Populações marginais face a alterações climáticas: estrutura genética de populações de algas marinhas Cécile Perrin, Gareth Pearson, Ester Serrão CCMAR-CIMAR Laboratório Associado, Universidade do Algarve, Faro Questões principais: Comparar a ecologia e evolução de: • populações de regiões marginais e centrais da distribuição biogeográfica de espécies marinhas • espécies com formas de reprodução contrastantes Espécies modelo: Fucus spiralis e Fucus vesiculosus Fucus vesiculosu s Fucus spiralis Hermafrodita, autofecundação hermafrodita Dióica dióica ambígua Xiphophora chondrophylla F. vesic., F. spiralis, F. ceran., F. virs. F. gardneri, F. distichus,F. evanescens Fucus serratus Hesperophycus californicus Pelvetiopsis limitata Pelvetia canaliculata Silvetia compressa Silvetia babingtonii Silvetia siliquosa Ascophyllum nodosum Hormosira banksii Serrão E.A., Alice L.A., Brawley S.H. (1999). Evolution of the Fucaceae (Phaeophyta) inferred from nrDNA-ITS. J. Phycology. 35: 382-394. http://www.marlin.ac.uk/images/species/distribution_maps/worldfucspi.jpg Distribuição geográfica de F. spiralis e F. vesiculosus Simpatria, regiões vastas de ocorrência conjunta Alopatria ocorre em algumas regiões ex: separação por habitat na zona de distribuição Sul Objectivos Avaliar a integridade das espécies Fucus spiralis e Fucus vesiculosus Estimar a diversidade genética populacional e a diferenciação ao longo da distribuição geográfica para cada espécie Comparar populações simpátricas versus alopátricas quanto a ocorrência de indicadores de hibridação e introgressão entre as duas espécies Amostragem Para cada espécie em cada local, 2 x 24 indivíduos em zonas separadas por 100 a 300 m quadrado: 1-2 m2 N=24 N= 24 Pointe de la Crèche, França 100 – 300 m Amostragem e metodologia Norte da França Gris Nez Northern Ireland La Crèche 5 km Bretanha England Brittany Northern France Penzé River Iberia 5 km 500 km 2941 indivíduos 38 regiões de Marrocos à Noruega, Islândia, Maine (+Pacífico e ilhas dos Açores e Canárias para F. spiralis) Microssatélites: 5 loci (Engel et al. 2003) + 5 novos loci (Perrin et al. 2007) Santec Brignogan Asturias http://www.marlin.ac.uk/images/species/distribution_maps/worldfucspi.jpg Batz Island F. spiralis F. vesiculosus Morlaix River Portugal + La Guardia Viana do Castelo Mindelo Lima River Mondego River Ribeira d’Ilhas Magoito Tagus River VN de Milfontes Almograve 100 km Mira River Gilão Albufeira Ria River Formosa Engel CR, Brawley SH, Edwards KJ, Serrão EA (2003) Isolation and cross-species amplification of microsatellite loci from the fucoid seaweeds Fucus vesiculosus, F. serratus and Ascophyllum nodosum (Heterokontophyta, Fucaceae). Molecular Ecology Notes, 3, 180–182. Perrin C, Daguin C, Van de Vliet M, Engel CR, Pearson GA Serrão EA (2007) Implications of mating system for genetic diveristy of sister algal species : Fucus spiralis and F. vesiculosus (Heterokontophyta, Phaeophyceae). European Journal of Phycology In press Integridade das espécies Fucus ceranoides Brittany 2 Axis 2 (11.15 %) NW Iberia 1 71 N Atlantic Fucus spiralis NW Iberia NW Iberia 72 Fucus vesiculosus 0 -1 65 -1 N AtlanticPacific 1 S IberiaCanary-AzoresNW Africa S Iberia-NW Africa Axis 1 (20.77 %) FCA of samples of F. vesiculosus and F. spiralis based on allele frequencies. F. ceranoides plotted as supplem. elements, bootstrap from a consensus NJ tree, Nei’s dist Billard E, Daguin C, Pearson GA, Serrão EA, Engel C, Valero M. (2005). Genetic isolation between the three closely related taxa: Fucus vesiculosus, F.spiralis and F. ceranoides. J Phycology 41.:900-905 F. ves Iceland F. ves Faroe F. ves Norway F. ves Ireland F. ves England F. ves France F. ves N Spain F. ves N Portugal F. ves SW Portugal F. ves Morocco F sp Pacific F.sp Iceland F. sp Faroe F. sp Norway F. sp Ireland F. sp England F. sp France F. sp N Spain F. sp N Portugal F. sp SW Portugal F. sp Azores F. sp Canary F. sp Morocco F. ceranoides Diferenciação populacional Fucus vesiculosus Fucus spiralis Penze 2 Rio del Eo 2 Rio del Eo 1 North+West Iberia N IberiaFranceEngl-IrlNorwayFaroesIceland Penze 1 Morlaix 2 63 North Ireland Morlaix 1 66 LCSGNW 1 3 GNW GNE1 2 LCS 2 GNE 3 GNEGNW 2 England SW 3 Bude 1 SE LCNSE 1 3 SW11 Norway 2 Brig 2 La Guardia2 Iceland 1 Brig 1 64 87 Batz VS 2 LCN 2 Iceland 2 Rio Lima 3VSR 1 VNR 1 Rio Lima 2 Rio Lima 1 VNR 2 VNR VSR VS213VN 1 VN 2 Cornwall KH Faroe 98 VSR 3 Mindelo 1 64 Mindelo 2 La Guardia1 Norway 1 Oviedo “Rest of the world” NW Iberia -France-England, IrelandNorway-Faroes-Iceland- Atlantic USA, Pacific USA NW Iberia PacificQ1 Pacific Q2 Maine WQ Maine WC Iceland Q1 Iceland Q2 Norway Q1 N Ireland La Creche 1 La Creche 2 Gris-Nez E Santec W1 Brignognan 1 Brignognan 2 Rio del Eo Cornwall KH Bude Gris-Nez W 94 69 Norway Q2 Santec E1 Ria Formosa 1 Faroes La Guardia 2 Viana S1 MondegoGL1MondegoFF3 MondegoGL3 MondegoFF1 61 Tavira 3 Tavira 4 Tavira 2 Rio Mira 3 Rio Mira 1 Tavira 1 SW Iberia, Canary, Azores, NW Africa Tejo Rosa1 Tejo Alco2 Tejo Alco1 63 Tejo Rosa 3 Tejo Alco3 77 Morocco 1 Tejo Alco4 Morocco 2 Ribeiro 2 Magoito Milfontes 1 Azores Milfontes 2 Rio Mira P Ribeiro 1 Canary 2 64 Rio Mira 66 Canary 1 Morocco 1 67 Almograve 2 Almograve 1 Albufeira 1 Ria Formosa 2 0.1 Oviedo Oviedo Mindelo 3 Mindelo 4 Albufeira 2 Morocco 2 SW Iberia, NW Africa 63 Viana N 1 0.1 NW Iberia La Guardia 1 Relationships among samples for each species, unrooted NJ tree, pairwise Nei’s distances. Bootstrap above 60% shown (2000 reps). Diversidade genética intra-populacional Fucus spiralis 0.80 0.80 0.70 0.70 0.60 0.60 0.50 0.50 Ĥ ˆHe Ĥ ˆHe Fucus vesiculosus 0.40 0.40 0.30 0.30 0.20 0.20 0.10 0.10 0.00 0.00 NA-S NF-S N Atl/France NI-S NWI-S N/NW Iberia SI-A Mo-A Pac-A S Iberia/Africa NF-S Pacific/N Atl/France 7.0 7.0 6.0 6.0 5.0 5.0 4.0 4.0 NI-S NWI-S SI-A Mo-A Az-A Ca-A N/NW Iber S Iber/Africa/Az/Can A A NA-S 3.0 3.0 2.0 2.0 1.0 1.0 0.0 0.0 NA-S NF-S NI-S NWI-S SI-A Mo-A Pac-A NA-S NF-S NI-S Mean over populations within each group ± standard deviation S: Sympatry A: Allopatry NWI-S SI-A Mo-A Az-A Ca-A Bretanha, N França Populações simpátricas (mais intermédios do que em parapatria) Engel et al. 2005) 491 inds Fv 2 Axis 2 (3.28 %) Evidência de hibridação/introgressão Fs 334 inds 1 0 -1 -2 -1 0 1 Axis 1 (9. 64 %) Fs 1 (mais intermédios do que em parapatria) Engel et al. 2005) Fv Axis 2 (6.38 %) Península Ibérica Populações simpátricas 235 inds 0 225 inds -1 -2 -1 0 Axis 1 (9.38 %) 1 Fv Não há genótipos intermédios Engel C.R., Daguin C. and Serrão E. A. 2005. Genetic entities and mating system in hermaphroditic Fucus spiralis and its close dioecious relative F. vesiculosus (Fucaceae, Phaeophyceae). Molecular Ecology, 14, 2033–2046 Fs Axis 2 (4.59 %) Península Ibérica Populações alopátricas 1 0 311 inds 432 inds -1 -1 0 Axis 1 (14.54 %) 1 FCA of F. vesiculosus and F. spiralis based on allele frequencies. Barreira biogeográfica - Evidência de hibridação/introgressão Frequências alélicas - locus 78 Fucus vesiculosus 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% North Atlantic - S North France Brittany - S North Iberia - S North West Iberia -S South Iberia -AS Morocco - A North Atlantic - S North France Brittany - S North Iberia - S North West Iberia -S South Iberia - A S Morocco - A Fucus spiralis 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% Pacific - A simpatria Azores - A alopatria Canary - A Site B Nível de maré (m) sincronia de reprodução inter e intra-espécies Viana do Castelo discos: 6.2 cm2 assentamento (óvulos.cm -2) Site A Fucus spiralis Fucus vesiculosus Sucesso da fertilização = 82-100% ambas espécies Conclusões Diferenciação populacional: Atlântico NW e NE, Pacífico. Expansão recente proveniente de uma única origem, provávelmente associada a refúgios glaciares Noroeste ibérico: Zona de transição biogeográfica entre populações diferenciadas de N e S Populações Sul - elevada diferenciação interpop., baixa diversidade intrapop. Fragmentação de habitat Conclusões cont. Integridade das duas espécies: Fucus vesiculosus e Fucus spiralis Especiação: Muito elevada diferenciação genética das populações sul de Fucus vesiculosus indica isolamento reprodutivo nesta espécie, comparável ao nível de diferenciação entre outras espécies de Fucus. Hibridação: Hibridação / introgressão aparente onde as distribuições das espécies se sobrepõem, reprodução sincronizada intra- e entre- espécies Forte barreira contra fluxo genético interespecífico deve ocorrer para manter integridade das espécies em simpatria hip: sistema reprodutivo - predominantemente autofecundação em F.spiralis Financiamento : EC Sustainable Development, Global Change and Ecosystems Program Marine Genomics Europe Network of Excellence (GOCE-CT-2004-505403) e FCT (programas PDCTM e POCTI), FSE, FEDER