Métodos estatísticos na avaliação da eficácia de medicamentos anti-helmínticos em
ovinos naturalmente infectados
Walter Bertequini Nagata1
Carlos Noriyuki Kaneto2
Silvia Helena Venturoli Perri2,3
1 – Introdução
O conhecimento estatístico, sem dúvida, é instrumento essencial para a análise de
dados de uma pesquisa. Independente da área em que se trabalha, saber utilizar os
fundamentos estatísticos na metodologia científica torna a experimentação otimizada e mais
confiável, conforme as especificações desejadas5.
É importante ressaltar que, dependendo da natureza dos dados obtidos em uma
pesquisa científica, haverá testes estatísticos específicos mais apropriados para analisa-los7.
Os testes estatísticos podem ser divididos em dois grupos: paramétricos e não
paramétricos. O primeiro tipo de teste se baseia em parâmetros da distribuição da variável,
geralmente distribuição normal e é mais exigente. Enquanto o segundo tipo, independe da
distribuição da variável e é usado para variáveis categóricas e quantitativas que não podem ser
estudadas por testes paramétricos4.
De uma maneira singular, observa-se que esse tipo de interdisciplinaridade tem
demonstrado grandes avanços em várias áreas de pesquisa, como a Medicina Veterinária. A
Parasitologia Veterinária, por exemplo, é uma área que precisa caminhar em união com a
Estatística em suas experimentações.
O auxílio da Estatística na avaliação dos dados referentes ao controle da verminose
gastrintestinal em ovinos (utilizando-se anti-helmínticos) dá condições a pesquisadores de
desenvolver e optar por maneiras mais eficientes de se combater esse problema. Em vista da
grande diversidade de alternativas de controle de verminose que o mercado disponibiliza,
saber qual medicamento (anti-helmínticos) é o mais eficaz a partir de uma dose recomendada,
evita que casos de dosagens excessivas e, consequentemente, resistência ao fármaco surja
nessa criação.
1
Graduando da FMVA - UNESP (Bolsa FAPESP)
DAPSA - FMVA - UNESP
3
e-mail: [email protected]
2
O uso abusivo de anti-helmínticos proporciona a seleção de vermes com diversidade
biológica (características genéticas e fisiológicas), que os tornam tolerantes à determinada
dose de anti-helmíntico3,6.
É importante conhecer os métodos estatísticos aplicados na experimentação animal
bem como a utilização correta de tais técnicas. Certamente, isso proporcionará uma melhor
aplicabilidade da estatística em trabalhos científicos.
O objetivo desta pesquisa científica foi avaliar a eficácia de medicamentos antihelmínticos atualmente disponíveis comercialmente, utilizando testes estatísticos adequados,
dependendo da natureza dos dados e das pressuposições dos testes, na avaliação do OPG.
2 – Material e Métodos
Os animais foram selecionados de cinco criatórios comerciais de ovinos com ou sem
histórico de resistência anti-helmíntica. Em cada criatório foram selecionados da maneira
mais homogênea possível, 70 animais de uma mesma faixa etária, padrão racial, peso
corporal, estado nutricional, dieta alimentar e número de ovos de nematóides por grama de
fezes - OPG acima de 500.
Os animais foram distribuídos randomicamente em sete grupos experimentais com 10
animais cada. Aleatoriamente, para cada grupo experimental, foi destinado por sorteio, uma
droga a ser administrada de acordo com a recomendação do fabricante, permanecendo um
grupo como controle.
As contagens de OPG de cada animal no dia do tratamento (dia 0) e dez dias póstratamento (dia 10), foram realizadas de acordo com a técnica de Gordon e Witlock
modificada2.
A porcentagem de redução de OPG foi calculada pela fórmula:
% Redução de OPG = (1 – XT10/XT0 * XC0/XC10) * 100
onde XT e XC são as médias aritméticas das contagens do dia 0 ou dia 10 para o grupo
tratado ou controle, respectivamente.
Os resultados de OPG foram submetidos à análise estatística conforme a natureza
desses dados (Figura 1), por meio dos programas estatísticos SAS versão 9.28 e GraphPad
InStat versão 3.101, e consideradas significativas quando P < 0,05;
Dados de OPG
Atendem as
pressuposições da
ANOVA
Não atendem as
pressuposições da
ANOVA
Análise de variância e
teste de Tukey
Dados transformados
em log
Atendem as
pressuposições da
ANOVA
Análise de variância e
teste de Tukey
Não atendem as
pressuposições da
ANOVA
Testes de KruskalWallis e comparação
múltipla de Dunn
Figura 1. Esquema da escolha do teste estatístico para análise de dados da OPG
3 – Resultados e discussão
Os dados de OPG foram submetidos à análise estatística conforme a natureza desses
dados por meio de programas estatísticos (SAS versão 9.2 e GraphPad InStat versão 3.10).
Dessa forma, após a realização dos testes de normalidade e homogeneidade de variâncias,
verificou-se que esses dados de OPG não atendiam a pressuposições da ANOVA (nem após a
transformação dos dados em log), pois apresentaram altos desvios padrão. Assim analisaramse os dados com o teste de Kruskal-Wallis seguido do teste de comparações múltiplas de
Dunn.
No Criatório 1 houve diferença significativa (P<0,05) entre o grupo Controle e o grupo
Cydectin; no Criatório 2, verificou-se diferença significativa (P<0,05) entre o grupo Controle
e os grupos Cydectin, Diantel e Trimix; no 3, houve diferença significativa (P<0,05) entre o
grupo Controle e os grupos Levamisol, Cydectin e Diantel; no 4, houve diferença significativa
(P<0,05) entre o grupo Controle e os grupos Levamisol, Cydectin, Diantel e Trimix; e no 5,
encontrou-se diferença significativa (P<0,05) entre o grupo Controle e os grupos Levamisol,
Cydectin e Diantel (Tabela1). É importante ressaltar que, esses grupos apresentaram
diferenças significativas em relação ao grupo Controle, mas não entre si, ou seja, tiveram
estatisticamente a mesma eficácia. Da mesma forma, os grupos Valbazen, Levamisol, Ivomec,
Diantel e Trimix no Criatório 1, Valbazen, Levamisol, Ivomec no 2, Valbazen, Ivomec e
Trimix nos 3 e 5, Valbazen e Ivomec no 4 apresentaram eficácia moderada e não
apresentaram diferença significativa entre si (P>0,05). Apenas o Trimix, no Criatório 4,
apresentou eficácia baixa (Tabela1).
Dos seis tratamentos testados, o Cydectin com 90,6% de redução de OPG é o que
apresenta melhor eficácia, seguido do Levamisol com 90,3% , Diantel com 88,1%, Trimix
com 82,1%, Valbazen com 78,6% e por último o Ivomec com 61,7%.
Tabela 1. Média ( x ), desvio padrão (S) e mediana (Md) de ovos por grama de fezes (OPG),
segundo os grupos em cada criatório.
Criatório 1
Grupo
xS
Controle
Valbazen
Levamisol
Ivomec
Cydectin
Diantel
Trimix
a, b
3255  3871
565  715
180  193
1760  4293
335  654
670  1170
535  816
Md
1350 a
450 ab
100 ab
300 ab
25 b
175 ab
25 ab
Criatório 2
x
S
4175  5093
1280  1955
820  1230
885  1382
380  634
330  398
394  608
Md
1700 a
650 ab
325 ab
350 ab
125 b
225 b
25 b
OPG
Criatório 3
Md
x S
2625  2762 1550 a
450 ab
685  886
300 b
420  663
530  645
425 ab
315  772
75 b
150 b
340  396
575 ab
899  1105
Criatório 4
x
S
3980  4460
825  1165
160  309
895  656
135  180
290  336
150  338
Md
1900 a
475 ab
50 b
900 ab
100 b
100 b
25 c
Criatório 5
x
S
3990  4061
495  395
120  106
2895  5440
475  1038
415  434
990  1715
Md
1775 a
400 ab
125 b
1225 ab
75 b
300 b
325 ab
Medianas seguidas de letras distintas, na coluna, diferem entre si pelo teste de Dunn (P < 0,05).
Não são todos os medicamentos anti-helmínticos disponíveis no mercado que têm
eficácia e condições de combater a verminose gastrointestinal dos pequenos ruminantes. Isso
acontece, porque não só o uso abusivo de anti-helmínticos9, como também a falta de
informações básicas sobre a utilização desses fármacos nos rebanhos, proporcionou um
aumento significativo de vermes resistentes a determinados anti-helmínticos (principal
estratégia para o combate e controle desses vermes gastrointestinais10).
VERISSIMO, et al.10 observaram que o Levamisol tem a menor taxa de resistência, ou
seja, é um dos mais eficazes e o Valbazen e Ivomec têm maiores taxas de resistência - eram
menos eficazes, resultados similares foram observados no presente estudo. É importante
lembrar que, variáveis como tempo e manejo, podem influenciar alterações no número de
ovos por grama de fezes.
4 – Conclusão
Os resultados obtidos mostram a necessidade de realizar pesquisas a respeito da
resistência de vermes a anti-helmínticos e incrementar o emprego de ações que visem
diminuir a propagação dessa ocorrência nos rebanhos ovinos. O conhecimento das técnicas
estatísticas é de fundamental importância para a correta análise e interpretação dos dados.
5 – Bibliografia
[1] GraphPad InStat versão 3.10, GraphPad Software Inc., San Diego California USA, em:
< www.graphpad.com>.
[2] LUMINA G.; BRICARELLO P. A.; GOMES J. F.; AMARANTE A. F. T. Avaliação do
kit “TF-Test” para o diagnóstico das infecções por parasitas gastrintestinais em ovinos. Braz.
J. vet. Res. anim. Sci., São Paulo, v. 43, n. 4, p. 496-501, 2006.
[3] PRICHARD, R. K. Anthelmintic resistance in nematodes: extent, recent understanding
and future directions for control and research. International Journal for Parasitology, v. 20,
n. 4, p. 515-523, 1990.
[4] REIS, G. M., JUNIOR, J. I. R. Comparação de testes paramétricos e não paramétricos
aplicados em delineamentos experimentais. III SAEPRO, UFV, 2007.
[5] RODRIGUES, M. I.; IEMMA, A. F. Planejamento de Experimentos e Otimização de
Processos – 2ª Ed. Campinas - SP, Cárita Editora, 2009.
[6] RUFENER L.; MASER P.; RODITI I.; KAMINSKY R. Haemonchus contortus
Acetylcholine Receptors of the DEG-3 Subfamily and Their Role in Sensitivity to
Monepantel. PLoS Pathogens. v. 5, n. 4, p.e 1000380 , 2009.
[7] SAMPAIO, I. B. M. Estatística Aplicada à Experimentação Animal. 3ª ed., Belo
Horizonte, UFMG, 2007, cap. 18, p. 207-221.
[8] SAS Institute Inc. The SAS System, release 9.2. SAS Institute Inc., Cary:NC, 2008.
[9] SILVESTRE A.; LEIGNEL V.; BERRAG B.; GASNIER N.; HUMBERT J. F.;
CHARTIER C.; CABARET J. Sheep and goat nematode resistance to anthelmintics: pro and
cons among breeding management factors. Vet. Res. V. 33, p. 465 – 480, 2002.
[10] VERISSIMO C. J.; NICIURA S. C. M.; ALBERTI A. L. L.; RODRIGUES C. F. C.;
BARBOSA C. M. P.; CHIEBAO D. P.; CARDOSO D.; SILVA G. S.; PEREIRA J. R.;
MARGATHO L. F. F.; COSTA R. L. D.; NARDON R. F.; UENO T. E. H.; CURCI V. C. L.
M.; MOLENTO M. B. Multidrug and multispecies resistance in sheep flocks from Sao Paulo
state, Brazil. Veterinary Parasitology v. 187, p. 209 – 216, .2012.