Doença infecto-contagiosa que atinge o
Sistema Nervoso Central, causada por
vários patógenos como bactérias, fungos,
vírus e parasitos.
As bactérias que possuem maior relevância
em Meningite por serem de transmissão
direta e por apresentarem grande letalidade,
necessitando de ações imediatas da
Vigilância Epidemiológica para conter o
avanço da doença são:
• Neisseria meningitidis
•Haemophilus influenzae b
O Streptococcus pneumoniae, apesar de
não ser transmissível, apresenta-se também
com alta letalidade.
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Havendo admissão de casos suspeitos de
Meningite na Unidade de Saúde, o médico
deverá realizar a punção do Líquor e Sangue
antes da administração do Antibiótico.
As amostras deverão ser encaminhadas ao
laboratório local o mais breve possível, onde o
técnico responsável pelas análises irá realizar:
•Exame físico: cor, aspecto
•Exame
Citológico:
citomorfológico
Quantitativo
e
•Exame Bioquímico: Glicose, proteínas e
cloretos
•Exame Bacterioscópico
•Cultura
•Hemocultura
•Látex
OBS: No momento do procedimento de coleta
das amostras (LCR e SANGUE), o laboratório
local deverá ser acionado imediatamente para
preparação da utilização do kit Meningite.
Os kits são produzidos pela Coordenação de
Insumos Estratégicos no próprio LACEN, de
acordo com as orientações do Ministério da
Saúde e distribuídos para as DIRES e
Laboratórios
Municipais
de
Referencia
Regional.
KIT MENINGITE
• 01 tubo de Ágar Chocolate
• 01 frasco de 30 ml de caldo de
TSB para Hemocultura.
• 02 lâminas (26X76) para exame
bacterioscópico.
• 01 frasco estéril para exame
quimiocitológico.
• 01 frasco estéril para teste de
aglutinação em Látex.
• 01 tubo de Ágar Lowenstein
Jensen – tuberculose.
• 01 tubo de Ágar Sabouraud fungos.
PREPARO DO MATERIAL
•Separar todo o material necessário
para a semeadura do LCR e Sangue;
•Retirar os meios de cultura da
geladeira, 30’ antes da semeadura (TA);
•Verificar o prazo de validade;
• Colocar a etiqueta de identificação no
frasco da coleta e nunca na tampa ou
sobre rótulos.
SEMEADURA em Ágar Chocolate
Gotejar na superfície do
meio 5 a 10 gotas do líquor
turvo ou após centrifugação.
Incubar
em
jarra
com
atmosfera
de
CO2
e
umidade, à 36ºC, por 24
horas. Se houver laboratório
de bacteriologia, proceder a
semeadura e identificação,
se não encaminhar para o
Lacen imediatamente.
SEMEADURA EM Lovenstein Jensen
(Micobactéria)
Semear 3 a 5 gotas do
LCR centrifugado, incubar
24 a 48 horas à 36°C e
encaminhar para o Lacen.
SEMEADURA em Ágar Sabouraud
(fungos)
Semear três a cinco gotas do
líquor centrifugado; deixar na
temperatura ambiente e no
escuro e encaminhar para o
Lacen.
IMPORTÂNCIA DA CULTURA:
•Retificar ou Confirmar o exame bacterioscópico
do LCR - Exame de alto grau de especificidade.
•Identificação do microorganismo
•Teste de Sensibilidade – Monitoramento das
resistências microbianas
•Importância Epidemiológica – Controle da doença
e de surtos
•Quimioprofilaxia (Haemophylus spp. e Neisseria spp.)
N. meningitidis
S. pneumoniae
EXAME BACTERIOSCÓPICO
• LCR purulento executar o esfregaço
sem centrifugação;
• LCR moderadamente turvo ou límpido,
se possível, centrifugar e preparar o
esfregaço fino com o sedimento;
• Deixar secar e fixar rapidamente
na chama;
• Corar uma lâmina pelo Gram e observar.
BACTERIOSCOPIA
Vantagens:
• Rápido/baixo custo
• Visualização da bactéria (até 80%)
• Auxilia na conduta terapêutica
• Quimioprofilaxia (DGN)
• Diagnóstico presuntivo
• Bacterioscopia + diagnóstico clínico:
Confirmação do caso (DGN)
Diplococo Gram Negativo
Cocos Gram positivo aos pares,
lanceolados e em cadeias
Bastonetes Gram Negativo
Cocos Gram positivo
Cocobacilos Gram Negativo
Pesquisa de BAAR
•Verificada a presença de fibrina no líquor.
•Fazer esfregaço utilizando a fibrina e
o sedimento para pesquisa de BAAR.
•Secar, corar pelo método de ZiehlNielsen.
HEMOCULTURA
Inocular de 3 a 5 ml do
sangue no TSB, após
desinfetar a tampa de
borracha com álcool a
70%.
Enviar
imediatamente
para
o
LACEN ou incubar 24
horas
em
estufa
bacteriológica.
LÁTEX
Técnica de aglutinação rápida, para detecção
de antígenos solúveis em fluidos biológicos
(LCR e soro) durante a infecção que permite
um rápido diagnóstico para:
• Neisseria meningitidis soro grupo A, B, C, Y e
W 135
• Haemophylus influenzae b
• Streptococcus pneumoniae
Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR).
•Amplificação “in vitro” de fragmentos de DNA,
que permite a identificação do agente utilizando
primers específicos de regiões conservadas e
variáveis do agente.
•Sensibilidade e especificidade de 100%.
ACONDICIONAMENTO
Para o envio das amostras ao LACEN o
município ou a Unidade de Saúde deverá:
• Enviar a cópia da ficha de investigação
epidemiológica do paciente com os dados
laboratoriais.
•Acondicionadas as amostras em sacos
plásticos onde os frascos devem estar bem
fechados para evitar vazamentos.
•Não colocá-los soltos na caixa de isopor.
IDENTIFICAÇÃO DAS AMOSTRAS
Toda amostra deve ser rigorosamente
identificada e acompanhada por uma Ficha
de Encaminhamento de amostra, preenchida
com os seguintes dados:
• Nome completo e legível do paciente
• Idade / sexo
• Tipo de exame solicitado
• Data de coleta da amostra
• Procedência / Município
•Anotar o uso de antibióticos
INSTRUÇÕES PARA O TRANSPORTE
• Meios de cultura - Colocar em isopor, sem gelo
os tubos hermeticamente fechados e protegidos
para evitar acidentes.
• Lâminas - Encaminhar a lâmina analisada,
junto com a outra lâmina apenas fixada. Proteger
com gaze ou papel higiênico.
• LCR e soro – Enviar juntamente com os meios
de cultura.
IMPORTANTE:
• As fichas de encaminhamento, bem como
requisições e relatórios, devem ser colocados
em sacos plásticos dentro das caixas.
• As amostras coletadas devem ser
encaminhadas ao LACEN de segunda à sextafeira entre 7:00 e 14:00h.
•Encaminhar em temperatura Ambiente
NOME COMPLETO DO PACIENTE_______________________________________
DATA DE NASCIMENTO________________________________________________
MUNICÍPIO DE RESIDÊNCIA____________________________________________
DATA DA COLETA_____________________________________________________
PROCEDÊNCIA (HOSPITAL / DIRES)_____________________________________
AMOSTRA ENVIADA:
AGAR CHOCOLATE
HEMOCULTURA
LÂMINAS
LÁTEX (LIQUOR)
LÁTEX (SORO)
AGAR SABOURAUD
LOWENSTEIN – JENSEN
RESULTADO DO BACTEROSCÓPICO NO HOSPITAL______________________
PROFISSIONAL RESPONSÁVEL_________________________________________
OBS.: REPRODUZIR ESTA FICHA E GUARDAR NO LABORATÓRIO ONDE
TODOS TENHAM ACESSO
DESCARTE DO MATERIAL UTILIZADO
Todo o material descartável,
utilizado na coleta, deverá ser
acondicionado em saco plástico,
vedado
com
fita
crepe
e
identificado como
RESÍDUO
INFECTANTE.
1º FLUXO DAS AMOSTRAS
PUNÇÃO DO LCR E SANGUE NO HOSPITAL
LABORATÓRIO DO HOSPITAL
SEMEAR O LCR E INOCULAR O SANGUE
NOS MEIOS DE CULTURA DO KIT
REALIZAR
BACTERIOSCOPIA
LACEN/BA
REALIZAR LÁTEX
IDENTIFICAR E SOROGRUPAR CEPA,
CONTROLE DE QUALIDADE DAS LÂMINAS,
TESTE DE SENSIBILIDADE
IAL/SP
2º FLUXO DAS AMOSTRAS
PUNÇÃO DO LCR E SANGUE NO HOSPITAL
LABORATÓRIO LOCAL
LMRR/BA
SEMEAR O LCR E SANGUE
NOS MEIOS DE CULTURA
Tubos de LJ e Agar
Sabouraud semeados
IDENTIFICAR
CEPA
REALIZAR
BACTERIOSCOPIA
REALIZAR LÁTEX
LACEN/BA
Controle de qualidade,
Teste de sensibilidade,
Sorogrupo
IAL/SP
Obrigada!
Rita Vilasboas
LACEN/BA
(71) 3276-1721 / (71)3356-2299
[email protected]