54º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Testes de isolamento das proteínas da
parede celular primária de cana-de-açúcar
em Suspensão celular
Rodrigues, MJC; de Andrade, A; Bonatto, JMC; Lacerda, GC; Barbosa, L; Labate, CA
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Com a necessidade de uma fonte renovável de energia para substituir o petróleo, mais atenção é direcionada ao
Setor Sucroalcooleiro Brasileiro, pois considerando todo o processo agro-industrial, a cana-de-açúcar gera créditos
de carbono. A qualidade do solo, o clima e a tecnologia desenvolvida na área agrícola colocaram a cana-de-açúcar
brasileira como uma das mais promissoras fontes de energia renovável. As proteínas, produtos da expressão gênica, são
constituintes essenciais das paredes celulares vegetais; estando envolvidas em modificações dos componentes da parede,
em sua estrutura, sinalização e interação com proteínas da membrana plasmática na superfície celular. Neste trabalho,
isolou-se as proteínas da parede celular primária da variedade SP 80 3280 de cana-de-açúcar, Saccharum spp, a fim de
se estabelecer quais proteínas são encontradas. As proteínas da parede celular foram isoladas de células em suspensão,
sendo então filtradas e precipitadas em soluções de 10% ou 15% de glicerol, em diferentes tratamentos: trocando as
soluções a cada hora ou deixando três horas ininterruptas, já que o glicerol auxilia na separação da parede celular dos
demais componentes celulares. A fração da parede foi recuperada e ressuspendida em solução de CaCl2, para eliminar
proteínas fracamente ligadas. Os extratos foram concentrados por precipitação em acetona e ressuspendidos por um
tampão de solubilização. Após a quantificação protéica utilizando o método de Bradford, as amostras de proteínas
foram aplicadas num gel SDS-PAGE. Os resultados mostraram que a solução de glicerol 15% deixada por três horas,
sem trocar as soluções, foi a que mais isolou proteínas. Outro teste foi realizado quanto à concentração de CaCl2,
que variou entre 150, 200, 250, 300 e 400 mM. Os resultados colaboraram para a realização de uma análise dessas
proteínas por gel 2-D. Os próximos passos serão otimizar ainda mais o protocolo de extração e realizar uma análise e
sequenciamento das proteínas encontradas no gel 2-D, através de espectrômetro de massas Q-TOF. Com esses dados
será possível identificar as proteínas existentes na parede celular da cana-de-açúcar e estabelecer uma relação entre a
função de cada proteína, a expressão gênica, e a dinâmica da parede celular.
Apoio financeiro: CNPq e Fapesp.
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