Rev Panam Infectol 2011;13(3):26-31. artículo original/artigo original Prevalência microbiana em culturas diversas de amostras clínicas obtidas de pacientes internos na Unidade de Terapia Intensiva (UTI) do Hospital de Urgência e Emergência de Rio Branco (HUERB) - Acre Microbial prevalence in different cultures from clinical samples obtained from inpatients in the Intensive Care Unit (ICU) of Hospital Urgency and Emergency, Rio Branco (HUERB) - Acre Rosemeiry Moreira da Silva1 Luis Edgardo Riveros Aguilar1 Fabiane Brasil de Mendonça2 Flávio Buratti Gonçalves3 Biomédica(o), Laboratório Central de Saúde Pública, Acre, Brasil - Especialista em Microbiologia e Imunologia Clínica. 2 Farm. Bioquímica, Assessora Científica da Real Diagnóstica, Brasil. Especialista em Microbiologia e Imunologia Clínica. 3 Biomédico. Prof. Pesquisador da Faculdade Metodista de São Paulo e Universidade Paulista, Brasil - Mrs. em Saúde Pública. 1 Rev Panam Infectol 2011;13(3):26-31 Conflicto de intereses: ninguno Recibido en 7/4/2011. Aceptado para publicación en 22/7/2011. 26 Resumo Introdução: As doenças infecciosas estão entre as mais prevalentes nas Unidades de Terapia Intensiva (UTI), onde existem fatores propícios ao surgimento de infecções, estando estas associadas com o tempo de internação, alto custo e maiores taxas de morbimortalidade. Objetivos: Verificar a prevalência e o perfil de suscetibilidade dos isolados bacterianos de pacientes internos na Unidade de Terapia Intensiva do Hospital de Urgência e Emergência de Rio Branco – Acre, Brasil. Metodologia: Foi realizado um estudo prospectivo e descritivo no período de janeiro a dezembro de 2008, a partir de 213 amostras (132 de aspirado traqueal, 34 de ponta de cateter, 28 de secreções diversas e 19 de líquido pleural), processadas e analisadas no Setor de Microbiologia Clínica do Laboratório Central do Estado do Acre (LACEN). Resultados: Dentre as amostras processadas, 68/132 (51,5%) das amostras de aspirado traqueal foram positivas para bactérias potencialmente patogênicas, dentre as quais destacou-se com maior prevalência Acinetobacter sp com 17,6%. Das 14/34 amostras de cateter positivas (41,2%), 35,3% foram para Staphylococcus coagulase negativo e 21,4% para Pseudomonas aeruginosa, das 28 amostras de secreções, 16 (57,2%) foram positivas, destacando a Escherichia coli e a Citrobacter sp, ambas com 18,7%; não houve amostras positivas nas culturas de líquido pleural processadas. Em relação ao perfil de suscetibilidade, 83,3% dos isolados de Acinetobacter sp, provenientes de aspirado traqueal apresentaram resistência a ceftazidima, em amostras de cateter o Staphylococcus coagulase negativo mostrou-se sensível a tetraciclina e vancomicina e resistente a oxacilina, penicilina, cefalotina e eritromicina. Escherichia coli e Citrobacter sp isoladas de amostras de secreções diversas apresentaram alta resistência a ampicilina e ampicilina/ sulbactam. Discussão e Conclusão: A resistência aos antimicro- Silva RM, et al • Prevalência microbiana em culturas diversas de amostras clínicas... bianos é uma ameaça a saúde pública mundial e está associada a uma maior morbi-mortalidade. O estudo aponta para uma frequência elevada de infecção por SCN, e para a necessidade de intensificar as pesquisas acerca deste patógeno, em relação a prevalência e ao perfil de suscetibilidade. Atualmente são reconhecidos como importantes agentes etiológicos e não meros contaminantes. É importante estabelecer medidas de contenção e de controle, coordenados entre o corpo clínico, a Comissão de Controle de Infecção Hospitalar (CCIH) e o Laboratório de Microbiologia, a fim de minimizar os casos e adequar a conduta terapêutica. Palavras-chave: Infecção hospitalar, patógenos, antimicrobianos. Abstract Introduction: Infectious diseases are among the most prevalent in the Intensive Care Unit (ICU), where there are factors favoring the development of infections, as those associated with the length of hospitalization, high cost and higher rates of morbidity and mortality. Objectives: To investigate the prevalence and susceptibility profile of bacterial isolates from inpatients in the Intensive Care Unit of Hospital Urgency and Emergency of Rio Branco – Acre, Brazil. Methods: We conducted a prospective and descriptive study, in the period January to December 2008 from 213 samples (132 tracheal aspirate, catheter tip 34, 28 from different secretions and 19 of pleural fluid) were processed and analyzed at the Department of Microbiology Central Laboratory of State of Acre (LACEN). Results: Among the analyzed samples, 68/132 (51.5%) of tracheal aspirate samples were positive for potentially pathogenic bacteria, among which stood out with the highest prevalence with 17.6% Acinetobacter sp. From 14/34 samples positive catheter (41.2%), 35.3% were Staphylococcus coagulasis negative and 21.4% for Pseudomonas aeruginosa, from 28 samples of secretions, 16 (57.2%) were positive, highlighting the Escherichia coli and Citrobacter sp, both with 18.7%, there were no positive samples in the cultures of pleural fluid processed. Regarding the profile of susceptibility, 83.3% of isolates of Acinetobacter sp, from tracheal aspirate were resistant to ceftazidime, in samples of catheter Staphylococcus coagulasis negative was found to be sensitive to tetracycline and vancomycin and resistant to oxacillin, penicillin, erythromycin and cephalothin. Escherichia coli and Citrobacter sp isolated from various secretions showed high resistance to ampicillin and ampicillin/sulbactam. Discussion and Conclusion: Antimicrobial resistance is a threat to public health worldwide and is associated with greater morbidity and mortality. The study points to a high frequency of infection with SCN, and the need to intensify research about this pathogen, to determine prevalence and susceptibility profile. Are now recognized as important etiologic agents and not mere contaminants. It is important to establish containment and control, coordinated between the clinical staff, the Commission on Hospital Infection Control (HICC) and the Microbiology Laboratory in order to minimize the cases and adjust the therapy. Key words: Nosocomial infection, pathogens, antimicrobial. Introdução O Ministério da Saúde define infecção hospitalar como aquela adquirida após a admissão do paciente e cuja manifestação ocorreu durante a internação ou após a alta, podendo ser relacionada com a internação ou procedimentos hospitalares.(1,2) Diferentemente do que ocorre com as infecções comunitárias que são constatadas no ato da admissão do paciente, desde que não sejam relacionadas à internação anterior no mesmo hospital.(2) Os principais patógenos-problemas da América Latina são Staphylococcus aureus Resistente a Meticilina (MRSA), Klebsiella pneumoniae produtora de ESBL, Acinetobacter resistente aos carbapenêmicos, além dos não fermentadores, como Acinetobacter sp e Pseudomonas aeruginosa. Essa é a visão microbiológica da resistência bacteriana.(3) Nos EUA, entre os anos de 1998 a 2003, notouse um aumento de 12% na resistência de amostras de Staphylococcus aureus à oxacilina, e de Enterococcus sp à vancomicina. Entre as enterobactérias, um aumento de até 47% na resistência às cefalosporinas de terceira geração em amostras de Klebsiella pneumoniae.(4) Os antimicrobianos são produtos capazes de destruir micro-organismos ou de suprimir sua multiplicidade ou crescimento. Dois tipos de produtos denominamse antimicrobianos: antibióticos - antimicrobianos produzidos por micro-organismos (bactérias, fungos e actinomicetos) e quimioterápicos - antimicrobianos sintetizados em laboratório.(5) Multirresistência é a resistência dos micro-organismos, principalmente bactérias, a um ou mais agentes antimicrobianos. Os micro-organismos tornam-se resistentes por mutações cromossomiais ou por heranças de genes, mais frequentemente via conjugação e transferência de plasmídeos.(6) De acordo com Curcio,(3) os pacientes que estão infectados por micro-organismos multirresistentes têm uma taxa de mortalidade maior que os infectados por bactérias sensíveis. A mortalidade está mais relacionada com o tratamento inapropriado recebido pelos pacientes do que com a bactéria multirresistente. Segundo Oplustil et al.,(7) as infecções relacionadas 27 Rev Panam Infectol 2011;13(3):26-31. a cateteres geralmente apresentam no seu local de inserção sinais inflamatórios, como enduração, presença de pus, entre outros. Em algumas situações, devido o paciente estar apresentando febre e nenhum outro foco infeccioso a ser detectado, suspeita-se de possível infecção do cateter, o que motiva sua remoção para a realização de cultura. As infecções do trato inferior incluem uma grande variedade de etiologias, principalmente virais e bacterianas, variando clínicamente desde bronquites até quadros graves de pneumonias. As pneumonias adquiridas em ambiente hospitalar são geralmente sempre graves. Na média geral, estas pneumonias são a segunda causa mais comum de infecção hospitalar e constituem a principal causa de morbimortalidade das infecções hospitalares.(8) A pele é uma região bastante exposta, sofrendo frequentemente riscos de infecção e envolve grande diversidade de micro-organismos. Essas infecções podem ser primárias, quando não existe uma porta de entrada, ou secundárias, quando surgem de complicações de outros traumatismos. O termo secreção ou secreção de ferida não é adequado e sim a descrição do sítio anatômico específico da infecção.(9) Em razão da grande importancia da evolução da resistência microbiana e da necessidade de um controle das infecções hospitalares em áreas de maior risco, como as Unidades de Terapia Intensiva (UTIs), surgiu o interesse em verificar a Prevalência Microbiana em Culturas Diversas de Amostras Clínicas Obtidas de Pacientes Internos na Unidade de Terapia Intensiva (UTI) do Hospital de Urgência e Emergência de Rio Branco - Acre (HUERB), analisando também a suscetibilidade desses micro-organismos frente aos antimicrobianos utilizados na UTI desse hospital. Materiais e métodos O estudo define-se como prospectivo e descritivo, para o qual foram processados e analisados os resultados de 213 amostras de materiais diversos (aspirado traqueal, ponta de cateter, líquido pleural e secreções), no laboratório de microbiologia clínica do LACEN/Acre, no ano de 2008, procedentes de pacientes da UTI do HUERB, sendo 132 de aspirado traqueal, 34 de ponta de cateter, 28 de secreções (abdominal, ferida, fístula, entre outras) e 19 de líquido pleural. Dessas amostras, 98 (46%) foram positivas. O isolamento das bactérias nas amostras foi realizado por método manual, em meios de cultura específicos para cada uma delas, e seguindo os procedimentos operacionais padrões estabelecidos pelo LACEN. O Teste de Sensibilidade Antimicrobiana utilizado pelo LACEN é o Método de difusão de Kirby-Bauer Modificado, que mede a capacidade de um antibiótico de inibir 28 o crescimento bacteriano in vitro, colocando discos de antibióticos impregnados em papel de filtro. Os discos de antibiótico normalmente utilizados no Teste de Sensibilidade Antimicrobiana da unidade laboratorial para os Bacilos Gram-negativos (enterobactérias) foram: Ampicilina (AMP), Ampicilina/Sulbactam (APS), Piperacilina/Tazobactam (PIT), Cefoxitina (CFO) ou Cefuroxima (CRX), Cefotaxima (CTX) ou Ceftriaxona (CRO), Ceftazidima (CAZ), Cefepime (CPM), Imipenem (IPM), Meropenem (MPM), Ciprofloxacina (CIP), Sulfametoxazol/Trimetoprima (SUT) e Amicacina (AMI). Para os bacilos Gram-negativos não fermentadores: Ampicilina/Sulbactam (APS), Piperacilina/Tazobactam (PIT), Aztreonam (ATM), Ceftazidima (CAZ), Imipenem (IPM), Meropenem (MPM), Amicacina (AMI), Ciprofloxacina (CIP), Cefotaxima (CTX) ou Ceftriaxona (CRO), Cefoxitina (CFO), Sulfametoxazol/Trimetoprima (SUT) e Polimixina (POL); para Staphylococcus spp foram usados Penicilina (PEN), Gentamicina (GEN), Cefalotina (CFL), Oxacilina (OXA), Vancomicina (VAN), Clindamicina (CLI), Ofloxacina (OFX), Eritromicina (ERI), Sulfametoxazol/Trimetoprima (SUT) e Tetraciclina (TET). Na leitura do antibiograma também é observada a resistência intrínseca, de acordo com Rossi & Andreazzi,(10) que em 2005 descreveram que esta resistência é uma característica natural de determinadas bactérias, que pode ser usada para confirmar a correta identificação da mesma, além de servir como marcador no monitoramento de procedimentos padronizados. Resultados No período de janeiro a dezembro de 2008 foram processadas 213 amostras. Dessas, 98 (46%) foram positivas, sendo: aspirado traqueal (132/213); ponta de cateter (34/213); secreções (67/213); líquido pleural (19/213). Das amostras de aspirado traqueal, 68/132 (51.5%) foram positivas para bactérias potencialmente patogênicas, dentre as quais destacou-se com maior prevalência Acinetobacter sp com 17,6%. Das 14/34 amostras de cateter positivas (41,2%), 35,7% foram para Staphylococcus coagulase negativo e 21,4% para Pseudomonas aeruginosa, das 28 amostras de secreções, 16 (57,2%) foram positivas, destacando Escherichia coli e Citrobacter sp, ambas com 18,7%; não houve amostras positivas nas culturas de líquido pleural processadas. Em relação ao perfil de suscetibilidade dos bacilos não fermentadores, a Pseudomonas aeruginosa isolada de amostras de aspirado traqueal e ponta de cateter apresentou 85,7% de resistência a ceftazidima e 78,6% a cefepima, a Acinetobacter sp mostrou 83,3% de resistência a estes antibióticos. Entre as enterobactérias, a Enterobacter aerogenes e a Klebsiella Silva RM, et al • Prevalência microbiana em culturas diversas de amostras clínicas... Gráfico 1. Frequência de micro-organismos isolados das amostras clínicas de pacientes internos na UTI do HUERB, Acre, 2008. pneumoniae isoladas de aspirado traqueal e ponta de cateter apresentaram total resistência a ampicilina e ampicilina/sulbactam, a Escherichia coli isolada de aspirado traqueal e secreções diversas apresentou 100% de sensibilidade a imipenem e amicacina, 83,3% a ciprofloxacina. Dentre os cocos Gram-positivos, o Staphylococcus coagulase negativa e o Staphylococcus aureus mostraram total sensibilidade a tetraciclina e vancomicina, e resistência a penicilina, 87,5% do Staphylococcus coagulase negativa foram resistentes a oxacilina, e o Staphylococcus aureus com 75% de resistência a este antibiótico. O gráfico 1 apresenta a frequência de microorganismos isolados das amostras clínicas de aspirado traqueal, ponta de cateter e secreções, obtidas dos pacientes da UTI do HUERB. Observa-se no gráfico 1 que a bactéria isolada do aspirado traqueal foi Acinetobacter sp, com a prevalência de 17,6%. Na ponta do cateter, Staphylococcus coagulase negativo com 36,3%, Pseudomonas aeruginosa com 21,1%. Nas amostras de secreções, 57,2% foram positivas, destacando a Escherichia coli e a Citrobacter sp, ambas com 18,7%. Os gráficos 2, 3 e 4 apresentam os percentuais de suscetibilidade dos micro-organismos isolados das amostras clínicas: aspirado traqueal, ponta de cateter, líquido pleural e secreções dos pacientes internos na UTI do HUERB. Gráfico 2. Perfil de resistência antimicrobiana dos micro-organismos não fermentadores isolados de pacientes internos na UTI do HUERB, Acre, 2008. * Isolado de aspirado traqueal e ponta de cateter; ** Isolado de aspirado traqueal; *** Isolado de aspirado traqueal e ponta de cateter; OBS: A resistência observada para as cefalosporinas no quadro acima foi reportada após análises dos resultados in-vitro e consideradas segundo recomendações do CLSI 2010. 29 Rev Panam Infectol 2011;13(3):26-31. Gráfico 3. Perfil de resistência antimicrobiana das enterobactérias isoladas de pacientes internos na UTI do HUERB, Acre, 2008. * Isolado de aspirado traqueal e ponta de cateter; ** Isolado de aspirado traqueal e secreções; OBS: A resistência observada para as cefalosporinas no quadro acima foi reportada após análises dos resultados in-vitro e consideradas segundo recomendações do CLSI 2010. Pode-se destacar no gráfico 2 que em relação aos bacilos não fermentadores, a Pseudomonas aeruginosa isolada de amostras de aspirado traqueal e ponta de cateter apresentou 85,7% de resistência a Ceftazidima (CAZ) e 78,6% a Cefepima (CPM), a Acinetobacter sp mostrou 83,3% de resistência a estes antibióticos. No gráfico 3 observa-se que entre as enterobactérias a Enterobacter aerogenes e a Klebsiella pneumoniae isoladas de aspirado traqueal e ponta de cateter apresentaram total resistência a Ampicilina (AMP) e Ampicilina/Sulbactam (APS), a Escherichia coli isolada de aspirado traqueal e de secreções apresentou 100% de sensibilidade a Imipenem (IPM) e Amicacina (AMI), 83,3% a Ciprofloxacina (CIP). De acordo com o gráfico 4 os cocos Gram-positivos, Staphylococcus coagulase negativa e o Staphylococcus aureus mostraram total sensibilidade a Tetraciclina (TET) e Vancomicina (VAN), e resistência a Penicilina (PEN), 87,5% dos Staphylococcus coagulase negativa foram resistentes a Oxacilina (OXA), e o Staphylococcus aureus com 75% de resistência a este antibiótico. Discussão Embora as UTIs representem apenas 5% a 10% dos leitos de um hospital, estima-se que nelas ocorram cerca de 25% das infecções hospitalares.(11) A prevenção da infecção é extremamente importante e exige um conhecimento aprofundado das taxas de infecção, tipo e natureza da infecção, ambiente de aquisição (comunitária, hospitalar, UTI) e perfil dos Gráfico 4. Perfil de resistência antimicrobiana dos cocos Gram-positivos isolados de pacientes internos na UTI do HUERB, Acre, 2008. * Isolado de aspirado traqueal, ponta de cateter e secreções. 30 Silva RM, et al • Prevalência microbiana em culturas diversas de amostras clínicas... micro-organismos causadores. O conhecimento dos fatores de risco para o desenvolvimento de infecção, principalmente quando adquirida na UTI, e sua relação com a mortalidade é essencial.(12) A Pseudomonas aeruginosa é um patógeno oportunista que tem se destacado quanto à prevalência em casos de infecções hospitalares, podendo infectar qualquer região do corpo em um paciente suscetível, principalmente em pacientes de Unidades de Terapia Intensiva.(13) No presente estudo foi detectada a presença de Pseudomonas aeruginosa em todas as amostras estudadas. No estudo realizado por Motti & Amato (14) os micro-organismos Gram-negativos mais prevalentes foram Pseudomonas aeruginosa, E. coli, Klebsiella spp, Enterobacter spp e Acinetobacter calcoaceticos. Os dados coincidem com os resultados encontrados, confirmando a importância desses patógenos. No mesmo estudo, os antimicrobianos descritos como de maior atividade foram ciprofloxacina e imipenem, o que também corrobora os resultados apresentados no presente trabalho. Segundo estudo realizado por Menezes et al.,(15) o aspirado traqueal é a amostra com maior índice de positividade (34,1%). Em nosso trabalho, a mesma amostra clínica apresentou uma positividade superior (51,5%). As culturas de ponta de cateter de acordo com Menezes et al.(16) apresentaram uma positividade de 57,1%, sendo o Staphylococcus coagulase negativa e Pseudomonas aeruginosa os micro-organismos de maior prevalência, o que está de acordo com os dados apresentados neste trabalho. Com relação ao perfil de suscetibilidade, em ambos os trabalhos a oxacilina mostrou uma elevada resistência, e a vancomicina foi o antimicrobiano mais eficiente. Para a Pseudomonas aeruginosa, o imipenem e a polimixina foram os mais sensíveis. A resistência aos antimicrobianos é uma ameaça à saúde pública mundial e está associada a uma maior morbimortalidade. O estudo aponta para uma frequência elevada de infecção por SCN, e para a necessidade de intensificarem as pesquisas acerca deste patógeno, em relação à prevalência e ao perfil de suscetibilidade. Atualmente são reconhecidos como importantes agentes etiológicos e não meros contaminantes. É importante estabelecer medidas de contenção e de controle, coordenados entre o corpo clínico, a Comissão de Controle de Infecção Hospitalar (CCIH) e o Laboratório de Microbiologia, a fim de minimizar os casos e adequar a conduta terapêutica. Referências 1. Bôas PJFV, Ruiz T apud Saviteer SM, Samsa GP, Rutala WA. Ocorrência de Infecção Hospitalar em idosos internados em Hospital Universitário. Rev Saúde Pública; Junh 2004. Disponível em: http://www.scielosp.org/scielo.php?pid=S003489102004000300006&script=sci_arttext. 2. O’Grady NP, Barie PS, Bartlett JG, Bleck T, Garvey G, Jacobi J et al. Practice guidelines for evaluating new fever in critically adult patients. Rev Clin Infect Dis 1998;30(1):234. 3. Curcio DJ. Desafios da resistência bacteriana na América Latina. Rev Prát Hosp 2008. Disponível em: http://www.praticahospitalar.com.br/pratica%2060/pdf/07.pdf. 4. National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report. J Am Infect; Out 2004. Disponível em: http://www. cdc.gov/ncidod/dhqp/pdf/nnis/2004NNISreport.pdf. 5. Gadelha MZP, Mesiano ERAB, Prade SS, Viscardi R, Turcato Jr G, Ferraz EM et al. Consenso sobre o uso racional de antimicrobianos. Disponível em: http://pesquisa.bvsalud.org/regional/ resources/lil-247268. 6. Burton GRW, Engelkirk PG. Impacto dos Programas de Antibióticos sobre os Custos e a Resistência Microbiana. In: Microbiologia para as ciências da saúde. 5 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1998;5:101-121. 7. Oplustil CP, Cassia MZ, Nina RT. Culturas Ponta de Cateter. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. Ed. Sarvier, 2000. p. 66-68. 8. Oplustil CP, Cassia MZ, Nina RT. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. Ed. Sarvier, 2000. p. 116-121. 9. Oplustil CP, Cassia MZ, Nina RT. Culturas de Secreções e Bió psias. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. Ed. Sarvier, 2000. p. 62-65. 10. Rossi F, Andreazzi DB. Bacilos Gram-negativos: Beta-lactamases. Resistência Bacteriana – Interpretando o antibiograma. Ed. Atheneu; 2005. p. 65-94. 11. Farr BM apud Menezes EA, Sá KM, Cunha FA, Ângelo MRF, Oliveira IRN, Salviano MNC. Frequência e percentual de suscetibilidade de bactérias isoladas em pacientes atendidos na Unidade de Terapia Intensiva do Hospital Geral de Fortaleza. J Bras Patol Med Lab 2007;43:149-155. 12. Lisboa T, Faria M, Hoher JA, Borges LAA, Gómez J, Schifelbain L et al. The prevalence of nosocomial infection in Intensive Care Units in the State of Rio Grande do Sul. Rev Bras de Ter Intensiva 2007;19:414-420. 13. Pires EJVC, Silva Jr VV, Lopes ACS, Veras DL, Leite LE, Maciel MAV. Epidemiologic analysis of clinical isolates of Pseudomona aeruginosa from an University Hospital. Rev Bras Ter Intensiva 2009;21(4):149-155. 14. Motti EF, Amato NV. Patterns of antimicrobial resistance in Gram negative bacilli isolated from patients in Intensive Care Units. Rev Hosp Clín Fac de Med São Paulo 1992 47(3):131-7. 15. Menezes EA, Sá KM, Cunha FA, Ângelo MRF, Oliveira IRN, Salviano MNC. Frequency and susceptibility percentile of bactéria isolated in patients assisted in the intensive care unit of the General Hospital of Fortaleza. J Bras Patol Med Lab 2007;43(3):149-155. 16. Menezes EA, Favalic BF, Cunha FA, Salviano MNC, Angelo MRF. Catheter tip’s bacterial caracterization from Fortaleza’s general hospital. Rev Bras Anal Clin 2002;34(3):151-154. Correspondência: Rosemeiry Moreira da Silva R. Eugênio Bêco Bezerra, nº 100, Cond. Green Garden, Quadra 06, Casa 05, Bairro São Francisco - CEP 69907-301 - Rio Branco - Acre - Brasil. e-mail: [email protected] 31