I Congresso de Pesquisa e Pós-Graduação do Câmpus Rio Verde do IFGoiano.
06 e 07 de novembro de 2012.
DETERMINAÇÃO DO TEOR DE ÁGUA LIMITE PARA A
CRIOPRESERVAÇÃO DE AQUÊNIOS DE CAJU-DE-ÁRVORE-DOCERRADO (Anacardium othonianum RIZZ) – ANACARDIACEAE
FERREIRA, Pedro Henrique Castro Magalhães Ferreira (Estudante IC)1; SALES,
Juliana de Fátima(Orientadora)1; SILVA, Lilian Abadia da (Mestranda PPGCA)1;
FRANÇA, Sabrina Cabral (Estudante IC)1, FREITAS, Bethânia Silva Moraes de
(Estudante IC)1.
1
Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia Goiano – Campus Rio Verde – GO
[email protected]
RESUMO: Objetivou-se com este trabalho determinar o teor de água limite para a criopreservação de
aquênios de caju-de-árvore-do-cerrado (Anacardium othonianum Rizz) e avaliar o efeito do método de
descongelamento no vigor destes. Os aquênios foram submetidos à secagem em sílica gel até
alcançarem teores de água de 14, 12, 8 e 4% b.u. e em seguida foram armazenados em nitrogênio
líquido (-196°C) por um período de 20 dias e submetidos ao descongelamento lento, rápido e em
microondas. Após o descongelamento, os aquênios foram submetidos a avaliações fisiológicas e testes
de vigor. Uma melhor qualidade fisiológica e de vigor foi verificada para os aquênios com teores de
água de 14 e 12%, e o os menores valores foram encontrados nos aquênios secos a 4% de umidade. O
descongelamento em microondas não foi eficiente principalmente para o teor de água de 8%.
Palavras-chave adicionais: Conservação. Dessecação. Criogenia. Nitrogênio líquido.
INTRODUÇÃO
O Cerrado é a segunda maior formação
vegetal brasileira com uma área original de dois
milhões de hectares. A intensa pressão de
ocupação agropecuária e as ações de extrativismo
no Cerrado têm colocado em risco muitas espécies
de importância ecológica, social e econômica
(COSTA, 2009).
O caju-de-árvore-do-cerrado é uma
espécie típica bastante conhecida e apreciada
nessa região. É uma planta arbórea, com 3 a 4
metros de altura por 3 a 4 metros de diâmetro de
copa, com propagação predominante via
sementes.
Para a conservação de sementes
ortodoxas, como é o caso do caju-de-árvore-docerrado, ambientes com umidade relativa e
temperaturas mais baixas tem se mostrado mais
adequados, para preservar o seu poder
germinativo
(MARCOS
FILHO,
2005).
Portanto, a técnica de criopreservação é
eficaz para armazenar recursos genéticos a longo
prazo. Porém, o teor de água das sementes no
momento da imersão em nitrogênio líquido deve
ser considerado como o fator mais crítico na
criopreservação. Este teor deve ser reduzido para
um ponto capaz de evitar a formação de cristais de
gelo intracelulares durante o congelamento ultrarápido, e preservar a integridade dos tecidos da
semente (LAMBARDI et. al., 2004).
Neste sentido, o objetivo deste trabalho
foi determinar o teor de água limite para a
criopreservação e avaliar o efeito do método de
descongelamento no desempenho fisiológico dos
aquênios de caju-de-árvore-do-Cerrado (A.
othonianum Rizz).
MATERIAL E MÉTODOS
Os frutos foram coletados na Fazenda
Gameleira, em Montes Claros de Goiás (16º 06’
20’’ S – 51º 17’ 11’’ W, altitude de 592 m). O
experimento foi realizado no Laboratório de
Sementes do Instituto Federal Goiano - Câmpus
Rio Verde-GO. Os aquênios foram extraídos
manualmente, beneficiados e tratados com
fungicida Vitavax-Thiram®. O teor de água inicial
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foi determinado conforme as Regras para Análise
de Sementes (BRASIL, 2009). Após, foram
submetidos ao processo de secagem até
alcançarem os teores de água estabelecidos (14,
12, 8 e 4% b.u). Para secagem, as amostras foram
dispostas em bandejas com sílica gel azul e
pesadas até alcancem os teores de água desejados.
Os aquênios foram embalados em papel
alumínio, acondicionados em canisters e
armazenados em botijões criogênicos em contato
direto com o nitrogênio por 20 dias.
Em seguida foram descongelados por
meio dos seguintes métodos: Descongelamento
lento, a 25°C por 2 horas; Rápido, em banho
maria, a 37°C por 5 minutos; Em microondas, a
uma potência de 150 W por 2 minutos. Os
aquênios foram lavados com água destilada e o
excesso de água eliminado.
Após o descongelamento, a qualidade
fisiológica e o vigor dos aquênios foram avaliados
por meio do índice de velocidade de germinação
(IVG); índice de velocidade de emergência (IVE);
envelhecimento acelerado (%), condutividade
elétrica, diâmetro na altura do colo; comprimento
da parte aérea e raiz e massa seca da folha, caule e
raiz.
No teste de germinação, foram utilizadas
três repetições de 25 aquênios, em papel
“germitest”, umedecido com água destilada
equivalente a 2,5 vezes o peso do substrato seco.
Os rolos foram mantidos em câmaras de
germinação “Mangesldorf” à temperatura de
25°C.
No teste de envelhecimento acelerado
foram utilizadas três repetições de 25 aquênios e
foi adotado o método proposto por Valentini e
Piña-Rodrigues (1995). Foram utilizadas caixas
acrílicas tipo gerbox contendo 40 mL de água em
seu interior, mantidas em câmara germinadora a
40°C por 72 horas. Após o envelhecimento, os
aquênios foram submetidos ao teste de
germinação.
O teste de condutividade elétrica foi
realizado em três subamostras de 10 aquênios. As
amostras foram pesadas e em seguida, colocadas
em copos plásticos contendo 75 mL de água
deionizada e mantidas em uma câmara de
germinação a temperatura de 25 ºC, durante 24
horas. Após esse período, efetuou-se a leitura da
condutividade elétrica por meio de condutivímetro
digital Technal, modelo TEC-4MP, e os
resultados foram expressos em µScm-1 g-1.
O teste de emergência foi conduzido em
casa de vegetação com temperatura média de
24,9±4ºC e umidade relativa de 76±14,5%. Foram
utilizadas três repetições de 25 aquênios e a
semeadura foi realizada em areia a 3 cm de
profundidade. O substrato foi umedecido até 70%
de sua capacidade de campo e irrigado, por
aspersão, três vezes ao dia. Foram realizadas
contagens diárias, a fim de determinar o índice de
velocidade de emergência de plântulas (IVE), de
acordo com Maguire (1962). Decorridos 30 dias
após a semeadura, a porcentagem de emergência
correspondeu à de plântulas normais.
O delineamento experimental foi o
inteiramente casualizado em esquema fatorial 4x3
sendo quatro teores de água e três tipos de
descongelamento, empregando-se três repetições.
A análise de variância e as comparações das
médias pelo teste de Tukey a 5% de significância.
Os dados expressos em porcentagem foram
transformados em arcoseno de √x/100.
RESULTADO E DISCUSSÃO
Os maiores valores para a germinação e
para o índice de velocidade de germinação foram
obtidos em aquênios com os teores de água de 12
e 14% respectivamente, ocorrendo decréscimo à
medida que se diminuiu o teor de água dos
mesmos.
Para o envelhecimento acelerado os
aquênios com teor de água 14% alcançaram
maiores valores de germinação, no entanto, à
medida que se reduziu o teor de água dos
aquênios,
quando
os
mesmos
foram
crioconservados,
ocorreu
decréscimo
na
porcentagem de germinação. Os maiores valores
para a condutividade elétrica foram obtidos para
aquênios com 12% b.u., ocorrendo redução à
medida que o teor de água dos mesmos foi
diminuído. Com isso, verificamos que a secagem
não prejudica a integridade das membranas pelo
baixo valor de lixiviados.
Os maiores valores para emergência e
índice de velocidade de emergência foram obtidos
para os aquênios criopreservados com teor de
água de 12%, ocorrendo queda nos valores à
medida que se diminuiu o teor de água. Resultado
semelhante foi encontrado para sementes de
pinhão-manso (Jatropha curcas L.), em que a
dessecação a 6,4% de umidade, associada a
períodos prolongados de exposição ao nitrogênio
líquido, causou anormalidade de plântulas, danos
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às células e aos tecidos das folhas, e afetou
negativamente a germinação (SILVA et al., 2011).
O teor de água das sementes e o método
de descongelamento não exerceram influência na
porcentagem de germinação e no índice de
velocidade de germinação, exceto em aquênios
criopreservados com 8% de teor de água e
descongelados em microondas.
Para o teste de envelhecimento acelerado
e condutividade elétrica, as sementes com teor de
água de 8% e descongeladas em microondas,
apresentaram os menores valores, diferindo dos
demais métodos de descongelamento.
O método de descongelamento mais
eficaz está diretamente relacionado com o teor de
água das sementes.
No descongelamento rápido, as sementes
com teor de água de 14% b.u. obtiveram o maior
valor para o teste de envelhecimento acelerado e o
menor para a condutividade elétrica.
Para o descongelamento em microondas
os maiores valores foram obtidos para as sementes
com 14% b.u e os menores para 8% b.u.
CONCLUSÃO
O teor de água limite para a
criopreservação das sementes de Anacardium
othonianum Rizz está situado entre 14 e 12% de
b.u. Teores de água abaixo de 12% causaram
redução na qualidade fisiológica e no vigor das
sementes.
Para os aquênios com teor de água
elevado, como 14% e 12%, o descongelamento
em microondas foi mais eficiente, ao passo que,
sementes com baixo teor como 4% respondem
melhor ao descongelamento lento.
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