Mestrado em Imunologia Clínica
Células T
L. Taborda Barata
Morfologia linfocitária
Hematopoiese
Papel das citocinas na hematopoiese
Timo
Timo
Ontogenia de células T
Período intra-medular e sanguíneo
Geração de diversidade no TCR
Período intra-tímico
Selecção de repertórios
O complexo do TCR
Domínios da estrutura proteica do TCR
Genes codificadores do TCR humano
Recombinação e transcrição dos genes das
cadeias ab do TCR
Geração de diversidade no TCR
1. Número de genes codificadores de regiões V (D) J e C das
cadeias a e b
2. Recombinação entre genes codificadores de regiões V (D) J
e C das cadeias a e b
3. Junção imprecisa entre genes codificadores recombinados
4. Adição de bases novas pela TdT
Ontogenia de células T
Período intra-medular e sanguíneo
Geração de diversidade no TCR
Período intra-tímico
Geração de diversidade no TCR
Selecção de repertórios
Processos de selecção de linfócitos T no timo
1º Passo: Selecção positiva
2º Passo: Selecção negativa
Processos de selecção
de linfócitos T no timo
Selecção positiva
Selecção negativa
Figura obtida de Kuby
“Immunology” 4ª Edição (2000)
Moléculas do MHC estão envolvidas na
selecção positiva de células T ab in vitro
Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Selecção positiva de linfócitos T ab no timo
Selecção positiva de linfócitos T ab no timo
Selecção negativa de linfócitos T ab no timo
Selecção intra-tímica de células T
Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Modelos propostos do papel de CD4 e CD8 na selecção de
células T ab no timo
Modelo Instructivo
Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Modelos propostos do papel de CD4 e CD8 na selecção de
células T ab no timo
Modelo Estocástico
Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Processos adicionais de selecção
de linfócitos T no timo
1º Passo: Selecção positiva
2º Passo: Selecção negativa
Papel de superantigénios
Linfócitos T e superantigénios
Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Superantigénios, famílias Vb e patologia
Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Superantigénios e famílias Vb
Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Papel de superantigénios na selecção negativa
de linfócitos T no ratinho
Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Processos adicionais de selecção
de linfócitos T no timo
1º Passo: Selecção positiva
2º Passo: Selecção negativa
Papel de superantigénios
Papel de receptores de superfície
(CD5, outros)
Processos de selecção de linfócitos T ab no timo
1º Passo: Selecção positiva
Inespecífica: depende da afinidade para MHC
2º Passo: Selecção negativa
Específica: depende do antigénio
Subtipos de células T na periferia
Maturação de linfócitos Tgd
Células T na periferia
CD4+ (++++)
CD8+ (++)
TCR ab
CD4-CD8- (+) TCR gd (+++)
Lidam com:
Ag externos
Ag do próprio
MHC clássico
MHC não clássico
Superantigénios
Lidam com:
Ag queratinócitos
HSP micobacterianas
Subtipos de células T na periferia
TCR
gd
ab
CD4+
CD8+
+++
+++
“helper”
citólise
Fisiologia de células Tab na periferia
Apresentação de Antigénios
Sinapse imunológica
Modificado de “Antigen Presentation”, de F. Arosa (2001) e Kuby (2000)
Moléculas co-acessórias em células T, e seus
ligandos em células apresentadoras de antigénios
Papel da co-estimulação através de CD28 e
CD80/CD86 na activação de células T
Papel da interacção entre CD40 e CD40L na activação
de células T
Activação versus anergia em células T
Importância do segundo sinal
Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)
Expressão de genes em linfócitos T activados
Várias
citocinas
Alguns padrões de citocinas em células T
Respostas celulares T após correcta
apresentação de antigénio
Activação celular
Proliferação
celular
Expressão de
receptores
Síntese de
citocinas
Respostas funcionais e efectoras de células T CD4+,
expressando TCR ab
Células T “naive” e de “memória”
CD45RA+
“naive”
Ainda não contactaram com Ag
CD45R0+
Já contactaram com Ag
“memória”
Activação de linfócitos T “naive” e efectores
Técnicas laboratoriais ligadas à apresentação de
antigénio e fisiologia de células T
• Testes de proliferação celular T utilizando 3H-Timidina
• Testes de análise de especificidade celular T
• Análise de diluição limitante (LDA)
• Técnica de tetrâmeros
• Avaliação da produção de citocinas em células T
• Imunoensaios ou bioensaios
• ELISA
• ELISPOT
• Detecção de citocinas intracelulares
• Avaliação da citotoxicidade de células T: Técnica de libertação de Crómio
Teste de proliferação celular T utilizando 3H-timidina
Testes de análise de especificidade celular T
Análise de diluição limitante (LDA) de células T
Análise com TETRÂMEROS para detectar células T específicas
Avaliação da produção de citocinas em células T
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Ensaio de ELISPOT para quantificar síntese de citocinas por células T
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Testes de avaliação da citotoxicidade de células T