UNIPAC - UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS FACULDADE DE CIÊNCIAS SOCIAIS, LETRAS E SAÚDE DE UBERLÂNDIA Av: João Pessoa, 719, Centro – Uberlândia Telefax: (34) 3214-1110 Curso de Medicina Veterinária Profª Andrea 8° período Disciplina: Tecnologia e Inspeção de Leite e Derivados N.º DA PRÁTICA: 4 DATA DA PRÁTICA: NOME DA PRÁTICA: Pesquisa de Fosfatase e Peroxidase OBJETIVOS DESTA ATIVIDADE Identificar a presença das enzimas fosfatase e peroxidase em Leite cru e Leite Pasteurizado; MATERIAIS MATERIAL ANALISADO VIDRARIA/EQUIPAMENTO SOLUÇÕES/ MEIOS Leite cru; Banho maria Leite Pasteurizado. Tubos de ensaio; Leite UHT Pipetas; Substrato, solução reagente e catalizador; solução hidroalcoólica de guaiacol a 1% e solução de peróxido de hidrogênio a 3%. DESCRIÇÃO DA TÉCNICA FOSFATASE Procedimento Transferir 0,5mL da amostra a analisar para um tubo de ensaio, adicionar 5mL do substrato, agitar ligeiramente e levar ao banho-maria mantido a 39 – 41ºC durante 20 minutos. Esfriar o tubo de ensaio em água corrente, adicionar 6 gotas de solução reagente e 2 gotas do catalisador. Levar o tubo novamente ao banho-maria a 39 41ºC por 5 minutos. Resultado Positivo: coloração azul intensa - leite cru. Negativo: coloração cinza - leite pasteurizado. PEROXIDASE Procedimento Transferir 10mL da amostra para um tubo de ensaio, aquecer em banho-maria a 45ºC por 5 minutos, para ativação da enzima. Acrescentar 2mL da solução hidroalcoólica de guaiacol a 1% ao tubo de ensaio, pelas suas paredes, seguindo-se a adição de 3 gotas da solução de peróxido de hidrogênio a 3%. Resultado Positivo: desenvolvimento de um alo de coloração salmão. Observação: Aguardar no mínimo 5 minutos para observar o resultado. UNIPAC - UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS FACULDADE DE CIÊNCIAS SOCIAIS, LETRAS E SAÚDE DE UBERLÂNDIA Av: João Pessoa, 719, Centro – Uberlândia Telefax: (34) 3214-1110 Curso de Medicina Veterinária Profª Andrea 8° período Disciplina: Tecnologia e Inspeção de Leite e Derivados N.º DA PRÁTICA: 5 DATA DA PRÁTICA: NOME DA PRÁTICA: Análise de Densidade OBJETIVOS DESTA ATIVIDADE Verificar a densidade do leite. MATERIAIS MATERIAL ANALISADO VIDRARIA/EQUIPAMENTO Leite cru; Proveta Leite Pasteurizado. Lactodensímetro SOLUÇÕES/ MEIOS Leite UHT DESCRIÇÃO DA TÉCNICA Procedimento: Transferir cerca de 500 mL (ou cerca de 1000 mL) de leite para uma proveta de capacidade correspondente, evitando incorporação de ar e formação de espuma. Introduzir o termolactodensímetro perfeitamente limpo e seco na amostra, deixar flutuar sem que encoste na parede da proveta. Observar a densidade aproximada, erguer cuidadosamente o termolactodensímetro e enxugar sua haste com papel absorvente, retornando o aparelho à posição anteriormente observada. Deixar em repouso por 1 a 2 minutos e fazer a leitura da densidade na cúspide do menisco. Observar a temperatura sempre que possível, fazer a leitura da densidade a 15ºC. Pode-se fazer a correção para 15ºC acrescentando à leitura 0,0002 para cada grau acima de 15ºC ou subtraindo 0,0002 para cada grau abaixo. De qualquer forma não deverão ser feitas leituras de densidade em amostras com temperatura inferior a 10oC ou superior a 20oC. UNIPAC - UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS FACULDADE DE CIÊNCIAS SOCIAIS, LETRAS E SAÚDE DE UBERLÂNDIA Av: João Pessoa, 719, Centro – Uberlândia Telefax: (34) 3214-1110 Curso de Medicina Veterinária Profª Andrea 8° período Disciplina: Tecnologia e Inspeção de Leite e Derivados N.º DA PRÁTICA: 6 DATA DA PRÁTICA: NOME DA PRÁTICA: Análise de Acidez OBJETIVOS DESTA ATIVIDADE Fundamenta-se na neutralização, até o ponto de equivalência, pelo hidróxido de sódio, na presença de indicador fenolftaleína. MATERIAIS MATERIAL ANALISADO Leite cru; Leite Pasteurizado. Leite UHT VIDRARIA/EQUIPAMENTO Frasco Erlenmeyer com capacidade de 125 mL Pipetas Volumétricas de 10mL Bureta de 25 mL; SOLUÇÕES/ MEIOS Hidróxido de Sódio 0,1N. -Fenolftaleína 1% . DESCRIÇÃO DA TÉCNICA Procedimento Transferir 10 mL da amostra para o béquer e adicionar 4 - 5 gotas da solução de fenolftaleína a 1 % e titular com solução de hidróxido de sódio 0,1 N ou com a solução Dornic, até aparecimento de coloração rósea persistente por aproximadamente 30 segundos. Cálculos Usando solução de hidróxido de sódio 0,1 N: Acidez (oDornic) = V x f x 0,9 x 10 Onde: V = volume da solução de hidróxido de sódio 0,1 N gasto na titulação, em mL; f = fator de correção da solução de hidróxido de sódio 0,1 N; 0,9 = fator de conversão do ácido lático; 10 = transformação de ácido lático para grau Dornic.