lina ferrica de Heidenhain. Quando hábilmente usado, é éste, ainda
hoje, o metodo por excelencia para trabalbos de citologia geral,
sobretudo em casos como o nosso, em que a imp os sibili dade do
emprégo do ácido ósmico ñas misturas fixadoras torna impraticável
a aplicacào do triplice Flemming.
Quanto aos zoosporos, apenas conseguimos obtè-los por duas
vezes e sempre à custa de soros de esporangios. Nào foi possível
fazer germinar os esporos de resistencia, a-pesar-de termos empregado os artificios aconselliados em casos idénticos. Depois de obseryarmos os zoosporos em gota pendente e de termos assistido aos
seus saltos bruscos tao característicos, fixávamo-los pelos vapores
do ácido ósmico, deixávamos evaporar a gota líquida e montávamos
em bálsamo. Todo o plasma se cora entáo de negro intenso, deixando apenas na regiào posterior urna vesícula arredondada incolor
(o núcleo). O flagelo percebia-se com difìculdade. Frequentemente
o fixador provocava a rutura da parede nuclear e o extravasamento
do nucleoplasma.
Além déste método, empregámos um outro nosso e com os melhores resultados. Com a ponta de um dedo molhado na mistura
de clara de ovo e glicerina, em partes iguais, passávamos sobre urna
lámina, de modo a deixar-lhe urna delgada película albuminosa. Deixávamos enxugar um pouco e lancávamos sobre a lamina urna gota
de agua com zoosporos. Espalhávamos a gota, inclinando a lámina
em varias direccòes, e deixávamos enxugar ao abrigo das poeiras.
Antes de completamente enxuta, fixávamos a preparacáo como se
fòsse um esfregaco, empregando fixadores que coagulassem a albumina. Os zoosporos ñcavam ao mesmo tempo fìxados e colados à
lamina, o que facilitava consideràvelmente o seu manejo ulterior.
Para a coloracáo dos flagelos usamos o método da tano-fucsina de
Zimmermann.
Muito desejo tivemos, principalmente depois da leitura do traballio de Lüdi, de completar o nosso estudo com experiencias de
inoculacáo no Erodium cicutarium, bem como em outras especies de
Erodium e alguns Geranium. Infelizmente, porém, quando obtivemos
zoosporos, ainda nào tínhamos à nossa disposicáo as plantas necessárias para as inoculacoes experimentáis ; e quando conseguimos
estas nào tornamos a apanhar zoosporos !
Nao desistimos, todavía, de tais experiencias. Emquanto se imprime éste trabalho, estáo já novas sementeiras feitas, à espera dos