Sociedade Brasileira de Química ( SBQ)
Estudo da cinética de produção da substância Brasiliamida A pelo
fungo Penicillium sp., isolado de melia azedarach.
Taicia Pacheco Fill1 (PG)*, Edson Rodrigues Filho1 (PQ)
[email protected], [email protected]
1. Laboratório de Bioquímica Micromolecular de Microorganismos (LaBioMMI) – UFSCa r- São Carlos-SP
Palavras Chave: Penicillium , amidas bis-fenilpropanoídicas, curva de produção
quando este fungo foi cultivado em canjica. As curvas
de produção da substância Brasiliamida A
H3C
H
O
N
N
O
O
H3 C
O
H
O
O
N
OCH3
CH3
O
O
N
O
O CH3
CH3
Figura 1: Estruturas moleculares das substâncias
Brasiliamida A e B respectivamente.
Resultados e Discussão
Em estudos anteriores, no intuito de otimizar
o meio de cultivo para produção dos compostos de
interesse, verificou-se que a adição do aminoácido LFenilalanina ao meio de cultura, influencia de alguma
maneira a produção das Brasiliamidas. Realizou-se
então, a partir deste conhecimento, uma curva de
produção destas substâncias em arroz, em arroz
suplementado com este aminoácido, e em canjica,
uma vez que o tempo de cultivo é uma variável para a
otimização da produção destas substâncias. As
extrações foram realizadas adicionando-se AcOEt e
MeOH de dois em dois dias.
Realizaram-se
experimentos
de
íons
produtos num espectrômetro de massas triploquadrupolo (WATERS), no intuito de determinar as
condições ideais para os experimentos de detecção
seletiva (SRM) para a substância Brasiliamida A nos
diferentes meios de cultivo propostos.
Foram obtidos os cromatogramas de íons
totais (TIC) para os extratos do fungo quando
cultivados em arroz, em arroz com a adição de
aminoácido e ainda os cromatogramas obtidos
31a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química
Production curve
60000000
50000000
y = -14,806x5 + 958,63x4 - 14652x3 - 111879x2 + 4E+06x - 2E+06
R 2 = 0,9507
Production (area)
O fungo Penicillium sp., isolado como
endofítico de melia azedarach, tem se mostrado
grande produtor de metabólitos secundários
interessantes,
como
as
amidas
bisfenilpropanoídicas, Brasilimida A e B (Figura 1)1.
Estas substâncias são conhecidas como agentes
tremorgênicos e ainda, inibem o crescimento da
bactéria gram-positiva bacillus subtilis.
Devido as interessantes aplicações citadas,
a otimização destes compostos é de grande
interesse, neste caso, devido ao rápido ciclo de vida e
fácil adaptação ao meio externo, os fungos podem
ser utilizados em inúmeras manipulações visando
maximização
da
produção
de
metabólitos
secundários.
40000000
1
30000000
20000000
y = -3,8627x5 - 5,0118x
10000000
4
+ 15395x 3 - 510862x
2
+ 6E+06x - 2E+06
R 2 = 0,9361
0
0
5
10
15
20
25
30
35
40
cultivation time(days)
Curva de produção
70000000
2
60000000
50000000
Area
Introdução
40000000
30000000
20000000
10000000
0
0
5
10
15
20
25
30
35
40
Tempo de cultivo (dias)
Figura 2: Curva de produção obtida para o cultivo do fungo
Penicillium sp. em arroz (verde) e em arroz suplementado com
o aminoácido L-Fenilalanina (vermelho) e em canjica (2).
Observa-se nas curvas de produção, que o
composto em estudo começa a ser produzido nos
dois primeiros dias de cultivo. E diferentemente da
curva obtida para o fungo cultivado em arroz, o
microorganismo em canjica aumenta a concentração
da substância Brasiliamida A nos últimos dias de
cultivo, dessa maneira, a curva não apresenta queda
da concentração desta substância como é observado
na curva 1. Por outro lado, no cultivo em arroz, a
maior concentração do composto ocorre em 28 dias.
A comparação das curvas nos diferentes meios de
cultivo é um indicativo da influência do meio de
cultura no metabolismo dos microorganismos.
Observa-se ainda, que a adição de LFenilalanina ao meio de cultivo, aumenta a produção
da amida (mostrado em vermelho), nos levando a
conclusão que o microorganismo poderia incorporar
esse aminoácido na biossíntese destes compostos,
A comprovação deste fato será realizada com a
adição deste aminoácido isotopicamente marcado ao
meio de cultura.
Conclusões
Através das curvas de produção realizadas
pode-se otimizar o tempo de cultivo para a
maximização da produção de Brasiliamida A em
diferentes meios de cultivo.
Agradecimentos
Áos órgãos financiadores FAPESP, CAPES e CNPq
Sociedade Brasileira de Química ( SBQ)
____________________
1
Santos, M. R.G.; Tese de doutorado, programa de Pós-Graduação
em Química-UFSCar, 2003,443pp
25 a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química - SBQ
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