UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS DEPARTAMENTO DE BOTÂNICA DISCIPLINA DE FITOFISIOLOGIA Respiração celular: visão geral A estrutura e hidrólise do ATP • A energia é liberada das moléculas de ATP – quando uma ligação terminal de fosfato é desfeita AULA 6 Respiração Mitocondrial nos vegetais P P P adenosina trifosfato (ATP) HH22OO P i + P Energia P Marcelo Francisco Pompelli fosfato inorgânico Oxidação de moléculas orgânicas na respiração celular Energia celular • Inicia-se no ecossistema a partir da luz, processo dirigido pela fotossíntese e liberado na forma de calor na respiração nos vegetais plastídeo Adenosina difosfato (ADP) Passos da respiração celular Sacarose (nos vegetais) Luz do sol C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O + Energia ECOSSISTEMA 100 mL de suco de laranja tem 98 kcal 1 banana tem 105 kcal Fotossíntese nos cloroplastos CO2 + H2O Respiração celular nas mitocôndrias 1 bombom de iogurte 80 kcal moléculas orgânicas 180 g mol-1 35 bombom de iogurte dariam 2800 kcal (2880 KJ.mol-1) ou 683 kcal mol-1 + O2 Glicólise (Citosol) Etapas ATP Energia para a maioria dos processos metabólicos Liberação de calor Ciclo de Krebs (Mitocôndria) Cadeia transportadora de elétrons (Cristas mitocondriais) 1 Passos da respiração celular Glicólise animal, primeira etapa Glicólise vegetal, primeira etapa • Glicólise – quebra glicose (em plantas sacarose) e produz moléculas de piruvato • Ciclo do Ácido Cítrico (Ciclo de Krebs) – completa a oxidação das moléculas orgânicas 1 Invertase 2 1 Hexocinase 2 Fosfohexose isomerase 3 Fosfofrutocinase 4 Aldolase 5 Triose fosfato isomerase 3 UDP Sintase da sacarose (Susi) Frutose Hexocinase ADP ATP ADP Glicose-UDP PPi UTP Fosfoglicomutase Frutose-6-P UDP-Glicose Pirofosforilase Glicose-1-P Fosfoglicomutase PPi Fosfofrutocinase Glicose-6-P Pi 4 Frutose-1,6-bisfosfato Aldolase – generadora ATP, calor e água (sub-produto) 5 Glicólise segunda etapa H 2O Glicose ATP Glicose-6-P • Fosforilação oxidativa – Cadeia Transportadora de Elétrons Mitocondrial Sacarose Citosol Gliceraldeído-3-P Diidroxiacetona-P Triose fosfato isomerase Glicólise Fermentação • A Glicólise • Na fermentação alcoólica – pode produzir ATP na presença ou ausência de oxigênio, em condições aeróbicas ou anaeróbicas – acopladada com a fermentação produz ATP • A Fermentação consiste de: – o piruvato é convertido em etanol por 2 passos, um dos quais libera CO2 • Durante a fermentação láctica – o piruvato é reduzido diretamente a NADH para formar lactato como subproduto – glicólise mais as reações que regeneram o NAD+, o qual é reutilizado na glicólise 2 Tipos de Fermentação Fermentação alcoólica 2 ADP + 2 Glicose P1 2 ATP Glicólise O– C O C O Respiração x Fermentação Ciclo do ácido cítrico • O Piruvato é a molécula chave do catabolismo • Antes do ciclo do ácido cítrico iniciar Glicose – o piruvato é, primeiramente, convertido em acetil-CoA, o qual faz um link entre a glicólise e o ciclo do ácido cítrico CH 3 2 Piruvato 2 NAD+ 2 NADH CITOSOL 2 CO2 Piruvato H H C H OH CH 3 2 Etanol C Na ausência de O2, fermentação O Na presença do O2, respiração celular CITOSOL MITOCÔNDRIA CH 3 2 Acetaldeído (a) Fermentação alcoólica 2 ADP + 2 P1 2 ATP NAD+ MITOCÔNDRIA Fermentação láctica Glicose Glicólise 2 NAD+ O C H C 2 NADH C O C O NADH S CoA C O 2 C Ciclo do Ácido Cítrico CH 3 + H+ O– Acetil CoA Etanol ou Lactato O– O C O 1 CH 3 3 CH 3 O OH Acetil CoA Piruvato CO2 Coenzima A CH 3 2 Lactato proteína de membrana (b) Fermentação Láctica Ciclo do ácido cítrico • O ciclo do ácido cítrico completa a oxidação das moléculas orgânicas para geração de energia • O ciclo do ácido cítrico – acontece na matriz da mitocôndria, diferentemente da glicólise que ocorria no citosol Ciclo do ácido cítrico CoA Fosforilação oxidativa Desidrogenase piruvato Acetil-CoA CO2 Citrato sintase Oxalacetato Desidrogenase malato Malato CoA NAD+ H2O Fumarato FADH2 FAD+ Ciclo do Ácido Cítrico ATP H+ H+ Citrato Aconitase espaço intermembrana Q I Desidrogenase isocitrato NAD+ NADH CoA NAD+ NADH membrana mitocondrial interna CoA Succinil-CoA H2O CO2 Desidrogenase 2oxoglutarato matriz mitocondrial IV III ATP sintase II FADH2 NADH+ 2-Oxoglutarato H+ Cyt c proteínas carregadoras de elétrons Isocitrato CO2 Succinato ATP Sintetase succinilADP CoA ATP H+ NADH Fumarase ATP membrana mitocondrial interna Fosforilação oxidativa, transporte de elétrons e quimiosmose Glicólise NADH NAD+ Desidrogenase succinato • Quimiosmose e cadeia transportadora de elétrons CO2 Piruvato FAD+ 2 H+ + 1/2 O2 H2O NAD+ ADP + carrega os elétrons advindos da glicólise e Krebs ATP Pi H+ Quimiosmose Cadeia transportadora de elétrons O transporte de elétrons e o bombeamento de prótons (H+), A síntese de ATP se dá pelo fluxo de de H+ através da membrana cria um gradiente de H+ entre os 2 lados da membrana Fosforilação oxidativa 3 Inibidores da Fosforilação Oxidativa em Plantas Resumo da Respiração Mitocondrial Cadeia Transportadora de Eelétrons • Há três principais processos Espaço intermembrana H+ H+ H+ H+ H+ H+ + + H+ H H DY H+ H+ + H + CITOSOL UQ III II NADH NAD ½ O2 Succ 2 NADH Glicose - Fum 2 NADH 2 Acetil CoA 2 Piruvato + 2 ATP por fosforilação ao nível de substrato H+ Matriz mitocondrial ADP Rendimento máximo por glicose Via metabólica Glicólise Ciclo de Krebs Substratos Produtos 1 Sacarose 4 Piruvatos 4 ADP + 4 Pi 4 ATP 4 NAD+c 4 NADHc 4 Piruvatos 12 CO2 4 ATP 16 NADHm 4 FADH2 4 ADP + 4 Pi 16 NAD+m 4 FAD 6 NADH Ciclo do Ácido cítrico Fosforilação oxidativa, transporte de elétrons e quimiosmose Rotenona + 2 ATP por fosforilação ao nível de substrato 4 NADHc 16 NADHm Malonato Antimicina A Cianeto COO Mixotiazol Azida + 32 ou 34 ATP pela fosforilação oxidativa, dependendo de como o NADH entra na mitocôndria carregando os elétrons CO CH2 ≈ 36 ou 38 ATP CTE em plantas Particuladidades da CTE em plantas ATP Oligomicina B COO Espaço intermembrana Espaço intermembrana 4 H+ H+ NAD NADH NAD(P)H NADH desid ADP NAD NADH II III ½ O2 ATP Fum ½ O2 Oxidase alternativa UCP H2O ATP sintetase - energia H2O energia Matriz 4 FADH2 IV AOX NAD Succ H+ H+ H+ + + H+ H H DY H+ H+ H+ + H + Cit c UQ I H+ NAD(P) NAD(P)H desid NAD(P)H desid 4 NADH Fosforilação oxidativa V 2 FADH 2 ATP Rendimento energético da Respiração IV ou ATP sintetase H2O III MITOCÔNDRIA 2 NADH Glicólise IV II 2 FADH 2 Cit c I carregadores de elétrons na membrana I Matriz mitocondrial Sem o bombeamento de prótons NADHs insensíveis a rotenona inibida por ácidos graxos H+ Dissipa o DY sem a geração de ADP ATP ATP Inibida por nucleotideos de purina 4 NAD(P)H insensíveis a Rotenona NADHcitosol ? Proteína Desacopladora de Mitocôndria – UCP Espaço intermembrana Membrana interna Complexo I I Complexo H+ Resumo da Respiração Mitocondrial • Aproximadamente 40% da energia da molécula da glicose H+ H+ Espaço intermembrana H+ Matriz + UCP Membrana interna O que acontece se o NADH não passar pelo Complexo I e sim pelas outras NAD(P)H da membrana? – é transferida ao ATP durante a respiração celular, produzindo aproximadamente 38 ATPs E os outros 60% da energia, onde ficam Matriz mitocondrial Reduz o transporte de H+ para o espaço intermembrana Papel Biológico da UCP e da AOX H+ H+ H+ Papel Ecológico da UCP Termogênese e volatilização de compostos de atração Anthurium andraeanum • Por diminuir o DY a UCP e a AOX atuam: – na produção de intermediários metabólicos quando a [ATP] é alta Espádice superior Bráctea – na regeneração de NAD+ quando a CTE estiver saturada – produção de calor (indispensável para a volatilização de compostos atrativos) Sauromatum guttatum Flores masculinas Espádice inferior – respiração de frutos climatéricos câmara floral – mecanismo antioxidativo (evitar a produção de de radicais livres) Flores femininas Zantedeschia aethiopica 5 Produção de ATP por substrato oxidado Material adicional para ser acessado na web • Respiração celular: visão geral • Glicólise – Substrato Produção de ATP Teórica Experimental Malato 2,5 2,4 - 2,7 Succinato 1,5 1,6 - 1,8 NADHext FADH2 1,5 1,5 1,6 - 1,8 1,6 - 1,8 http://www.territorioscuola.com/youtube/view.php?video=NV6qqcr4o6s&feature=youtube_gdat a&title=Biologia+-+Respira%C3%A7%C3%A3o+celular – http://www.territorioscuola.com/youtube/view.php?video=0VDt7T92OrA&feature=youtube_gdat a&title=Biologia%3A+Respira%C3%A7%C3%A3o+Celular++Glic%C3%B3lise+02+%28Prof.+Toid%29 – http://www.territorioscuola.com/youtube/view.php?video=aLfGqkRD9QA&feature=youtube_gd ata&title=Respira%C3%A7%C3%A3o+celular+-+Parte+1+-+Glic%C3%B3lise • Ciclo de krebs (em inglês) • Ciclo de krebs (em português) – • http://www.videa.vsetkyvidea.sk/video/1xWDBGybWhg/Ciclo-de-Krebs-Detalhado.html – http://www.youtube.com/watch?v=9wsVe-Gi0BQ Cadeia respiratória – • http://www.videa.vsetkyvidea.sk/video/lAxNcuTiGxM/conversion-de-acido-piruvico.html – http://www.territorioscuola.com/youtube/view.php?video=dRLfcigsuyE&feature=youtube_gdata &title=Cadeia+Respirato%CC%81ria Cadeia respiratória e fosforilação oxidativa – http://www.territorioscuola.com/youtube/view.php?video=YtAkoTc87B8&feature=youtube_gdat a&title=Respira%C3%A7%C3%A3o+celular+-+Parte+3++Cadeia+de+transporte+de+el%C3%A9trons+e+fosforila%C3%A7%C3%A3o+oxidativa 6