Análise de Proteínas e Glicoproteínas de Plasma
Seminal de Suíno Doméstico.
Giovane Pelanda Vendrame
IC UFPR/TN
Prof. Dr. Marise Fonseca dos Santos
Introdução/Objetivos: A criopreservação do sêmen de
suínos pode afetar algumas proteínas e aglutinar os
espermatozóides, dificultando a sua utilização. O
objetivo deste trabalho é conhecer as proteínas do
plasma seminal para contribuir nos estudos e
desenvolvimento de métodos para que não ocorra
essa perda de qualidade do espermatozóide. Através
da determinação da concentração de proteinas e
perfil eletroforetico assim como dos glicoconjugadas.
Método: Para realizar a coleta do ejaculado do suíno,
uttilizou-se o método da mão enluvada. O ejaculado
foi centrifugado separando os espermatozóides do
plasma. A dosagem de proteínas foi realizada pelo
método de Lowry modificado por Hartree (Hartee,
1972). O perfil eletroforético foi obtido em gel de
poliacrilamida (PAGE) a 12% e corado pelo método
coomassie G-250 coloidal (Candiano et al., 2004) e
ácido periódico-Shif (PAS), para proteínas totais e
glicoproteínas (Gandolfi, 2000) .
GANDOLFI, F. Sperm Mediated Transgenesis. Theriogenology, v.53, p.127- 137.
2000.
GÜNDOGAN, M. Some Reproductive Parameters and SeminalPlasma Constituents in
Relation to Season in Akkaraman and Awassi Rams. Journal of Veterinary and
Animal Sciences, v.30, p.95-100. 2005.
CANDIANO, G., M. BRUSCHI, et al. Blue Silver: A Very Sensitive Colloidal Coomassie G250 Staining for Proteome Analysis. Electrophoresis, v.25, n.9, May, p.1327-33. 2004.
DE SOUZA, F. F., C. S. BARRETO, et al. Characteristics of Seminal Plasma Proteins and
Their Correlation with Canine Semen Analysis. Theriogenology, v.68, n.1, Jul 1, p.100-6.
2007.
A amostra de sobrenadante de plasma seminal apresentou
concentração de 21,7 mg/mL (2,17g/dL) Comparado a plasma
seminal de cão, com 2.19 g/dL e em carneiro os dados
encontrados são bem próximo (DE SOUZA, BARRETO et
al.,2007;GÜNDOGAN, 2005).
A
(a)
B
C
A
B
C
(b)
Figura 1: Perfill eletroforetico de 54, 108 e 151 μg (A, B e C)
de proteína de plasma seminal de suíno (Sus scrofa
domesticus) em PAGE a 12% revelado com (a) Coomassie G250 e (b) reagente de Shif.
Conclusões: A concentração de proteínas totais está em acordo
com a de outras espécies animais e, entretanto mostrando
perfis de eletroforese diferente referentes à cada espécie.