JAYME NUNES DE SOUZA FILHO
EFEITO DA RADIAÇÃO IONIZANTE NA CROTOXINA (TOXINA DO VENENO DE
Crotalus durissus terrificus): ESTUDOS AO NÍVEL MOLECULAR
Orientador: Dr. José Roberto Rogero
RESUMO
Sabe-se
que
a
radiação
ionizante
possui
a
capacidade
de
alterar
significativamente, dependendo da dose e condições de irradiação, o comportamento
biológico e antigênico de uma toxina, provavelmente por alterações estruturais causadas
pela radiação. Neste trabalho, a crotoxina, principal neurotoxina do veneno de cascavel
sul-americana, foi isolada utiizando cromatografia de exclusão molecular em gel
Sephadex G-75, seguido de precipitação no ponto isoelétrico. A seguir, frações na
concentração de 2 mg de proteína/ml NaCl 0,85% foram irradiadas em uma fonte de
radiação gama
60
Co sob taxa de dose de 1100 Gy/h em doses respectivas de 250, 500,
1.000, 1.500 e 2.000 Gy. Partindo dessas amostras, foram determinados o conteúdo
protéico (método de Lowry mod.) , o conteúdo de grupamentos SH livres ( método de
Ellman) , o perfil eletroforético (SDS-PAGE), a toxicidade pela dose letal 50% em
camundongos e o comportamento antigênico frente ao soro anticrotálico (método de
Ouchterlony). Os resultados mostraram a formação de agregados além de ocorrer uma
perda de proteína em solução por precipitação. Foi observada a presença de
grupamentos sufidrilas nas amostras irradiadas com doses acima de 1.000 Gy, indicando
o rompimento de pontes S-S. A dose letal 50% aumentou cerca de 2 vezes para a
amostra irradiada com 1.000 Gy e, 3,5 vezes para 1.500 Gy, mostrando o fenômeno de
destoxicação, enquanto que o comportamento antigênico aparentou manter-se intacto até
a dose de 1.000 Gy.