero Bacillus geralmente produzem maior mais intensa nesse primeiro período. Em seguida, o pH do meio aumentou gradativamente alcançando 8,7 quantidade de protease ao final da fase exponencial de crescimento. Por outro lado, embora a função destas depois de 30 horas de fermentação, quando a atividade máxima da enzima foi observada e então posteriormente enzimas ainda não seja bem conhecida, sua produção está correlacionada com uma elevada taxa de renovação apresentou um leve declínio. Portanto, o final da produção da enzima foi sinalizado pelo decréscimo do pH do caldo de proteínas durante a esporulação. Desta forma, fatores que afetam a esporulação como condições de stress, de fermentação. Estes resultados sugerem que o perfil do pH do meio de fermentação pode ser útil para seja pela redução da concentração de nutrientes, tensão monitorar o processo de produção da protease. Ciência e Cultura 45 Utilização de resíduos agroindustriais para a produção de proteases por fermentação submersa usando o termofílico Bacillus sp SMIA-2 DELATORRE et al. 5 Figura 3. Cinética do crescimento microbiano de Bacillus sp SMIA-2 ( ), pH ( ) e atividade da protease (=), em fermentação submersa com meio de cultura contendo 0,5% de melaço de cana, 0,1% de proteínas do soro e 0,5% de água de maceração de milho à temperatura de 50°C, 150 rpm e pH inicial de 7,5. BANERJEE, U. C., SANI, R.K., AZMI, W., SONI, R. Thermostable alkaline protease from Bacillus CONCLUSÃO O Bacillus sp. SMIA-2 cresceu e produziu protease quando cultivado em meio contendo 0,5% brevis and its characterization as a laundry detergent additive. Process Biochemistry v 35, p. 213-219, melaço de cana de açúcar, 0,1% de proteína do soro de leite e 0,2% água de maceração de milho. A produção 1999. máxima da enzima foi alcançada com 30 horas de fermentação alcançando níveis de atividade de 27,82 BEG, Q. K.; GUPTA, R. Purification and characterization of an oxidation-stable, thiol-dependent U/mg de proteína. Estes resultados são animadores e revelam a capacidade deste microorganismo para serine alkaline protease from Bacillus mojavensis. Enzyme and Microbial Technology, v 32, p.294-304, 2003. produzir protease, mostrando-se um processo fermentativo potencialmente atrativo para sua BEG, Q.K.; SAXENA, R. K.; GUPTA, R. Derepression and Subsequent induction of protease syntesis by Bacillus mojavensis under fed bach operations. implementação em escala industrial. Process Biochemistry, v 37 p. 1103-1109, 2002. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS DAS BOCCHINI, D.A., OLIVEIRA, O.M.M.F., GOMES, E., SILVA, R. Use of sugarcane bagasse and INDÚSTRIAS DE MILHO (2006). Disponível em <http://www.abimilho.com.br >. Acesso em 29 de grass hydrolysates as carbon sources for xylanase production by Bacillus circulans D1 in submerged outubro de 2006. fermentation. Process Biochemistry, 40:3653-3659, 2005. 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Zootecnista da Secretaria de Estado da Agricultura e do Abastecimento do Paraná. E-mail: [email protected] 2- Professor Adjunto do Departamento de Zootecnia, FCAV-UNESP – Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane, s/n, 14884-900 – Jaboticabal, SP. E-mail: [email protected] Pesquisador do CNPq. 3- Professora Doutora do Departamento de Economia Rural, FCAV-UNESP – Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane, s/n, 14884900 – Jaboticabal, SP. E-mail: [email protected] RESUMO Considerando a carência e necessidade de realizar um diagnóstico da região quanto à produção de leite, para posterior desenvolvimento de trabalhos avaliando a relação entre variáveis no sistema produtivo, foram aproveitados dados referentes à área de pasto, vacas ordenhadas e produção de leite, disponíveis no site da Coordenadoria de Assistência Técnica Integral – CATI e do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística - IBGE, em relação aos 14 municípios pertencentes ao Escritório de Desenvolvimento Rural (EDR) de Jaboticabal-SP, sendo então realizada uma análise de agrupamento, com a formação de subgrupos, o que possibilitou o agrupamento dos municípios de acordo com suas similaridades nas variáveis levantadas, em 4 grupos, o G1 que reuniu municípios de baixa aptidão leiteira, o G2 com destaques de produtividade, o G3 com característica intermediárias e o G4 com maiores áreas de pastagens porém menos eficientes em produção. Essa abordagem exploratória permite uma visão mais contextualizada da situação leite na região, além de possibilitar tomadas de decisões com referenciais não subjetivos no direcionamento de políticas públicas, assistência técnica e pesquisas que envolvam a cadeia leiteira. Palavras-Chave: análise de agrupamentos, pecuária leiteira, municípios ABSTRACT Considering the shortage and need to make a diagnosis municipalities according to their similarities in the variables of the region as the production of milk, for further development of work assessing the relationship between raised, in four groups, G1 which brought together the municipalities of low fitness milk, G2 with the headlines variables in the production system, were data concerning the area of grass, milked cows and milk production, on productivity, G3 with the characteristic intermediate, G4 and grassland areas with larger but less efficient in available on the website of the Coordenadoria de Assistência Técnica Integral – CATI and Instituto production. This approach allows a more exploratory context of the situation of milk in the region, well as Brasileiro de Geografia e Estatística – IBGE, in relation to the 14 municipalities belonging to Escritório de enabling the decision-making references to subjetivos not in the direction of public policies, technical assistance Desenvolvimento Rural – EDR, city of Jaboticabal – SP, and then performed an analysis of grouping, with the and research involving the milk production. Keywords: analysis of groupings, cattle milk, formation of subgroups, which allowed the group of municipalities Ciência e Cultura 49 Caracterização produtiva da pecuária leiteira na área do escritório de desenvolvimento rural de Jaboticabal/SP INTRODUÇÃO LOPES et al. não são condizentes com a estrutura socioeconômica O escritório de desenvolvimento rural (EDR) de desses produtores. Como relatado por Vilela (1999), a falta de Jaboticabal/SP é formado por 14 municípios, sendo eles: Borborema, Cândido Rodrigues, Dobrada, Fernando organização das informações existentes e a necessidade de identificar os padrões de produção de leite da região, Prestes, Guariba, Ibitinga, Itápolis, Jaboticabal, Monte Alto, Santa Ernestina, Taiaçú, Taiúva, Taquaritinga, Vista são problemas que devem ser solucionados para atender as necessidades de melhorias tecnológicas no segmento Alegre do Alto, totalizando uma área de 5.016 km2. O EDR de Jaboticabal é uma região de elevado da produção na Região Sudeste. Neste sentido, ações de desenvolvimento e nível de exploração da terra e de resultados econômicos, estando segundo estudo de Andrietta (2002), no grupo profissionalização com o uso de tecnologias apropriadas e acessíveis aos produtores, devem ser feitas, com uma das regiões agrícolas que apresentam alto valor médio de produção por unidade de área cultivada (R$ boa compreensão das características regionais. O objetivo do presente trabalho foi de realizar uma 1.271,85/ha), bastante acima da média estadual (R$ 664,88/ha). primeira abordagem de variáveis relacionadas à produtividade e concentração leiteira nos municípios A região é caracterizada pela sua expressiva produção agrícola, principalmente ligada à citricultura e pertencentes à região, com dados já disponíveis por instituições de pesquisa, mas ainda não discutidos sob cana-de-açúcar, sendo que esta última vem a cada ano ganhando mais espaço, como pode ser observado pelos esta ótica, que auxiliará no agrupamento destes, de acordo com suas similaridades, apresentando uma visão dados disponíveis no site da Coordenadoria de Assistência Técnica Integral - CATI (2006). geral da distribuição e classificação que servirá de base para futuros estudos. No entanto, muitos produtores desta região continuam ativos na pecuária leiteira, seja por motivos de tradição familiar, ocupação de mão de obra disponível na propriedade (caseiros), uso de áreas desfavoráveis MATERIAL E MÉTODOS para outras culturas, alternativa para diversificação na produção e complementação da renda, como pode ser Os dados para análise foram coletados do sistema digital do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística - constatado neste trabalho. Sendo assim, a pecuária leiteira apresenta importância, não apenas do ponto de IBGE (2005), produção da pecuária municipal e da Coordenadoria de Assistência Técnica Integral – CATI vista econômico, mas principalmente social, ajudando na manutenção de empregos no campo e na produção (2006), pelas informações do Lupa (levantamento das unidades de produção agropecuárias), sendo então de alimentos. Por não ser uma região expoente na pecuária obtidas as seguintes variáveis: número de vacas ordenhadas e produção de leite em mil litros por ano, e leiteira, apresenta carência na literatura sobre seu perfil produtivo nos municípios, com a necessidade de um a partir destes valores foi também obtido o de produção por vaca ordenhada ao ano (litros/vaca ordenhada/ano), diagnóstico preliminar balizador que permita o direcionamento das ações de pesquisa, assistência área de pasto total (soma das áreas ocupadas com capim braquiária, napier, colonião, gramas, jaraguá, e outras técnica e de políticas públicas subsidiadas em dados que se sobrepõem ao subjetivismo na tomada de decisões. gramíneas e leguminosas usadas em pastagens, não exclusivamente com bovinos), os de concentração de Segundo Fonseca e Carvalho (1997), trabalhando com produtores dos municípios de Jaboticabal, Taiúva vacas ordenhadas por hectare de pasto total (vacas ordenhadas/hectare) e produção de leite por hectare de e Monte Alto, constatou-se que as tecnologias não estão sendo adotadas de forma eficiente, levando a crer que pasto total (litros de leite/hectare). Com estes dados foi realizada a análise de 50 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB agrupamento, técnica que permite classificar em v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 RESULTADOS E DISCUSSÃO subgrupos excludentes, em que se pretende de forma geral maximizar a homogeneidade dentro dos grupos e Os dados utilizados neste trabalho podem ser maximizar a heterogeneidade entre os grupos, permitindo assim, classificar os municípios pertencentes à EDR de observados na Tabela 1, onde estão representados os 14 municípios pertencentes ao escritório de Jaboticabal em grupos mais homogêneos, representados num gráfico com estrutura de árvore denominado desenvolvimento rural de Jaboticabal/SP e os valores das variáveis abordadas. dendrograma (SNEATH e SOKAL, 1973). Tabela 1 – Produção e concentração leiteira das propriedades localizadas na região do Escritório de Desenvolvimento Rural de Jaboticabal/SP Fonte: IBGE, Produção da pecuária municipal 2005 e CATI, Levantamento das unidades de produção agropecuária (2006) (adaptado). Sendo: L/VO/ano = litros produzidos por vaca ordenhada no ano; Área de pasto = (soma das espécies braquiária, napier, colonião, gramas, jaraguá, outras gramíneas e outras leguminosas usadas em pastagem); Vacas Ord/ha = número de vacas ordenhadas por hectare de pasto; L/ha = litros produzidos por hectare de pasto no ano. Ciência e Cultura 51 Caracterização produtiva da pecuária leiteira na área do escritório de desenvolvimento rural de Jaboticabal/SP LOPES et al. Devido à dificuldade de visualizar as similaridades a formação de quatro grupos (considerando o corte no dos municípios em relação ao total das variáveis, de forma a facilitar a classificação em grupos, foi realizado a análise ponto cinco), através do dendrograma, construído pelo método de Ward (WARD, 1963), demonstrado na de agrupamentos. Por esta análise, foi possível visualizar Figura 1. Figura 1: Agrupamento dos municípios localizados no escritório de desenvolvimento rural de Jaboticabal/SP de acordo com as variáveis abordadas na Tabela 1. Apontados os grupos, a construção de uma tabela com as suas respectivas médias, facilita a visualização de suas características frente às variáveis abordadas, sendo observados na Tabela 2. Tabela 2 – Grupos formados e seus respectivos valores nas variáveis observadas Sendo: L/VO/ano = litros produzidos no ano por vaca ordenhada; Área de pasto = (soma das espécies braquiária, napier, colonião, gramas, jaraguá, outras gramíneas e outras leguminosas usadas em pastagem); Vacas Ord/ha = vacas ordenhadas por hectare de pasto, L/ha = litros produzidos no ano por hectare de pasto. Sendo assim, podemos observar as 6 variáveis abordadas, de maneira a facilitar o entendimento da formação dos 4 grupos de municípios, considerando as suas atribuições: 52 Ciência e Cultura 1. Vacas Ordenhadas: representa o efetivo de rebanho realmente produzindo leite; 2. Produção de leite total: está relacionada a todas as demais variáveis; CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 3. Litros produzidos no ano por vaca ordenhada: leite na agricultura familiar está diretamente relacionada propicia uma visualização do potencial produtivo dos animais e do manejo adotado; à intensificação e gestão dos recursos produtivos. O grupo 3 formado pelos municípios de 4. Área de pasto: permite uma relação à área potencialmente disponível para criação de bovinos; Taquaritinga, Monte Alto e Jaboticabal, apresenta características intermediárias entre os grupos 2 e 4, 5. Vacas ordenhadas por hectare: considera de maneira apenas relacional, a concentração de animais apresentando índices de produtividade acima da média regional, porém com baixa concentração de vacas produzindo leite em cada hectare de pasto total, o que possibilita aferir que regiões com mais aptidão leiteira ordenhas em relação as áreas de pastagens, o que indica que as criações leiteiras são de sistemas mais intensivos, apresentem maiores índices; 6. Litros produzidos no ano por hectare de pasto: porém de menor expressão que a pecuária de corte. O grupo 4 foi formado por três municípios: possibilita identificar onde realmente as pastagens são mais utilizadas para produção de bovinos leiteiros e sua Ibitinga, Itápolis e Borborema, ambos com grandes áreas de pastagens (75.519,5 ha), porém, com o menor valor eficiência, associado a variável litros produzidos no ano por vaca ordenhada. de produção de leite por vaca ordenhada no ano (885,26 litros), de vacas ordenhas por hectare de pasto total (0,11 Torna-se, pois, necessário estudar as vantagens locacionais de cada uma das regiões, bem como os VO/ha) e de produção de leite por hectare de pasto total (100,22 litros/ha). Estes dados indicam a baixa fatores explicativos do desempenho favorável destes setores em algumas (HADDAD, 1999). eficiência produtiva dos rebanhos leiteiros, além de outras atividades de criação nas áreas de pasto, que não a O grupo 1 formado por seis municípios: Santa Ernestina, Fernando Prestes, Vista Alegre do Alto, leiteira. A análise de agrupamentos, representada pelo dendrograma (Figura 1), foi fundamental na determinação Guariba, Dobrada e Cândido Rodrigues, foi o que apresentou menor relevância nas características leiteiras, destes grupos e na facilidade para visualizá-los, sendo então mais fácil discutir a Tabela 1, referente aos dados ou seja, municípios onde a atividade leiteira demonstrou tendência a pequeno impacto econômico e social, pelo e variáveis utilizadas. A essência do desenvolvimento de clusters pequeno número de vacas ordenhadas (870 divididas entre os seis municípios) e baixa produção de leite (1.008 (agrupamentos) é a criação de capacidades produtivas especializadas dentro de regiões para a promoção de mil litros/ 6 municípios), o que resultou em uma pequena produção de leite em relação à área total de pasto seu desenvolvimento econômico, ambiental e social (HADDAD, 1999). (185,89 litros/ha), o que indica que mesmo nas áreas de pasto, as criações desenvolvidas, provavelmente não Ainda neste contexto, Lopes (2007) destaca que ações direcionadas de acordo com as individualidades estão relacionadas a atividade leiteira. O grupo 2 foi formado por dois municípios, sendo de cada propriedade inserida nesses municípios, podem ser facilitadas pelo agrupamento de acordo com suas eles: Taiúva e Taiaçú, que apresentaram maior concentração de vacas ordenhadas e de produção de similaridades, inclusive com a difusão de práticas, processos ou sistemas referenciais, entre os grupos leite por hectare de pasto total (0,76 e 1.716,85 respectivamente), além da maior produção por vaca formados. De posse dessas informações, a visualização da ordenhada no ano (2.632,14 litros) em relação aos demais grupos. Este fato indicou que a pecuária leiteira situação leiteira nos municípios fica facilitada e possibilita comparações e elaboração de propostas de trabalho. apresentou maior importância econômica e social nestes municípios, além de possivelmente possuir sistemas de Como relatado por Diniz (2008), a avaliação de programas e dos projetos de intervenção, em função produção mais intensivos. De acordo com Almeida (2008), a sustentabilidade do sistema de produção de dos indicadores e das metas estabelecidas, permite orientar a tomada de decisões. Ciência e Cultura 53 Caracterização produtiva da pecuária leiteira na área do escritório de desenvolvimento rural de Jaboticabal/SP CONCLUSÃO LOPES et al. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Pela caracterização da pecuária leiteira na área ALMEIDA, E.L.D., et al. Análise da evolução dos de abrangência do Escritório de Desenvolvimento Rural de Jaboticabal, foi possível observar a formação de índices técnicos e econômicos de uma propriedade leiteira de agricultura familiar do noroeste do Paraná. quatro grupos de municípios. O grupo 1(Santa Ernestina, Fernando Prestes, In: CONGRESSO BRASILEIRO DE ASSISTÊNCIA TÉCNICA E EXTENSÃO RURAL, 4., 2008, Vista Alegre do Alto, Guariba, Dobrada e Cândido Rodrigues) foi formado por municípios de baixa aptidão Londrina. Anais...Londrina: AEA-Ld, 2008. p.275-279. leiteira. O grupo 2 (Taiúva e Taiaçú) se destacou, com ANDRIETTA, A.J. Desempenho agrícola e desenvolvimento: uma análise regionalizada do estado valores que podem indicar sistemas mais intensivos de produção, assim como utilização de tecnologias mais de São Paulo. Informações Econômicas, São Paulo. V.32, n.2, p. 43-55, fev.2002. eficientes. O grupo 3 (Taquaritinga, Monte Alto e COORDENADORIA DE ASSISTÊNICA Jaboticabal) apresentou características intermediárias entre o 2 e o 4. TÉCNICA INTEGRAL (CATI). Levantamento Censitário de Unidades de Produção Agropecuária - O grupo 4 (Ibitinga, Itápolis e Borborema) apresentou as maiores áreas de pastagem e rebanhos LUPA, 2006. Disponível em: < http:// www.cati.sp.gov.br/novacati/servicos/lupa/lupa.php> leiteiros, porém pouco eficientes ou subutilizadas para a produção de leite. Acesso em: 02 mar. 2007. Os municípios pertencentes ao grupo 2 demonstraram oferecer vantagens para os laticínios, pela DINIZ, F.H. ET al. Produção de leite com qualidade em areas de assentamento: proposições de facilidade de captação de leite em função da maior concentração de vacas ordenhadas e de produção por intervenção como inovação. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE ASSISTÊNCIA TÉCNICA E hectare. A classificação da região por grupos de EXTENSÃO RURAL, 4., 2008, Londrina. Anais...Londrina: AEA-Ld, 2008. p.656-660. municípios de acordo com as variáveis abordadas facilita o direcionamento de ações na pecuária leiteira. FONSECA, M.I.; CARVALHO, A.A.B. Caracterização tecnológica da pecuária leiteira na microrregião homogênea serra de Jaboticabal-SP. ARS AGRADECIMENTO Veterinária, Jaboticabal-SP. 13 (2): 170-183, 1997. A Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo (Fapesp), pelo auxílio HADDAD, P. R., et al. A competitividade do agronegócio e desenvolvimento regional no Brasil – financeiro na condução deste trabalho (Processo N° 2005/55662-1). Estudo de Clusters. Brasília: CNPq – EMBRAPA, 1999. 265 p. A Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (Capes), pela bolsa concedida ao INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA primeiro autor. E ESTATÍSTICA (IBGE). IBGE Cidades@. Pecuária Municipal (2005). Disponível em < http:// www.ibge.com.br/cidadesat/topwindow.htm?1>. Acesso em 20 ago. 2006. 54 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 LOPES, A.D. Caracterização de unidades VILELA, D.; BRESSAN, M. Restrições produtoras de leite na área de abrangência do escritório de desenvolvimento rural de Jaboticabal – SP. Técnicas, Econômicas e Institucionais ao Desenvolvimento da Cadeia Produtiva do Leite no Brasil Jaboticabal, SP: Dissertação de mestrado em Zootecnia, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias de – Região Sudeste. Brasília: MCT/CNPq/PADCT/Juiz de Fora: Embrapa Gado de Leite, 1999. 54 p. Jaboticabal - UNESP, 2007. WARD, J.H. 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A pilot study of in vitro eficacy Devanir de Araújo Cervi**, Liliane Hitomi Sunto*, Carlos Alberto Mosquini*, Elizangela Partata Zuza***, Maria José Pereira de Almeida** *Cirurgiões-Dentistas. **Professor da Disciplina de Endodontia do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos. ***Professora do Curso de Pós-Graduação em Periodontia do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos Autor responsável: Devanir de Araujo Cervi. Av. Prof. Roberto Frade Monte, 389 – Jardim Aeroporto, 14.783-226 – Barretos SP. Fone: (17) 3321-6411 – e-mail: [email protected] Este artigo foi originalmente publicado na edição de novembro de 2008, e por problemas de impressão está sendo novamente publicado. RESUMO Os cimentos retro-obturadores utilizados em endodontia não apresentam todas as propriedades biológicas desejáveis, dessa forma, estudos têm sido realizados no intuito de buscar novos materiais que apresentem características ideais. O objetivo deste estudo piloto foi avaliar a infiltração marginal de um cimento à base de polímero de mamona em retroobturações endodônticas. Neste estudo utilizaram-se 15 caninos que foram inicialmente instrumentados e obturados, sendo em seguida, realizados retro-preparos com auxílio do ultra-som. Os preparos foram retroobturados inserindo-se um cimento à base de polímero de mamona (Biosteo®), sendo as amostras imersas em uma solução de azul de metileno a 2 % à vácuo, lavadas e cortadas. As mensurações das infiltrações foram realizadas com lupa esteroscópica. Os graus de infiltração variaram de 0 a 4 e foi apresentado em porcentagens. Na maioria dos casos, o Biosteo® (cimento à base de polímero de mamona) mostrou bom selamento marginal (0 e 1), totalizando 70,7% dos casos. Dentro dos limites deste estudo piloto, foi possível concluir que o cimento à base de polímero de mamona mostrou resultados satisfatórios in vitro, com baixo grau de infiltração marginal na maioria dos dentes estudados. Palavra chave: Endodontia, Polímero de mamona, Infiltração marginal. ABSTRACT The endodontics retrofillling cements do not Leakages measurements were performed with a present all the biological properties, thus, studies have been performed to find other materials with ideals stereoscopic magnifying glass. The scores of leakage varied from 0 to 4 and it was given in percentages. In characteristics. The aim of this pilot study was to accomplish a marginal leakage pilot study to test a castor most of the cases, Biosteo® (castor bean polymer cement) enabled a clinical acceptable marginal seal (levels bean polymer cement used in endodontic retrofilling. Fifteen canines were initially instrumented and filled; then, 0 and 1), totaling 70.7% of the cases. Within the limits of this pilot study, it was possible to conclude that the castor retro-preparations were performed with the use of an ultrasonic appliance. Preparations were retrofilled bean polymer cement showed satisfactory results in vitro, with low degree of marginal leakage in the most of inserting castor bean polymer cement (Biosteo®) and the samples were afterwards immersed into 2% the teeth studied. Keywords: Endodontics, Oil polyurethane, methylene blue solution in vacuum, rinsed and sectioned. Marginal leakage. Ciência e Cultura 57 Avaliação da infiltração marginal de um cimento à base de polímero de mamona em retro-obturações. Estudo piloto de eficácia in vitro INTRODUÇÃO CERVI et al. Odontológico, a fim de verificar seu desempenho clínico (CARVALHO et al, 1997). De acordo com PASCON Os cimentos retro-obturadores de canais et al. (2000), a resina poliuretana de mamona mostrou radiculares encontrados no mercado não apresentam qualidades biológicas de um material com grandes propriedades ideais, tais como selamento marginal e ação possibilidades de ser utilizado como cimento obturador bactericida. Outro fator importante a ser considerado é de canais radiculares. Diante de tais considerações, o a capacidade de reabsorção quando extravasado na objetivo deste estudo piloto foi avaliar a infiltração região apical, além da indução de depósitos mineralizados marginal de um cimento à base de polímero de mamona no periápice. utilizado para retro-obturações endodônticas. Muitos materiais foram pesquisados como material obturador de canais radiculares, dentre eles pode-se citar o óxido de zinco e eugenol (TANOMARU et al., 2004), MATERIAL E MÉTODOS o óxido de zinco puro (GARCIA, 2003), ionômero de vidro (PIRES & BUSATO, 2000; DALÇÓQUIO et al. Este trabalho foi aprovado pelo Comitê de Ética 2001), cianocrilato (ENNES & MARQUES, 2000; em Pesquisa da Faculdade de Odontologia da Fundação DALÇÓQUIO et al., 2001), super EBA (YAMASHITA Educacional de Barretos (processo no 041/2006). Foram et al., 1999; GOMES et al., 2001), MTA (SILVA et al., selecionados 15 dentes humanos caninos (superiores e/ 1996; BUSATO et al., 1999, SILVA NETO et al., ou inferiores), unirradiculares, retirados do banco de 2005), resina epóxica (PASCON et al., 2000; PAVAN dentes da Faculdade de Odontologia de Barretos, os et al., 2001) e mais recentemente o polímero de mamona quais foram radiografados para verificação de variações (COSTA et al., 1997, FUENTEFRIA et al., 1998; anatômicas. Em seguida, as amostras foram limpas, YUNES, 1999; CAVALIERI, 2000; PASCON et al., hidratadas e desinfectadas por 4 dias em solução de 2001; BONINI et al., 2002; PAVAN, 2003; hipoclorito de sódio à 1%. TAGLIANI, 2004 e MORAES, 2005). Os diversos Realizou-se a abertura coronária dos dentes de materiais utilizados para retro-obturações apresentam acordo com a técnica preconizada pela Disciplina de bons resultados clínicos com regressão das lesões Endodontia da Faculdade de Odontologia de Barretos, periapicais, entretanto, não apresentam todas as sendo o preparo biomecânico realizado pela técnica propriedades ideais desejáveis. Dessa forma, novas Escalonada com emprego de brocas especiais e pesquisas têm sido realizadas com o propósito de intercaladas com irrigação de hipoclorito de sódio à 1% melhorar a resposta biológica ao tratamento retro- (seringa de 3ml). Após o término da instrumentação, os obturador. canais radiculares foram secos com pontas de papel O polímero de mamona tem se mostrado absorventes e obturados com cimento obturador Endofil biocompatível, bactericida, germicida, praticamente (Maillefer Industria e Comércio Ltda, Petrópolis, RJ, atóxico (GUTIERREZ, 2006), além de promover ósseo- Brasil), pela técnica termoplastificada de McSpadden, indução e bom selamento marginal (devido à expansão sendo as aberturas coronárias seladas com cimento quando de sua manipulação) (LEONEL et al., 2003). restaurador à base de Óxido de Zinco e Eugenol (IRM). Este material foi inicialmente empregado na medicina nos Os dentes foram conservados em temperatura ambiente casos de ortopedia e cirurgias plásticas e pesquisas por 4 horas para que houvesse total presa do cimento recentes têm sido desenvolvidas no âmbito obturador e restaurador. 58 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Figura 1 – Apresentação comercial do Biosteo Após esse período, realizou-se a apicectomia ao nível de 3 mm aquém do ápice radicular com auxílio de uma broca carbide (nº 701), tronco cônica em baixa rotação, perpendicularmente ao longo eixo do dente. As retrocavidades foram preparadas com 3mm de profundidade utilizando-se uma ponta ultra-sônica (nº S 12/90ºD), montada num aparelho Ultra Sônico (Multi - Sonic (Satelec System, Gnatus, Ribeirão Preto, SP, Brasil). Com exceção do preparo retrógrado, em todas as amostras foram aplicadas 2 camadas de cola epóxica Araldite 10 minutos (Brascola, São Bernardo do Campo, SP, Brasil), e duas camadas de esmalte para unha de secagem rápida. Após este tempo, os preparos retrógrados foram obturados com Biósteo. (Figura 1). Após a presa do material imergiu-se as amostras em uma câmara para vácuo com solução de azul de metileno a 2 % tamponada, com 60 mmHg de pressão, por 10 minutos e mantidas por 24 horas em imersão. Após este tempo, as amostras foram lavadas em água corrente por 1 hora para a retirada do excesso de corante. Foram removidas as impermeabilizações com lâmina de bisturi nº 15 e fixaram-se as amostras com godiva de baixa fusão em suportes de madeira, onde foram cortadas longitudinalmente com um disco de aço sob irrigação. Para verificação do grau de infiltração marginal do corante considerou-se os seguintes escores: Grau 0: Ausência de infiltração; Grau 1: Infiltração até o limite de 3mm da retroobturação; Grau 2: Infiltração de 4 a 6mm além do limite da retroobturação; Grau 3: Infiltração de 7 a 10mm além do limite da retro-obturação; Grau 4: Infiltração > 10mm além do limite da retroobturação. Os espécimes foram observados com lupa esteroscópica por cinco avaliadores, os quais realizavam as medidas dos graus infiltrativos com auxílio de uma régua milimetrada. Todos os examinadores foram instruídos quanto à forma correta de se executar as mensurações, sendo que cada um verificou as respectivas medidas em duas ocasiões distintas para adequada calibração. (figura 2) Figura 2 – Diferentes graus de infiltração marginal na região apical. Ciência e Cultura 59 Avaliação da infiltração marginal de um cimento à base de polímero de mamona em retro-obturações. Estudo piloto de eficácia in vitro CERVI et al. A reprodutibilidade intra-examinador foi verificada excelente com correlação intra-classe variando de 0.8 a pelo método de correlação intra-classe para dados paramétricos e a concordância inter-examinadores foi 0.9, o que equivale dizer que houve concordância em 80 a 90% das avaliações. A comparação entre as médias analisada pelo teste ANOVA (um critério) para comparação entre as médias obtidas por cada obtidas por cada avaliador não mostrou diferença estatisticamente significante (p=0.92), havendo examinador nos diferentes dentes mensurados. Para a aplicação dos testes estatísticos utilizou-se o programa concordância entre os mesmos. BioEstat 4.0. A média dos escores de infiltração observada por cada examinador pode ser observada na tabela 1. Na RESULTADOS E DISCUSSÃO A reprodutibilidade intra-examinador mostrou-se tabela 2 verificam-se os escores de infiltração, o número de observações e as porcentagens obtidas. O gráfico 1 mostra o histograma de freqüência dos escores de acordo com as médias verificadas na tabela 1. Tabela 1 – Média das mensurações (em milímetros) realizadas em cada dente do estudo. 60 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 O tratamento endodôntico tem o propósito de Esta particularidade físico-química é um dos principais impedir que microrganismos e/ou endotoxinas atinjam os tecidos apicais, promovendo desinfecção do sistema fatores para um bom selamento hermético nas cavidades preparadas para retro-obturações, prevenindo contra a de canais radiculares. No entanto, em alguns casos em que não houve o desaparecimento da lesão periapical penetração de fluídos e bactérias que infiltrem em lacunas deixadas pela contração do material (SILVA NETO et após o período de proservação, a cirurgia paraendodôntica com obturação retrógrada está bem al, 2005); Para avaliação dos graus de infiltrações nas retro-obturações com polímero de mamona, optou-se indicada (YUNES, 1999). O Biosteo® é uma poliuretana desenvolvida a pela utilização do corante azul de metileno por este apresentar baixo peso molecular e grande poder de partir do óleo de mamona para ser utilizado em cirurgias ortopédicas para reconstituição e preenchimento de penetração nos espaços vazios (OPPENHEIMER et al., 1979). Utilizou-se a concentração de 2% por ser melhor espaços ósseos e na confecção de endopróteses (CARVALHO et al., 1997). Ele apresenta boa observada que concentrações inferiores, além de ser de fácil obtenção e apresentar manchas definidas que biocompatibilidade, capacidade de ósseo-indução e expansividade quando da sua polimerização, tendo facilitam a leitura dos resultados (DIEP et al., 1982). Os nossos resultados deste estudo piloto grande possibilidade de ser utilizado como cimento obturador (MORAES, 2005; PASCON et al, 2001). mostraram resultados satisfatórios, com 25.3% das amostras apresentando grau 0 de infiltração. Apesar de O estudo deste material para obturação retrógrada de canais radiculares deveu-se ao fato de haver expansão haver infiltração em graus variáveis (de 1 a 4), totalizando 74.7% dos dentes, 45.4% apresentaram apenas grau 1, após o tempo de presa (de acordo com o fabricante). não ocorrendo infiltração além da obturação (Tabela 2). Tabela 2 – Escores de infiltração, número de observações e porcentagens obtidas Gráfico 1 – Histograma de freqüência dos escores de infiltração de acordo com as médias obtidas. Ciência e Cultura 61 Avaliação da infiltração marginal de um cimento à base de polímero de mamona em retro-obturações. Estudo piloto de eficácia in vitro O polímero de mamona apresentou bom desempenho na maioria dos dentes (Grau 0= 25.3%; Grau 1: 45.4%), totalizando 70.7% dos casos com pouca ou nenhuma infiltração marginal. Este fato confirma a boa capacidade seladora do material utilizado nesta pesquisa. Graus reduzidos de infiltração também foram observados nos estudos de Yunes (1999), Pavan et al. (2001), Pavan et al. (2003) e Leonardo (2005). Há escassez de estudos na literatura que descrevam o comportamento de retro-obturações com materiais à base de polímero de mamona, por isso não encontrou-se estudos que contradizem o bom selamento apical obtido em nossa pesquisa. Este material tem se mostrado eficiente como material selador, entretanto, outros estudos com amostras maiores e com padronização adequada ainda são necessários. Outro aspecto importante é a realização de estudos prospectivos longitudinais “in vivo” para se atestar sua real aplicabilidade clínica. CERVI et al. Q.; COSTA, S. DE P. ; ROSSI, T. R. Agregado de trióxido mineral - indicações clínicas de um novo cimento dentário, JBC J. Bras. Clin. Odontol. Integr;3(18):3234, 1999. CARVALHO, T.L.; ARAÚJO, C.A.; TEOFILO, J.M.; BRENTEGANI, L.G. Histologic and histometric evaluation of rat alveolar wound healing around polyurethane resin implants. Int J Oral maxillofac Implants; 26 (2): 149-152, abr, 1997. CAVALIERI, I. Estudo do processo de reparação óssea entre os implantes de polímero de mamona, resina acrílica termicamente ativada e cimento ósseo, em tíbia de coelhos. 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Autor responsável: Elizangela Partata Zuza - Av. Prof. Roberto Frade Monte, 389, Jd. Aeroporto - Cep: 14783-226, Barretos-SP Telefone: (17) 3321-6411. Ramal 6468 - E-mail: [email protected] RESUMO O objetivo deste estudo foi verificar a inter-relação existente entre a polpa e o periodonto avaliando a reposta pulpar ao estímulo em dentes com diferentes graus de periodontite crônica. Foram avaliados in vivo 98 dentes unirradiculares (sem cáries ou restaurações) quanto à Profundidade de Sondagem (PS), Perda Óssea Alveolar Radiográfica (POA), Recessão Gengival (RG) e Perda de Inserção Clínica (PIC), sendo que todas as medidas (em milímetros) foram classificadas em leves, moderadas ou severas. Após as medições periodontais verificou-se a Vitalidade Pulpar (VP) com auxílio de um teste de estímulo a frio. Para verificação da relação entre a condição clínica periodontal e pulpar (PS e VP, POA e VP, RG e VP, PIC e VP) realizou-se análise estatística pelo teste de Kruskal-Wallis e pelo método de Dunn para comparações múltiplas inter-grupos. No parâmetro PS verificou-se VP positiva respectivamente em 100% (leve), 85% (moderada) e 27% (severa) dos dentes avaliados. Em relação à POA verificou-se VP positiva respectivamente em 100% (leve), 100% (moderada) e 52% (severa) dos casos. Avaliando-se a RG verificouse VP positiva em 85% (leve), 74% (moderada) e 52% (severa). No parâmetro PIC observou-se VP positiva em 100% (leve), 100% (moderada) e 62.2% (severa) dos dentes avaliados.Os parâmetros clínicos de RG e PIC não influenciaram a condição clínica da polpa, enquanto a PS e a POA influenciaram significativamente a resposta pulpar negativa ao estímulo nos casos mais severos de periodontites. Palavras-chave: Periodontite; polpa dental; diagnóstico ABSTRACT The objective of the present study was to verify the interrelation between pulp and periodontium, evaluating pulpal response to stimulus in teeth with different levels of chronic periodontitis. Ninety-eight single-root teeth (either non-decayed or non-restored) were evaluated in vivo, with regard to Probing Depth (PD), radiographic Alveolar Bone Loss (ABL), Gingival Recession (GR), and e Clinical Insertion Loss (CIL), where all the measurements (in millimeters) were classified as mild, moderate or severe. After periodontal measurements, Pulpal Vitality (PV) was checked with the use of a cooling stimulus test. In order to verify the relation between pulpal and periodontal clinical conditions (PD and PV, ABL and PV, GR and PV, CIL and PV) statistical assessment was carried out with Kruskal-Wallis’ test and with Dunn’s method for multiple intergroup comparisons. With regard to the parameter PD, positive PV was observed respectively in 100% (mild), 85% (moderate) and 27% (severe) of the teeth evaluated. Considering ABL, positive PV was observed respectively in 100% (mild), 100% (moderate) and 52% (severe) of the cases. When GR was evaluated, positive PV was verified in 85% (mild), 74% (moderate) and 52% (severe). As for the CIL parameter, positive PV was observed in 100% (mils), 100% (moderate) and 62.2% (severe) of the teeth evaluated. Clinical parameters for GR and CIL did not influenced the clinical condition of the pulp, while PD and ABL influenced significantly the negative pulp response towards the stimulus in the most severe cases of periodontitis. KEY WORDS: Periodontitis; dental pulp; diagnosis Ciência e Cultura 65 Inter-relação entre a doença periodontal crônica e a resposta pulpar ao estímulo: avaliação clínica e radiográfica INTRODUÇÃO ZUZA et al. acessórios (DAMMASCHKE et al., 2004; ZUZA et A ocorrência concomitante de lesões de origem al., 2006) ou túbulos dentinários (ADRIAENS, 1988a,b; LEONARDO et al., 1995). Assim, não há necessidade endodôntica e periodontal no mesmo dente salienta a possibilidade de que possa existir uma inter-relação entre de que alterações endodônticas ou periodontais atinjam o nível apical para que essa inter-relação se estabeleça. as duas patologias, havendo necessidade de endodontistas e periodontistas conduzirem Ainda não se sabe em qual momento a doença periodontal começa a influenciar a resposta clínica da procedimentos terapêuticos conjuntamente. Considerando essa realidade, a Academia Americana polpa ou em qual fase da alteração pulpar há influência sobre as estruturas periodontais, sendo este fato de de Periodontia (AAP), incluiu na Classificação das Doenças Periodontais e Condições Decorrentes, um máxima importância clínica no estabelecimento de um diagnóstico diferencial precoce e um tratamento grupo de lesões Periodontais-Endodônticas Combinadas, quando dentes com periodontite também apresentam adequado. Diante de tais considerações, o objetivo deste estudo é verificar a inter-relação existente entre polpa e lesões endodônticas (ARMITAGE, 1999). O diagnóstico diferencial de lesões periodontais e periodonto, avaliando a resposta pulpar ao estímulo em dentes com diferentes graus de periodontite crônica. endodônticas, na maioria das vezes pode ser estabelecido sem muita dificuldade (TOLEDO et al., 2001), uma vez que nas de origem endodôntica os sinais clínicos e radiográficos localizam-se mais próximos da região apical, MATERIAL E MÉTODOS ao passo que na lesão periodontal as alterações são localizadas próximas ao periodonto marginal Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa das Faculdades Unificadas da Fundação (BERGENHOLTZ & HASSELGREN, 1997). O diagnóstico torna-se ainda mais fidedigno se o paciente Educacional de Barretos com processo no 047/2006. Os pacientes só foram incluídos na pesquisa após assinatura apresentar radiografias retrospectivas ou estiver sendo monitorado por algum tempo (MENG, 1999). do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Foram avaliados 98 dentes unirradiculares, No entanto, quando há presença de lesões periodontais-endodônticas combinadas, o diagnóstico selecionados de pacientes que procuraram a Clínica de Periodontia da Faculdade de Odontologia de Barretos diferencial torna-se mais obscuro, sendo difícil identificar a etiologia primária determinante para o aparecimento para tratamento periodontal, com idades entre 18 e 40 anos, independente de sexo ou raça. Para serem incluídos das lesões (PILATTI & TOLEDO, 1994). Dessa forma, o diagnóstico deve ser baseado na combinação da no estudo, os dentes deveriam apresentar os seguintes requisitos: serem portadores de periodontite crônica, história relatada pelo paciente, dos achados do exame clínico, das observações radiográficas e do resultado de isentos de cárie ou restaurações, não terem recebido tratamento periodontal há menos de 6 meses. algum teste adicional (ABBOTT, 1998). Estes testes geralmente estão relacionados à determinação da A determinação do estado periodontal foi verificada com a utilização dos seguintes parâmetros presença ou ausência de vitalidade pulpar (BECERRA et al., 1993), à utilização de contrastes radiográficos clínicos: presença ou ausência de placa, presença ou ausência de sangramento gengival ou à sondagem, (MENG, 1999), ao tipo de comunicação com a margem gengival (MANDEL et al., 1993) e às análises profundidade clínica de sondagem, recessão gengival e nível de inserção clínica. Radiograficamente foi verificado microbiológicas (TROPE et al., 1988). Alguns estudos mostraram que a comunicação o grau de perda óssea alveolar. As medições de Profundidade de Sondagem (PS), entre a polpa e o periodonto não ocorre apenas pelo forame apical, podendo também ocorrer via canais Perda Óssea Alveolar (POA) e Recessão Gengival (RG) foram consideradas da seguinte forma: Periodontite Leve 66 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 (3 a 4mm), Moderada (5 a 6mm) e Severa (> 6mm). A em relação ao paciente examinado, sendo que eram Perda de Inserção Clínica (PIC) foi calculada medindose a distância da JCE até o fundo de bolsa, sendo que a realizadas no máximo 20 mensurações por dia, para que não houvesse vieses decorrentes de cansaço visual e Recessão Gengival (RG) foi considerada como sendo a distância da JCE à margem gengival. As medições de mental. Para a verificação da relação entre Profundidade PIC foram consideradas de acordo com FLEMMIG (1999) em: Leve (1 a 2mm), Moderada (3 a 4mm) e de Sondagem (PS) e Vitalidade Pulpar (VP), entre Perda Óssea Alveolar (POA) e VP, entre Recessão Gengival Severa (> 5mm). Para medição da PS, RG e PIC foi utilizada uma (RG) e VP e entre Perda de Inserção Clínica (PIC) e VP, foi realizada análise estatística com o programa sonda periodontal milimetrada do tipo Williams da HuFriedy (PCPN115BR), sendo que os dentes foram BioEstat 4.0 pelo teste de Kruskal-Wallis. Como foi verificada variação significante entre os grupos, aplicou- sondados em 6 sítios (mésio-vestibular, vestibular, distovestibular, mésio-lingual, lingual e disto-lingual). As se o método de Dunn para comparações múltiplas, considerando a=0,05. mensurações foram realizadas por um único examinador já experiente no assunto. Após as medições periodontais, verificou-se a vitalidade pulpar com auxílio de um teste de estímulo a RESULTADOS frio Endo Frost (Cold Spray, ROEKO, P.O. Box 1150, Langenau, Germany). Para aplicação do teste utilizou- No parâmetro PS verificou-se VP positiva respectivamente em 100% (leve), 85% (moderada) e se uma pinça clínica e uma bolinha de algodão pequena, a qual era embebida com o jato de ar frio (ativada pela 27% (severa) dos dentes avaliados (Tabela 1). Em relação à POA verificou-se VP positiva respectivamente pressão da válvula por aproximadamente 3 segundos) e colocada na parte central da coroa dental. Essa em 100% (leve), 100% (moderada) e 52% (severa) dos casos (Tabela 2). Avaliando-se a RG verificou-se VP verificação foi executada por um segundo examinador devidamente treinado e calibrado para a técnica positiva em 85% (leve), 74% (moderada) e 52% (severa) (Tabela 3). No parâmetro PIC observou-se VP positiva proposta. Um controle positivo contra-lateral (unirradicular) foi considerado para avaliar a sensibilidade em 100% (leve), 100% (moderada) e 62.2% (severa) dos dentes avaliados (Tabela 4). do paciente ao estímulo. Para a medição do grau de POA, realizou-se Com a análise estatística verificou-se uma diferença altamente significativa de vitalidade positiva na PS leve tomadas radiográficas dos dentes selecionados utilizando-se filmes Ekta-speed (Kodak) com exposição quando comparada a PS severa (p<0,05). As diferenças também foram significativas entre a PS moderada e de 0,4 segundos, pela técnica de paralelismo com posicionadores (Jon®). A medição foi realizada com uma severa (p<0,05), com posto médio de 57.15 para as moderadas e de apenas 28.86 para as severas. Já em régua de precisão milimetrada, medindo-se da JCE à COA (considerada pela maior perda proximal do dente relação a PS leve e moderada, não houve diferença estatística significante quanto a vitalidade positiva (> 0,05) avaliado). Essas medições foram feitas em negastoscópio, sobre o qual foi acomodada uma máscara escura para (Tabela1). Em relação a Perda Óssea Alveolar (POA) que eliminasse a passagem de luz ao redor da radiografia, em um local com a mínima luminosidade possível. Para verificou-se uma diferença altamente significativa de vitalidade positiva na POA leve quando comparada a as mensurações radiográficas, as mesmas foram codificadas e analisadas pelo mesmo examinador que POA severa (p<0,05) e também entre a POA moderada e severa. Quando comparou-se a POA leve com a realizou as mensurações clínicas. A codificação das radiografias foi adotada no intuito de cegar o examinador moderada não constatou-se diferença estatística (> 0.05) (Tabela 2). Ciência e Cultura 67 Inter-relação entre a doença periodontal crônica e a resposta pulpar ao estímulo: avaliação clínica e radiográfica ZUZA et al. Tabela 1 – Freqüência da resposta pulpar ao estímulo de acordo com o grau de Profundidade de Sondagem (Leve: 3 a 4mm; Moderada: 5 a 6 mm; Severa: >6mm). p<0.0001; H= 40,89; Graus de Liberdade= 2 (Kruskal-Wallis) Comparações múltiplas (Dunn): * leve x moderada (p>0,05: sem diferença estatisticamente significante); ¥ leve x severa (p<0,05: diferença estatística); § moderada x severa (p<0,05: diferença estatística) Tabela 2 – Freqüência da resposta pulpar ao estímulo de acordo com o grau de Perda Óssea Alveolar (Leve: 3 a 4mm; Moderada: 5 a 6 mm; Severa: >6mm). p<0,0001; H= 23,77; Graus de Liberdade= 2 (Kruskal-Wallis) Comparações múltiplas (Dunn): * leve x moderada (p>0,05: sem diferença estatisticamente significante); ¥ leve x severa (p<0,05: diferença estatística); § moderada x severa (p<0,05: diferença estatística) Tabela 3 – Freqüência da resposta pulpar ao estímulo de acordo com o grau de Recessão Gengival (Leve: 3 a 4mm; Moderada: 5 a 6 mm; Severa: >6mm). p>0,05; H= 8,53; Graus de Liberdade= 2 (Kruskal-Wallis) Comparações múltiplas (Dunn): * leve x moderada, ¥ leve x severa, §moderada x severa (p>0,05: sem diferença estatisticamente significante). Tabela 4 – Freqüência da resposta pulpar ao estímulo de acordo com o grau de Perda de Inserção Clínica (Leve: 1 a 2mm; Moderada: 3 a 4 mm; Severa: >5mm). p>0,05; H= 9,21; Graus de Liberdade= 2 (Kruskal-Wallis) Comparações múltiplas (Dunn): * leve x moderada, ¥ leve x severa, §moderada x severa (p>0,05: sem diferença estatisticamente significante). 68 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Quando avaliou-se o parâmetro de RG (Tabela a PS e a POA estiveram estatisticamente relacionadas à 3) e PIC (Tabela 4), verificou-se que não houve diferenças significativas entre os graus leve, moderado e resposta pulpar negativa ao estímulo. Estes achados sugerem que a condição pulpar depende do grau de severo e a vitalidade da polpa (pe”0,05). severidade da doença periodontal ativa, com bolsa periodontal sangrante e reabsorção óssea progressiva. DISCUSSÃO Para se determinar a influência da doença periodontal sobre a polpa, desconsiderou-se fatores de A Periodontite Leve foi considerada a partir de confusão, tais como traumas oclusais, dentes cariados, com presença de restaurações e coroas protéticas. Outro 3mm, devido a PS de até 2mm (com sangramento gengival) ser considerada apenas como gengivite (Nyman fator importante para a veracidade dos resultados foi a inclusão apenas de dentes unirradiculares, descartando & Lindhe, 1999). A POA foi julgada Leve também a partir de 3mm, já que a distância normal entre a Junção a possibilidade de falsos positivos verificado muitas vezes em elementos multirradiculares. Para a verificação da Cemento-Esmalte (JCE) e a Crista Óssea Alveolar (COA) é considerada até 2mm (GJERMO et al., 1984; vitalidade pulpar aplicou-se um estímulo térmico a frio Endo-Frost (Cold Spray, Roeko, P.O. Box 1150, AASS et al., 1994). Já a Perda de Inserção Clínica (PIC) foi calculada medindo-se a distância da JCE até o Langenau, Germany), que de acordo com Zehnder et al. (2002) possibilita um diagnóstico confiável, permitindo fundo de bolsa, sendo que a recessão gengival foi considerada como sendo a distância da JCE à margem que uma reação negativa represente uma polpa necrótica em 90% dos casos (com poucos falso-negativos). gengival. As definições de PIC foram realizadas de acordo com FLEMMIG (1999): Leve (1 a 2mm), Poucas situações de necrose pulpar foram verificadas nos casos de periodontite moderada, no Moderada (3 a 4mm) e Severa (> 5mm). Apesar de alguns estudos mostrarem claramente entanto a maioria esteve relacionada à periodontite severa com envolvimento próximo da região apical, o que está a inter-relação entre polpa e periodonto (LEONARDO et al., 1995; ZUZA et al., 2006), ainda há controvérsias de acordo com o estudo de Langeland et al. (1974). A relação entre a patologia periodontal avançada e o em até que ponto a patologia de um tecido influencia sobre o outro. Autores como Mazur e Massler (1964) comprometimento pulpar também foi motivo do estudo de Becerra et al. (1993). Neste estudo avaliou-se o relataram que a doença periodontal não exerce influência sobre a polpa e sugeriram que a degeneração pulpar estado pulpar pelo teste de vitalidade em dentes com periodontite avançada, e verificou-se uma resposta seria decorrente de fatores sistêmicos. Entretanto, estudos histológicos (Rubach e Mitchell, 1965; negativa ao estímulo de 46.15%, porcentagem inferior aos nossos achados clínicos. Esses autores sugeriram Langeland et al., 1974) confirmam a existência de alterações pulpares na presença de doença periodontal. haver maior comprometimento pulpar nos casos de periodontites agressivas (“de início precoce”), o que A possibilidade de que uma alteração periodontal influencie a polpa não é tão evidente quanto a influência indicaria uma influência da agressividade da doença periodontal em relação ao dano pulpar. da polpa sobre as estruturas periodontais, mas considera-se que se a polpa sofrer estímulos de baixa JANSSON et al. (1995a,b) afirmaram que dentes uniradiculares, com lesão radiolúcida periapical, intensidade freqüentes e de longa duração, apresentaria reação de caráter crônico-degenerativo lento e correlacionavam-se significativamente a bolsas periodontais profundas e a maior perda óssea assintomático com conseqüente necrose pulpar (Bombana, 2003). Este fato foi verificado em nosso radiográfica, o que também confirma nossos resultados. Em contrapartida, todos os dentes avaliados em nossa estudo, já que observou-se que a RG e a PIC não exerceram influência na vitalidade pulpar, enquanto que amostragem (100%) com PS e POA leves apresentaram vitalidade positiva da polpa. Ciência e Cultura 69 Inter-relação entre a doença periodontal crônica e a resposta pulpar ao estímulo: avaliação clínica e radiográfica ZUZA et al. De acordo com Berger (1998) as alterações SAMPAIO, J.E.C. Inter-relação Periodontia- pulpares decorrentes da presença de periodontites progressivas, podem estar relacionadas com o Endodontia. In: OPPERMAN, R.V. & RÖSING, C.K. Periodontia – Ciência e Clínica, cap. 7-4, São Paulo, comprometimento nutricional da polpa, ocasionado pela destruição da microcirculação dos canais acessórios, não Artes Médicas, p.321-36, 2001. havendo necessidade de que as alterações endodônticas ou periodontais atinjam a região do forame apical para BERGENHOLTZ, G. & HASSELGREN, G. Endodontics and Periodontics. In: LINDHE, que se estabeleça uma inter-relação entre os tecidos. Este fato justifica o aparecimento de resposta negativa K.;KARRING, T. & LANG, N. Clinical periodontolgy and Implant dentistry. Copenhagen: Munksgaard, 1997. ao estímulo em presença de periodontite moderada. Existe uma escassez de evidências científicas MENG, H.X. Periodontic-endodontic lesions. Ann recentes que esclareçam os diferentes aspectos da relação entre as alterações periodontais e endodônticas Periodontol, v.4, p.84-90, 1999. (Zehnder et al., 2002). Duas questões básicas de máxima importância clínica ainda precisam ser esclarecidas: se a PILATTI, G.L. & TOLEDO, B.E.C. As comunicações anatômicas entre polpa e periodonto e doença periodontal causa necrose pulpar e se um dente desvitalizado pode ser causa de periodontites (Harrington suas conseqüências na etiopatogenia das lesões endoperiodontais. Rev. Paul. de Odontol., v.22, p.38-43, et al., 2003). Dessa forma, o conteúdo deste estudo é pertinente e auxilia na evolução de geração de dados 2000. científicos, sendo que outros estudos são necessários no intuito de melhor esclarecer a inter-relação entre polpa ABBOTT, P. Endodontic manegement of combined endodontic-periodontal lesions. J.N.Z. Soc. e periodonto. Periodontol., v.83, p.15-28, 1998. CONCLUSÃO BECERRA, N., VILLALOBOS, A.M. & FUENTES, E.M. Estudio sobre relatión entre De acordo com os achados deste estudo pode- periodontitis avanzada y respuesta a test de vitalidad pulpar en piezas dentarias sin caries ni obturaciones. R. se concluir que os parâmetros clínicos de recessão gengival e perda de inserção clínica não influenciam a Periodontia, v.2, p.100-106, 1993. condição clínica da polpa, enquanto a profundidade de sondagem e a perda óssea alveolar estão diretamente MANDEL, E., MACHTOU, P. & TORABINEJAD, M. Clinical diagnosis and treatment relacionadas à atividade da doença periodontal, influenciando significativamente a resposta pulpar negativa of endodontic and periodontal lesions. Quintessence Int, v.24, p.135-139, 1993. ao estímulo nos casos mais severos de periodontites. TROPE, M. et al. Darkfield microscopy as a REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ARMITAGE, G.C. Development of a Classification System for Periodontal Disease and Conditions. Ann Periodontol, v.4, p.1-6, 1999. TOLEDO, B.E.C., FIGUEIREDO, L.C. & 70 Ciência e Cultura diagnostic aid in diffrentiating exsudates from endodontic and periodontal abscesses. J Endod, v.14,p.35-38, 1988. DAMMASCHKE, T.; WITT, M.; OTT, K.; SCHAFER, E. Scanning electron microscopic investigation of incidence, location, and size of accessory foramina in primary and permanent molars. Qunintessence Int, v. 35: p.699-705, 2004. CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 ZUZA, E.P.; TOLEDO, B.E.; HETEM, S.; MAZUR, B.; MASSLER, M. Influence of SPOLIDORIO, L.C.; MENDES, A.J.; ROSETTI, E.P. Prevalence of different types of accessory canals in the periodontal disease on the dental pulp. Oral Surg Oral Med Oral Pathol, v. 17: p.592-603, 1964. furcation area of third molars. J Periodontol, v. 77: p.1755-1761. 2006. RUBACH, W.C.; MITCHELL, D.F. Periodontal ADRIAENS, P.A.; De BOUER, J.A. & disease, accessory canals and pulp pathosis. J Periodontol, v.; 36: p. 34-38, 1965. LOESCHE, W,.J. Bacterial invasion in root cementum and radicular dentin of periodontally diseased teeth in LANGELAND, K.; RODRIGUES, H.; humans. J. Periodontol, v.59, p. 222-230, 1988a. DOWDEN, W. Periodontal disease, bacteria, and pulpal histopathology. 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Santos, n. 1, p. 123-130, 2003. selected potential predictors. J Periodontol, v. 65: p.814819, 1994. Ciência e Cultura 71 72 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Avaliação dos parâmetros microbiológicos e físicoquímicos de iogurtes comercializados no município de Campos dos Goytacazes, RJ. Microbiological and physico-chemical parameters evaluation of yogurts sold in Campos dos Goytacazes, RJ. Thamy Lívia Ribeiro CORRÊA1, Silvania Alves LADEIRA1, Raphael Cardoso RODRIGUES1, Sílvia Menezes de Faria PEREIRA1, Fábio da Costa HENRY1, Meire Lelis Leal MARTINS1 1 Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias, Universidade Estadual do Norte Fluminense, Av. Alberto Lamego, 2000, CEP 28015-620, Campos dos Goytacazes, RJ, Brasil. Tel (22) 2726-1461, Fax (22) 2726-1549 e-mail: [email protected] RESUMO Vinte e quatro amostras de iogurte com polpa de fruta foram adquiridas em supermercados do município de coliformes totais e fecais, respectivamente. Os valores de pH estavam de acordo com o prescrito por alguns Campos dos Goytacazes, RJ, entre outubro e novembro de 2007, com a finalidade de caracterizá-las quanto aos autores e os outros resultados físico-químicos (acidez, teor de gordura e amiláceos) se enquadraram às normas parâmetros físico-químicos (pH, acidez, teor de gordura e amiláceos) e microbiológicos (bolores e leveduras, estabelecidas pela legislação brasileira vigente quanto aos padrões de identidade e qualidade de leites fermentados. coliformes totais e coliformes fecais). As análises microbiológicas mostraram que 87,5%, 41,6% e 58,3% das amostras estavam em desacordo com a normatização brasileira para contagem de bolores e leveduras, Palavras-chave: acidez, pH, gordura, microbiologia, físico-química, iogurtes. ABSTRACT Twenty-four samples of yogurts with fruits were acquired in supermarkets of Campos dos Goytacazes, RJ, between October and November of 2007, in order to characterized them as for physico-chemical (pH, acidity, fat and starch) and microbiological (moulds and yeasts, total coliformes and fecal coliformes) parameters. The microbiological analyses depicted that 87.5%, 41.6% and 58.3% of the samples were in disagreement with the Brazilian legislation to moulds and yeasts, total coliformes and fecal coliformes, respectively. The pH values were in agreement with some authors and the others physicochemical results (acidity, fat and starch) can be considered adjusted when compared with the requirements indicated in the standards of identity and quality of yogurts estabilished by Brazilian legislation. Keywords: acidity, pH, fat, microbiology, physicochemical, yogurts. Ciência e Cultura 73 Avaliação dos parâmetros microbiológicos e físico-químicos de iogurtes comercializados no município de Campos dos Goytacazes, RJ. INTRODUÇÃO CORREA et al. microbiológicas das amostras foi executada segundo Atualmente, os consumidores, além do valor Silva et al. (1997). As análises físico-químicas foram realizadas de acordo com Pereira et al. (2001). nutricional, estão mais atentos às propriedades funcionais dos alimentos (HEKMAT e REID, 2006). O iogurte 2.1 – Obtenção e preparo das amostras de iogurte possui alto valor nutritivo, sendo aconselhável a qualquer dieta por ser facilmente digerível e regulador das funções Vinte e quatro amostras de iogurte com adição de digestivas (TEIXEIRA et al., 2000). Blanc (1984), citado por Silva e Rodrigues (2006) descreve o iogurte como polpa de fruta foram utilizadas no experimento. As amostras 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 e 8 foram obtidas em outubro fonte de cálcio, fósforo, potássio, sódio, aminoácidos essenciais, açúcares e vitaminas. No Brasil, o iogurte de 2007 e as demais em novembro de 2007 todas em estabelecimentos comerciais do município de Campos corresponde a 76% do total de produtos lácteos produzidos e a ampliação do mercado deste laticínio nos dos Goytacazes – RJ. Após a obtenção, as amostras foram imediatamente conduzidas ao Laboratório de últimos 20 anos se deve, em parte, a adição de polpas de frutas. Segundo dados da UNICAMP, cada brasileiro Tecnologia de Alimentos (LTA) da Universidade Estadual do Norte Fluminense (UENF) para a realização das consome cerca de 3 kg de iogurte por ano (FAVA, 2004). O leite é a matéria-prima para elaboração do análises. Cada embalagem foi numerada e higienizada iogurte e sua composição é refletida na qualidade do produto, devendo ser pasteurizado respeitando sempre (água corrente, detergente e álcool etílico 70%) para remoção dos contaminantes superficiais. Assepticamente, o binômio tempo-temperatura que visa a eliminação da sua flora patogênica e acompanhante (GOUVEIA et al., 25g de cada amostra foram pesados em balança GEHAKA e transferidos para 225mL da solução de 2000). A legislação brasileira (BRASIL, 2000) define como iogurte o produto cuja fermentação se realiza com citrato de sódio 2% (diluição 10:1 ou 10-1) para homogeneização. A partir desta diluição foram realizadas cultivos protosimbióticos de Streptococcus salivarius spp. thermophilus e Lactobacillus delbrueckii spp. bulgaricus, outras diluições subseqüentes (10-2 e 10-3). aos quais podem acompanhar, de forma complementar, outras bactérias ácido-lácticas que contribuem para a 2.2 - Análises microbiológicas formação das características do produto final. Vários estudos visam aumentar a qualidade do iogurte e Para a contagem de bolores e leveduras foi adotado o “método de plaqueamento em superfície”. beneficiar os consumidores: adição de fibras (SENDRA et al., 2008) controle do pH durante a fermentação Placas de Petri contendo 20-25mL de ágar batata dextrose (PDA) (39g L-1), autoclavado durante 15 (BRABANDERE e BAERDEMAEKER, 1999), utilização de bactérias probióticas (ZANINI et al., 2007) minutos a 121ºC e acidificado com 1mL de ácido tartárico 10% para cada 100mL de PDA, foram e emprego de variedades do leite (NETO et al., 2005). No entanto, pouco se sabe a respeito da qualidade dos inoculadas com alíquotas de 0,1mL de cada diluição. As placas não invertidas foram incubadas em estufa BOD - iogurtes comercializados. Neste sentido, este trabalho tem por finalidade caracterizar os parâmetros Q315 D durante 5 dias a 25oC. A contagem de coliformes totais foi realizada pelo microbiológicos e físico-químicos de iogurtes comercializados no município de Campos do Goytacazes, RJ. “método do número mais provável” (NMP). Alíquotas de 1mL de cada diluição foram transferidas para tubos 2 - MATERIAL E MÉTODOS contendo 10mL de caldo lauril sulfato triptose (LST) (35,5g L-1) e incubadas em estufa durante 24h, a 35ºC, A metodologia de obtenção, preparo e análises 74 Ciência e Cultura para observação do crescimento microbiano com produção de gás. Em caso positivo, uma alçada CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 carregada dos tubos LST foi transferida para o caldo de solução lugol (200g/L iodeto de potássio, 50g/L iodo) verde brilhante bile (VB) (40g L ) para contagem dos coliformes totais. Os tubos de caldo VB foram incubados para determinação do teor de amiláceos. O desenvolvimento da coloração azulada é indicativo da durante 24-48h a 35ºC para se observar o crescimento e a produção de gás. O número de tubos VB positivos presença de amido. O controle foi feito com 1% de amido solúvel diluído em água destilada para comparação da para crescimento e ocorrência de gás foi registrado para determinação do NMP/g através da tabela disponível intensidade de coloração com as amostras analisadas. -1 em Silva et al. (1997). Uma outra alçada dos tubos LST positivos foi 3 - RESULTADOS E DISCUSSÃO transferida para tubos contendo o caldo Escherichia coli (EC) (37g L-1) para determinação dos coliformes fecais. 3.1 – Análises microbiológicas Os tubos com caldo EC foram incubados em banhomaria a 45,5ºC durante 24h. Após este período A população de bolores e leveduras variou analisou-se o crescimento e a produção de gás. O número de tubos positivos foi anotado e o NMP/g foi obtido bastante entre as amostras, como observado na Tabela 1. As amostras 2 e 4 apresentaram os maiores índices utilizando-se os dados de Silva et al. (1997). desses microrganismos (1,9x106 UFC/g). Os mofos encontram no iogurte o ambiente ideal 2.3 - Análises físico-químicas de proliferação devido ao baixo pH, modificando seu sabor e aspecto (BEHMER, 1999) tornando-o não A solução de análise foi preparada em um balão volumétrico de 100mL, contendo 20g de iogurte, que agradável ao consumidor. Os bolores e leveduras são eliminados do leite pela pasteurização (EARLY, 2000), teve seu volume completado com água destilada para diluição da amostra. O pH foi determinado com um porém Rodas et al. (2001) demonstraram que a ocorrência desses microrganismos é comum em iogurtes pHmêtro WTW pH330 introduzindo-se o eletrodo diretamente nas amostras. devido à adição de açúcar e polpas de frutas, principalmente de morango, encontrando em 136 Para a acidez, 5g da amostra, 20mL de água destilada e três a cinco gotas de fenolftaleína 1% foram amostras de iogurtes com frutas analisadas, 44,1% amostras com contaminação fúngica. misturados em um erlenmayer e a titulação feita por solução de hidróxido de sódio 0,1mol/L até atingir o pH A contagem de bolores e leveduras registrada no presente estudo pode ser devido às matérias-primas de 8,3. O volume de solução gasto foi anotado e a medida da acidez foi obtida pela fórmula descrita por Pereira et qualidade inadequada, ao meio ambiente, à existência de falhas na higienização dos equipamentos que entram al. (2001). Na análise da gordura, 10mL de ácido sulfúrico, 1mL de álcool isoamílico e 11mL da solução em contato direto com o produto, àquelas ocorridas durante o processamento ou manuseio e, ainda, a de análise foram agitados vigorosamente em um butirômetro para leite e centrifugados a 1200-1400 rpm manutenção do produto sob temperatura inadequada (JAY, 1992; SILVA Jr, 1995; MOREIRA et al., 1999). em centrífuga ITR. Após esse processo, cada amostra permaneceu em banho-maria (65-66ºC) durante dois a A contagem de coliformes totais pelo método do “NMP” indica grande variação entre os valores três minutos. A leitura do teor de gordura foi feita na escala do próprio butirômetro e o seu percentual obtido registrados, sendo encontradas nas amostras 3 e 18 comprometimento da qualidade higiênico-sanitária dos através da fórmula descrita por Pereira et al. (2001). Tubos de ensaio com 10mL da solução de análise foram produtos analisados. Quanto à contagem de coliformes fecais, a maior incidência foi verificada nas amostras 18 fervidos em banho-maria durante cinco minutos, resfriados em água corrente e adicionados de cinco gotas e 19. O número máximo de coliformes totais permitidos Ciência e Cultura 75 Avaliação dos parâmetros microbiológicos e físico-químicos de iogurtes comercializados no município de Campos dos Goytacazes, RJ. CORREA et al. pela legislação é de 100 NMP/g e, sendo assim, 41,6% Dessa forma, a presença destes microrganismos é fruto o das amostras estão em desacordo com a Resolução n 5/00. Já para coliformes fecais, o número máximo de contaminação pós-pasteurização, provavelmente devido a condições sanitárias deficientes durante o permitido é de 10 NMP/g, desta forma, 58,3% das amostras estavam fora do padrão. processamento, produção ou armazenamento do produto (EARLY, 2000). A observação de coliformes totais em alimentos não é um indicativo de contaminação fecal, pois este Poucos dados são encontrados na literatura sobre a incidência de coliformes totais e fecais em iogurtes. grupo inclui bactérias não entéricas como Serratia e Aeromonas (SILVA et al., 1997). Coliformes como a Estudos realizados por Silva e Rodrigues (2006) não apontaram a presença de coliformes totais e fecais em E. coli, por exemplo, são encontrados no trato digestivo de humanos e outros animais e a sua presença indica iogurtes com polpa de morango, abacaxi e coco, o que indica boas práticas de elaboração. O mesmo foi contaminação fecal. Por serem termosensíveis são facilmente destruídos durante a pasteurização do leite. observado com o iogurte fabricado com leite de búfala (QUEIROZ et al., 2002). Tabela 1. Análises microbiológicas das amostras de iogurte comercializado no município de Campos dos Goytacazes – RJ. 76 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 3.2 - Análises físico-químicas de pH, enquanto os maiores foram encontrados nas Os valores correspondentes aos parâmetros amostras 5, 6, 7, 8, 21, 22, 23 e 24. A acidez, medida em gramas de ácido láctico/100g, foi o parâmetro que físico-químicos estão apresentados na Tabela 2. As amostras 1, 2, 3 e 4 apresentaram os menores valores mais variou. A porcentagem de gordura oscilou entre 0,5 e 3,0g de matéria gorda/100g de iogurte. Tabela 2. Análises físico-químicas das amostras de iogurte comercializado no município de Campos dos Goytacazes – RJ. Segundo Hamann e Marth (1983), o pH do Considerando-se estes mesmos valores ideais de pH, iogurte comercializado deve estar em torno de 3,7-4,3. Já o limite ideal de pH em leites fermentados da legislação Longo et al. (2006), estudando a qualidade físicoquímica de iogurtes em Curitiba – PR mostraram que brasileira é de 3,6 a 4,3. Os resultados do presente estudo condizem com a recomendação destes autores e 80% de seus resultados não se ajustavam nesse intervalo. O valor de pH implica na atividade metabólica das com a legislação. Se o valor de pH ideal for considerado entre 4,2-4,5, como descrito por Moreira et al. (1999), bactérias, podendo favorecer um determinado grupo em detrimento de outro (MOREIRA et al., 1999). As 66,7% das amostras estão abaixo do valor desejado. medidas ideais de acidez, teor de gordura e amiláceos Ciência e Cultura 77 Avaliação dos parâmetros microbiológicos e físico-químicos de iogurtes comercializados no município de Campos dos Goytacazes, RJ. CORREA et al. em leites fermentados foram baseadas na legislação BRABANDERE, A.G. D.; BAERDEMAEKER, brasileira. Nesse sentido, todas as amostras pesquisadas estavam dentro dos padrões para acidez titulável. O J.G.D. Effects of process conditions on the pH development during yogurt fermentation. Journal of Food metabolismo do açúcar do leite em ácido láctico pelas bactérias lácticas aumenta a acidez do iogurte durante Engineering, v. 41, p. 221-227, 1999. sua estocagem. O aumento da acidez é um problema, pois causa alteração de sabor no produto e compromete BRASIL. Leis, decretos. Recomendação nº 31 de 12 de junho de 1997 (Consulta Pública) – a viabilidade de outras culturas adicionadas com o fim de aumentar os benefícios do iogurte, como a de Regulamento Técnico Mercosul de Identidade e Qualidade de Leites Fermentados, Diário Oficial da bactérias probióticas (ZACARCHENCO e MASSAGUER-ROIG, 2004). União, Brasília, 3 jul 1997, Seç. 1, p. 14064. (Internalizada no Brasil – DIPOA/MA – Resolução nº 5 O teor de gordura também se encontrava dentro dos padrões e as amostras analisadas foram classificadas de 13 de novembro de 2000, republicada em 2/01/2001, Disponível em: <http://www.agricultura.gov.br/das/dipoa/ como iogurtes desnatados (0,5g/100g), parcialmente desnatados (1,0 e 1,5) ou integrais (3,0). Dados similares resolução_leite_fermentado.htm>. Acesso em: 02 nov. 2007. foram encontrados por Longo et al. (2006). A análise do teor de amiláceos também foi EARLY, R. traduzido por Rosa Maria Oria Almudí. realizada e nenhuma amostra apresentou amido ou amido modificado em proporção maior que 1% (m/m). A adição Tecnología de los productos lácteos. Zaragoza (España): Editorial Acribia, S.A., 2000. Cap. 11, p. 382-383. de amido aumenta a consistência do produto e pode representar uma fraude. FAVA, A. R. Tese mostra que análise sensorial incrementaria produção de iogurte. Jornal da UNICAMP, Campinas. n. 253, p. 11, 2004. Disponível 4- CONCLUSÕES em: <http://www.unicamp.br/unicamp/unicamp_hoje/ jornalPDF/ju253.html>. Acesso em 02 nov. 2007. A análise microbiológica das 24 amostras de iogurte aponta que 87,5%, 41,6% e 58,35 das amostras GOUVEIA, C.O.; NASCIMENTO, M.C.M.; analisadas não estão de acordo o que recomenda a legislação em vigor para contagem de bolores e leveduras, CAMPOS, M.C.B.; CASTRO, T.A.; NETO, T.M.S. Manual de leite e derivados. Recife, SEBRAE/PE, 2000. coliformes totais e coliformes fecais, respectivamente. Danos à saúde do consumidor podem ser evitados com 35 p. Disponível em: <http:// www.pe.sebrae.com.br:8080/notitia/dowload/ a adoção de práticas de higienização simples. Quanto às análises físico-químicas, todos os parâmetros (pH, pn_leite.pdf>. Acesso em 02 nov. 2007. acidez, gordura e amiláceos) estão de acordo com o recomendado pela legislação brasileira quanto aos HAMANN, W. T.; MARTH, E. H. Survival of Streptococcus thermophilus and Lactobacillus bulgaricus padrões de identidade e qualidade de leites fermentados. in commercial and experimental yogurts. Journal of Food protection, v.47, n. 10, p. 781-786, 1983. 5- REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS BEHMER, M.L.A. Tecnologia do leite. 13ª edição revisada e atualizada. São Paulo: Nobel, 1999. 78 Ciência e Cultura HEKMAT, S.; REID, G. Sensory properties of probiotic yogurt is comparable to standard yogurt. Nutrition Research, v.26, p. 163-166, 2006. CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB JAY, J.M. Modern food microbiology. 4a ed. New York: Chapman & Hall, 1992. v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Sendra, E et al. Incorporation of citrus fibers in fermented milk containing probiotic bacteria, Food Microbiology, v. 25, p. 13–21, 2008. LONGO G. et al. Avaliação da qualidade físicoquímica de iogurtes naturais comercializados na cidade SILVA, N.; JUNQUEIRA, V.C.A.; SILVEIRA, de Curitiba, Paraná. Higiene Alimentar, v. 20, n. 138, p.56-59, 2006. N.F.A. Manual de métodos de análise microbiológica de alimentos, 2a. edição. São Paulo: Ed. Varela, 1997. MOREIRA, S.R. et al. Análise microbiológica e química de iogurtes comercializados em Lavras – MG. Ciência e Tecnologia de Alimentos, v.19, n.1, p. 147- SILVA, G. S.; RODRIGUES, M.A.M. Avaliação da qualidade de iogurte aromatizado. Higiene Alimentar, 152, 1999. v.21, n. 110, p. 82-85, 2006. NETO, O.C.C. et al. Avaliação físico-química do iogurte natural produzido com leite de búfala contendo SILVA Jr., E.A. Manual de controle higiênicosanitário em Alimentos. São Paulo: Ed. Varela, 1995. diferentes níveis de gordura. Ciência e Tecnologia de Alimentos, v.25, n.3, p. 448-453, 2005. TEIXEIRA, A.C.P., et al. Qualidade do iogurte PEREIRA, D.B.C. et al. Físico química do leite e comercializado em Belo Horizonte. Leite e derivados, v.9, n.51, p.32-37, 2000. derivados: métodos analíticos, 2a. edição. Juiz de Fora: EPAMIG, 2001. ZACARCHENCO, P.B.; MASSAGUER-ROIG, Queiroz, L. S. O. et al. Avaliação microbiológica S. Avaliação sensorial, microbiológica e de pós acidificação durante a vida-de-prateleira de leites de iogurte de leite de búfala, com sabor de frutas da Amazônia, para merenda escolar. Higiene Alimentar, v. fermentados contendo Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium longum e Lactobacillus acidophilus. 16, n. 94, p. 39-44, 2002. Ciência e Tecnologia de Alimentos, v. 24, n. 4, p. 674679, 2004. RODAS, M.A.B. et al. Caracterização físicoquímica, histológica e viabilidade de bactérias lácticas ZANINI, K. et al. The effects of fermented milks em iogurtes com frutas. Ciência e Tecnologia de Alimentos, v.25, n. 3, p. 1-13, 2001. with simple and complex probiotic mixtures on the intestinal microbiota and immune response of healthy adults and children. International Dairy Journal, v. 17, p. 1332–1343, 2007. Ciência e Cultura 79 80 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Novilhas de corte submetidas à suplementação em pastagem na época das secas: desempenho e caracteres genéticos polimórficos do sangue. Beef heifers before supplementation to pasture in the dry season: performance characteristics and genetic polymorphism of blood. Maria Margareth Theodoro CAMINHAS1, Sílvia Helena Venturolli PERRI1 e Marcelo Pereira MACEDO2 1. Professoras Doutoras do Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal – Curso de Medicina Veterinária -FO/ UNESP Araçatuba, SP. E-mail:[email protected] 2. Zootecnista, M.S em Produção Animal. RESUMO O objetivo do trabalho foi estudar uma possível relação foram mantidos em pastagem de braquiária brizanta e entre o desempenho de novilhas suplementadas com os caracteres polimórficos genético-bioquímicos do sangue: submetidas aleatoriamente a três tratamentos com suplementação alimentar, com diferentes níveis de hemoglobinas, transferrinas e albuminas; que são identificados por técnicas rotineiras, relativamente simples proteína bruta (T1 =18% PB; T2 = 24% PB e T3 = 12% PB). O genótipo heterozigoto AlbAB influenciou e de baixo custo; constituindo sistemas para a caracterização genética, uma vez que revelam as significativamente os pesos aos 25 e 26 meses de idade para todos os tratamentos. A análise estatística não modificações ocorridas na seqüência codificadora do DNA que alteram a estrutura ou carga da molécula. revelou efeitos de tratamento, linhagem, tipo de hemoglobina e tipo de transferrina. Foram utilizadas 60 novilhas da raça Nelore com idade e peso médio inicial de 23 meses e 224 kg. Os animais Palavras- chave: albumina, hemoglobina, gado de corte, nutrição, transferrina. ABSTRACT The objective was to study a possible relationship of Brachiaria brizanta and randomly subjected to three between the performance of heifers supplemented with polymorphic genetic and biochemical characteristics of treatments with supplementation with different levels of crude protein (T1 = 18% CP, T2 = 24% CP and T3 = blood hemoglobin, transferrin and albumin, which are identified by routine techniques, relatively simple and low 12% CP). The heterozygote genotype AlbAB significantly influence the weights of 25 and 26 months of age for all cost, providing systems for the genetic characterization since it shows the changes in the DNA coding sequence treatments. Statistical analysis revealed no effects of treatment, strain, hemoglobin and transferrin types. that alter the structure or loading of the molecule. Sixty Nellore heifers were used with age and initial weight of Keywords: albumin, beef cattle, hemoglobin, nutrition, 23 months and 224 kg. The animals were kept in a pasture transferrin. Ciência e Cultura 81 Novilhas de corte submetidas à suplementação em pastagem na época das secas: desempenho e caracteres genético polimórficos do sangue. INTRODUÇÃO CAMINHAS et al. A hematologia dos animais domésticos é um O manejo nutricional, a idade a puberdade, a raça assunto antigo e ao mesmo tempo atual, pois em pleno século XXI, época de grande desenvolvimento e e composição genética são alguns dos fatores importantes que irão influenciar a produtividade. O baixo expansão tecnológica, o tema ainda não demonstrou estar exaurido, uma vez que muitos são os fatores de índice de desfrute do rebanho brasileiro, nos últimos anos, é resultado principalmente da elevada idade ao primeiro variabilidade que influenciam o quadro hematológico e que continuam ainda não elucidados satisfatoriamente ( parto e baixa taxa de gestação das matrizes (ANUALPEC, 2008). BEZERRA et al., 2008). Técnicas eletroforéticas possibilitam resultados Existem poucos trabalhos relacionados ao estudo dos fatores que influenciam o início da atividade mais confiáveis no estudo da heterogeneidade das proteínas, seu papel fisiológico e bioquímico, suas reprodutiva em fêmeas bovinas, particularmente em relação às zebuínas. Conforme Knickerbocker et al. interrelações e aplicações como marcadores genéticobioquímico no melhoramento animal. O polimorfismo (1986) o início da atividade reprodutiva, em fêmeas de raça européias, via de regra, é iniciada ao redor dos apresentado pelas proteínas sangüíneas é devido à variação genética. Essas variantes são transmitidas por doze meses de idade, sendo influenciada por fatores genéticos (raça) e de ambiente (alimentação, clima, herança mendeliana simples com ausência de dominância. As variantes ocorrem uma vez que substituições de fotoperíodo, sanidade) tornando a idade à puberdade bastante variável. A suplementação protéica tem sido aminoácidos ou deleções modificam a estrutura e/ou a carga da molécula (BORTOLOZZI, 1983; LIMA e utilizada para diminuir a perda de peso ou aumentar a produção animal durante os períodos críticos do ano SILVA et al., 2002). Os polimorfismos genéticos bioquímicos do sangue (EUCLIDES, 1998). No período da seca os animais jovens mantidos a pasto sofrem com a redução na tem sido associados às características de produção nos animais de interesse zootécnico por diversos autores disponibilidade de forrageiras, que resulta no retardo do crescimento (SERENO et al., 1991). (ROCHA et al., 2008; PARO de PAZ et al., 2004; TAMBASCO et al., 2003; EKINS e NIVEU, 2001; Em animais de origem zebuína, a interação genótipo-ambiente tem um efeito significativo no peso KANTANEN et al., 2000; Blott et al., 1998; MORANI et al, 1998; CHARON et al., 1996; PIERAGOSTINI da fêmea na incidência da primeira ovulação no período pós-parto (FERREIRA et al., 1999). Assim, a et al., 1994; ANDERSSON-EKLUND et al., 1990; MANDAL e DATTAGUPTA, 1985). Bouquet et subnutrição aumenta a idade à puberdade. Conseqüentemente, o aumento da produtividade pode al.1986 , encontraram linkage entre os locos da albumina C e G. Estes foram mapeados sobre o cromossomo 6 ser melhorado introduzindo-se técnicas de manejo nutricional (BERETTA et al., 2001). Por outro lado, a (KAPPES et al., 1994) onde foram determinados vários QTLs com efeitos positivos sobre caracteres de primeira parição aos dois anos de idade pode prolongar o intervalo entre partos (PATTERSON et al., 1992). A produção de leite ( VEMALA et al., 1999; RON et al., 2001) e com caracteres fenotípicos descritos em alta herdabilidade (0,57±0,01) para início da gestação aos 14 meses em novilhas da raça Nelore sugere nas bovinos. (HIENDLEDER et al., 2003). Caracteres polimórficos que constituem o sangue possibilitam a últimas décadas uma falha prévia de seleção nesta raça para esta característica (ELER et al., 2002). Para bovinos detecção de marcadores bioquímicos e/ou moleculares, tais como a hemoglobina, transferrina e a albumina que, de corte no Brasil, a idade à primeira cria de 40 meses é atribuída à baixa qualidade das forragens tropicais que entre diversos sistemas polimórficos podem ser identificados por técnicas relativamente simples e de baixo contribui para uma inadequada nutrição dos animais (PEREIRA, 2000). custo constituindo sistemas para a caracterização genética, uma vez que revelam as modificações ocorridas 82 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 na seqüência codificadora do DNA (LARA et al, 1998) ministrados diariamente aos animais, pela manhã, em que alteram a estrutura ou carga da molécula (ROCHA, et al., 2007). quantidade equivalente a 0,8% do peso vivo médio de cada lote. Os alimentos empregados na formulação do O objetivo do presente estudo foi relacionar o desempenho de novilhas Nelore submetidas ao efeito suplemento foram rolão de milho, farelo de algodão e minerais. Não foram observadas sobras do suplemento da suplementação protéica em três diferentes níveis de proteína bruta durante um período de seca com os durante todo o período experimental. As amostras de sangue foram coletadas após a caracteres polimórficos genético bioquímicos do sangue: hemoglobina, transferrina e albumina. última pesagem, através de punção da veia jugular, em tubos vacutainer heparinizados e conservados sob refrigeração até chegada ao Laboratório de Genética Animal da UNESP, Campus de Araçatuba, visando à MATERIAL E MÉTODOS tipificação dos genótipos de hemoglobina (Hb), transferrina (Tf) e albumina (Alb). O experimento foi conduzido na Estação Experimental do Pólo Regional de Desenvolvimento Primeiramente o plasma foi separado dos eritrócitos por centrifugação a 2000 rpm durante 15 Tecnológico dos Agronegócios de Andradina, unidade da Agência Paulista de Tecnologias dos Agronegócios minutos e armazenado a -20º C até o momento de serem feitas as análises das proteínas albumina (Alb) e (APTA), da Secretaria da Agricultura de Abastecimento do Estado de São Paulo, localizada na região Noroeste transferrina (Tf). Os eritrócitos foram lavados por três vezes do Estado de São Paulo. A caracterização climática dessa região, segundo Köppen, é “W”, ou seja, tropical consecutivas em solução salina isotônica para posterior hemólise e eletroforese, sistema horizontal em gel de úmido com inverno seco, cuja média anual de precipitação pluvial é de 1200 mm e temperatura média ágar-amido¨, tampão TRIS-EDTA-borato, pH 8.6; corrida eletroforética sob a diferença de 150 V obtendo- de 19oC para as mínimas e 30oC para as máximas. O relevo da área usada era levemente ondulado e o solo se a intensidade de corrente de 25 mA, em geladeira (4o C) por 90 minutos. Após esse período , fez-se a latossolo amarelo – fase arenosa. Foi utilizada uma área de pastagem cultivada de coloração com amido Black 2% por 15 minutos e descorou-se o fundo através de lavagens sucessivas com braquiária brizanta (Brachiaria brizantha cv. MG4) previamente submetida a pastejo, visando proporcionar uma solução descorante de acido acético glacial a 2% (CAMINHAS, 1987). maior oferta de matéria seca (MS) às novilhas. Os animais foram mantidos nas mesmas condições Para a identificação das transferrinas foi utilizado eletroforese vertical com gel de poliacrilamida à de alimentação e manejo, desde o nascimento até o início desta pesquisa. Utilizaram-se 60 novilhas da raça Nelore, concentração de 7,5% , sistema tampão alcalino conforme Hames e Rickwood, (1998). oriundas do Programa de Melhoramento Genético da Raça Nelore do Instituto de Zootecnia, denominados, As amostras de plasma foram retiradas do freezer e descongeladas. Separaram-se 200 microlitros de respectivamente, de Linhagem Controle (LC) e Linhagem Seleção (LS); sendo 22 da linhagem controle e 38 da plasma sangüíneo e adicionaram-se 800 microlitros de solução de rivanol a 0,04% (2-ethoxy-2,9-diamino- linhagem seleção; com idade e peso médio inicial de 23 meses e 224 kg de peso vivo, distribuídas aleatoriamente acridinlactato), a fim de se ter melhor definição das bandas de transferrinas conforme citação de Klister et em três tratamentos (T1 =18% PB; T2 = 24% PB e T3 = 12% PB). Outros 15 animais foram utilizados para al. (1985). Posteriormente, foram submetidas a repouso por aproximadamente dezoito horas a uma temperatura uniformizar a disponibilidade de forragem entre os tratamentos (put and take). Os suplementos foram de 4ºC, e subseqüentemente feita a centrifugação a 3000rpm durante cinco minutos para obtenção do Ciência e Cultura 83 Novilhas de corte submetidas à suplementação em pastagem na época das secas: desempenho e caracteres genético polimórficos do sangue. sobrenadante. Deste, tomou-se 1,0 microlitros, ao qual CAMINHAS et al. (GMD), foi o seguinte: foi adicionado 0,05 g de Dextrose para prevenir a suspensão da amostra no tampão eletrodo, aplicando- Yijklm = µ + Hi + Lj + Gk + Tl + Am + eijklm se após, 20 microlitros da amostra no gel de poliacrilamida. onde: Para a identificação da albumina foi utilizado também eletroforese vertical em gel de poliacrilamida à Yijklm é a variável dependente (P24, P25, P26 e GMD); m é a média geral; H-i é o efeito fixo do i-ésimo concentração de 10% sistema tampão alcalino, conforme Hames e Rickwood (1998). tratamento, para i = 1, 2, 3; Lj é o efeito fixo da j-ésima linhagem, para j = 1, 2; Gk é o efeito fixo do k-ésimo Separaram-se 10 microlitros de plasma sangüíneo descongelado e adicionaram-se 490 microlitros de tipo de hemoglobina, para k = 1, 2,3; Tl é o efeito fixo do l-ésimo tipo de transferrina, para l = 1, 2, 3, 4,5; Am solução de dextrose a 40%. Aplicaram-se 4 microlitros da amostra no gel de é o efeito fixo do n-ésimo tipo de albumina, para n = 1, 2,3; eijklm é o erro aleatório associado a cada observação poliacrilamida. O procedimento visando a determinação dos com distribuição N (N (φ, Iσ2). padrões eletroforéticos das proteínas sangüíneas realizou-se pelo método vertical, tendo o gel de RESULTADOS E DISCUSSÃO poliacrilamida como meio suporte em concentração de 7,5% para a transferrina e 10% para a albumina. Durante A análise de variância do experimento é apresentada na Tabela 1. Não se observou nenhum efeito a corrida, a constante de 25 mA foi fixada. A coloração do gel foi feita com Coomassie significativo (P>0,05) sobre o peso aos 24 meses de idade (P24) para todas as características avaliadas. Brilliant Blue 250-R (MERCK) a 5%. Após evidenciar as bandas, estas foram analisadas e interpretadas de Embora, o tratamento T1 = 18% de proteína bruta tenha apresentado um melhor desempenho que os acordo com os dados obtidos na literatura. Os dados foram submetidos à análise de variância demais, não se detectou efeito significativo (P>0,05) de tratamento sobre os pesos aos 24 (P24), 25 (P25) e 26 pelo PROC GLM (General Linear Models Procedure) do programa computacional SAS (1999) e as (P26) meses de idade e sobre o ganho médio diário (GMD). Em face desses resultados e considerando a comparações entre as médias foram realizadas pelo teste de Tukey no nível de 5% de probabilidade. economicidade da suplementação, visto que a fração proteica geralmente é o item mais caro das formulações, O modelo adotado para as análises das características do desempenho ponderal dos animais pode-se recomendar a utilização de um teor de proteína bruta mais baixo para os suplementos destinados a peso aos 24 (P24), peso aos 25 (P25), peso aos 26 (P26) meses de idade e ganho de peso médio diário alimentação de novilhas de corte durante a época das secas. Tabela 1 - Análise de variância para os pesos aos 24 (P24), 25 (P25), 26 (P26) meses de idade e ganho de peso diário (GMD). 84 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Os pesos obtidos para as idades e o ganho médio (Tabela 2) respectivamente para T1, T2 e T3. Não houve diário são expostos no Tabela 2. Os pesos médios aos 26 meses (P26), isto é, os pesos finais para cada diferença significativa (P>0,05) para os pesos finais observados nesse trabalho. Esses resultados são tratamento foram: 288,30 kg; 284,50 kg e 286,25 kg, semelhantes com os obtidos por SERENO et al. (1991). Tabela 2 - Médias e desvios padrão (DP) dos pesos aos 24 (P24), 25 (P25), 26 (P26) meses de idade e ganho de peso diário (GMD) de acordo com o tratamento. Não houve diferença significativa (P>0,05) para os ganhos de peso diário no período experimental (Tabela 2). Não obstante, os ganhos médios observados para os tratamentos possibilitaram a antecipação da cobertura das novilhas em um ano. Tornando as novilhas Nelores aptas a serem acasaladas aos 26 meses de idade, em função do peso final atingido e considerando o peso de cobertura de 300 kg, desde que as fêmeas disponham de nutrição adequada, o que lhes permitirá manter um padrão de crescimento após a cobertura. Existem na literatura muitos trabalhos que corroboram essa conclusão estudando o efeito de variados tipos de suplementos protéicos sobre a produção animal e, via de regra, as melhores produções foram obtidas quando havia elevada disponibilidade de forragens de baixa qualidade (MANCIO et al., 1982; HAFLEY et al.,1993; POPPI e McLENNAN, 1995). Não se observou efeito significativo (P>0,05) de linhagem sobre os pesos P24, P25 e P26 e o GMD estudados. Contudo, o P26 (290,24 kg) das novilhas Nelores pertencentes à Linhagem Seleção sobrepujou o peso das novilhas da Linhagem Controle em 10 kg, de certo modo, evidenciando o maior potencial para ganho de peso desses animais. Tabela 3 - Médias e desvios padrão (DP) dos pesos aos 24 (P24), 25 (P25), 26 (P26) meses de idade e ganho de peso diário (GMD) de acordo com a linhagem. CABANNES e SERAIN (1955), estudando bovinos de Argel, identificaram o polimorfismo da foram observados os três fenótipos mais comuns (Tabela 4), denominados A, AB e B; concordando, portanto com hemoglobina ao detectarem os dois alelos (HbA e HbB) responsáveis pelos diferentes genótipos (AA, AB e BB). os dados da literatura existentes para esta proteína eritrocitária em bovinos. O genótipo mais comum apresentou migração eletroforética mais lenta (AA) que o outro homozigoto O tipo de hemoglobina não apresentou efeitos significativos (P>0,05) sobre as características estudadas. (BB), ao passo que o heterozigoto (AB) apresentou um padrão de migração de duas bandas eletroforéticas. Com Os pesos aos vinte e seis meses (P26) cresceram de forma linear para os fenótipos A, AB e B. Quanto ao relação ao loco da hemoglobina, no presente estudo, GMD o efeito do tipo de hemoglobina foi similar ao Ciência e Cultura 85 Novilhas de corte submetidas à suplementação em pastagem na época das secas: desempenho e caracteres genético polimórficos do sangue. CAMINHAS et al. verificado para o (P26), com pequena diferença absoluta hemoglobina. Na literatura, outros trabalhos relatam que em relação ao fenótipo HbAB. Assim, o maior peso foi observado para o fenótipo HbB, para todos os pesos os bovinos com o genótipo homozigoto HbAA foram mais pesados do que os do tipo heterozigoto HbAB, analisados e também para o GMD. Os resultados dessa pesquisa são semelhantes aos mencionados por para animais de raças leiteiras européias, polimórficas para o sistema da hemoglobina, mantidos em condições POLITZER (1968) que menciona que animais da raça Africânder com o tipo HbB foram mais pesados aos ambientais controladas e em nível alimentar próximo do ideal (MERKUJEVA, 1968; PILJKO e GERTMAN, desmame do que os animais com outros tipos de 1970). Tabela 4 - Médias e desvios padrão (DP) dos pesos aos 24 (P24), 25 (P25), 26 (P26) meses de idade e ganho de peso diário (GMD) de acordo com o tipo de hemoglobina. No Brasil, PANEPUCCI et al., (1990) relatam que bovinos Canchim mais pesados aos desmame e aos obtidos no presente estudo (Tabela 5) demonstra que os menores pesos médios (271,33 ± 15,87 kg e 278,20 12 meses de idade, foram os que apresentaram o genótipo heterozigoto HbAB, em relação aos demais ±20,54 kg) foram observados para os genótipos TfDE TfEE, respectivamente e os maiores pelos genótipos tipos. Essas informações permitem-nos inferir que os bovinos pertencentes ao grupamento genético Bos taurus TfAD, TfAE e TfAA, em ordem decrescente. Em contraste, VALLEJO e SANCHES GARCIA (1983), e os produtos de seus cruzamentos, quando são dos genótipos HbAA e HbAB, em condições ideais de verificaram ganho de peso maior para os animais que apresentavam o genótipo TfDE. O que tem sido criação apresentam melhores desempenhos individuais, na medida que estejam mais bem adaptados a essas observado nos trabalhos com bovinos em que se procurou associar tipos de transferrinas a maiores pesos condições. Ao passo que os bovinos pertencentes ao grupamento genético Bos indicus, mantidos em e ganhos de pesos, é uma tendência dos animais que apresentam em seu genótipo o alelo TfA apresentarem condições ambientes desfavoráveis apresentam desempenhos superiores quando são do genótipo HbBB. maiores pesos e ganhos de pesos (FOWLE et al., 1967; POLITZER, 1968; NEVADA et al., 1977; RAHMAN SILVA et al., (1996a), estudando o desempenho ponderal de fêmeas Nelore do nascimento ao segundo e KALAM, 1986). POLITZER (1968), estudando rebanhos leiteiros parto, encontraram efeito significativo do tipo de hemoglobina sobre o peso aos 18 meses de idade e o pertencentes ao grupo Bos taurus, observou que os menores pesos foram obtidos para animais que peso ao segundo parto, no qual as maiores médias foram para o genótipo HbBB. apresentavam o genótipo TfAA, contrastando com os resultados obtidos neste experimento. PANE PUCCI SILVA et al., (1996b), não encontraram associação entre os tipos de hemoglobina e o et al. (1990), observaram associações significativas entre os tipos de transferrina em animais da raça Canchim desenvolvimento ponderal de bovinos Canchim em confinamento. Da mesma forma, o tipo transferrínico não (bimestiço 3/8Nelore X 5/8Charolês). Em contraste, SILVA et al. (1997) sugerem uma associação entre o apresentou efeito significativo (P>0,05) sobre o P24, P25 e P26 e o GMD estudados. A análise dos pesos alelo TfA e os maiores ganhos de peso de bovinos Nelore em teste de desempenho em confinamento. 86 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Tabela 5 - Médias e desvios padrão (DP) dos pesos aos 24 (P24), 25 (P25), 26 (P26) meses de idade e ganho de peso diário (GMD) de acordo com o tipo de transferrina. Tabela 6 - Médias e desvios padrão (DP) dos pesos aos 24 (P24), 25 (P25), 26 (P26) meses de idade e ganho de peso diário (GMD) de acordo com o tipo de albumina. Médias, na coluna, seguidas por letras diferentes, diferem entre si (P < 0,05), pelo teste Tukey. Detectou-se efeito significativo (P<0,05) entre efeito heterótico do genótipo para este polimorfismo. fenótipo de albumina e os P25 e P26 e o GMD estudados (Tabela 6). Contudo, para o P24 não houve Entretanto, sugere-se que outros estudos com enfoque no tema ora apresentado, envolvendo maior número de diferenças (P>0,05) entre os pesos analisados. Para os P25 e P26 e o GMD o melhor desempenho foi animais, sejam realizados para se estabelecer a relação entre os sistemas polimórficos analisados com observado para as novilhas com o genótipo AlbAB (256,27 ± 18,94 kg); (296,27 ± 18,54 kg) e (1,30 ± desempenho em zebuínos de corte. 0,15 kg), para os respectivos pesos e GMD; sendo que os outros dois genótipos homozigotos A e B CONCLUSÕES manifestaram desempenho semelhante, respectivamente (246,74 ± 17,39 kg; 283,66 19,47 kg e 1,15 ± 0,21 A suplementação obteve sucesso na antecipação kg) e (243,43 ± 9,52 kg; 279,29 10,83 e 1,12 ± 0,09 kg). Analisando outras características, como peso ao do peso de cobertura das novilhas em função dos ganhos de peso observados. Tornando as novilhas zebuínas nascer e produção à primeira lactação de animais mestiços, Mandal e Dattagupta, (1985) notaram que, aptas a serem acasaladas aos 25 meses de idade, em função do peso final atingido. para o genótipo da albumina, vacas homozigotas AlbAA (fast) tiveram maior peso ao nascer e maior produção Os resultados confirmam a necessidade de se manter os animais em pastagens com boa oferta de de leite à primeira lactação quando comparadas às vacas com fenótipo AlbBB (slow). Os autores associaram o matéria seca para garantir bons ganhos de peso, quando os animais forem submetidos à suplementação protéica alelo AlbA à maior produção de leite e maior peso ao nascer, o que não ocorreu na amostra estudada quanto durante a época da seca. A albumina, foi a única proteína sangüínea que aos pesos. A relação significativa encontrada no presente manifestou efeito significativo para os P25, P26 e o GMD estudados, apresentando melhor desempenho do trabalho entre o genótipo AlbAB com o melhor desempenho das novilhas heterozigotas, poderia sugerir genótipo AlbAB. Ciência e Cultura 87 Novilhas de corte submetidas à suplementação em pastagem na época das secas: desempenho e caracteres genético polimórficos do sangue. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS CAMINHAS et al. BLOTT, S. C., WILLIANS, J. L., HALEY, C. ANDERSSON-EKLUND, L. DANELL, B.; S. Genetic relationships among European cattle breeds. Anim. Genet., v. 29, p.273–282, 1998. RENDEL, J. Associations between blood protein groups, blood polymorphisms and breeding values for production CABANES, R., SERAIN, C. Hétérogenéité de traits in Swedish Red and White Dairy bulls. Anim. Genet., v. 21, p. 361–376, 1990. l’hémoglobine des Bovides; identification électroforétique de deux hemoglobines bovines. C.R. Soc. Biol., Paris, v.149, p.7-10, 1955. 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Endereços de emails: [email protected]; [email protected]. 1,2 3,4 *Parte do Trabalho de Conclusão de Curso apresentado, pelos dois primeiros autores, em junho de 2007 ao Curso de Engenharia de Alimentos do Centro Universitário da Fundação Educacional de Barretos como requisito à obtenção do grau de Engenheiro de Alimentos. RESUMO No presente trabalho pesquisou-se sobre o desenvolvimento de filme biodegradável a base de amido de mandioca com adição de óleo essencial de canela e laranja, considerando o crescimento exponencial da população mundial que levou ao acúmulo de uma enorme quantidade de lixo não biodegradável. As embalagens ativas podem aumentar a vida útil porque, além de proteger, interagem com o produto. Realizou-se a produção dos filmes nas concentrações de 0%, 1%, 5% e 10% de óleo essencial de canela e laranja, com posterior análise visual, resistência a rasgo e espessura dos mesmos, com a finalidade de conferir as suas propriedades e análises microbiológicas para verificar a eficiência dos filmes em relação aos microrganismos: Salmonella, E. coli e S. aureus. Os resultados mostraram que com o aumento da concentração de óleo essencial na formulação ocorreu aumento da intensidade da cor, oleosidade e aspereza da superfície em contato com o ambiente e a resistência a rasgo diminuiu com a concentração de óleo essencial. Na análise microbiológica verificou-se que o filme com óleo essencial de canela se mostrou eficiente em relação ao S. aureus na concentração de 10%, E. coli nas concentrações de 5% e 10% e Salmonella nas concentrações de 1%, 5% e 10%. O filme com óleo essencial de laranja demonstrou eficiência em relação a E. coli na concentração de 10% e Salmonella nas concentrações 1%, 5% e 10%. Palavras – chave: Filme Biodegradável; Embalagem ativa; Óleo essencial. ABSTRACT In this work it was researched about the development of biodegradable film with a base of cassava starch with a addition of essential oil of cinnamon and orange, considering the exponential growth of the world population that took to the accumulation of an enormous amount of no biodegradable garbage. The active packaging can increase the shelf life because, besides protecting, it interacts with the product. Films in the concentrations of 0%, 1%, 5% and 10% were produced of essential oil, visual analysis, resistance to tear and thickness with the purpose of verifying the properties and analysis microbiologic to verify the efficiency of the films in relation to the microorganisms: Salmonella, E. coli and S. aureus. The results showed that with the increase of the concentration of essential oil in the formulation happens increase of the intensity of the color, oiliness and roughness of the surface in contact with the atmosphere, and the resistance to tear decreases with the concentration of essential oil. In the microbiologic analysis can be verified that the film with essential oil of cinnamon showed efficiency in relation to the S. aureus in the concentration of 10%, E. coli in the concentrations of 5% and 10% and Salmonella in the concentrations of 1%, 5% and 10%. The film with essential oil of orange demonstrated efficiency in relation to E. coli in the concentration of 10% and Salmonella in the concentrations 1%, 5% and 10%. Keywords : Film Biodegradable; Active packaging; Essential oil. Ciência e Cultura 93 Filmes biodegradáveis com óleos essenciais de laranja e canela: estudo sobre produção e inibição do crescimento de microrganismos* INTRODUÇÃO FERREIRA et al. O óleo essencial de canela tem coloração amarelo- A função principal da embalagem é minimizar a amarronzada, e tem o eugenol como componente majoritário (mais de 90%) (GROSSMAN, 2005). perda de qualidade do produto, associada aos fatores de natureza física, química ou microbiológica, ao longo O eugenol é um composto aromático que está presente nos cravos, canela e sassafrás. É considerado das etapas de armazenamento, manuseio e consumo (RIZVI,1981 apud ROMANO e FARIA, 2003). um forte anti-séptico. Seus efeitos medicinais auxiliam no tratamento de náuseas, flatulências, indigestão, Nas últimas décadas, algumas tecnologias vêm sendo desenvolvidas com o princípio de interação diarréia, contém propriedades antibactericidas, antivirais, e é também usado como anestésico e anti-séptico para embalagem/produto como forma de preservar a qualidade e a segurança do alimento. São as conhecidas o alívio de dores de dente (EUGENOL, 2007). Na linha de produtos cítricos, durante a etapa de embalagens ativas definidas como embalagens que percebem mudanças no ambiente ao redor do produto esmagamento dessas frutas, os óleos essenciais cítricos são obtidos nas condições de subprodutos. Esses óleos e respondem com alterações em suas propriedades (BRODY, 2002). são formados por uma combinação de compostos químicos das famílias da cetona, dos hidrocarbonetos, Os aditivos químicos podem ser liberados a partir de uma embalagem, a fim de aumentar a vida de alcoóis, aldeídos, entre outros. Para os óleos cítricos, o limoneno é o componente presente em maior quantidade prateleira do produto. A maior parte dos compostos assim liberados são os conservantes, capazes de prevenir (93-94% p/p), sendo amplamente utilizado, dentre outros, como monômero da fabricação de polímeros, o crescimento de microrganismos deteriorantes e patogênicos e podem ser liberados controladamente solventes, matéria-prima na síntese de diversos compostos químicos (CRAVEIRO; QUEIROZ, 1993). sobre a superfície de um alimento (LABUZA e BREENE, 1996). Os polímeros em geral possuem a vantagem de permitirem manipulações químicas e físicas para Pereira et al. (2006) citam que, de acordo com Bara (1992), a utilização de substâncias naturais, de adquirirem diversas formas e propriedades. Porém, a limitação no uso desses materiais encontra-se relacionada origem vegetal, torna o alimento mais atrativo ao consumidor e, além dos benefícios proporcionados à ao seu descarte. As massas moleculares elevadas e sua estrutura química são, em geral, responsáveis pela saúde, diversos estudos têm demonstrado o efeito inibidor de condimentos no desenvolvimento de resistência dos plásticos à biodegradação, os quais permanecem no solo por longo tempo (SANTOS, 2005). microrganismos deterioradores e patogênicos veiculados por alimentos. Dentre os vários novos compostos Dados estatísticos mostram que, em todo o mundo, toneladas de plásticos são produzidas e despejadas estudados, os óleos essenciais têm mostrado eficiência no combate do crescimento e sobrevivência de bactérias anualmente no meio ambiente, de acordo com Thiré (2002). e fungos contaminantes de alimentos, bem como inibindo a produção de toxinas microbianas. Tem havido grande interesse no desenvolvimento de filmes ou coberturas biodegradáveis, principalmente Os óleos essenciais constituem os elementos voláteis contidos em muitos órgãos vegetais, e estão pelo impacto ambiental provocado pela degradação muito lenta das embalagens convencionais de alimentos relacionados com diversas funções necessárias à sobrevivência vegetal, exercendo papel fundamental na (TANADA-PALMU, GROSSO, 2002). A produção de materiais biodegradáveis a partir defesa contra microrganismos Os óleos essenciais das espécies de condimentos contêm diferentes compostos, de fontes renováveis é considerada uma forma de reciclagem. Por isso várias pesquisas com diferentes que contribuem com as propriedades antimicrobianas (SIQUI et al., 2000; SOUZA et al., 2004). materiais (amido, celulose e lipídios) têm sido desenvolvidas na tentativa de minimizar, diminuir ou 94 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 solucionar o problema da poluição através da obtenção formando as soluções filmogênicas. Seguiram para de plásticos biodegradáveis, ou seja, os biofilmes (SILVA et al, 2007). aquecimento a 95°C por 2 minutos, sob agitação manual e pausadamente. Após resfriamento até 60°C, colocou- Devido ao baixo custo de produção e excelente biodegradabilidade, o amido constitui-se em matéria- se 60g da solução filmogênica em placas de vidro (100 mm x 100 mm x 30 mm) sendo posteriormente prima promissora para a produção de plásticos biodegradáveis (ANDRADE et al., 2004). submetidas à secagem em estufa com circulação forçada de ar a 40°C por 24 horas. O presente trabalho teve como objetivo produzir filmes biodegradáveis a base de amido de mandioca Condicionou-se os filmes durante 10 dias a 28°C ± 2°C e 75% U.R. em dessecadores, com solução de contendo óleos essenciais de canela e laranja, nas concentrações de 1%, 5% e 10%, como inibidor do NaCl, antes da análise microbiológica. crescimento de microrganismo para aplicação como embalagem ativa. Identificou-se a inibição do 2.3 Análises Microbiológicas desenvolvimento de Staphylococcus aureus, Salmonella e E.coli. Para a realização das análises microbiológicas usou-se o método de formação de halo em placas de acordo com Appendini e Hotchkessb (2002). MATERIAL E MÉTODOS 2.1 Formulações dos Filmes Biodegradáveis Foram utilizadas cepas de Salmonella, E. coli e S. aureus. A manutenção das cepas foi realizada com repiques de 15 em 15 dias em tubos com PCA inclinados em estufa a 36æ%C por 24 horas. As formulações dos filmes biodegradáveis a base de amido foram elaboradas com base nos autores Iniciou-se com a ativação dos microrganismos em tubos de ensaio contendo 7mL de caldo PCA inclinado, Yamashita et al. (2006), Yamashita et al. (2005), TanadaPalmu et al. (2005) e Soares (2002). Para a produção a 36°C por 24 horas. As diluições foram com água peptonada até 10-3. A inoculação de Salmonella, E. coli dos filmes foram preparadas soluções filmogênicas com amido de mandioca, glicerol como plastificante, óleo e S. aureus foi realizada pelo método de superfície em placas de petri com meio PCA. Após a colocação essencial como conservante e água como solvente. Foram usadas quatro formulações de soluções asséptica das amostras circulares dos filmes, de cada tratamento, com 10 mm de diâmetro, sobre a superfície filmogênicas: filme controle - 3,5% de amido de mandioca (base úmida, b.u.), 1% glicerol (b.u.) e 95,5% de água do meio de cultura vedaram-se as placas de petri com fita adesiva e as acondicionaram em estufas a 36°C por destilada e filmes com 1%, 5% e 10% de óleo essencial mantendo os teores de amido e glicerol e reduzindo as 24 horas. Realizaram-se as medições dos diâmetros dos halos de inibição formados para verificar a eficiência porcentagens de óleo no teor de água. antimicrobiana dos óleos em relação aos microrganismos inoculados previamente e depois a eficiência 2.2 Operações de Produção dos Filmes antimicrobiana dos filmes com adição dos óleos essenciais nas concentrações de 1%, 5% e 10%. Biodegradáveis A técnica identificada e usada na produção dos filmes foi o casting, que consistiu na desidratação da 2.4 Análise Visual e Resistência a Rasgo do Filme solução filmogênica aplicada sobre um suporte. Os ingredientes das formulações foram pesados e misturados A análise visual e a resistência ao rasgo baseouse em Sarantópoulos et al. (2002).Em dois corpos-deCiência e Cultura 95 Filmes biodegradáveis com óleos essenciais de laranja e canela: estudo sobre produção e inibição do crescimento de microrganismos* FERREIRA et al. prova de dimensionamento de 100cm2 de cada filme, de pontos relacionados com a aparência e a formação observaram-se cuidadosamente os seguintes critérios: coloração, aparência e textura das superfícies em contato da embalagem que podem influenciar no seu desempenho físico-mecânico. com o ambiente e com a placa de vidro. Na resistência ao rasgo utilizaram-se dois corpos-de-prova de Os filmes das diferentes formulações apresentaram características diferentes, sendo estas influenciadas pelo dimensão de 100cm2 de cada formulação. Avaliou-se a facilidade/ dificuldade encontrada para iniciar o rasgo teor de óleo essencial adicionado. Verificou-se um aumento da intensidade da cor – do filme manualmente, observou-se a aparência da amostra e a ocorrência do alongamento após a tentativa. amarelada nos filmes com óleo de laranja e castanha nos filmes com óleo de canela, oleosidade e aspereza da superfície em contato com o ambiente com o aumento da concentração de óleo essencial na formulação. Os 2.5 Análise Espessura do Filme filmes com óleos essenciais apresentaram odores semelhantes aos dos óleos usados. Realizaram-se medições da espessura dos filmes nas diferentes concentrações através de corpos-de-prova Apenas o filme controle se apresentou brilhante, os que tiveram adição de óleo essencial se apresentaram de aproximadamente 10cmx10cm livre de sujidades. Para as medições usou-se micrômetro. As leituras foram opacos. A resistência ao rasgo diminuiu com o aumento da concentração de óleo essencial, tanto para o de canela em cinco pontos diferentes de uma única amostra (SARANTÓPOULOS et al. , 2002). quando para o de laranja. Os resultados das análises visuais dos filmes biodegradáveis após um mês exposto ao ambiente externo indicaram que os filmes com adição de óleo RESULTADOS E DISCUSSÃO sofreram oxidação do pigmento, ficando todos com menor intensidade de coloração. Os filmes também Produziram-se filmes biodegradáveis a base de amido de mandioca sem óleo essencial (controle: amido ficaram mais ásperos. A resistência ao rasgo diminuiu para os filmes de mandioca, glicerol como plastificante, água destilada como solvente) e com óleo essencial de canela e laranja após trinta dias de exposição ao ambiente, e os filmes que continham óleo na formulação se apresentaram (agentes antimicrobianos) nas concentrações de 1%, 5% e 10%. quebradiços, mesmo com a adição de plastificante, sendo necessário realizar estudos em relação à concentração e O amido tem recebido especial atenção e as pesquisas com este polímero se intensificaram nos últimos outros plastificantes. O odor dos filmes com óleos essenciais foi diminuindo com o passar dos dias, anos, pois o amido possui baixo custo, abundância e alta aplicabilidade (BENGTSSON et al., 2003). indicando que ocorreu perda dos óleos durante armazenamento. Segundo Martins et al. (1997), os plásticos à base de amido apresentam grande potencial para aplicação A análise de espessura permite obter informações sobre as propriedades mecânicas e de barreira a gases em matrizes de liberação controlada de medicamentos e de pesticida com princípios semelhantes aos das e vapor de água. As médias das espessuras dos diferentes filmes embalagens ativas. foram: Filmes com óleo de laranja: 0%: 0,072mm; 1%: 3.1 Resultados da Análise Visual e da Espessura dos Filmes 0,202mm; 5%: 0,212%; 10%: 0,280mm. Filmes com óleo de canela: 0%: 0,070mm; 1%: A análise visual de embalagem permite a detecção 0,204mm; 5%: 0,226%; 10%: 0,268mm. A adição de óleo essencial na formulação 96 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB aumentou a espessura em relação ao filme controle. A v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 3.2 Análises Microbiológicas espessura foi aproximadamente quatro vezes maior na concentração de 10% no óleo de laranja e canela, devido A Tabela 1 apresenta a eficiência do óleo à presença de algumas gotículas de óleo no filme que não se dissolveram na solução. Isso é considerado essencial de canela em relação aos microrganismos testados. Levou-se em consideração que o óleo deslizou favorável, pois quanto maior a espessura maior a barreira a gases, umidade e aromas. pelo ágar favorecendo a formação de alguns halos não uniformes. Tabela 1: Análise da eficiência do Óleo de Canela nos diferentes microrganismos. Pode-se verificar que o óleo essencial de canela foi eficiente em relação aos microrganismos testados. A inibição do crescimento foi maior em relação a S. aureus (halo de 2,30cm). Verificou-se que o óleo essencial de laranja foi eficiente em relação aos microrganismos: Sthaphylococcus aureus e Salmonella (Tabela 2). Em relação à Escherichia coli não se pode confirmar a eficiência dos óleos, pois não houve crescimento da bactéria nas placas inoculadas. Tabela 2: Análise da eficiência do Óleo de Laranja nos diferentes microrganismos. Ciência e Cultura 97 Filmes biodegradáveis com óleos essenciais de laranja e canela: estudo sobre produção e inibição do crescimento de microrganismos* FERREIRA et al. Comparando-se os resultados dos halos obtidos A toxicidade apresentada pelos óleos essenciais para os dois óleos (S. aureus 2,30cm com óleo de canela e 0,53cm com o de laranja; Salmonella 2,10cm com o sobre alguns microrganismos pode ser devida à alta complexidade de sua composição química. Os óleo de canela e 0,81cm com o de laranja) identificouse que o óleo essencial de canela foi mais eficiente na grupamentos alcoóis, fenóis, ésteres, ácidos, aldeídos e terpenos podem explicar sua ação bacteriostática e/ou inibição do crescimento dos microrganismos. Bhavanani e Ballow (1992 apud LIMA, 2006) bactericida (NOGUEIRA et al., 2006). A tabela 3 apresenta as diferentes concentrações afirmam que cerca de 60% dos óleos essenciais possuem propriedades antifúngicas e 35% exibem propriedades do óleo essencial de canela presentes nos filmes e a eficácia em relação ao microrganismo Sthaphylococcus antibacterianas. aureus. Tabela 3: Análise da eficiência dos filmes com diferentes concentrações de Óleo de Canela nas em relação ao Sthaphylococcus aureus. O filme com 10% de óleo de canela foi o único eficiente em relação ao Sthaphylococcus aureus com halo formado de 0,96cm. A Tabela 4 apresenta os resultados da análise do óleo de canela nas diferentes concentrações com a Escherichia coli. Tabela 4: Análise da eficiência do Óleo de Canela nas diferentes concentrações e com o microrganismo Escherichia coli Verificou-se que, em relação ao microrganismo e 10% em relação ao microrganismo, pela formação dos Escherichia coli os filmes com óleo essencial de canela apresentaram grande eficiência na concentração de 5% halos com 1,32cm e 2,30cm respectivamente. A tabela 5 apresenta os filmes com óleo essencial de canela e a inibição de Salmonella. 98 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Tabela 5: Análise da eficiência dos filmes com Óleo de Canela nas diferentes concentrações em relação à Salmonella. Em relação à Salmonella ocorreu a formação de relação ao microrganismo testado. halo nas concentrações de 1%, 5% e 10%. Demonstrando que o óleo essencial de canela presente A tabela 6 apresenta os diferentes filmes com óleo essencial de laranja e a eficiência em relação ao nos filmes foi eficiente em pequenas proporções em microrganismo Sthaphylococcus aureus. Tabela 6: Análise da eficiência do Óleo de Laranja presente nos filmes de amido nas diferentes concentrações em relação à Sthaphylococcus aureus. Em relação à S. aureus observou-se que não ocorreu formação de halos em nenhuma das concentrações testadas, mostrando que o óleo de laranja presente nos filmes não foi eficiente frente ao Na tabela 7 estão os resultados da análise das diferentes concentrações do óleo essencial de laranja presente nos filmes de amido em relação ao microrganismo Escherichia coli microrganismo em questão. Tabela 7: Análise da eficiência do Óleo de Laranja presente nos filmes de amido nas diferentes concentrações em relação à Escherichia coli. Ciência e Cultura 99 Filmes biodegradáveis com óleos essenciais de laranja e canela: estudo sobre produção e inibição do crescimento de microrganismos* O filme com óleo de laranja em relação à E. coli demonstrou eficiência apenas na concentração de 10% com a formação do halo de 0,26cm. FERREIRA et al. A tabela 8 apresenta análise do óleo essencial de laranja presente nos filmes em relação à Salmonella. Tabela 8: Análise da eficiência do Óleo de Laranja nas diferentes concentrações nos filmes de amido em relação à Salmonella. Os filmes com óleo de laranja em à relação à eficiente com o halo de 0,97cm. A tabela 9 apresenta Salmonella demonstraram eficiência desde a menor concentração (1%) com a formação de um halo de todos os raios dos halos formados na análise dos filmes de amidos com óleos essenciais de canela e laranja 0,12cm até a maior concentração (10%) sendo mais quanto à inibição do crescimento de microrganismos. Tabela 9: Eficiências dos filmes de amido com óleos essenciais de canela e laranja. Comparando os resultados apresentados na tabela 9 concluiu-se que os filmes com óleo essencial de canela microrganismos (7 leveduras e 14 bactérias). Os óleos essenciais de maior atividade antimicrobiana foram: os foram mais eficientes na inibição dos microrganismos analisados, exceto para Salmonella na concentração de de canela e menta, nas concentrações de 10,0 e 1,0%. De acordo com Viegas et al. (2007) o óleo 5% de óleo. Hoffmann et al. (1999) determinaram a atividade essencial de canela possui um princípio ativo com ação fungicida. antimicrobiana in vitro de quatro óleos essenciais de condimentos e especiarias (canela, cravo, gengibre e Os compostos dos óleos essenciais foram capazes de prevenir o crescimento de microrganismos menta) da mesma marca comercial, em três diferentes concentrações (10,0; 1,0 e 0,1%), sobre vinte e um deterioradores e patogênicos, porém conferiram aos filmes odor e cor acentuados. 100 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB Segundo Soares (2002), um agente antimicrobiano ideal deve ser efetivo em um largo espectro e em baixas concentrações, não causar alterações nas características sensoriais do produto, ter um custo compatível e atender à legislação vigente. Os maiores desafios dessa tecnologia têm sido estabilidade térmica e eficácia a baixas temperaturas, o atendimento às exigências legais e o grau de alteração de propriedades físicas, mecânicas e de maquinabilidade dos filmes. A interação entre o produto antimicrobiano com o material do filme, o alimento e o ambiente também devem ser considerados para o seu uso (VENTURINI et al. ,2003). Ditchfield (2007) pesquisou a produção de filme plástico comestível, biodegradável e com propriedades antimicrobianas usando vários compostos que são conhecidos por apresentar atividade antimicrobiana, como mel, extrato de própolis, cravo e canela em pó, óleo essencial de laranja e café. Os testes mostraram que com a incorporação desses ingredientes, a resistência e a flexibilidade dos filmes podem ser alteradas, assim como a sua capacidade de proteção do produto em termos de barreira à umidade. Obteve os melhores resultados com o cravo e a canela. CONCLUSÃO O estudo sobre a produção de filmes biodegradáveis a base de amido de mandioca contendo óleos essenciais de canela e laranja como inibidor do crescimento de microrganismo permitiu as seguintes conclusões: os filmes controles se apresentaram com superfície brilhante, lisa e incolor; nos filmes com óleos essenciais quanto maior a concentração do óleo maior a opacidade, aspereza e intensidade da cor, sendo marrom para o óleo de canela e amarela para o óleo de laranja; a resistência ao rasgo diminui com o aumento das concentrações dos óleos essenciais; a adição de óleo essencial na formulação aumentou a espessura dos filmes em relação ao filme controle; os filmes de amido com óleo essencial de canela na concentração de 1% inibiu o crescimento de Salmonella; na concentração de 5% inibiu o crescimento de E. coli e Salmonella; na concentração de 10% inibiu o crescimento de S. aureus, v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 E. coli e Salmonella; os filmes de amido com óleo essencial de laranja nas concentrações de 1% e 5% inibiu o crescimento de Salmonella; na concentração de 10% inibiu o crescimento de E. coli e Salmonella; o óleo essencial de laranja presente nos filmes de amido a 1%, 5% e 10% não inibiu o crescimento de S. aureus; os filmes com adição de óleo essencial de canela foram mais eficientes na inibição do crescimento de S. aureus, Salmonella e E. coli. 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Fábio Luiz Scannavino - Professor do curso de Odontologia da UNIFEB - Rua Jesuíno de Arruda, 1968 – apto 22 – Centro - CEP 13560-642 - São Carlos – SP – Brasil - Telefones: +55 17 3322 1360 | +55 16 8163 4470 e-mail: [email protected] RESUMO A amelogênese imperfeita é um defeito na formação do impedindo-o de se alimentar adequadamente bem como esmalte dentário caracterizado por uma heterogeneidade clínica e genética. O esmalte é afetado com alta realizar a higienização bucal. Após o planejamento do tratamento foi proposto sessões de profilaxia, aplicação variabilidade desde a deficiência na formação até os defeitos no conteúdo mineral e protéico, atingindo tanto tópica de fluoreto de sódio e aplicação de cimento de ionômero de vidro em todos os dentes, por sextantes. a dentição decídua quanto a permanente. O presente trabalho tem como objetivo realizar uma revisão de O tratamento proposto foi considerado um sucesso, pela melhora nas condições de alimentação e da higiene bucal literatura e apresentação do caso clínico de amelogênese imperfeita, de um paciente com 11 anos de idade, gênero do paciente, proporcionando assim, qualidade de vida. masculino que compareceu à Clínica Infantil da Faculdade de Odontologia de Barretos, relatando grande Descritores: Amelogênese imperfeita, Dentição sensibilidade em todos os dentes permanentes, permanente, Assistência paliativa. ABSTRACT The amelogenesis imperfect is a defect in the dental enamel formation characterized by a clinical and genetic After the planning of the treatment it was proposed prophylaxis sessions, application of fluoride of sodium heterogeneity. The enamel is affected with high variability from the deficiency in the formation to defects in the and application of cement of glass ionomer in all the teeth for sextants. The proposed treatment was considered a mineral content and protein, reaching the deciduous teeth as for permanent. The aim of the study was accomplishes success, for the improvement in the feeding conditions and of the patient’s oral hygiene, providing like this, life a literature revision and clinical case of amelogenesis imperfect of a patient with 11 years-old that was attended quality. in the Pediatric Clinic of Dentistry University in Barretos, with sensibility in all the permanent teeth, impeding him Keywords: Amelogenesis imperfect, Dentition of feeding appropriately as well as to accomplish the oral. permanent, Palliative care. Ciência e Cultura 105 Amelogênese imperfeita: Alternativa de tratamento INTRODUÇÃO FERREIRA et al. transcrevem as principais proteínas de matriz e as O esmalte dentário em condições de normalidade proteinases do esmalte têm sido associadas com fenótipos de amelogênese imperfeita, que também pode é constituído, em sua maior parte de material inorgânico (96%), além de uma matriz orgânica e água (4%) ocorrer frequentemente em um pequeno número de síndromes (HALL et al., 1995; MCDONALD e AVERY, (NEVILLE et al., 1995). É a estrutura dentária de maior dureza existente no corpo, caracterizado clinicamente 1985; WRIGHT et al., 2006. O tratamento e prognóstico são altamente por uma superfície lisa e brilhante, o que justifica a identificação de possíveis alterações, quando as mesmas variáveis, estando atrelados com o grau de desenvolvimento do esmalte dentário e as implicações ocorrem (HARNDT e WEYERS, 1995; TUGRUL e USUMEZ, 2003). clínicas, isto é, ao subtipo e a gravidade da amelogênese. Outros fatores também fazem parte, incluindo a idade A amelogênese imperfeita é um defeito na formação do esmalte dentário, caracterizado pela do paciente, o padrão sócio econômico e a situação bucal na época do desenvolvimento do tratamento. heterogeneidade clínica e genética. O esmalte é afetado com alta variabilidade desde a deficiência na formação Os principais problemas decorrentes da amelogênese imperfeita são os comprometimentos da até os defeitos no conteúdo mineral e protéico. Mesmo sendo complexas as condições que demonstram estética, a sensibilidade e a perda da dimensão vertical. Além disso, em alguns casos de amelogênese imperfeita modificações no desenvolvimento da estrutura dentária, as mesmas não estão necessariamente, associadas a há um aumento da incidência de lesões cariosas, a mordida aberta anterior, o irrompimento retardado, a doenças sistêmicas. A distribuição dos tipos de amelogênese imperfeita varia em diferentes populações, impactação de dentes e a inflamação gengival associada (NEVILLE et al., 1995; OZTURK et al., 2004). oscilando de 1:700 até 1:16000, dependendo da população e as diferenças de freqüências entre as etnias O presente trabalho tem como objetivo apresentar um caso clínico realizado na clínica de Odontopediatria (GUEDES-PINTO, 2000; ROBINSON e HAUBENREICH, 2006; SANTOS e LINE, 2005; do curso de Odontologia da UniFEB, sobre amelogênese imperfeita, bem como uma proposta de tratamento ZILBERMAN et al., 2004). Quanto aos graus de severidade, a amelogênese provisório. imperfeita pode ser classificada em três tipos principais: a amelogênese hipoplásica, na qual há uma redução na CASO CLÍNICO quantidade de esmalte, mas a mineralização é relativamente satisfatória; a hipocalcificada, na qual o Paciente com 11 anos de idade, gênero masculino, esmalte é formado em quantidades relativamente normais, mas é pobremente mineralizada e, a última, em compareceu à Clínica Infantil do Curso de Odontologia do Centro Universitário da Fundação Educacional de que os estágios finais do processo de mineralização são normais, denominada hipomaturada (KENNEDY, 1985; Barretos - UniFEB, relatando grande sensibilidade em todos os dentes, impossibilidade de alimentar-se MACEDO et al., 2005; STEPHANOPOULOS et al., 2005). adequadamente, assim como de higienizar os dentes. Durante o preenchimento do questionário de saúde não O esmalte anormal ou imperfeito pode atingir todos os dentes, tanto na dentição decídua quanto na foi observado alterações sistêmicas relevantes. A gestação transcorreu sem nenhum problema. A criança permanente. A herança genética aponta o autossomo dominante como principal alvo, no entanto, não se nasceu a termo por parto natural e sem complicações. O paciente recebeu o aleitamento no peito materno descarta a possibilidade de atingir o autossomo recessivo. Diferentes mutações nos genes que durante um mês de vida e posteriormente fez uso da mamadeira até os dois anos de idade. 106 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 Quanto à saúde bucal, o paciente teve uma Após o planejamento do tratamento foi proposto experiência negativa durante as visitas ao cirurgiãodentista, e sendo assim, nunca havia recebido tratamento sessões de profilaxia e aplicação tópica de flúor gel acidulado 1,23% (Odahcam - Dentisply® Indústria e adequado para a alteração dentária diagnosticada. No aspecto psicológico, o paciente no ambiente clínico tem Comércio, Rio de Janeiro, RJ - Brasil). Na sessão seguinte paciente retornou à clínica por hábito a onicofagia e comportamento tímido, de tristeza e ansiedade. O paciente apresentava dicção, relatando melhora na sensibilidade principalmente a térmica. Foi realizada nas sessões subseqüentes a fonação, deglutição e mastigação normais, com respiração mista e transtornos quanto à acuidade visual. aplicação do cimento de ionômero de vidro (Meron®, Voco Cuxhaven - Germany) em todos os dentes, por Durante o exame clínico observou grande sensibilidade, devido à amelogênese imperfeita em todos os dentes sextantes, seguindo as instruções do fabricante (FIGURA 3). Ao longo do tratamento, o paciente apontava melhora permanentes, além de apresentar sangramento gengival (FIGURA 1). O exame radiográfico demonstrou uma significativa tanto na sensibilidade térmica como na mecânica. característica peculiar aos dentes atingidos, com a ausência de radiopacidade do esmalte dentário e O paciente é monitorado semanalmente, e quando necessário, realiza-se complementação do cimento de irregularidade na superfície radicular (FIGURA 2). ionômero de vidro até o tratamento definitivo. Figura 1: Aspecto clínico inicial da amelogênese imperfeita em todos os dentes permanentes. Figura 2: Aspecto radiográfico. Ciência e Cultura 107 Figura 3: Após a realização do tratamento paliativo com cimento ionomérico de vidro. RESULTADOS E DISCUSSÃO clínico mais preciso (ALDRED et al., 2002; KIM et al., 2006; STEPHANOPOULOS et al., 2005). A amelogênese imperfeita é uma hipoplasia hereditária do esmalte dentário, provavelmente causada Por isso a elucidação dos defeitos moleculares associados com amelogênese imperfeita continua a por distúrbios generalizados dos ameloblastos, com o comprometimento de todos os dentes, sendo que a expandir nosso entendimento de heterogeneidade clínica e genética deste grupo de doenças hereditárias. dentina, o cemento e a polpa apresentam aspecto de normalidade. A amelogênese imperfeita afeta a Sobre as causas da amelogênese imperfeita, não observamos nenhuma alteração local ou sistêmica no composição do esmalte dos dentes tanto em qualidade, quanto em quantidade e está associada diretamente com período que antecedeu o irrompimento dos dentes permanentes, contrastando com o estudo de Borsatto a má formação da coroa dentária e a densidade do esmalte anormal (ROBINSON e HAUBENREICH, et al. (2004) em que a influência de possíveis alterações na época de desenvolvimento do órgão dentário, durante 2006). No presente caso clínico, ao realizarmos o o estágio de histodiferenciação, levou a formação irregular ou deficiente de esmalte. preenchimento do questionário de saúde, nenhuma alteração sistêmica relevante no paciente ou história Nesse caso clínico a sintomatologia dolorosa foi o aspecto mais relevante para a procura de atendimento pregressa que pudesse comprometer o funcionamento adequado das funções vitais foi observado ou relatado odontológico do paciente à clínica odontológica, por impedi-lo de realizar uma alimentação e higienização pelo responsável. Ao investigarmos o histórico familiar, nenhum caso semelhante de amelogênese imperfeita foi bucal adequadas, corroborando com Turkun (2005), que relatou como um dos principais problemas clínicos da encontrado na família. Contudo a literatura científica mostra que a relação amelogênese imperfeita, a alta sensibilidade dos dentes acometidos. entre a hereditariedade e a amelogênese imperfeita provavelmente está na dependência do fenótipo do gene Ao exame clínico observou-se que todos os dentes da série permanente estavam comprometidos, com envolvido e a conseqüente mudança no nível protéico. A alteração nos genes regulatórios gera um distúrbio ausência total de esmalte dentário e uma coloração amarelo-acastanhada. A identificação da amelogênese genético manifestado precocemente e que atrasa o desenvolvimento dos dentes. Os genes e as proteínas imperfeita pode ser feita primeiramente por meio do exame clínico, devendo-se realizar um diagnóstico envolvidos na amelogênese imperfeita reforçam e auxiliam no conhecimento das mutações genéticas associadas aos diferencial quando a abrasão estiver razoavelmente avançada. vários tipos de amelogênese, pois as características clínicas são semelhantes, o que dificulta o diagnóstico Ao exame radiográfico observamos a ausência da camada radiopaca de esmalte e a irregularidade da 108 Ciência e Cultura CIÊNCIA E CULTURA - Revista Científica Multidisciplinar do Centro Universitário da FEB v. 4, nº 1, Junho/2009 - ISSN 1980 - 0029 superfície radicular. Milles et al. (1991) relataram que o imperfeita requer tratamento odontológico extensivo, que aspecto radiográfico da amelogênese imperfeita apresenta um esmalte delgado seguido clinicamente de duram muitos anos, incluindo diversas fases restauradoras, algumas vezes acompanhadas por uma perda do contato normal dos dentes adjacentes. Os dentes são reconhecidos pela ausência de imagem tratamentos ortodônticos e cirúrgicos. Faz-se importante salientar que as restaurações diretas só foram possíveis radiopaca que difere do esmalte dos dentes normais, assim Law et al. (1993) também demonstraram em uma devido a um avanço da tecnologia na área da Odontologia, com a comprovada eficácia dos sistemas série de radiografias, o irrompimento retardado dos dentes permanentes de um paciente com hipoplasia adesivos (AYERS et al., 2004; KRAUTGARTNER et al., 2006; TOLEDO, 1996; TUGRUL e USUMEZ, dentária, e a presença de uma camada de esmalte muito fina na radiografia. 2003). Para Hall et al. (1995) estudos ultraestruturais concluíram que o tipo hipoplásico da amelogênese imperfeita cobre um espectro de anormalidades da forma do esmalte, nas quais defeitos da matriz primária parecem CONCLUSÃO existir. Histologicamente, Guedes-Pinto (2000) descreve que o dente com amelogênese imperfeita possui uma O tratamento proposto para o paciente portador de amelogênese imperfeita, apesar de alternativo e de matriz de esmalte inadequadamente formada, embora a mineralização subseqüente ocorra de maneira normal, urgência, foi considerado um sucesso, principalmente na melhora da sintomatologia dolorosa, nas condições para tornar a estrutura do esmalte clinicamente dura, porém defeituosa na quantidade (espessura) e a bucais e, sobretudo na qualidade de vida. superfície, que se apresenta rugosa, com pontos ou fissuras verticais e horizontais anômalas. REFERÊNCIAS Após o diagnóstico, o plano de tratamento foi proposto de acordo com as necessidades específicas 1. ALDRED, M.J.; SAVARIRAYAN, R.; desse caso clínico, em que o tratamento de urgência priorizava atenuar a sintomatologia dolorosa, optou-se LAMANDÉ, S.R.; CRAWFORD, P.J.M. Clinical and radiographic features of a family with autosomal dominant pela realização da restauração provisória com o cimento de ionômero de vidro, que proporcionou um resultado amelogenesis imperfecta with taurodontism. Oral Disease, Copenhagen, v.8, n.1, p.62-68, 2002. satisfatório também em termos de função. Mondelli et al. (2001) relataram a importância da 2. AYERS, K.M.S.; DRUMMOND, B.K.; aparência estética no convívio social diário e para a saúde psicológica dos pacientes com amelogênese imperfeita. HARDING, W.J.; SALIS, S.G.; LISTON, P.N. Amelogenesis imperfecta - multidisciplinary management Para Ozturk et al. (2004) a restauração dos dentes com amelogênese imperfeita extrapola a preocupação estética from eruption to adulthood. Review and case report. New Zeland Dental Journal, Auckland, v.100, n.4, p.101-104, e funcional e age diretamente no psicológico no paciente. Borsatto et al. (2004) afirmaram ainda que o 2004. tratamento da amelogênese imperfeita depende da sua gravidade e da necessidade de melhorar a estética, 3. BORSATTO, M.C.; ORTOLAN, A.S.; SILVA, J.M.G. Amelogênese imperfeita em gêmeos podendo ser realizado desde tratamentos conservadores até restaurações em resina composta. univitelínicos. In: JORNADA ODONTOLÓGICA DE RIBEIRÃO PRETO, 26., 2004, Ribeirão Preto. Anais... É importante ressaltar que a utilização da terapêutica reabilitadora nos casos de amelogênese Ribeirão Preto: Universidade de São Paulo; 2004. p. 84. Ciência e Cultura 109 4. GUEDES-PINTO, A.C. Odontopediatria. 1ª ed. São Paulo: Santos; 2000. número de páginas. 13. MILLES, V.D.; KAUGARS, L. Oral and Maxillofacial Radiology. 6ª ed. California: Library; 1991. número de páginas. 5. HALL, R.K.; PHAKEY, P.; PALAMARA, J.; McCREDIE, D.A. 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