AVALIAÇÃO DA INTEGRIDADE DA MEMBRANA PLASMÁTICA DO
ESPERMATOZÓIDE EQÜINO DURANTE ETAPAS DA CRIOPRESERVAÇÃO
Igor Shabib Péres; Daniela B. Nunes; Camila S. Ferreira; Charles Kiefer; Eliane V.
Costa e Silva; Carmem Estefânia S. N. Zúccari – [email protected]
Introdução: Danos na estrutura da membrana plasmática levam a perda da homeostase
e conseqüente morte da célula, sendo essencial sua integridade para a viabilidade
espermática e manutenção da capacidade fertilizante. O objetivo do trabalho foi avaliar
a integridade da membrana plasmática (IMP) do espermatozóide eqüino, durante as
etapas do processo de criopreservação, mediante duas técnicas de coloração. Material e
Métodos: Foram colhidas 19 amostras de sêmen de seis garanhões e analisadas em
quatro momentos do processo de congelação: pós-colheita (PCo), pós-centrifugação
(PCe), pós-refrigeração (PR) e pós-descongelação (PD), totalizando 76 sub-amostras. A
avaliação da IMP foi feita pelas técnicas da eosina/nigrosina (EN-Barth e Oko, 1989) e
dos fluorocromos diacetato de 6-carboxifluoresceína e iodeto de propídio (CFDA/PIHarrison e Vickers, 1990). As médias das variáveis para diferentes momentos foram
comparadas pelo teste de Duncan a 5%. Resultados e Discussão: O percentual médio
de células íntegras PCo foi superior (p<0,05) aos demais momentos, sendo que PCe e
PR não diferiram entre si, porém, ambos diferiram significativamente do momento PD
(PCo>PCe=PR>PD), que apresentou os valores médios mais baixos. Pela técnica da
EN houve diferença (p<0,05) para o número de vivos apenas PD (PCo=PCe=PR>PD).
Portanto, uma maior sensibilidade dos fluorocromos em detectar lesões da membrana
plasmática durante os procedimentos de centrifugação (61,94±11,99%) e refrigeração
(63,18±7,67%), quando comparados a eosina/nigrosina (80,32±8,69% e 80,53±5,33%,
respectivamente). Conclusão: Conclui-se que a associação dos fluorocromos mostrouse mais eficaz para identificar lesões na membrana plasmática do espermatozóide
eqüino durante os procedimentos de criopreservação.
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Laboratório de Biotecnologia da Reprodução Animal - Departamento de Zootecnia FAMEZ - Universidade Federal Mato Grosso do Sul / UFMS