Universidade Estadual de Londrina
Departamento de Biologia Geral
Laboratório de Citogenética Animal - LACA
TÉCNICA PARA DETECÇÃO DA HETEROCROMATINA CONSTITUTIVA
(BANDA-C)
SUMNER (1972)
1. Tratar o material preparado, segundo a técnica descrita para cromossomos
mitóticos, com HCl 0,2N à temperatura ambiente durante 15 minutos.
2. Lavar a lâmina em água corrente e deixar secar ao ar.
3. Colocar a lâmina em solução salina 2xSSC, a 60°C, por 15 minutos.
4. Lavar a lâmina em água corrente e deixar secar ao ar.
5. Colocar a lâmina em solução aquosa de hidróxido de bário (Ba(OH)28H2O)
5%, recém-preparada e filtrada, a 42°C, durante 1 a 2,5 minutos.
6. Para interromper a ação da solução de hidróxido de bário, submergir
rapidamente a lâmina em solução de HCl 0,2N, lavar em água corrente e deixar
secar ao ar.
7. Colocar a lâmina em solução salina 2xSSC a 60°C durante 45 minutos.
8. Lavar a lâmina em água corrente e secar ao ar.
9. Corar com solução de Giemsa diluída a 2% em tampão fosfato (pH=6,8),
durante 15 minutos.